保健食品15保健食品的毒理學(xué)評(píng)價(jià)與功能評(píng)價(jià)課件

2023/10/51第十五章保健食品的毒理學(xué)評(píng)價(jià)與功能評(píng)價(jià)【知識(shí)目標(biāo)】保健食品評(píng)價(jià)一般包括（1）保健食品的安全性毒理學(xué)試驗(yàn)；（2）功能學(xué)試驗(yàn)（包括動(dòng)物試驗(yàn)和/或人體試食試驗(yàn)）；（3）功效成分檢測(cè)；（4）衛(wèi)生學(xué)試驗(yàn)；（5）穩(wěn)定性試驗(yàn)等五個(gè)方面。本章重點(diǎn)介紹保健食品的安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)與功能評(píng)價(jià)。安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)與功能評(píng)價(jià)是保健食品研發(fā)的重要環(huán)節(jié)，是保證保健食品安全有效必須遵循的原則。通過(guò)本章學(xué)習(xí)，學(xué)生了解保健食品的安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)與功能評(píng)價(jià)的總體要求，熟悉保健食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)與功能評(píng)價(jià)所需執(zhí)行的法規(guī)與標(biāo)準(zhǔn)，理解各類(lèi)毒理學(xué)評(píng)價(jià)與功能評(píng)價(jià)的原理，掌握毒性試驗(yàn)的原則與功能性評(píng)價(jià)的基本要求，掌握毒性試驗(yàn)與功能性評(píng)價(jià)的方法。【技能目標(biāo)】通過(guò)本章學(xué)習(xí)，學(xué)生能夠清楚保健食品的安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)與功能評(píng)價(jià)的總體要求；正確使用毒性試驗(yàn)與功能性評(píng)價(jià)的方法；運(yùn)用毒性試驗(yàn)的原則與功能性評(píng)價(jià)的基本要求，開(kāi)展保健食品研發(fā)過(guò)程中的評(píng)價(jià)工作?！侗＝∈称贰罚ǖ诙妫?023/7/251第十五章保健食品的毒理學(xué)【知識(shí)目標(biāo)】2023/10/52第一節(jié)保健食品的毒理學(xué)評(píng)價(jià)一、保健食品毒理學(xué)評(píng)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)與階段（一）保健食品毒理學(xué)評(píng)價(jià)所執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)目前我國(guó)現(xiàn)行的對(duì)食品安全性的評(píng)價(jià)包括急性毒性試驗(yàn)、遺傳毒理學(xué)試驗(yàn)、亞慢性毒性試驗(yàn)（90d喂養(yǎng)試驗(yàn)、繁殖試驗(yàn)、代謝試驗(yàn)）和慢性毒性試驗(yàn)（包括致癌試驗(yàn)）。毒理學(xué)評(píng)價(jià)是對(duì)保健食品進(jìn)行功能學(xué)評(píng)價(jià)的前提。保健食品或其功效成分，首先必須保證食用安全性，原則上必須完成衛(wèi)生部《保健食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序和檢驗(yàn)方法規(guī)范》中規(guī)定的第一、二階段的毒理學(xué)試驗(yàn)，必要時(shí)需進(jìn)行更深入的毒理學(xué)試驗(yàn)?！侗＝∈称贰罚ǖ诙妫?023/7/252第一節(jié)保健食品的毒理學(xué)評(píng)價(jià)《保健食品2023/10/53（二）保健食品毒理學(xué)評(píng)價(jià)的四個(gè)階段1.毒理學(xué)評(píng)價(jià)的第一階段第一階段為急性毒性試驗(yàn)階段，包括經(jīng)口急性毒性（LD50）試驗(yàn)、聯(lián)合急性毒性試驗(yàn)、一次最大耐受量試驗(yàn)。2.毒理學(xué)評(píng)價(jià)的第二階段第二階段包括遺傳毒性試驗(yàn)、傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)和30d喂養(yǎng)試驗(yàn)。3.毒理學(xué)評(píng)價(jià)的第三階段第三階段為亞慢性毒性試驗(yàn)，包括90d喂養(yǎng)試驗(yàn)、繁殖試驗(yàn)和代謝試驗(yàn)。4.毒理學(xué)評(píng)價(jià)的第四階段第四階段為慢性毒性試驗(yàn)（包括致癌試驗(yàn)）?！侗＝∈称贰罚ǖ诙妫?023/7/253（二）保健食品毒理學(xué)評(píng)價(jià)的四個(gè)階段《保健2023/10/54二、保健食品毒性試驗(yàn)的原則

