JJG 705-2014液相色譜儀行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

中華人民共和國(guó)國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程液相色譜儀2014-02-14發(fā)布2014-08-14實(shí)施液相色譜儀檢定規(guī)程I 2引用文件 3概述 4計(jì)量性能要求 4.1輸液系統(tǒng) 4.2柱溫箱 4.3檢測(cè)器 4.4整機(jī)性能 5通用技術(shù)要求 5.1儀器外觀 5.2儀器電路系統(tǒng) 6計(jì)量器具控制 6.1檢定條件 6.2檢定項(xiàng)目和檢定方法 6.3檢定結(jié)果 6.4檢定周期 附錄A色譜柱性能測(cè)試 附錄B單色器濾光片的性能測(cè)試 附錄C不同溫度下流動(dòng)相密度 附錄D檢定證書(內(nèi)頁)格式 附錄E液相色譜儀檢定記錄格式 JJG705-2014ⅡJJG705—2014《液相色譜儀》的編寫是以JJF1001—2011《通用計(jì)量術(shù)語及定 熒光檢測(cè)器檢定用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)改為萘-甲醇溶液； 示差折光率檢測(cè)器檢定用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)改為甲醇中膽固醇溶液——整機(jī)定性重復(fù)性由原來的1.5%修改為1.0%; 1分離系統(tǒng)進(jìn)分離系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)流動(dòng)相流動(dòng)相液相色譜儀檢定規(guī)程本規(guī)程適用于配有紫外-可見光檢測(cè)器、二極管陣列檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、示差折光率檢測(cè)器和蒸發(fā)光散射檢測(cè)器的液相色譜儀的首次檢定、后續(xù)檢定和使用中檢查，2引用文件JJG537—2006熒光分光光度計(jì)液相色譜儀(以下簡(jiǎn)稱儀器)是由輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等部分組成的分析儀器，圖1是其組成的方框圖。液相色譜儀根據(jù)樣品中各組分在色譜柱內(nèi)固定相和流動(dòng)相間分配或吸附等特性的差異，由流動(dòng)相將樣品帶入色譜柱中進(jìn)行分離，經(jīng)檢測(cè)器檢測(cè)并通過數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄色譜圖，依據(jù)各組分的保留時(shí)間和響應(yīng)值(峰面積或峰高)進(jìn)行定性和定量分析。輸液系統(tǒng)廢液收集4計(jì)量性能要求4.1輸液系統(tǒng)4.1.1輸液管路接口緊密牢固，在規(guī)定的壓力范圍內(nèi)無泄漏。4.1.2泵流量設(shè)定值誤差Ss和流量穩(wěn)定性SR應(yīng)符合表1的要求。4.1.3梯度最大允許誤差G。:±3%。2表1泵流量設(shè)定值誤差Ss和穩(wěn)定性S的指標(biāo)要求泵流量設(shè)定值/(mL/min)0.2～0.50.6～1.0大于1.0測(cè)量次數(shù)333流動(dòng)相收集時(shí)間/min20～105泵流量設(shè)定值最大允許誤差Ss泵流量穩(wěn)定性S。注：①最大流量的設(shè)定值可根據(jù)用戶使用情況而定②對(duì)特殊的、流量小的儀器，流量的設(shè)定可根據(jù)用戶使用情況選大、中、小三個(gè)流量，流動(dòng)相的收集時(shí)間則根據(jù)情況適當(dāng)縮短或延長(zhǎng)。4.2.1柱溫箱溫度設(shè)定值最大允許誤差：±2℃。4.2.2柱溫箱溫度穩(wěn)定性：不大于1℃/h.4.3檢測(cè)器儀器的檢測(cè)器的主要技術(shù)指標(biāo)見表2。表2液相色譜儀檢測(cè)器的主要技術(shù)指標(biāo)檢測(cè)器紫外-可見光檢測(cè)器二極管陣列檢測(cè)器熒光檢測(cè)器示差折光率檢測(cè)器蕃發(fā)光散射檢測(cè)器基線噪聲①基線漂移最小檢測(cè)濃度蒸-甲醇溶液萘-甲醇溶液膽固醇-甲醇溶液膽固醇-甲醇溶液波長(zhǎng)示值最大允許誤差———波長(zhǎng)重復(fù)性———線性范圍優(yōu)于103優(yōu)于103優(yōu)于103注：①若儀器的輸出信號(hào)用mV或V表示，注意查看儀器說明書或儀器標(biāo)牌標(biāo)明的其與AU(FU)的換算關(guān)系；若無特殊標(biāo)明通?？