地中海貧血檢測相關(guān)問題

地中海貧血檢測相關(guān)問題

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α-地貧基因缺失示意圖-a3.7-a4.2--SEA

a2

a1a2a1

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α地貧的基因型與表型Normal(αα/αα)

正常α+thaltrait(αα/-α3.7)(αα/-α4.2)靜止型－單一α基因缺失或喪失功能臨床無任何病癥，一般血液學(xué)檢查無異樣，僅平均紅細(xì)胞體積(MCV)位于正常值下限。出生時(shí)臍帶血HbBart’s可達(dá)1%-2%，但很快消失。17編輯pptα地貧的基因型與表現(xiàn)型HbHdisease(-α

3.7/--SEA)(-α

4.2/--SEA)αoThaltrait(αα/--SEA)(-α/-α)標(biāo)準(zhǔn)型－2個(gè)α基因缺失或喪失功能臨床無病癥，血液學(xué)檢查出現(xiàn)輕微貧血，紅細(xì)胞大小不均一，平均紅細(xì)胞體積(MCV)及平均血紅蛋白含量(MCH)輕度下降。出生時(shí)臍帶血HbBart’s可達(dá)5%-15%血紅蛋白H病－3個(gè)α基因缺失或喪失功能肝脾腫大，中度貧血。HbH含量較高〔0.8%-40%〕，易發(fā)生溶血，有些病例需不定期輸血，重者需切脾。18編輯ppta地貧的基因型與表現(xiàn)型HbBart'sHydrops(--SEA/--SEA)HbBart’s胎兒水腫綜合癥－4個(gè)基因缺失或喪失功能患胎于妊娠晚期或產(chǎn)后數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡，全身水腫，肝脾腫大，可有四肢和外生殖器畸形。由于胎兒無法合成亞基，臍血血紅蛋白〔HbBart’s，4〕含量高〔80%-90%〕。19編輯ppt

HbConstantSpring(HbCS)基因突變：

a2珠蛋白基因142位終止密碼子TAA→CAA突變，其mRNA不穩(wěn)定，降解加速，導(dǎo)致HbCS合成減少，HbCS在功能上相當(dāng)于一個(gè)a-地中海貧血2基因。20編輯ppt

HbQuongSze(HbQS)