以普通食品和衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源物質(zhì)以及允許用作保健食品的物質(zhì)以外的動(dòng)植物或植物提取物、微生物、化學(xué)合成物等為原料生產(chǎn)的保健食品，原則上進(jìn)行第一、二階段的毒性試驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行下一階段的毒性試驗(yàn)。以傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)且食用方式相同的保健食品，一般不要求進(jìn)行毒性實(shí)驗(yàn)。用水提物配制生產(chǎn)的保健食品，一般不要求進(jìn)行毒性試驗(yàn)。

進(jìn)行第一、二階段的毒性試驗(yàn)的保健食品國(guó)內(nèi)外均無(wú)食用歷史的原料或成分作為保健食品原料時(shí)，應(yīng)對(duì)該原料或成分進(jìn)行四個(gè)階段的毒性試驗(yàn)。僅在國(guó)外少數(shù)國(guó)家或國(guó)內(nèi)局部地區(qū)有食用歷史的原料或成分，原則上應(yīng)對(duì)該原料或成分進(jìn)行第一、二、三階段的毒性試驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行第四階段毒性試驗(yàn)。《保健食品》（第二版）2023/7/254二、保健食品毒性試驗(yàn)的原則《保健食品》（2023/10/55三、保健食品毒理學(xué)評(píng)價(jià)的結(jié)果判定（一）急性毒性試驗(yàn)

對(duì)人體推薦量較大和其他一些特殊原料的保健食品，按最大耐受量法給予最大劑量，動(dòng)物未出現(xiàn)死亡，也可進(jìn)入下一階段毒理學(xué)試驗(yàn)。（二）遺傳毒性試驗(yàn)如三項(xiàng)致突變?cè)囼?yàn)中，體外或體內(nèi)有一項(xiàng)或以上試驗(yàn)呈陽(yáng)性，一般應(yīng)放棄該受試物用于保健食品。如三項(xiàng)致突變?cè)囼?yàn)均為陰性，則可繼續(xù)進(jìn)行下一步的毒性試驗(yàn)?！侗＝∈称贰罚ǖ诙妫?023/7/255三、保健食品毒理學(xué)評(píng)價(jià)的結(jié)果判定《保健食2023/10/56（三）30d喂養(yǎng)試驗(yàn)對(duì)只要求進(jìn)行第一、二階段毒理學(xué)試驗(yàn)的受試物，若30d喂養(yǎng)試驗(yàn)的最大未觀察到有害作用劑量大于或等于人的可能攝入量的100倍，綜合其他各項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果可初步作出安全性評(píng)價(jià)。（四）傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)以LD50或30d喂養(yǎng)試驗(yàn)的最大未觀察到有害作用劑量設(shè)計(jì)的受試物各劑量組，如果在任何一個(gè)劑量組觀察到受試物的致畸作用，則應(yīng)放棄該受試物用于保健食品；如果觀察到有胚胎毒性作用，則應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一步的繁殖試驗(yàn)?！侗＝∈称贰罚ǖ诙妫?023/7/256（三）30d喂養(yǎng)試驗(yàn)《保健食品》（第二2023/10/57（五）90d喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)、繁殖試驗(yàn)1.國(guó)內(nèi)外少數(shù)國(guó)家或國(guó)內(nèi)局部地區(qū)有食用歷史的原料或成分2.國(guó)內(nèi)外均無(wú)食用歷史的原料或成分（六）慢性毒性試驗(yàn)和致癌試驗(yàn)1.慢性毒性試驗(yàn)評(píng)價(jià)2.致癌試驗(yàn)評(píng)價(jià)《保健食品》（第二版）2023/7/257（五）90d喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)、繁殖試驗(yàn)《保健食2023/10/58第二節(jié)保健食品的功能評(píng)價(jià)

功能評(píng)價(jià)（functionalevaluation）是對(duì)保健食品的功能進(jìn)行動(dòng)物和人體試驗(yàn)加以評(píng)價(jià)確認(rèn)。保健食品所宣稱(chēng)的生理功效必須是明確而肯定的，且經(jīng)得起科學(xué)方法的驗(yàn)證并具有重現(xiàn)性。2003年衛(wèi)生部發(fā)布了《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》的新標(biāo)準(zhǔn)，將衛(wèi)生部受理的保健功能擴(kuò)展至27項(xiàng)?！侗＝∈称贰罚ǖ诙妫?023/7/258第二節(jié)保健食品的功能評(píng)價(jià)《保健食品》2023/10/59一、保健食品功能性評(píng)價(jià)的基本要求（一）對(duì)受試樣品、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、受試樣品劑量及時(shí)間等的基本要求1.對(duì)受試樣品的要求2.