砂凑?V=1AU(FU)進(jìn)行換算，儀器的整機(jī)性能用定性定量測(cè)量重復(fù)性表示，指標(biāo)要求見表3檢測(cè)器紫外-可見光檢測(cè)器二極管陣列檢測(cè)器熒光檢測(cè)器示差折光率檢測(cè)器蒸發(fā)光散射檢測(cè)器定性重復(fù)性定量重復(fù)性35通用技術(shù)要求5.1儀器外觀儀器上應(yīng)有儀器名稱、型號(hào)、制造廠名、產(chǎn)品系列號(hào)、出廠日期等內(nèi)容的標(biāo)牌，國(guó)產(chǎn)儀器應(yīng)有制造計(jì)量器具許可證標(biāo)志。5.2儀器電路系統(tǒng)儀器電源線、信號(hào)線等插接緊密，各開關(guān)、旋鈕、按鍵等功能正常，指示燈靈敏，6計(jì)量器具控制計(jì)量器具控制包括：首次檢定、后續(xù)檢定和使用中檢查。6.1檢定條件6.1.1環(huán)境條件6.1.1.1檢定室應(yīng)清潔無塵，無易燃、易爆和腐蝕性氣體，通風(fēng)良好。6.1.1.2室溫(15～30)℃,檢定過程中溫度變化不超過3℃(對(duì)示差折光率檢測(cè)器，室溫變化不超過2℃),室內(nèi)相對(duì)濕度20%～85%6.1.1.3儀器應(yīng)平穩(wěn)地放在工作臺(tái)上，周圍無強(qiáng)烈機(jī)械振動(dòng)和電磁干擾源，儀器接地6.1.1.4電源電壓為(220±22)V,頻率為(50±0.5)Hz。6.1.2檢定設(shè)備6.1.2.1秒表：最小分度值不大于0.1s。6.1.2.2分析天平：最大稱量不小于100g,最小分度值不大于1mg。6.1.2.3數(shù)字溫度計(jì)：測(cè)量范圍為(0～100)℃,最大允許誤差為±0.3℃。萘-甲醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：認(rèn)定值為1.00×10-4g/mL,擴(kuò)展不確定度小于4%,k=2;萘-甲醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：認(rèn)定值為1.00×10-7g/mL,擴(kuò)展不確定度小于4%,k=2;甲醇中膽固醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：認(rèn)定值為200μg/mL,擴(kuò)展不確定度小于甲醇中膽固醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：認(rèn)定值為5.0pg/mL,擴(kuò)展不確定度小于5.0%,k=2;膽固醇純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：認(rèn)定值為99.7%,擴(kuò)展不確定度小于0.1%,k=2,6.1.4其他要求6.1.4.1檢定用試劑：色譜級(jí)甲醇，純水，分析純的丙酮和異丙醇，紫外分光光度計(jì)46.2檢定項(xiàng)目和檢定方法6.2.1檢定項(xiàng)目檢定項(xiàng)目見表4。表4檢定項(xiàng)目一覽表序號(hào)檢定項(xiàng)目首次檢定后續(xù)檢定使用中檢查1輸液系統(tǒng)：泵耐壓泵流量設(shè)定值誤差Ss泵流量穩(wěn)定性SR梯度誤差G;②一①一①十一一十一2柱溫箱：溫度設(shè)定值誤差△T:-— 3檢測(cè)器：基線噪聲基線漂移最小檢測(cè)濃度波長(zhǎng)示值誤差和重復(fù)性③線性范圍十十—4整機(jī)：定性、定量重復(fù)性十十十注：①“十”表示應(yīng)檢定項(xiàng)目，“—”表示可不檢定項(xiàng)目：②無梯度洗脫裝置和無柱溫箱的儀器，此項(xiàng)不檢定；③紫外-可見光、二極管陣列和熒光檢測(cè)器檢定此項(xiàng)目，其他檢測(cè)器不檢定此項(xiàng)目，6.2.2檢定方法6.2.2.1通用技術(shù)要求按5.1和5.2的要求，目視、手動(dòng)檢查。6.2.2.2輸液系統(tǒng)a)泵耐壓將儀器各部分連接好，以100%甲醇(或純水)為流動(dòng)相，流量為0.2mL/min,按說明書啟動(dòng)儀器，壓力平穩(wěn)后保持10min,用濾紙檢查各管路接口處是否有濕跡。