基因突變：a2珠蛋白基因125位密碼子CTG→CCG突變，導(dǎo)致HbQS(a125(H8)Leu→Pro)。HbQS高度不穩(wěn)定，合成后迅速降解。21編輯pptCodon41-42〔–TCTT〕IVS-II-654〔C→T〕Codon17〔A→T〕-28〔A→T〕Codon71-72〔+A〕Codon26〔G→A〕常見的基因突變類型：Codon43〔G→Ｔ〕Codon27/28〔＋Ｃ〕IVS-I-1〔G→A〕IVS-I-5〔G→Ｃ〕22編輯ppt2021第一次地貧基因檢驗(yàn)EQA23編輯ppt一、背景：1、廣西與衛(wèi)生部合作工程，開展地貧防治工程；2、基因檢測在指導(dǎo)有地貧攜帶基因夫婦進(jìn)行產(chǎn)前檢查，防止重度地貧孩子出生方面具有重要意義。已建立三大地貧檢測中心。二、目的：了解廣西各醫(yī)療機(jī)構(gòu)開展地貧基因檢測的質(zhì)量情況，進(jìn)一步標(biāo)準(zhǔn)地貧基因檢測、保證質(zhì)量。24編輯ppt三、參加實(shí)驗(yàn)室：廣西各級醫(yī)療機(jī)構(gòu)、人口效勞中心共23個(gè)實(shí)驗(yàn)室〔調(diào)查摸底34家，報(bào)名25家，已發(fā)質(zhì)控品，自愿退出2家〕。四、質(zhì)控品：選取已確診地貧接收治療患兒，治療時(shí)抽取的全血，用枸櫞酸鈉抗凝，交公司分裝加工成質(zhì)控品，每支0.5毫升。樣本凍于-20℃，低于4℃運(yùn)送到各實(shí)驗(yàn)室。五、質(zhì)控品發(fā)放：共發(fā)放10個(gè)血樣〔其中α-地中海貧血基因分析和β-地中海貧血基因分析各5個(gè)血樣，不同實(shí)驗(yàn)室收到的血樣不完全相同，防止抄襲結(jié)果。每個(gè)病人的血樣均留足備份保存于-80℃，用作破損后的補(bǔ)發(fā)和參考實(shí)驗(yàn)室確定參考結(jié)果。25編輯ppt26編輯ppt六、檢測要求：1、α-地中海貧血基因分析：包括中國人群常見的東南亞缺失〔--SEA〕、右側(cè)缺失〔-α3.7〕、左側(cè)缺失〔-α4.2〕三種缺失型基因檢測，以及HbWS,HbQS,HbCS三種α2珠蛋白基因突變的檢測。2、β-地中海貧血基因分析：包括中國人群常見的8個(gè)位點(diǎn)突變CD41-42-TCCT(41-42M)、IVS-2-654C變T(654M)、CD17A變T(17M)、-28A變G(28M)、CD26G變A(βEM)、CD71-72加A(71-72M)、CD43G變T(43M)、-29A變G(29M)的檢測，以及少見的9個(gè)位點(diǎn)突變、CD14-15加G(14-15M)、CD27-28加C(27-28M)、-32C變A(32M)、-30T變C(30M)、IVS-1-1G變T(IVS-1-1M)、IVS-1-5G變C(IVS-1-5M)、CD31減C(31M)、CAP-40-43-AACC)(CAPM)、起始密碼子ATG變AGG(IntM)的檢測。27編輯ppt七、評價(jià)方法：

各樣本的參考答案由專家組根據(jù)參評實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果、參考實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果和患兒病歷資料確定，有異議時(shí)可取出血樣再次檢測。參考實(shí)驗(yàn)室名單：廣西醫(yī)科大學(xué)兒科實(shí)驗(yàn)室自治區(qū)婦女兒童醫(yī)院優(yōu)生遺傳科實(shí)驗(yàn)室自治區(qū)人民醫(yī)院PCR實(shí)驗(yàn)室解放軍303醫(yī)院血液科PCR實(shí)驗(yàn)室28編輯ppt八、本次質(zhì)評發(fā)現(xiàn)的問題：〔一〕a-地貧：1、有一家實(shí)驗(yàn)室完全錯(cuò)誤，參考答案為--SEA/αcsα的標(biāo)本，做成了“αα/αα〞。2、7家實(shí)驗(yàn)室未做α2珠蛋白基因突變的檢測，導(dǎo)致所涉及的三個(gè)樣本CS突變未檢出。3、報(bào)告格式不標(biāo)準(zhǔn)：參考答案為--SEA/αα的標(biāo)本，其他格式有：“αα/--SEA〞，“-SEA/αα〞，“--/αα〞，“東南亞缺失型α地貧-1〞，“1.檢出東南亞缺失型α-地中海貧血2.未檢出-α3.7，-α4.2缺失型α-地中海貧血3.未檢出QS,CS,WS點(diǎn)突變〞29編輯ppt〔二〕β-地貧：1、有一家實(shí)驗(yàn)室兩個(gè)標(biāo)本檢測錯(cuò)誤，參考答案為“28M/28M〞的報(bào)告為“71-72/71-72〞，參考答案為“43M/71-72M〞的報(bào)告為“71-72M/βn〞;2、另一家實(shí)驗(yàn)室參考答案為“28M/71-72M〞的報(bào)告為“-28/-28〞；3、報(bào)告格式混亂，參考答案為“28M/28M〞的報(bào)告格式有：“-28m/-28m〞，“β-28/β-28〞，“-28N位點(diǎn)突變純合子〞，“-28純合子〞，“CD28〞，“28位點(diǎn)突變〔純合子〕〞，〞β珠蛋白基