對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的要求3.對(duì)受試樣品劑量及時(shí)間的要求（二）對(duì)人體試食試驗(yàn)的基本要求1.對(duì)受試樣品和試驗(yàn)的一般要求2.對(duì)受試者的要求3.對(duì)試驗(yàn)實(shí)施者的要求《保健食品》（第二版）2023/7/259一、保健食品功能性評(píng)價(jià)的基本要求《保健食2023/10/510二、主要保健功能的評(píng)價(jià)（一）增強(qiáng)免疫力的功能評(píng)價(jià)1.胸腺/體重比值、脾臟/體重比值通過(guò)測(cè)定實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的胸腺/體重比值和脾臟/體重比值是否有差異，可了解受試樣品是否具有調(diào)節(jié)免疫力的作用。2.細(xì)胞免疫功能測(cè)定主要通過(guò)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)這兩個(gè)試驗(yàn)來(lái)評(píng)價(jià)受試樣品是否具有調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫的功能。（1）小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。（2）遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)有兩種方法。《保健食品》（第二版）2023/7/2510二、主要保健功能的評(píng)價(jià)《保健食品》（第2023/10/5113.體液免疫功能測(cè)定主要通過(guò)抗體生成細(xì)胞檢測(cè)和血清溶血素測(cè)定試驗(yàn)來(lái)評(píng)價(jià)受試物對(duì)體液免疫功能的調(diào)節(jié)。（1）抗體生成細(xì)胞檢測(cè)（Jerne改良玻片法）。（2）血清溶血素測(cè)定。4.單核-巨噬細(xì)胞功能測(cè)定主要通過(guò)小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn)和小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)來(lái)評(píng)價(jià)受試物對(duì)單核巨噬細(xì)胞功能的影響。（1）小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn)。（2）小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?！侗＝∈称贰罚ǖ诙妫?023/7/25113.體液免疫功能測(cè)定《保健食品》（第二2023/10/5125.NK細(xì)胞活性測(cè)定通常用乳酸脫氫酶（LDH）測(cè)定法來(lái)評(píng)價(jià)受試樣品對(duì)NK細(xì)胞活性的影響。6.結(jié)果判斷（1）增強(qiáng)免疫力功能判定。（2）細(xì)胞免疫功能結(jié)果斷定。（3）體液免疫功能結(jié)果斷定。（4）單核巨噬細(xì)胞功能結(jié)果判定。（5）NK細(xì)胞活性結(jié)果判斷《保健食品》（第二版）2023/7/25125.NK細(xì)胞活性測(cè)定《保健食品》（第二2023/10/513（二）抗氧化的功能評(píng)價(jià)1.過(guò)氧化脂質(zhì)含量測(cè)定自由基攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸，可使脂類(lèi)氧化形成過(guò)氧化脂質(zhì)。過(guò)氧化脂質(zhì)進(jìn)一步分解形成丙二醛、乙烷等物質(zhì)。如果這些物質(zhì)在體液和組織中的含量增多，則表示體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)增強(qiáng)。2.抗氧化酶活性（1）超氧化物歧化酶（SOD）活性。（2）谷胱甘肽過(guò)氧化酶(GSH-Px)的活力。3.結(jié)果判斷（1）動(dòng)物試驗(yàn)。（2）人體試食試驗(yàn)?！侗＝∈称贰罚ǖ诙妫?023/7/2513（二）抗氧化的功能評(píng)價(jià)《保健食品》（第2023/10/514（三）輔助改善記憶的功能評(píng)價(jià)1.跳臺(tái)試驗(yàn)2.避暗試驗(yàn)3.穿梭箱試驗(yàn)（雙向回避試驗(yàn)）4.水迷宮試驗(yàn)5.結(jié)果判定（1）動(dòng)物試驗(yàn)。（2）人體試食試驗(yàn)。（四）改善生長(zhǎng)發(fā)育的功能評(píng)價(jià)1.體重、身長(zhǎng)、食物利用率等試驗(yàn)項(xiàng)目2.結(jié)果判定（1）動(dòng)物試驗(yàn)。（2）人體試食試驗(yàn)。《保健食品》（第二版）2023/7/2514（三）輔助改善記憶的功能評(píng)價(jià)《保健食品2023/10/515（五）緩解體力疲勞作用的功能評(píng)價(jià)1.負(fù)重游泳試驗(yàn)2.血清尿素測(cè)定3.