臨床常用免疫學(xué)檢查課件

臨床常用免疫學(xué)檢查蘭州大學(xué)第一醫(yī)院實驗診斷教研室李燕平1基本概念（1）

免疫（Immune）是機體識別“自身”與“非己”抗原，對自身抗原形成天然免疫耐受，對“非己”抗原產(chǎn)生排斥作用的一種生理功能。正常情況下，這種生理功能對機體有益，可產(chǎn)生抗感染、抗腫瘤等維持機體生理平衡和穩(wěn)定的免疫保護(hù)作用。在一定條件下，當(dāng)免疫功能失調(diào)時，也會對機體產(chǎn)生有害的反應(yīng)和結(jié)果，如引發(fā)超敏反應(yīng)、自身免疫病和腫瘤.

2免疫功能

▲

是免疫系統(tǒng)在識別和清除“非己”抗原的過程中所產(chǎn)生的各種生物學(xué)作用的總稱。

▲主要包括免疫防御免疫自穩(wěn)免疫監(jiān)視3免疫防御（Immunologicaldefence)

---是機體排斥微生物的侵襲及其他外源性抗原異物的一種免疫保護(hù)功能

■正常時可產(chǎn)生抗感染免疫的作用，防御功能過強會產(chǎn)生超敏反應(yīng)，

■過弱則產(chǎn)生免疫缺陷（后兩種情況均屬異常反應(yīng)）4免疫自穩(wěn)(Homeostasis)

---是機體免疫系統(tǒng)維持內(nèi)環(huán)境相對穩(wěn)定的一種生理功能■正常時：機體可及時清除體內(nèi)損傷、衰老、變性的血細(xì)胞和抗原－抗體復(fù)合物，而對自身成份保持免疫耐受

■異常時：發(fā)生生理功能紊亂、自身免疫病等5免疫監(jiān)視

(Immunesurveillance)

---是機體免疫系統(tǒng)及時識別、清除體內(nèi)突變、畸變和病毒干擾細(xì)胞的一種生理保護(hù)作用。機體借以防止、監(jiān)視和抑制惡性腫瘤在體內(nèi)生長。

■喪失:機體突變細(xì)胞失控,

有可能導(dǎo)致腫瘤發(fā)生;

或出現(xiàn)病毒的持續(xù)感染。6

免疫學(xué)檢查內(nèi)容

1.血清免疫球蛋白檢測2.血清補體檢測3.細(xì)胞免疫檢測4.腫瘤標(biāo)志物檢測5.自身抗體檢測6.流式細(xì)胞術(shù)檢測7.器官與骨髓移植的檢測7一、血清免疫球蛋白測定（1）免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)

是一組具有抗體活性和（或）抗體樣結(jié)構(gòu)的球蛋白。Ig由漿細(xì)胞產(chǎn)生，存在于血液和體液（包括組織液和外分泌液）中，也可作為抗原受體表達(dá)于B細(xì)胞表面，稱為膜表面免疫球蛋白。多數(shù)Ig具有抗體活性，可以特異性的識別和結(jié)合抗原，并引發(fā)一系列生物學(xué)效應(yīng)。所有的抗體均是免疫球蛋白，但并非所有的免疫球蛋白都是抗體。8一、血清免疫球蛋白測定(2)免疫球蛋白的化學(xué)結(jié)構(gòu)：

Ig分子由四條肽鏈借二硫鍵連接組成，即兩條相同的重鏈和相同的輕鏈。免疫球蛋白的血清型：

根據(jù)Ig重鏈恒定區(qū)肽鏈抗原特異性的不同，可將分為五類，在人體的含量由多到少依次為：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。9免疫球蛋白的生物學(xué)活性：

■與抗原結(jié)合作用■補體活化作用■親細(xì)胞作用■調(diào)理作用■膜傳遞作用10免疫球蛋白G測定

IgG占血清Ig的70%~80%，大部分抗細(xì)菌、抗病毒、抗毒素抗體都屬于IgG型，具有調(diào)理作用、中和毒素、中和病毒介導(dǎo)ADCC、激活補體經(jīng)典途徑，也是唯一能通過胎盤的Ig。IgG合成速度快，分解慢，半衰期長，在血中含量最高。

【參考值】：單向免疫擴(kuò)散法7.6-16.6g/L。

IgG11【臨床意義】

■

IgG增高：

多克隆性增高:即IgG、IgA、IgM均增高，常見于各種慢性感染、以及自身免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡等。單克隆性增高僅有某一種Ig增高而其他種不增高，主要見于免疫增殖性疾病如MM。

■

IgG降低

見于各種先天性和獲得性體液免疫缺陷病、聯(lián)合免疫缺陷病，也見于病毒感染和應(yīng)用免疫抑制劑患者。IgG12

IgA可分為血清型和分泌型■

大部分血清IgA為單體，少量為雙聚體或多聚體。占血清中免疫球蛋白10~15%?！龇置谛驮诜置谝褐惺亲钪饕腎g，在外分泌系統(tǒng)中表現(xiàn)其重要的免疫功能，呼吸道、消化道、泌尿生殖道的淋巴樣組織可合成大量的分泌型IgA(即sIgA)，sIgA性能穩(wěn)定，在局部濃度大，能抑制病原體和有害抗原黏附在黏膜上，阻擋其進(jìn)入體內(nèi)；同時也因其具有條理吞噬和溶解作用，構(gòu)成了黏膜第一防御機制；與這些部位炎癥、感染、腫瘤等密切相關(guān)。