卸下色譜柱，堵住泵出口端(壓力傳感器以下),使壓力達(dá)到最大允許值的90%,保持b)泵流量設(shè)定值誤差Ss和流量穩(wěn)定性Sp按表1的要求設(shè)定流量，啟動(dòng)儀器，壓力穩(wěn)定后，在流動(dòng)相出口處用事先稱重過的潔凈容量瓶收集流動(dòng)相，同時(shí)用秒表計(jì)時(shí)，收集表1規(guī)定時(shí)間流出的流動(dòng)相，在分析天平上稱重，按公式(3)計(jì)算流量實(shí)測(cè)值F按公式(1)、公式(2)計(jì)算Ss和Sg。每一設(shè)定流量，重復(fù)測(cè)量3次。5Fm——同一設(shè)定流量3次測(cè)量值的算術(shù)平均值，mL/min;Fmx——同一設(shè)定流量3次測(cè)量值的最大值，mL/min;Fmin——同一設(shè)定流量3次測(cè)量值的最小值，mL/min。Fm=(W?-W?)/(p?·t)(3)F—流量實(shí)測(cè)值，mL/min;W?——容量瓶+流動(dòng)相的質(zhì)量，g;p.實(shí)驗(yàn)溫度下流動(dòng)相的密度，g/cm3,(不同溫度下流動(dòng)相的密度參見附錄C);t-—收集流動(dòng)相的時(shí)間，min。c)梯度誤差由梯度控制裝置設(shè)置階梯式的梯度洗脫程序(梯度程序可參照表5),A溶劑為純水，B溶劑為含0.1%丙酮的水溶液。將輸液泵和檢測(cè)器連接(不接色譜柱),開機(jī)后以A溶劑沖洗系統(tǒng)，基線平穩(wěn)后開始執(zhí)行梯度程序，畫出B溶劑經(jīng)由5段階梯從0%變到100%的梯度變化曲線，如圖2所示。求出由B溶劑變化所產(chǎn)生的每一段階梯對(duì)應(yīng)的響應(yīng)信號(hào)值的變化值L;。重復(fù)測(cè)量2次，按公式(4)計(jì)算每一段階梯對(duì)應(yīng)的響應(yīng)信號(hào)值的變化平均值L;按公式(5)計(jì)算五段階梯響應(yīng)信號(hào)值的總平均值工；;按公式(6)計(jì)算每一段的梯度誤差G;,取G;最大者作為儀器的梯度誤差。式中：L:第i段階梯響應(yīng)信號(hào)值的平均值；Lu——第i段階梯第1組響應(yīng)信號(hào)值；Liq-y——第(i-1)段階梯第1組響應(yīng)信號(hào)值；Lz——第i段階梯第2組響應(yīng)信號(hào)值；Lzq-1)——第(i-1)段階梯第2組響應(yīng)信號(hào)值。元5段階梯響應(yīng)信號(hào)值的總平均值；JJG705—20146輸出信號(hào)輸出信號(hào)G;——第i段階梯的梯度誤差。注：當(dāng)i為1(i-1=0)時(shí)，第(i-1)階梯響應(yīng)信號(hào)值為B溶劑為0%時(shí)的響應(yīng)信號(hào)值。表5梯度程序設(shè)置序號(hào)A溶劑(純水)B溶劑(0.1%丙酮水溶液)12340%440%5670%A20%A40%A60%A80%A0%B圖2梯度誤差檢定示意圖6.2.2.3柱溫箱溫度設(shè)定值誤差△Ts和柱箱溫度穩(wěn)定性TcJJG705—20147將數(shù)字溫度計(jì)探頭固定在柱溫箱內(nèi)與色譜柱相同的部位，選擇35℃和45℃(也可根據(jù)用戶使用溫度設(shè)定)進(jìn)行檢定。按儀器說明書操作，通電升溫，待溫度穩(wěn)定后，記下溫度計(jì)讀數(shù)并開始計(jì)時(shí)，以后每隔10min記錄1次讀數(shù)，共計(jì)7次，求出平均值。平均值與設(shè)定值之差為柱溫箱溫度設(shè)定值誤差△Ts,7次讀數(shù)中最大值與最小值之差為柱溫箱溫度穩(wěn)定性Tc。6.2.2.4紫外-可見光檢測(cè)器和二極管陣列檢測(cè)器的性能a)波長(zhǎng)示值誤差和重復(fù)性將檢測(cè)器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)連接好，通電預(yù)熱穩(wěn)定后，用注射器將純水注入檢測(cè)池內(nèi)進(jìn)行沖洗后，充滿檢測(cè)池。