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文檔簡(jiǎn)介

生殖生理性成熟

在正常的發(fā)育過程中,雄鼠出生后23-25天睪丸開始下降,30-35日齡進(jìn)入陰

囊,45-60天產(chǎn)生精子,60日齡以后就可交配。雌鼠一般在70-75日齡陰道開口,同品種品系開口時(shí)間不同,有的50日齡即開口,達(dá)80日齡即可交配。過早交配,增加雌鼠負(fù)擔(dān),對(duì)子代發(fā)育不利。大鼠最適交配日齡為雄鼠90日齡,雌鼠80日齡。性周期大鼠的發(fā)情不受季節(jié)溫度的影響,具有多發(fā)性、周期性的變化規(guī)律。大鼠性周期為4-5天。在此周期內(nèi),生殖系統(tǒng)發(fā)生一系列組織學(xué)的變化,可作陰道涂片檢查。根據(jù)陰道上皮細(xì)胞的變化,典型的4日性周期分為發(fā)情前期、發(fā)情期、發(fā)情后期和靜止期。

表二:大鼠性周期

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陰道涂片

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發(fā)情前期

陰道分泌物中大局部是膨大橢圓形扁平上皮細(xì)胞。此期

約持續(xù)17-21小時(shí),當(dāng)日下午出現(xiàn)排卵前促性腺激素頂峰,從

黃昏到深夜,此期結(jié)束。

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發(fā)情期膨大的上皮細(xì)胞核消失,成為鱗狀脫落〔角化上皮細(xì)胞并聚集在一起形成堆狀,鏡下好象許多落葉堆疊在一起。在情前期過渡到發(fā)情時(shí)〔即深夜〕發(fā)生排卵,此時(shí)大鼠的發(fā)情行為達(dá)頂峰,此期約持續(xù)9-15小時(shí)。

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發(fā)情后期

陰道分泌物中大局部是白細(xì)胞,混有少量角化上皮細(xì)胞,此期

約持續(xù)10-14小時(shí)。

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靜止期

陰道分泌物中大局部是白細(xì)胞,偶爾可見較小的有核扁平上皮

細(xì)胞。此期約持續(xù)60-70小時(shí)。

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大鼠排卵通常在發(fā)情后8-10小時(shí),發(fā)情多在夜間。排卵通常是自發(fā)的,但強(qiáng)壯的雄鼠能強(qiáng)迫雌鼠在非發(fā)情期接受交配,促進(jìn)排卵懷孕。黃體的形成及其發(fā)育是在發(fā)情后期,這時(shí)卵子已進(jìn)入輸卵管內(nèi)。在發(fā)情靜止期,卵泡又開始發(fā)育。生殖能力

雌鼠產(chǎn)仔的多少,取決于品種、胎次、飼養(yǎng)管理的好壞和雌鼠的年齡、體質(zhì)。一般情況下,適齡雌鼠第1-5胎產(chǎn)仔多,第6胎以后逐漸減少。每胎可產(chǎn)仔8-13只,最多可達(dá)產(chǎn)仔20只,如SD大鼠。

飼料的營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)大鼠的生殖能力也有一定影響。當(dāng)飼料內(nèi)缺乏維生素E時(shí),大鼠即喪失生殖能力,特別是雄鼠,可終身喪失,如補(bǔ)喂維生素E,雌鼠可以恢復(fù)其生殖能力。

溫度對(duì)大鼠的生殖能力也有影響,當(dāng)飼養(yǎng)室內(nèi)持續(xù)高溫〔30℃以上〕可降低雄鼠的交配能力。交配雌性大鼠只在發(fā)情期的數(shù)小時(shí)內(nèi)允許雄鼠交配。雌鼠被雄鼠反復(fù)追逐之后才接受交配。交配后,雌鼠的陰道口形成一種特殊的膣栓即陰栓。陰栓是雄鼠的精液、雌鼠的陰道分泌物與陰道上皮細(xì)胞的混合物遇空氣后迅速變硬形成的。陰栓一般在交配后12-24小時(shí)左右自動(dòng)脫落。所以,常把檢查陰栓的有無作為判斷是否交配的重要標(biāo)志。妊娠和分娩