■母乳中的sIgA提高了嬰兒出生后4-6個月內(nèi)的局部免疫屏障，常為局部抗體?！?/p>

參考值和臨床意義：為了解內(nèi)容IgA免疫球蛋白A測定13

IgM：

是分子量最大的Ig，為五聚體，半衰期短、出現(xiàn)早、消失快、組織穿透力弱。占血清總Ig的5-10%。

■血型中天然凝集素和冷凝集素的抗體類型是IgM，不能通過胎盤，新生兒臍血中若IgM增高，提示有宮內(nèi)感染。在感染或疫苗接種以后，最先出現(xiàn)的抗體是IgM，是有效的凝集和溶解細(xì)胞的因子。

免疫球蛋白M測定IgM14

IgD：

血清含量極少,其功能尚不完全清楚,已發(fā)現(xiàn)有些抗核抗體、抗基底膜抗體、抗甲狀腺抗體和鏈球菌溶血素“O”抗體等均屬IgD，但活性甚低免疫球蛋白D測定IgD15

IgE：

介導(dǎo)?型變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生，為重要的變態(tài)反應(yīng)指標(biāo)，與寄生蟲感染及過敏有關(guān)免疫球蛋白E測定IgEIg的檢測---常用免疫擴(kuò)散法,ELISA法,免疫比濁法等16

IgE：

介導(dǎo)?型變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生，為重要的變態(tài)反應(yīng)指標(biāo)，與寄生蟲感染及過敏有關(guān)免疫球蛋白E測定IgEIg的檢測：

常用免疫擴(kuò)散法,ELISA法,免疫比濁法等Ig的檢測---常用免疫擴(kuò)散法,ELISA法,免疫比濁法等17二、血清補體的測定

補體系統(tǒng)：補體加上其調(diào)節(jié)因子和相關(guān)膜蛋白共同組成一個反應(yīng)系統(tǒng)，稱為補體系統(tǒng)。補體系統(tǒng)參與機體的抗感染及免疫調(diào)節(jié)，也可介導(dǎo)病理反應(yīng)（如參與破壞自身組織和細(xì)胞而導(dǎo)致自身免疫病的發(fā)生）補體系統(tǒng)是體內(nèi)主要的免疫系統(tǒng)和放大系統(tǒng)。

補體(complement,C)：

存在于人和脊椎動物正常新鮮血液及組織液中的一組具有酶樣活性的球蛋白。18組成

由傳統(tǒng)途徑的9種成分C1~C9，旁路途徑的三種成分及其衍生物B、D、P、H、I等因子組成常作項目總補體溶血活性檢測、補體旁路途徑溶血活性檢測、補體C1q檢測、C3檢測、C4檢測等方法單向免疫擴(kuò)散法、免疫比濁法等二、血清補體的測定19三、自身抗體的檢查自身免疫：

當(dāng)某種原因使自身免疫耐受削弱或破壞，免疫系統(tǒng)會對自身成分產(chǎn)生免疫應(yīng)答，這種現(xiàn)象稱為自身免疫自身免疫性病的概念及特征

健康個體的免疫調(diào)節(jié)功能會將自身耐受和自身免疫協(xié)調(diào)在一個相符相承的合理水平。當(dāng)某種原因使自身免疫應(yīng)答過分強烈時，也會導(dǎo)致相應(yīng)的自身組織、器官損傷或攻能障礙，這種病理狀態(tài)稱為自身免疫?。ˋID）

特征：

■患者血清中可檢出高滴度的自身抗體

■患者組織器官的病理特征為免疫炎癥

■動物中可復(fù)制出相應(yīng)的動物模型20類風(fēng)濕因子(RF)測定RF：是抗變性IgG的自身抗體，主要為IgM，也可有見IgG、IgA、IgD、IgE型，可與人或動物的變性IgG結(jié)合，而不與正常IgG發(fā)生凝集，最多見于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)患者。RF在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)患者中的檢出率70%，RF陽性支持早期RA的傾向性診斷，如對于年輕女性應(yīng)進(jìn)行RA和風(fēng)濕熱的鑒別；而對非活動期RA的診斷，需參考病史。RF并不是RA的特異性抗體，在SLE患者約有50%RF陽性，在其他結(jié)締組織病如SS、硬皮病、慢性活動性肝炎及老年人中均可有不同程度的陽性率。

■檢測方法：乳膠凝集法(定性)免疫比濁法(可準(zhǔn)確測其含量)。21抗核抗體檢測（1）ANA：

泛指核成分的抗體，是一種廣泛存在的自身抗體。性質(zhì)主要是IgG,也有IgM、IgA、IgD、IgE，可與不同來源的細(xì)胞核起反應(yīng)，無器官特異性和種屬特異性。ANA主要存在與血清中