待檢測(cè)器示值穩(wěn)定后，在(235上5)nm、(257±5)nm、(313±5)nm和(350±5)nm的波長(zhǎng)下將示值回零，然后再用注射器將紫外分光光度計(jì)溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(參考波長(zhǎng)為235nm,257nm,313nm和350nm)從檢測(cè)器入口注入樣品池中沖洗，并將樣品池充滿至示值穩(wěn)定。將檢測(cè)器波長(zhǎng)調(diào)到低于參考波長(zhǎng)5nm處(例如檢定257nm時(shí)，檢測(cè)器波長(zhǎng)先調(diào)到252nm),改變檢測(cè)器波長(zhǎng)，每(5～10)s改變1nm,記錄每個(gè)波長(zhǎng)下的吸收值(吸收值變化的示意圖見圖3),最大或最小吸收值對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)與參考波長(zhǎng)之差為波長(zhǎng)示值誤差。每個(gè)波長(zhǎng)重復(fù)測(cè)量3次，其中最大值與最小值之差為波長(zhǎng)重復(fù)性。圖3波長(zhǎng)示值誤差檢定中吸收值變化示意圖有吸光值顯示的檢測(cè)器，改變波長(zhǎng)時(shí)可直接讀出吸光值，其最大(或最小)吸光值對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)與參考波長(zhǎng)之差為波長(zhǎng)示值誤差。有波長(zhǎng)掃描功能的儀器可畫出標(biāo)準(zhǔn)溶液的光譜曲線，其波峰(或波谷)對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)與參考波長(zhǎng)之差為波長(zhǎng)示值誤差。對(duì)于有內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)濾光片可進(jìn)行自檢的儀器可直接采用其測(cè)量數(shù)據(jù)。對(duì)改變波長(zhǎng)有自動(dòng)回零功能的紫外-可見光檢測(cè)器，可采用連續(xù)進(jìn)樣的方法檢定波長(zhǎng)示值誤差，具體做法是：用一節(jié)空管代替色譜柱將液路連通，以水做流動(dòng)相，流量為(0.5～1.0)mL/min,采用步進(jìn)進(jìn)樣方法，例如檢定257nm時(shí)，從252nm開始到262nm,每2min改變1nm,用注射器注入相同體積的紫外分光光度計(jì)溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，得到一組不同波長(zhǎng)的色譜峰，最高(或最低)色譜峰對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)與參考波長(zhǎng)之差，即為b)基線噪聲和基線漂移選用Ci?色譜柱，以100%甲醇為流動(dòng)相，流量為1.0mL/min,紫外檢測(cè)器的波長(zhǎng)設(shè)定為254nm,檢測(cè)靈敏度調(diào)到最靈敏擋。開機(jī)預(yù)熱，待儀器穩(wěn)定后記錄基線30min,選取基線中噪聲最大峰-峰高對(duì)應(yīng)的信號(hào)值，按公式(7)計(jì)算基線噪聲，用檢測(cè)器自身JJG705—20148的物理量(AU)作單位表示?；€漂移用30min內(nèi)基線偏離起始點(diǎn)最大信號(hào)值(AU/30min)表示。N?——檢測(cè)器基線噪聲K——衰減倍數(shù)B測(cè)得基線峰-峰高對(duì)應(yīng)的信號(hào)值，AUc)最小檢測(cè)濃度在6.2.2.4中b)的色譜條件下，由進(jìn)樣系統(tǒng)注入(10～20)μL的1.00×10-7g/mL萘-甲醇溶液，記錄色譜圖，由色譜峰高和基線噪聲峰高，按公式(8)計(jì)算最小檢測(cè)濃N?——基線噪聲峰高c——標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，g/mLH——標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的峰高。d)線性范圍將檢測(cè)器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)連接好，檢測(cè)器波長(zhǎng)設(shè)定為254nm,通電穩(wěn)定后，用注射器直接向檢測(cè)池中注射2%異丙醇-水溶液沖洗檢測(cè)池至示值穩(wěn)定后，記下此值。