鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵

一．實(shí)驗(yàn)名稱(chēng)：鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵二．實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)分光光度法測(cè)定鐵的條件實(shí)驗(yàn)，學(xué)會(huì)選擇和確定分光光度分析的適宜條件。了解光柵分光光度計(jì)的構(gòu)造和使用方法。掌握鄰二氮菲分光光度法測(cè)定鐵的原理和方法。三．實(shí)驗(yàn)原理鄰二氮菲使鐵的一種優(yōu)良的顯色劑，在pH2?9的溶液中，F(xiàn)e2+能與其生成1：3的橙紅色配合物，lg0二21.3最大吸收波長(zhǎng)510nm處的摩爾吸光系數(shù)為31.1x104L?mol-1?cm-1。在一定濃度范圍內(nèi)，F(xiàn)e2+的濃度范圍內(nèi)，F(xiàn)e2+的濃度與配該顯色反應(yīng)選擇性很高，形成的配合物較穩(wěn)定，在還原劑的存在下，顏色可保持?jǐn)?shù)月不變。由于Fe3+也可與鄰二氮菲生成1：3的淡藍(lán)色配合物，lg0二14.1，所3以，在顯色反應(yīng)前，需將Fe3+全部還原成Fe2+。四．實(shí)驗(yàn)用品儀器721或722型分光光度計(jì)。2．試劑0.1mg?L-1鐵標(biāo)準(zhǔn)液準(zhǔn)確稱(chēng)取0.7020gNHFe(SO)?6H0置于燒杯中，4422加少量水和20mL1:1HS0溶液，溶解后，定量轉(zhuǎn)移到1L容量瓶中，用水稀釋24至刻度，搖勻。100g?L-1鹽酸羥胺水溶液用時(shí)現(xiàn)配。1.5g?L-1鄰二氮菲水溶液避光保存，溶液顏色變暗時(shí)即不能使用。1.0mol?L-1乙酸鈉溶液。1mol?L-1氫氧化鈉溶液。五．實(shí)驗(yàn)步驟1.準(zhǔn)備工作。打開(kāi)分光光度計(jì)開(kāi)關(guān)，預(yù)熱。確定最大吸收波長(zhǎng)。取50mL容量瓶（1#）,用吸量管加入1mL100g?L-1鹽酸羥胺溶液，再各加入2mL1.5g?L-1鄰二氮菲溶液、5mL1.0mol?L-1乙酸鈉溶液，以水稀釋至刻度，搖勻（參比溶液）。放置10分鐘。在分光光度計(jì)上，用1cm吸收池，以為容量瓶#1溶液為參比溶液，在460?520nm之間，每隔10nm測(cè)定一次待測(cè)溶液的吸光度A，以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制吸收曲線，從而選擇測(cè)定鐵的最大吸收波長(zhǎng)。3．顯色劑用量的確定。在7只50mL容量瓶（標(biāo)號(hào)3-9#）中，各加1.0mL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液和1.0mL100g?L-1鹽酸羥胺溶液，搖勻后放置2min。分別加入0.1,0.3，0.5，0.8，1.0，2.0，4.0mL1.5g?L-1鄰二氮菲溶液，再各加5.0mL1.0mol?L-1乙酸鈉溶液，定容至刻度線，搖勻。在光度計(jì)上用1cm比色皿，采用試劑溶液為參比溶液，測(cè)吸光度。以鄰二氮菲體積為橫坐標(biāo)吸光度為縱坐標(biāo)，繪制吸光度-試劑用量曲線，從而確定最佳顯色劑用量.溶液適宜酸度范圍的確定。在8只50mL容量瓶（標(biāo)號(hào)10-17#）中各加入1.0mL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液和1.0mL100mol?L-1鹽酸羥胺溶液，搖勻后放置2min。各加2mL1.5g?L-1鄰二氮菲溶液，然后從滴定管中分別加入0.5,1.0，1.5,2.0，2.5，3.0，3.5,4.0mL1mol?L-NaOH溶液搖勻，定容至刻度線，搖勻。以試劑溶液為參比，在選定波長(zhǎng)下，用1cm吸收池測(cè)量各溶液的吸光度。繪制A—VNaOH曲線，確定適宜的NaOH用量（A—PH曲線，選擇最適宜酸度）。標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液（10ug/mL）的稀釋移取100ug/mL的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液10.0mL，置于100mL容量瓶中，加入2.0mL6mol/LHCl，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。標(biāo)準(zhǔn)系列的配制移取上面所配制的鐵標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（10ug/mL）：0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0mL依次放入6只潔凈的50mL容量瓶（編號(hào)18-23#）中，分別加入100g?L-1鹽酸羥胺溶液1.0mL,稍搖動(dòng)，再加入1.5g?L-1鄰二氮菲溶液2.0mL及1.0mol?L-1HAc-NaAc緩沖溶液5mL,用蒸餾水稀釋至刻度，充分搖勻。標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制放置10分鐘后，以不加鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液的試液為參比，以選定的最大吸收波長(zhǎng)為測(cè)定波長(zhǎng)，依次測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列中各溶液的吸光度A值。以鐵的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，A值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

8．未知樣中含鐵含量的測(cè)定準(zhǔn)確移取5ml鐵待測(cè)樣于50mL容量瓶（24#）中，依次加入100g?L-i鹽酸羥胺溶液1.0mL,稍搖動(dòng)，再加入1.5g?L-1鄰二氮菲溶液2.0mL及1.0mol?L-iHAc-NaAc緩沖溶液5mL,用蒸餾水稀釋至刻度，充分搖勻。按測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線同樣方法測(cè)定吸光度A值。在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得含鐵濃度，然后計(jì)算未知樣中總鐵的含量。六、數(shù)據(jù)處理1.確定最大吸收波長(zhǎng)波長(zhǎng)（nm）460470480490495吸光度0.0050.0070.0090.0100.011波長(zhǎng)（nm）500505510515520吸光度0.0120.0150.0170.0160.015最大吸收波長(zhǎng)為510nm2.顯色劑用量的確定。編號(hào)3#4#5#6#7#8#9#鐵標(biāo)液/mL1.OO1.OO1.OO1.OO1.OO1.OO1.OO鹽酸羥胺/mL1.01.01.01.01.01.01.0鄰二氮菲/mL0.10.30.50.81.02.04.0NaAc/mL5.05.05.05.05.05.05.0吸光度0.0170.0160.0180.0190.0190.0200.023

V/mL3.4.溶液適宜酸度范圍的確定編號(hào)10#11#12#13#14#15#16#17#鐵標(biāo)液/mL1.OO1.OO1.OO1.OO1.OO1.OO1.OO1.00鹽酸羥胺/mL1.01.01.01.01.01.01.01.0鄰二氮菲/mL2.02.02.02.02.02.02.02.0NaOH/mL0.51.01.52.02.53.03.54.0吸光度0.0120.0470.0120.0060.0140.0130.0110.0104.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制編號(hào)18#19#20#21#22#23#鐵稀釋液/mL0.01.02.04.06.08.0鹽酸羥胺/mL1.01.01.01.01.01.0鄰二氮菲/mL2.02.02.02.02.02.0NaOH/mL0.51.01.52.02.53.0鐵濃度ug/mLO0.20.40.81.21.6吸光度0.0000.0150.0490.127