大鼠的妊娠期因品種不同略有差異,一般為19-21天。孕鼠受驚嚇往往造成流產(chǎn)或早產(chǎn)。大鼠的分娩晝夜均有發(fā)生,但以夜間居多。孕鼠臨產(chǎn)前一般表現(xiàn)不安狀態(tài),常常不停地整理產(chǎn)窩,隨著子宮收縮將仔鼠娩出。分娩結(jié)束后約12-24小時(shí)母鼠出現(xiàn)產(chǎn)后發(fā)情,此時(shí)假設(shè)與雄鼠交配,多能受孕。

哺乳和離乳通常,根據(jù)雌鼠體質(zhì)確定帶仔的多少,一般8-10只。對(duì)帶仔缺乏8只的,可將其它產(chǎn)窩多余的仔鼠移入窩內(nèi)代乳,代乳效果很好。

母鼠產(chǎn)后1-2天內(nèi)飼料的消耗量突然下降,這是由于母鼠產(chǎn)后不適造成的。從第3天開始恢復(fù)正常,飼料消耗量有逐漸增加的趨勢(shì),1-8日內(nèi)仔鼠體重增長(zhǎng)速度慢,平均日增重1.8g,每天消耗的飼料量尚不大。8-9日仔鼠長(zhǎng)出切齒,14-17日仔鼠睜眼,逐漸采食,仔鼠日增重達(dá)2.4g,但這個(gè)時(shí)期仔鼠仍以母乳為主,所以飼料量

略有增加,以上這個(gè)階段稱為哺乳第一階段。從仔鼠生出第一、第二臼齒〔19-21日〕后,飼料的消耗量迅速上升,這是由于仔鼠從全吃乳期過度到半吃乳期,到哺乳末期根本以吃飼料為主。這個(gè)時(shí)期仔鼠生長(zhǎng)發(fā)育速度平均日增重3.0g,是哺乳期生長(zhǎng)速度最快的階段,稱為哺乳第二階段。

仔鼠的哺乳期一般為21天,留種的仔鼠可延長(zhǎng)到23天。過于延長(zhǎng)哺乳時(shí)間,不僅影響母鼠的健康,還會(huì)影響母鼠的發(fā)情。

哺乳期滿的仔鼠要與母鼠分開,雌雄分籠飼養(yǎng)。如果離乳以后雄、雌混養(yǎng),

兩周內(nèi)應(yīng)清查并分開,超過兩周或發(fā)現(xiàn)雌鼠盒內(nèi)混入雄鼠,所在的整盒大鼠即被視為不合格動(dòng)物全部淘汰。

雄鼠和雌鼠的主要區(qū)別是:雄鼠的外生殖器呈圓柱狀突起,離肛門較遠(yuǎn),乳頭不明顯;雌鼠外生殖器離肛門較近,生殖器中間有一凹溝,乳頭明顯。選種育種

留做種用的大鼠需按選種條件嚴(yán)格選擇,才能使親代的優(yōu)良體質(zhì)和高產(chǎn)能力以及群體性狀逐代積累并遺傳下去。繁殖用的種鼠應(yīng)選擇第2-3胎仔鼠留種。同胎留仔8只,使仔鼠吃到足夠的乳汁,保證其生長(zhǎng)發(fā)育迅速,體格健壯。哺乳期仔鼠應(yīng)無死亡。留種的數(shù)量要比用量多1/3,以便進(jìn)一步篩選。

選擇條件:親代應(yīng)選擇體質(zhì)健壯,無疾病,母鼠受孕率高,產(chǎn)仔多〔10只以上〕,母性好,帶仔成活率高,同窩仔鼠生長(zhǎng)均勻,離乳時(shí)幼鼠體格健壯,生活力強(qiáng);雄鼠配種能力強(qiáng)。留作種用的仔鼠要求健康無病,被毛濃密有光澤,并緊貼身體。眼睛明亮有神,呼吸正常,四肢運(yùn)動(dòng)迅速有力,尾巴無脫落,體形勻稱,頭部寬廣,頸部長(zhǎng)度適中,背部寬闊平直,腹部系緊。雄性睪丸發(fā)育正常,雌性乳頭明顯。

