中藥炮制理論的實驗研究

中藥炮制理論的實驗研究

醋煮和醋蒸工藝延胡索是一種常用的理氣止痛藥，具有活血、益氣、止痛的功能。用于胸脅、脘腹疼痛,經閉痛經,產后瘀阻,跌撲腫痛等癥。歷代對延胡的炮制有生用、炒、醋炙、酒炙、醋煮、鹽炙等,現(xiàn)多采用醋炙、醋煮和醋蒸,部分地區(qū)沿用酒炙和鹽炙?！吨袊幍洹?000年版及2005版收載的只有生延胡索和醋延胡索2種。延胡索主要含有多種生物堿,包括叔胺堿、季銨堿及酚性叔胺堿。藥理實驗證明,延胡總生物堿、延胡甲素、乙素、丑素均有較強的鎮(zhèn)痛作用,以乙素鎮(zhèn)痛作用最強?，F(xiàn)代研究主要以總生物堿、元胡乙素、季銨堿的含量為成分指標,以鎮(zhèn)痛及小鼠耐缺氧實驗為藥理指標,對其炮制原理、炮制工藝進行探討。本研究為探討不同炮制方法制得的生延胡索和醋延胡索的抗炎、鎮(zhèn)痛藥效作用,進行了抗炎、鎮(zhèn)痛的實驗研究,現(xiàn)報道如下。1scxk粵昆明種小鼠,雌雄兼用,2~3月齡,體重18~22g;以上動物均由廣州中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供(動物許可證:粵監(jiān)證字2008A005,SCXK(粵)2008-0001)。生延胡索和醋延胡索顆粒由廣東省中醫(yī)研究所提供(批號:070713、070816)。實驗時取藥物顆粒以生理鹽水溶解,配置生理鹽水溶液,4℃保存?zhèn)溆谩６妆?、冰醋酸、伊文思蘭等試劑均為市售分析純試劑。消炎痛,河南安陽華安制藥有限公司,批號:080716,以生理鹽水溶解,4℃保存?zhèn)溆?方法和結果2.1抗炎試驗2.2鎮(zhèn)痛實驗3中藥質量與藥理中藥是植物、動物、礦物等原生藥材,所含成分非常復雜,往往一種中藥,含有多種化學成分。具有明顯藥理作用的成分,有生物堿、苷類、揮發(fā)油、多糖、有機酸、鞣質、蛋白質、氨基酸、無機成分及微量元素等。中藥炮制是以中醫(yī)藥基本理論為指導,根據(jù)辯證施治用藥的需要和藥物自身的理化性質以及制劑的不同要求,對原藥材進行的一整套加工處理,使藥物的某些作用突出,某些作用減弱,力求符合疾病實際的治療需要,以提高臨床療效。中藥炮制成飲片后其化學成分、理化性質發(fā)生改變,從而影響藥物的療效。所以必須重視中藥的炮制工作,以保證臨床用藥的安全、準確、有效。延胡索為罌粟科植物CorydalisyanhusuoW.T.Wang的干燥塊莖。主產于河北、山東、江蘇、浙江等地。具有活血、利氣、止痛之功效,用于胸脅、脘腹疼痛、經閉通經、產后瘀阻、跌撲腫痛等?，F(xiàn)在,臨床主要集中用于各種疼痛、心血管疾病及痛經等。延胡索鎮(zhèn)痛的主要藥效物質基礎是延胡索總堿,其中延胡索乙素是主要有效成分?，F(xiàn)代研究證實,醋炙元胡水煎液的生物堿含量比生延胡索顯著升高,而酒炙元胡水煎液中的生物堿含量最低,因此藥典已未再收載。目前,從中藥延胡索中提取的延胡索乙素(dl-tetrahydropalmatine,dl-THP),即左旋四氫巴馬汀(l-tet2rahydropalmatine,l-THP,又稱顱痛定)已經廣泛用于臨床。本實驗研究顯示,醋延胡索及凈制延胡索能顯著抑制二甲苯所致小鼠耳廓腫脹,抑制小鼠腹腔毛細血管的通透性,提高熱板法疼痛模型小鼠痛閾值,抑制醋酸所致小鼠扭體痛反應,具有良好的抗炎鎮(zhèn)痛藥理效應。