然后，依照上法向檢測(cè)池中依次分別注入丙酮-2%異丙醇系列水溶液(丙酮含量為0.1%,0.2%,…,1.0%),并記下各溶液對(duì)應(yīng)的穩(wěn)定響應(yīng)信號(hào)值，每個(gè)溶液重復(fù)測(cè)量3次，取算術(shù)平均值。以5個(gè)丙酮溶液濃度(0.1%,0.2%,0.3%,0.4%,0.5%)和對(duì)應(yīng)的響應(yīng)信號(hào)值做標(biāo)準(zhǔn)曲線，在曲線上找出丙酮溶液濃度大于0.5%各點(diǎn)的讀數(shù)；與相應(yīng)各濃度點(diǎn)的測(cè)量值做比較，量值相差5%時(shí)的濃度作為檢測(cè)上限CH。按6.2.2.4中c)得到的最小檢測(cè)濃度為檢測(cè)下限C.值，Cn/C.比值為線性范圍。6.2.2.5熒光檢測(cè)器性能a)波長(zhǎng)示值誤差和重復(fù)性固定波長(zhǎng)熒光檢測(cè)器波長(zhǎng)示值誤差和重復(fù)性的檢定，需取出檢測(cè)器中的濾光片，參照J(rèn)JG537—2006《熒光分光光度計(jì)》5.3.3的方法(參見附錄B),在經(jīng)檢定合格的紫外-可見分光光度計(jì)上測(cè)出其最大透射比對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)，此波長(zhǎng)與濾光片上標(biāo)記的波長(zhǎng)之差，為波長(zhǎng)示值誤差?？烧{(diào)波長(zhǎng)熒光檢測(cè)器波長(zhǎng)示值誤差和重復(fù)性的檢定，將檢測(cè)器與數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)連接好，利用萘在290nm(激發(fā)波長(zhǎng))和330nm(發(fā)射波長(zhǎng))有最大熒光強(qiáng)度的特性，用JJG705—20149其充滿。調(diào)激發(fā)波長(zhǎng)為290nm,改變發(fā)射波長(zhǎng)，從325nm到335nm,每(5～10)s改變1nm,記錄每個(gè)波長(zhǎng)下的吸收值(吸收值變化的示意圖類似圖3),曲線最高點(diǎn)對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)與參考波長(zhǎng)之差，為發(fā)射波長(zhǎng)示值誤差，重復(fù)測(cè)量3次，其最大值與最小值之差為波長(zhǎng)重復(fù)性。然后將發(fā)射波長(zhǎng)調(diào)到測(cè)得的曲線最高點(diǎn)對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)，改變激發(fā)波長(zhǎng)定后，記錄基線30min,根據(jù)檢測(cè)器的衰減倍數(shù)和測(cè)得的基線峰-峰高對(duì)應(yīng)的響應(yīng)信號(hào)值，按公式(7)計(jì)算基線噪聲，用檢測(cè)器自身的物理量(FU)做單位表示；基線漂移c)最小檢測(cè)濃度在6.2.2.5中b)的色譜條件下，待基線穩(wěn)定后由進(jìn)樣系統(tǒng)注入(10～20)μL的1.00×10~7g/mL(或1×10-8g/mL)的萘-甲醇溶液，記錄色譜圖，按公式(8)計(jì)算d)線性范圍1×10-*g/mL的萘-甲醇溶液，記下每種溶液對(duì)應(yīng)的響應(yīng)信號(hào)值，重復(fù)測(cè)量3次，取平均值。以5個(gè)萘-甲醇溶液濃度(1×10-5～5×10-5)g/mL和對(duì)應(yīng)的響應(yīng)信號(hào)值作標(biāo)量值做比較，兩值相差5%時(shí)的萘-甲醇溶液濃度為檢測(cè)上限C,6.2.2.5中c)得到的注：熒光檢測(cè)器性能的檢定過程中使用的1×10-5g/mL、1×10-6g/mL和1×10-8g/mL的萘-甲醇溶液可用1.0×10-4g/mL的萘-甲醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稀釋而得。a)基線漂移和基線噪聲選用C?g色譜柱，將儀器各部分連接好，以甲醇為流動(dòng)相，流量為1.0mL/min,參比池充滿流動(dòng)相，靈敏度選擇在最靈敏擋，接通電源，待儀器穩(wěn)定后記錄基線30min,根據(jù)檢測(cè)器的哀減倍數(shù)和測(cè)得的基線峰-峰高對(duì)應(yīng)的響應(yīng)信號(hào)值，按公式(7)計(jì)算基線噪聲，用檢測(cè)器自身的物理量(RIU)表示；基線漂移用30min內(nèi)基線偏離過2℃)。