肝糖原測(cè)定4.血乳酸測(cè)定（1）自配試劑測(cè)定方法。（2）乳酸鹽測(cè)定儀測(cè)定方法。5.結(jié)果判定《保健食品》（第二版）2023/7/2515（五）緩解體力疲勞作用的功能評(píng)價(jià)《保健2023/10/516（六）輔助降血脂的功能評(píng)價(jià)用高膽固醇和高脂類(lèi)飼料喂養(yǎng)動(dòng)物，可使動(dòng)物形成脂代謝紊亂動(dòng)物模型，再給予動(dòng)物受試樣品或在造模時(shí)同時(shí)給予受試樣品，可檢測(cè)受試樣品對(duì)高血脂癥動(dòng)物的影響，并可判定受試樣品對(duì)脂質(zhì)的吸收、蛋白質(zhì)的形成、脂質(zhì)的降解或排泄的影響。1.脂代謝紊亂動(dòng)物模型——預(yù)防性給受試樣品2.脂代謝紊亂動(dòng)物模型——治療性給受試樣品3.結(jié)果判定（1）動(dòng)物試驗(yàn)①輔助降血脂功能結(jié)果判定。②輔助降低甘油三酯結(jié)果判定。③輔助降低血清總膽固醇結(jié)果判定。（2）人體試食試驗(yàn)《保健食品》（第二版）2023/7/2516（六）輔助降血脂的功能評(píng)價(jià)《保健食品》2023/10/517（七）輔助降血糖的功能評(píng)價(jià)1.降低空腹血糖試驗(yàn)2.糖耐量試驗(yàn)3.結(jié)果判定（1）動(dòng)物試驗(yàn)。（2）人體試食試驗(yàn)。（八）改善睡眠的功能評(píng)價(jià)1.直接睡眠試驗(yàn)2.延長(zhǎng)戊巴比妥鈉睡眠試驗(yàn)3.戊巴比妥鈉（或巴比妥鈉）閾下劑量催眠試驗(yàn)4.巴比妥鈉睡眠潛伏期試驗(yàn)5.結(jié)果判定《保健食品》（第二版）2023/7/2517（七）輔助降血糖的功能評(píng)價(jià)《保健食品》2023/10/518（九）改善營(yíng)養(yǎng)性貧血作用的功能評(píng)價(jià)用低鐵飼料喂飼動(dòng)物可形成實(shí)驗(yàn)性缺鐵性貧血模型，再給予受試樣品，觀察其對(duì)血液細(xì)胞學(xué)、血液生化學(xué)等指標(biāo)的影響，可判定該受試樣品對(duì)改善動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)性貧血的作用。1.血紅蛋白測(cè)定（1）消光系數(shù)法。（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法。2.紅細(xì)胞內(nèi)游離原卟啉測(cè)定3.結(jié)果判定（1）動(dòng)物試驗(yàn)。（2）人體試食試驗(yàn)。《保健食品》（第二版）2023/7/2518（九）改善營(yíng)養(yǎng)性貧血作用的功能評(píng)價(jià)《保2023/10/519（十）增加骨密度作用的功能評(píng)價(jià)增加骨密度功能作用的檢驗(yàn)方法根據(jù)受試樣品作用原理的不同分為方案一（檢測(cè)以補(bǔ)鈣為主的受試物）和方案二（檢測(cè)不含鈣或不以補(bǔ)鈣為主的受試物）兩種。1.方案一生長(zhǎng)期大鼠在攝食低鈣飼料的基礎(chǔ)上分別補(bǔ)充碳酸鈣（對(duì)照組）或受試含鈣產(chǎn)品（實(shí)驗(yàn)組），對(duì)受試樣品增加骨密度的功能進(jìn)行評(píng)價(jià)。2.方案二在建立模型的同時(shí)或模型建立之后給模型實(shí)驗(yàn)組大鼠補(bǔ)充受試樣品，通過(guò)受試物抑制破骨或促進(jìn)成骨等骨代謝調(diào)節(jié)作用，對(duì)受試樣品增加骨密度的功能進(jìn)行評(píng)價(jià)。3.結(jié)果判定《保健食品》（第二版）2023/7/2519（十）增加骨密度作用的功能評(píng)價(jià)《保健食2023/10/520（十一）輔助降血壓的功能評(píng)價(jià)輔助降血壓的功能評(píng)價(jià)試驗(yàn)原理是以受試樣品給予遺傳型高血壓動(dòng)物或通過(guò)試驗(yàn)方法造成的高血壓動(dòng)物模型，觀察受試樣品對(duì)高血壓動(dòng)物模型的血壓、心率等指標(biāo)的影響，可評(píng)價(jià)受試樣品的降壓作用。1.一般情況觀察觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體重、生長(zhǎng)狀況。2.觀察血壓、心率（1）動(dòng)物試驗(yàn)。（2）人體試食試驗(yàn)。3.結(jié)果判定（1）動(dòng)物試驗(yàn)。（2）人體試食試驗(yàn)?！侗＝∈称贰罚ǖ诙妫?023/7/2520（十一）輔助降血壓的功能評(píng)價(jià)《保健食品2023/10/521

保健食品評(píng)價(jià)一般包括安全性毒理學(xué)試驗(yàn)、功能學(xué)試驗(yàn)（包括動(dòng)物試驗(yàn)和/或人體試食試驗(yàn)）、功效成分檢測(cè)、衛(wèi)生學(xué)試驗(yàn)和穩(wěn)定性試驗(yàn)等五個(gè)方面，本章重點(diǎn)介紹了保健食品的安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)與功能評(píng)價(jià)