育種:選出的種鼠應(yīng)雌雄分籠飼養(yǎng),精心護(hù)理,發(fā)現(xiàn)異?;虿B(tài)立即淘汰,必要時(shí)全籠淘汰,直到90日齡。配種繁殖

根據(jù)留種方案和生產(chǎn)用量,按時(shí)進(jìn)行配種。封閉群動(dòng)物一般采用以下繁殖方法長(zhǎng)期同居交配法

一雄一雌終身同居進(jìn)行交配生產(chǎn)。該方法的優(yōu)點(diǎn):雌雄長(zhǎng)期同居,雌鼠生產(chǎn)后雄鼠與之交配,在哺乳期雌鼠又能繼續(xù)懷孕,這樣,雌鼠每月可生一胎。缺點(diǎn)是:雌鼠既哺乳又懷孕,負(fù)擔(dān)太重,如果營(yíng)養(yǎng)跟不上,雌鼠和仔鼠體質(zhì)都會(huì)下降,直接影響大鼠的質(zhì)量。循環(huán)交配法

一雄多雌同居進(jìn)行繁殖???:2、1:4交配,確認(rèn)雌鼠懷孕后把它單獨(dú)放一籠內(nèi)進(jìn)行飼養(yǎng),待其產(chǎn)仔哺乳、仔鼠離乳后把雌鼠放回原籠交配。其優(yōu)點(diǎn)是:雌鼠受孕后單獨(dú)飼養(yǎng),有利仔鼠生長(zhǎng)發(fā)育,哺乳期不懷孕,母鼠泌乳好,仔鼠健壯。缺點(diǎn)是:近兩個(gè)月一胎,生產(chǎn)周期長(zhǎng)。應(yīng)用這種方法時(shí)注意一個(gè)問題,發(fā)現(xiàn)雄鼠體質(zhì)下降要及時(shí)更換,以保持較高的懷孕率。方案生產(chǎn)

根據(jù)使用方案確定配種日期非常重要,醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)常對(duì)大鼠體重或日齡要求較為嚴(yán)格,如不按使用方案配種,可能造成延誤實(shí)驗(yàn)或造成大鼠超重而被迫淘汰。配種方案一般按以下公式進(jìn)行計(jì)算。

公式:配種日期=使用日期-〔性周期+懷孕期+要求日齡〕

配種數(shù)量=方案總數(shù)÷8〔1:1配種〕

例如:明年2月9日需要60日齡的大鼠400只,那么,配種日期為使用日期明年2月9日倒推4+21+60=85天,即是今年11月23日。配種數(shù)量為400只÷8=50只雌鼠。大鼠繁殖和飼養(yǎng)管理3飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)管理是一項(xiàng)非常重要的工作,它直接關(guān)系到動(dòng)物的質(zhì)量,稍有疏忽那么可

造成全群覆滅,因此飼養(yǎng)人員必須有高度的責(zé)任心和過硬的專業(yè)技術(shù)。工作程序:

大鼠飼養(yǎng)管理每周工作安排:

周一

加水加料,檢查仔鼠出生及離乳并登記

周二

更換墊料,整理衛(wèi)生、飼養(yǎng)室消毒

周三

墊料籠具衣物高壓滅菌

周四

同周一工作內(nèi)容

周五

同周二工作內(nèi)容

周六

工作值班〔文字形式回憶本周工作、安排下周工作〕

周日

平安值班觀察和記錄

觀察大鼠的吃料飲水量、活動(dòng)程度、雙目是否有神、尾巴顏色等,記錄飼養(yǎng)