b)最小檢測(cè)濃度在6.2.2.6中a)的色譜條件下，待基線穩(wěn)定后由進(jìn)樣系統(tǒng)注入(10～20)μL的5.0μg/mL的甲醇中膽固醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，記錄色譜圖，按公式(8)計(jì)算最小檢測(cè)濃JJG705—2014c)線性范圍將檢測(cè)器與數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)連接好，用甲醇反復(fù)沖洗樣品池與參比池，并充滿參比池，儀器穩(wěn)定后記下響應(yīng)信號(hào)值。依次向樣品池中注入1×10-*g/mL,2×10-*g/mL,…,10×10~4g/mL甲醇中膽固醇溶液，記下上述各濃度溶液對(duì)應(yīng)的響應(yīng)信號(hào)值，重復(fù)測(cè)量3次，取平均值。以5個(gè)甲醇中膽固醇溶液濃度(1×10-4～5×10-4)g/mL和對(duì)應(yīng)的響應(yīng)信號(hào)值作標(biāo)準(zhǔn)曲線，在曲線上找出甲醇中膽固醇溶液濃度大于5×10~*g/mL各點(diǎn)對(duì)應(yīng)的讀數(shù)，與相應(yīng)各濃度點(diǎn)的測(cè)量值做比較，兩值相差5%時(shí)的甲醇中膽固醇溶液濃度為檢測(cè)上限CH,6.2.2.6中b)得到最小檢測(cè)濃度為檢測(cè)下限Cn,Cn/Cn之比值為線性范圍。6.2.2.7蒸發(fā)光散射檢測(cè)器性能a)基線漂移和基線噪聲選用C??色譜柱，將儀器各部分連接好，以甲醇為流動(dòng)相，流量為1.0mL/min漂移管溫度70℃(低溫型35℃),霧化氣體流速為(2.5～3.0)L/min或適當(dāng)?shù)臍怏w壓力(280～350)kPa,靈敏度選擇在適當(dāng)?shù)膿跷唬油娫?，待儀器穩(wěn)定后記錄基線30min,根據(jù)檢測(cè)器的衰減倍數(shù)和測(cè)得的基線峰-峰高對(duì)應(yīng)的響應(yīng)信號(hào)值，按公式(7)計(jì)算基線噪聲，用檢測(cè)器自身的物理量(mV)表示；基線漂移用30min內(nèi)基線偏離起始點(diǎn)最大響應(yīng)信號(hào)值(mV/30min)表示。b)最小檢測(cè)濃度在6.2.2.7中a)的色譜條件下，待基線穩(wěn)定后由進(jìn)樣系統(tǒng)注入(10～20)μL的5.0μg/mL(5.0×10~6g/mL)的甲醇中膽固醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，記錄色譜圖，按公式(8)計(jì)算最小檢測(cè)濃度CL。6.2.2.8整機(jī)性能(定性、定量重復(fù)性)將儀器各部分聯(lián)接好，選用C色譜柱，用100%甲醇為流動(dòng)相，流量為1.0mL/min,根據(jù)儀器配置的檢測(cè)器，選擇測(cè)量參數(shù)：紫外-可見光檢測(cè)器和二極管陣列檢測(cè)器波長(zhǎng)設(shè)定為254nm,靈敏度選擇適中，基線穩(wěn)定后由進(jìn)樣系統(tǒng)注入一定體積的1.0×10-4g/mL萘-甲醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)；熒光檢測(cè)器激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)分別設(shè)定為290nm和330nm,靈敏度選在中間擋，基線穩(wěn)定后注人一定體積的1×10-5g/mL萘-甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液；示差折光率檢測(cè)器和蒸發(fā)光散射檢測(cè)器靈敏度選在中間擋，注入一定體積的200pg/mL(2.0×10-4g/mL)的甲醇中膽固醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。