實驗6淀粉酶的固定化

第二章酶的應用實驗6α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測1精品課件什么是酶制劑？蛋白酶和脂肪酶酶制劑：含有酶的制品。胃蛋白酶2精品課件酶制劑的缺點通常對強酸、強堿、高溫和有機溶劑等條件非常敏感，容易失活。溶液中的酶很難回收，不能被再次利用，提高了生產(chǎn)本錢。反響后酶會混在產(chǎn)物中，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量〔難別離〕。3精品課件什么是固定化酶？固定化酶：將水溶性的酶用物理或化學的方法固定在某種介質(zhì)上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。4精品課件酶的固定化方法①②③④吸附法共價偶聯(lián)法交聯(lián)法包埋法5精品課件共價偶聯(lián)法交聯(lián)法包埋法6精品課件實驗原理用吸附法將α-淀粉酶固定在石英砂上，一定濃度的淀粉溶液經(jīng)過固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示劑溶液〔KI-I2溶液〕測試，流出物呈紅色說明水解產(chǎn)物糊精生成。糊精淀粉α-淀粉酶β淀粉酶麥芽糖葡萄糖糖化淀粉酶遇碘顯紅色遇碘不顯色遇碘顯藍色7精品課件實驗設備及用品5mL塑料注射器、50mL燒杯、滴管、自行車用氣門心及夾子、注射器架、試管及微量離心管3支。固定化柱控制流速注射器架閥門8精品課件Step1：α-淀粉酶的固定化①吸附：5mgα-淀粉酶+4mL蒸餾水+5g石英砂，攪拌30min。②裝柱：裝入下端接有氣門心并用夾子封住的注射器中。③洗柱：用10倍柱體積的蒸餾水洗滌除去未吸附的游離淀粉酶。吸附有α-淀粉酶的石英砂9精品課件固定化裝置—反響柱固定化柱控制流速注射器架10精品課件Step2：淀粉水解作用的檢測①溶解淀粉：50mg可溶性淀粉溶于100mL熱水中，攪拌均勻。②過柱：使淀粉溶液以0.3mL/min的流速過柱，在流出5mL淀粉溶液后接收0.5mL流出液。③檢測：參加1-2滴KI-I2溶液，觀察顏色變化。用水稀釋1倍后再觀察顏色。每分鐘6滴11精品課件Step3：固定化柱的保存和再次使用用10倍柱體積的蒸餾水洗滌此柱〔洗去殘留的反響物和產(chǎn)物〕，放置在4℃冰箱中保存，幾天后取出再重復實驗。12精品課件實驗結(jié)果①②③④對照：淡黃色藍色紅色淺紅色實驗結(jié)論：淀粉被α-淀粉酶水解成為糊精。水淀粉溶液淀粉濾液稀釋1倍13精品課件固定化酶柱目的：控制流速讓淀粉和淀粉酶充分接觸反響。14精品課件酶顆粒無法通過篩板上的小孔，而反響液卻可以自由出入。固定化酶技術生產(chǎn)高果糖漿分布著小孔的篩板15精品課件例題：研究認為，用固定化酶技術處理污染物是很有前途的。如將從大腸桿菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龍膜上制成制劑，可以用來降解殘留在土壤中的有機磷農(nóng)藥，與用微生物降解相比，其作用不需要適宜的〔〕A.溫度B.pHC.水分D.營養(yǎng)固定化酶的優(yōu)點：①使酶既能與反響物接觸，又能與產(chǎn)物別離。②固定在載體上的酶可以被反復利用。③酶反響過程可嚴格控制。16精品課件例題：〔2021·杭州模擬〕〔1〕在工業(yè)生產(chǎn)中，為提高酶的使用效率和產(chǎn)品純度，一般需要將酶進行固定化處理。利用石英砂固定α-淀粉酶的方法屬于〔〕A.