室溫度、濕度、通風(fēng)狀況,記錄大鼠生產(chǎn)籠號(hào)、胎次、出生仔數(shù)等。飼養(yǎng)人員必須

及時(shí)填寫,決不能后補(bǔ)記錄。飼料和飲水

大鼠的飼料應(yīng)保證其營(yíng)養(yǎng)需要,并符合各等級(jí)動(dòng)物飼料的衛(wèi)生質(zhì)量要求。生

長(zhǎng)發(fā)育的階段不同,飼料的成分也應(yīng)有所不同。剛離乳的幼鼠需加喂軟料,哺乳期

加喂葵花籽。

大鼠具有隨時(shí)采食的習(xí)慣,應(yīng)保證其充足的飼料和飲水。飼料按照少量屢次的

原那么添加,軟料那么應(yīng)每日更換。一般情況下飼料添加量掌握在每次添加時(shí)上次添加

的飼料已根本吃完為宜。飼料在加工、運(yùn)輸、儲(chǔ)存過程中應(yīng)嚴(yán)防污染、發(fā)霉、變質(zhì)

,一般的飼料儲(chǔ)存時(shí)間夏季不超過15天,冬季不超過30天。

一級(jí)大鼠的飲水應(yīng)符合城市飲水衛(wèi)生要求,二級(jí)大鼠使用PH2.5-2.8的酸化水,

SPF大鼠那么用高溫高壓滅菌水。大鼠飼料與水的消耗比例為1:2,即吃1克飼料要飲

2毫升水。墊料

目前采用的動(dòng)物墊料主要是木材加工廠的下腳料,如多種闊葉樹木的刨花、鋸

末、碎木楔等,玉米軸或秸桿粉碎后也是很好的墊料。

每周兩次更換墊料是很必要的,因?yàn)槭蠛械目臻g有限,大鼠的排泄物中含有

的氨氣、硫化氫等刺激性氣體,對(duì)飼養(yǎng)員和動(dòng)物是不良刺激,極易引發(fā)呼吸道疾病

;排泄物也是微生物繁殖的理想場(chǎng)所,如不及時(shí)更換,很容易造成動(dòng)物污染。每次

更換墊料時(shí)必須把盒內(nèi)的臟墊料全部去除,鼠盒用清水沖刷干凈后消毒液浸泡3-

5分鐘,然后再用清水沖洗干凈,晾干備用。最好是有一套備用的鼠盒,待全部

更換完后集中清洗消毒,這樣可提高工作效率。換下的臟墊料及時(shí)移出飼養(yǎng)室并做

無害化處理。衛(wèi)生消毒措施

飼養(yǎng)室的消毒隔離工作是管理中重要的一環(huán),必須引起高度重視,它是保持

大鼠等級(jí)的關(guān)鍵。飼養(yǎng)員進(jìn)入飼養(yǎng)室前必須更衣,肥皂水洗手并用清水沖洗干凈,

戴上消毒過的口罩、帽子、手套前方可進(jìn)入;飼養(yǎng)室內(nèi)保持整潔,門窗、墻壁、地

面、鼠盒、架子每天擦洗;每周二、五用0.1%新潔爾滅或其它消毒劑消毒,隔周更

換消毒劑品種,每月進(jìn)行一次大消毒,用0.1%過氧乙酸噴霧消毒效果較好。

墊料、飼料經(jīng)高壓消毒后放到清潔準(zhǔn)備間儲(chǔ)存,但儲(chǔ)存時(shí)間不超過15天。鼠

盒、飲水瓶每月用0.2%過氧乙酸浸泡3分鐘或高壓滅菌。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的采血技術(shù)方法動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常常需要采取動(dòng)物的血液進(jìn)行檢查和分析,所以必須熟練地掌握動(dòng)物的采血方法。采血方法依動(dòng)物的種類和采血的血量不同。靜脈采血,假設(shè)需反復(fù)屢次。應(yīng)先從遠(yuǎn)心端開始,以免發(fā)生栓塞而影響整條靜脈?!惨弧炒?、小鼠的采血1、剪尾采血:需血量少時(shí)可用此方法。將動(dòng)物固定,顯露尾部,將尾塵剪去約5mm,從尾根部向尾端部按摩,血即從斷端流出。