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植物葉片中色素的提取、分離和含量測(cè)定北京市廣渠門中學(xué)2016年11月24日夏天植物的葉子是綠色的,為什么?分布:葉綠體類囊體膜上綠色葉片類囊體膜上是否只含有葉綠素
一、綠葉中色素的提取和分離菠菜銀杏黃葉月季紅葉油菜月季綠葉爬山虎紅葉一、色素提取:
稱量2.5g材料
剪碎葉子
加CaCO3、SiO2
移液槍加2.5ml無(wú)水乙醇迅速、充分研磨
葉片勻漿研磨要充分!層析液一定不能觸及色素線??!層析液色素提取液劃線二、色素分離層析(水;石油醚:丙酮=10:1)劃線為什么研磨時(shí)加入酒精提取色素原理:葉綠體色素不溶于水,溶于有機(jī)溶劑為什么研磨時(shí)加入碳酸鈣和二氧化硅?碳酸鈣作用:防止葉綠體中色素被破壞二氧化硅作用:使研磨更充分色素線葉綠素a葉綠素b葉黃素胡蘿卜素葉綠素類胡蘿卜素蒸餾水層析液(丙酮石油醚)紙層析法分離色素原理?溶解度不同—擴(kuò)散速度不同為什么層析液不能觸及色素劃線葉片中有四種色素,葉片為什么為綠色紅色月季葉片紅色月季葉片葉綠體中色素液泡中色素?層析液(丙酮石油醚)蒸餾水三、葉綠素濃度的測(cè)定用混合提取液(丙酮:乙醇:蒸餾水=45:45:1)浸提法測(cè)定
菠菜葉、油菜葉、月季紅色葉、月季綠色葉、銀杏黃色葉、爬山虎紅色葉,加入10ml提取液,放入37度恒溫箱中浸提24小時(shí)。讀值:分光光度計(jì)分別在波長(zhǎng)440nm、645nm和663nm處測(cè)定并記錄光密度值,通過(guò)OD值計(jì)算葉綠素含量。
A440A645A663菠菜葉
月季紅色葉
爬山虎紅色葉
油菜葉
銀杏葉
月季綠色葉
葉綠素濃度的測(cè)定根據(jù)以下公式計(jì)算葉綠素濃度:葉綠素a濃度(Ca,mg·L-1)=127×A663–269×A645葉綠素b濃度(Cb,mg·L-1)=229×A645–468×A663葉綠素ab濃度(CT,mg·L-1)=CaCb=802×A663
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