吸附法B.偶聯(lián)法C.交聯(lián)法D.包埋法〔2〕一定濃度的淀粉溶液流過α-淀粉酶固定化酶柱后，被水解成，遇碘顯色。〔3〕α-淀粉酶可以通過枯草桿菌發(fā)酵生產(chǎn)，以下是利用誘變育種方法培育獲得產(chǎn)生較多淀粉酶的菌株的主要實驗步驟?！苍恚壕晟L過程中可釋放淀粉酶分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈?！澈t17精品課件第一步：將枯草桿菌菌株接種到培養(yǎng)基上進行擴大培養(yǎng)。第二步：將枯草桿菌菌株分成兩組，A組用處理，B組不處理〔作對照〕。第三步：制備多個含淀粉的固體培養(yǎng)基。第四步：將A、B組分別稀釋后，分別在含淀粉的固體培養(yǎng)基上利用法別離，適宜條件下培養(yǎng)得到單菌落。第五步：觀察A、B組各菌落周圍的。實驗結(jié)果預期：①根據(jù)誘發(fā)突變率低的特點，預期。②根據(jù)誘發(fā)突變不定向的特點，預期。液體誘變劑涂布透明圈大小A組多數(shù)菌落周圍的透明圈與B組差異不顯著A組透明圈大小不一，B組較一致18精品課件例題：〔2021·浙江自選模塊〕利用紫甘薯制酒可提高其附加值。請答復：〔1〕為提高紫甘薯的利用率，工廠化生產(chǎn)時，可參加果膠酶和淀粉酶，其中果膠酶可來自等微生物。由于酶在水溶液中不穩(wěn)定，因此常將酶固定在某種介質(zhì)上制成?！?〕果膠酶可將紫甘薯勻漿中的果膠水解成。A.半乳糖醛酸和葡萄糖B.半乳糖和果糖C.半乳糖醛酸甲酯和果糖D.半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯黑曲霉或蘋果青霉固定化酶19精品課件〔3〕紫甘薯勻漿流經(jīng)α-淀粉酶柱后，取適量流出的液體，經(jīng)脫色后參加KI-I2溶液，結(jié)果液體呈紅色。說明該液體中含有。A.淀粉B.糊精C.麥芽糖D.葡萄糖〔4〕在發(fā)酵前，為使酵母菌迅速發(fā)生作用，取適量的干酵母，參加溫水和。一段時間后，酵母懸液中會出現(xiàn)氣泡，該氣泡內(nèi)的氣體主要是。將酵母液接種到待發(fā)酵液中后，隨發(fā)酵的進行，酵母菌在條件下產(chǎn)生了酒精和二氧化碳。蔗糖CO2無氧20精品課件〔5〕以下圖表示發(fā)酵液pH對酒精濃度的影響。據(jù)圖判斷，最正確pH是。4.721精品課件例題：〔2021·寧波模擬〕固定化酶是從20世紀60年代迅速開展起來的一種技術。東北農(nóng)業(yè)大學科研人員利用雙重固定法，即采用戊二醛作交聯(lián)劑〔使酶相互連接〕，海藻酸鈉作為包埋劑來固定小麥酯酶，研究固定化酶的性質(zhì)，并對其最正確固定條件進行了探究。如圖顯示的是局部研究結(jié)果〔注：酶活力為固定化酶催化化學反響的總效率，包括酶活性和酶的數(shù)量〕，分析并答復：22精品課件〔1〕固定化酶技術是將水溶性的酶用物理或化學的方法固定在某種介質(zhì)上，使酶既能與接觸，又能與別離，同時還能被。常見的酶固定化的方法有多種：如對此題的小麥酯酶使用了和，在“α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測〞這一實驗中，α-淀粉酶固定在石英砂上，使用了以下圖中的。底物〔反響物〕產(chǎn)物反復利用交聯(lián)法包埋法③23精品課件〔2〕從對溫度變化適應性和應用范圍的角度分析，甲圖所示結(jié)果可以得出的結(jié)論是?！?〕乙圖曲線說明濃度為的海