假設(shè)用二甲苯棉球涂擦尾部或事先將鼠尾浸在45℃水中數(shù)分鐘,使尾部血管充盈,可采到較多的血,但注意二甲苯可致溶血。也可用鋒利刀片割破尾動(dòng)脈或尾靜脈,讓血液自行流出,采血后,消毒,止血。如將動(dòng)物麻醉取血量可更多些。小鼠每次采血約,大鼠約0.4ml。為了屢次反復(fù)取血應(yīng)盡量從鼠尾末端開始。2、摘眼球采血:此法常用于鼠類大量采血。用左手固定動(dòng)物,壓迫眼球,盡量使眼球突出,右手用無鉤彎鑷子或彎止血鉗迅速摘除眼球,立即將鼠倒置,頭朝下,眼眶內(nèi)很快流出血液。一般只適用于一次采血。大部動(dòng)物采血后可以存活,可采另一側(cè)眼球取血。3、眼眶后靜脈叢采血:用7—10cm長(zhǎng)的玻璃取血管,其一端內(nèi)徑為1—1.5mm,另一端逐漸擴(kuò)大,細(xì)端長(zhǎng)約1cm即可,將其尖端折斷,使其鋒利。將取血管浸入1%肝素溶液,枯燥后使用。采血時(shí),左手拇指和食指抓住鼠兩耳之間的皮膚使鼠固定,并用中指配合,輕輕壓迫頸部?jī)蓚?cè),阻礙靜脈回流,使眼球充分外突,提示眼眶后靜脈叢充血。可用少量1%可卡因滴入動(dòng)物眼內(nèi),使眼部局部麻醉。右手持取血管,將其尖端插入內(nèi)眼角與眼球之間,輕輕向眼底方向刺入,小鼠刺入約2—3mm,大鼠刺入約4——5mm,當(dāng)感到有阻力時(shí)即停止刺入,旋轉(zhuǎn)取血管以切開靜脈叢,血液即流入取血管中,采血結(jié)束后,拔出取血管,放松左手,出血即停止。用本法短期內(nèi)可重復(fù)采血。小鼠一次可采血—0.3ml,大鼠一次可采—〔圖15〕。圖15大鼠后眼框靜脈叢取血方法4、頸靜脈或頸動(dòng)脈采血:將鼠麻醉,剪去一側(cè)頸部外側(cè)被毛,作頸靜脈或頸動(dòng)脈別離手術(shù),用注射器即可抽出所需血量。也可插入導(dǎo)管,反復(fù)采血。5、斷頭采血:操作者左手拇指和食指握住鼠頸部,頭朝下,用利剪在頭頸間1/2處迅速剪動(dòng)物頭部,提起動(dòng)物,血液即可流入準(zhǔn)備好的容器中。6、心臟采血:將動(dòng)物麻醉,使其仰位固定,剪去胸前區(qū)毛,消毒皮膚,在左側(cè)第3—4肋間選擇心博最強(qiáng)處穿刺,血液借心臟跳動(dòng)的力量進(jìn)入注射器。亦可在動(dòng)物麻醉后,切開動(dòng)物胸腔,直視心臟內(nèi)抽血或剪破心臟,直接用注射器、吸管等吸血?!捕?、豚鼠的采血1、耳緣切口采血:先將豚鼠耳消毒,用刀片割破耳緣,在切口邊緣涂上20%的檸檬酸鈉溶液,防止血凝,那么血可自切口處流出。此法采血每次可采左右。2、背中足靜脈采血:固定豚鼠,將其右或左后肢膝關(guān)節(jié)伸直,腳背消毒,找出背中足靜脈,左手拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手將注射針刺入靜脈,拔針后立即出血。3、心臟采血:選心跳最明顯的部位把注射針刺入心臟,血液即流入針管。心臟采血時(shí)所用的針頭應(yīng)細(xì)長(zhǎng)些,以免發(fā)生采血后穿刺孔出血?!踩?、兔的采血1、耳緣靜脈采血:將兔固定,拔去耳緣靜脈局部的被毛,消毒,用手指輕彈兔耳,使靜脈擴(kuò)張,用針頭刺耳緣靜脈末端,血液即流出。本法為兔最常用的采血方法,可屢次重復(fù)使用。2、耳中央動(dòng)脈采血:在兔耳中央有一條較粗的、顏色較鮮紅的中央動(dòng)脈。用左手固定兔耳,右手持注射器,在中央動(dòng)脈的末端

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