連續(xù)測(cè)量6次，記錄色譜峰的保留時(shí)間和峰面積，按公式(9)計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSDsRSDs定性(定量)——定性(定量)測(cè)量重復(fù)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差；X:第i次測(cè)得的保留時(shí)間或峰面積；X6次測(cè)量結(jié)果的算術(shù)平均值；i——測(cè)量序號(hào)；6.3檢定結(jié)果6.3.1按本規(guī)程條款檢定，全部檢定項(xiàng)目(詳見第4章)均達(dá)到規(guī)定技術(shù)要求的儀器6.3.2只配一個(gè)檢測(cè)器的儀器，任何一個(gè)檢定項(xiàng)目不合格，該儀器為不合格儀器，發(fā)給檢定結(jié)果通知書，注明不合格項(xiàng)。6.3.3配一個(gè)以上檢測(cè)器的儀器，只要其中一個(gè)檢測(cè)器的檢定項(xiàng)目和除檢測(cè)器外其他檢定項(xiàng)目合格，可發(fā)給配該檢測(cè)器的儀器檢定證書。同時(shí)注明其他不合格的檢測(cè)器，限6.4檢定周期儀器的檢定周期一般不超過2年，更換重要部件或?qū)x器性能有影響時(shí)，應(yīng)重新色譜柱性能測(cè)試A.1液相色譜柱A.1.1柱效反相色譜柱的理論塔板數(shù)一般在(3×10?~4×10?)m-1范圍內(nèi)，正相色譜柱的理論塔板數(shù)在(4×10?~5×10?)m-1范圍內(nèi)。A.1.2色譜峰對(duì)稱性：被測(cè)峰(蒽)的不對(duì)稱因子As一般在0.8～1.6范圍內(nèi)。A.2色譜柱性能測(cè)試方法A.2.1測(cè)試條件和標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜柱性能測(cè)試條件和液相色譜儀的檢定條件基本相同。反相色譜柱測(cè)試用的標(biāo)準(zhǔn)溶液為1×10-4g/mL尿嘧啶、1×10-5g/mL聯(lián)苯和蒽(萘)的甲醇溶液，正相色譜柱測(cè)試用的標(biāo)準(zhǔn)溶液為1×10-2mL/mL甲苯和1×10~4mL/mL硝基苯的正己烷溶液。A.2.2柱效的測(cè)試方法將被測(cè)試的色譜柱接到檢定合格的液相色譜儀器上，反相柱用甲醇十水(85%+15%)為流動(dòng)相，流速為1mm/s(內(nèi)徑為4.6mm色譜柱，流量為1.0mL/min),紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)為254nm,靈敏度選擇適中。按說明書操作，開啟儀器穩(wěn)定后，從進(jìn)樣口注入10μL反相色譜柱測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)溶液，記錄色譜圖(如圖A.1),由公式(A.1)計(jì)算色譜柱效，重復(fù)測(cè)量3次，取平均值。(A.1)W?——色譜峰半高峰寬，min;正相色譜柱的柱效測(cè)試條件和方法與反相色譜柱基本相同，只是流動(dòng)相為正己烷十異丙醇(99.5%+0.5%),注入正相色譜柱測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)溶液。A.2.3色譜峰對(duì)稱性的計(jì)算在A.2.2測(cè)得的色譜圖中，按公式(A.2)計(jì)算色譜峰的不對(duì)稱因子As。As=b/a(A.2)a,b分別為通過峰高處、平行于峰底的直線被峰兩側(cè)及峰高截取的兩線段的長(zhǎng)度(見圖A.1)。圖A.1標(biāo)準(zhǔn)色譜圖附錄B單色器濾光片的性能測(cè)試用紫外-可見分光光度計(jì)測(cè)量被檢儀器的濾光片在各波長(zhǎng)處的透射比，繪制透射比波長(zhǎng)特性曲線(見圖B.1)。由曲線求出最大透射比T對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)λ,則濾光片峰△λ=λ-λmx(B.1)3B.2截止型濾光片波長(zhǎng)示值誤差截止型濾光片的透射光特性用半高波長(zhǎng)表示。測(cè)量方法同B.1,由圖B.2所示曲線求出最大透射比Tmx,Tmx/2所對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)λ?為半高波長(zhǎng)。附錄C不同溫度下流動(dòng)相密度不同溫度下純水的密度見表C.1.單位為g/cm單位為g/cm30注：該純水的密度表采用國(guó)際溫標(biāo)(ITS-90)的純水密度表C.2純甲醇的密度不同溫度下純甲醇的