■抗核抗體（ANA）類型及意義

■

類型:抗核蛋白抗體(DNP)，即脫氧核糖蛋白、DNA、可提取的核抗原（ENA）和RNA等22抗雙鏈DNA(ds-DNA抗核抗體檢測)抗體：抗ds-DNA的靶抗原是細(xì)胞核中DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)，是SLE的標(biāo)志性抗體.抗核抗體檢測（2）23抗RNP抗體：即核糖核蛋白，高效價的抗RNP抗體對混合性結(jié)締組織病有診斷意義，低效價的抗RNP抗體可在SLE患者中發(fā)現(xiàn)抗Sm抗體：是SLE的特征性標(biāo)志之一，若抗ds-DNA和抗Sm抗體同時檢測，可提高SLE的診斷率抗SS-A抗體：為干燥綜合正（SS）的A抗原,抗SS-A抗體主要見于SS，但也見于其他自身免疫病如SLE中抗SS-B抗體：為干燥綜合正（SS）的B抗原,13%的SLE及30%的SS患者有抗SS-B抗體抗ENA抗體：

可提取性核抗原(ENA),多從動物胸腺中提取24組織和細(xì)胞抗體檢測（1）

抗線粒體抗體（AMA）

是一種針對肝細(xì)胞質(zhì)中線粒體內(nèi)膜脂蛋白成分的自身抗體,無器官和組織特異性抗體,該抗體主要是IgG.常用大白鼠胃或腎皮質(zhì)作抗原進(jìn)行免疫熒光法測定【臨床意義】

原發(fā)性膽汁性肝硬化（PAB）可有70%~94%為陽性反應(yīng)或效價>=1:160；長期持續(xù)性肝阻塞、慢性活動性肝炎、原因不明肝硬化等也呈陽性反應(yīng)25抗甲狀腺球蛋白抗體及微粒體抗體：這種抗體可以針對甲狀腺的多種成分,以甲狀腺球蛋白抗體和微粒體為代表?？贵w主要是IgG,可以介導(dǎo)ADCC活性,引起慢性淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎,又稱喬本甲狀腺炎26

抗乙酰膽堿抗體（AchR）抗AchR抗體的檢測對重癥肌無力（MG）具有診斷意義。且特異性和敏感性較高。大約90%的MG患者陽性；伴有眼肌癥狀的患者，抗體效價低于普通癥狀患者；同時還用來檢測對該病免疫抑制療效的效果。肌萎縮側(cè)索硬化癥患者用蛇毒治療后可出現(xiàn)假陽性27抗平滑肌抗體（ASMA）檢出陽性率較高的疾病有慢性活動性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化（PAB），而在肝外性膽汁阻塞、藥物誘發(fā)性肝病、急性病毒性肝炎及肝細(xì)胞癌等時，ASMA的檢出率極低其他：抗心肌抗體、抗胃壁細(xì)胞抗體、抗胰島素抗體、抗腎小球基底膜抗體、抗精子抗體、抗血細(xì)胞抗體等28血清C-反應(yīng)蛋白的測定

C-反應(yīng)蛋白(CRP)是一種由肝臟產(chǎn)生的急性時相蛋白。CRP能激活補體，促進(jìn)吞噬并有其他的免疫調(diào)節(jié)功能。因能與肺炎鏈球菌菌體的C多糖起沉淀反應(yīng)而得名。CRP的檢測對炎癥，組織壞死，惡性腫瘤等診斷及療效的觀察有重要意義。常用方法有：單向免疫擴(kuò)散法、免疫比濁法、膠乳凝集法等。注意其含量與年齡相關(guān)295、腫瘤標(biāo)志物的檢測（1）概念是由腫瘤細(xì)胞本身合成釋放或者是由機體對腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類物質(zhì).分類蛋白類糖類酶類

30蛋白類腫瘤標(biāo)志物的檢測

甲種胎兒球蛋白（AFP）

概念：參考值：RIA或ELISA法低于25μg/L;定性試驗陰性臨床意義

（主要用于診斷干細(xì)胞癌及滋養(yǎng)細(xì)胞惡性腫瘤）

原發(fā)性肝細(xì)胞性肝癌生殖腺胚胎癌病毒性肝炎孕婦31癌胚抗原測定（CEA）概念：參考值：RIA或ELISA法低于15μg/L;定性試驗陰性臨床意義

（主要用于對消化道腫瘤的診斷/預(yù)后/復(fù)發(fā)的判斷）

■CEA明顯升高:胰腺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌

■CEA濃度下降,病情好轉(zhuǎn);濃度升高病情加重

■CEA輕度升高:結(jié)腸炎、胰腺炎、肺氣腫等

■其他體液CEA檢測:胃液和唾液中CEA的檢測有助于對胃癌診斷32組織多肽抗原(TPA)概念：存在于胎盤和腫瘤組織中的單鏈多肽參考值：ELISA法低于130U/L;

臨床意義

（主要用于惡性腫瘤的診斷/預(yù)后/復(fù)發(fā)的判斷）

TPA明顯升高:急性肝炎胰腺炎肺炎、妊娠3個月濃度下降,病情好轉(zhuǎn);濃度升高病情加重