但在鎮(zhèn)痛作用方面醋延胡索要顯著優(yōu)于凈制延胡索,這可能與經醋炙后,延胡索中的生物堿與醋酸結合成易溶于水的醋酸鹽易于溶出有關。本實驗研究進一步說明了中藥炮制理論的科學性。2.1.1連續(xù)給藥對小鼠耳水腫度的影響取昆明種小鼠60只,體重18-22g,雌雄各半,隨機分為4組,即生理鹽水對照組、消炎痛組(給藥量為1mg/kg)、醋延胡索組(給藥量為4g/kg)、生延胡索組(給藥量為4g/kg)、每組小鼠10只,灌胃給藥(對照組給予等容的生理鹽水),每天1次,連續(xù)給藥3天。末次給藥后0.5h,將0.02ml二甲苯均勻涂于每只小鼠右耳耳廓兩面致炎,左耳不涂作為正常對照。1h后脫頸處死各小鼠,用直徑8mm打孔器在左耳及右耳同一部位打下圓耳片,用電子天平稱重,以右耳重量減去左耳重量為腫脹度,計算耳腫脹度及腫脹抑制率。腫脹抑制率(%)=(對照組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度)/(對照組平均腫脹度)×100%,分別計算耳腫脹度及腫脹抑制率,結果以SPSS11.5進行組間t檢驗,結果見表1表1結果顯示,醋延胡索組、凈制延胡索組和消炎痛組在給藥后均能不同程度地抑制二甲苯所致小鼠耳腫脹,p<0.05;但經t檢驗發(fā)現(xiàn)醋延胡索組、凈制延胡索組與消炎痛組有顯著性差異,p<0.05。2.1.2小鼠腸道感染后成分的變化取小鼠隨機分組(用藥方法同上),末次給藥1h后尾靜脈注射1%伊文思藍10ml/kg,同時腹腔注射0.6%醋酸10ml/kg,20min后拉頸處死,打開腹腔,用6ml蒸餾水分3次沖洗腹腔,收集腹腔洗液,測定光密度值OD。抑制率=(對照組滲出量-用藥組滲出量)/對照組滲出量×100%,結果以SPSS11.5進行組間t檢驗,結果見表2。由表2可見,凈制延胡索、醋延胡索各組及消炎痛組對致炎小鼠尾靜脈注射伊文思蘭后,腹腔毛細血管的通透性有明顯的抑制作用(P<0.01或P<0.05);而消炎痛組優(yōu)于醋延胡索組、凈制延胡索組,差異顯著,p<0.05。2.2.1對小鼠的痛行為檢測取雌性小白鼠,將智能熱板儀溫度調至(55±0.5)℃,預熱10分鐘后,將雌性小鼠每次1只放在熱板上,小鼠自放上至出現(xiàn)舐后腿、趾所需時間(s)作為該鼠的痛閾值,將篩選合格(舔足時間小于5s或者大于30s或者踴躍者棄之不用)的雌性小鼠50只,隨機分成5組,每組10只,分組及給藥方式同2.1.1,每組給藥前重復測定痛閾值,取兩次痛閾平均值作為正常痛閾值。連續(xù)給藥3d,每天1次。第3天給藥后在第0.5h、1h、3h、6h測量小鼠的痛閾值,記錄結果,計算各組痛閾提高百分率,結果以SPSS11.5進行組間t檢驗,結果見表3。表3結果顯示,凈制延胡索、醋延胡索各組及消炎痛組在給藥后均能顯著提高痛閾值(P<0.05或P<0.01),而消炎痛組和醋延胡索組則優(yōu)于凈制延胡索組(P>0.05)。2.2.2單次給藥后小鼠的鎮(zhèn)痛試驗取小鼠50只,雌雄各半,隨機分為5組,每組10只,分組及給藥方法同2.1.1,均于末次給藥后30min,各小鼠腹腔注射0.8%的醋酸0.1ml/10g,觀察記錄15min內每只小鼠出現(xiàn)扭