微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基

本章內(nèi)容第一節(jié)微生物化學(xué)組成和營(yíng)養(yǎng)要求第四節(jié)培養(yǎng)基第三節(jié)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞方式第二節(jié)微生物營(yíng)養(yǎng)類型微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第1頁(yè)—營(yíng)養(yǎng)是生命活動(dòng)起點(diǎn)，是必需物質(zhì)基礎(chǔ)。

微生物營(yíng)養(yǎng)過(guò)程為其生命活動(dòng)提供了物質(zhì)、能量、代謝調(diào)整物和必要生理環(huán)境保障。營(yíng)養(yǎng)(nutrition)：生物體從外部環(huán)境中攝取生命活動(dòng)必需物質(zhì)和能量，以滿足正常生長(zhǎng)、繁殖和各種生理活動(dòng)之所需。

廣義地說(shuō)，營(yíng)養(yǎng)是微生物取得和利用營(yíng)養(yǎng)物過(guò)程，是微生物維持和延續(xù)其生命形式一個(gè)基本生理過(guò)程。營(yíng)養(yǎng)物(nitrient)：含有營(yíng)養(yǎng)功效物質(zhì)和能量（指光能——對(duì)微生物來(lái)說(shuō)）微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第2頁(yè)第一節(jié)微生物營(yíng)養(yǎng)要素1微生物菌體化學(xué)組成——元素水平主要元素：碳、氫、氧、氮、磷、硫、鉀、鎂、鈣等微量元素：鋅、錳、氯、鉬、硒、鈷、銅等占細(xì)胞干重97%2微生物營(yíng)養(yǎng)要素按照營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在菌體中生理作用不一樣，能夠?qū)⑺鼈兎殖闪箢悾禾荚?、氮源、能源、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽和水微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第3頁(yè)一碳源在微生物生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中，能為其提供碳素營(yíng)養(yǎng)起源物質(zhì)稱碳源。即，是用來(lái)構(gòu)建菌體物質(zhì)中或代謝產(chǎn)物中碳素骨架營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。碳源譜有機(jī)碳C.H.O無(wú)機(jī)碳C.O,C.O.X異養(yǎng)微生物自養(yǎng)微生物從微生物整體來(lái)看，可利用碳源物質(zhì)范圍稱碳源譜。微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第4頁(yè)對(duì)大多數(shù)異養(yǎng)菌來(lái)說(shuō)，其最適碳源是“C.H.O”型碳源，其中：

糖類——最廣泛、最經(jīng)濟(jì)酸醇脂類——次要

糖類中：?jiǎn)翁?gt;雙糖、多糖己糖>戊糖葡萄糖、果糖>半乳糖、甘露糖等淀粉>纖維素、幾丁質(zhì)等普通不把含蛋白質(zhì)、氨基酸牛肉膏、蛋白胨等原料降格做碳源使用。當(dāng)前在微生物發(fā)酵工業(yè)中所利用碳源物質(zhì)主要有單糖、蔗糖、淀粉、糖蜜、麩皮、米糠.微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第5頁(yè)在微生物生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中，能為其提供氮素營(yíng)養(yǎng)起源物質(zhì)稱氮源。即，是用來(lái)滿足菌體物質(zhì)中或代謝產(chǎn)物中氮素需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。2.2氮源氮源譜｛有機(jī)氮N.C.H.O無(wú)機(jī)氮N.H,N.ONH3銨鹽（NH4+）硝酸鹽N2｛｛蛋白質(zhì)核酸氨基酸尿素微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第6頁(yè)普通而言，能利用有機(jī)氮也以利用無(wú)機(jī)氮不過(guò)，能利用無(wú)機(jī)氮不一定能利用有機(jī)氮。對(duì)大多數(shù)異養(yǎng)菌來(lái)說(shuō)，其最適氮源是“N.C.H.O”型或“N.C.H.O.X”型氮源(有機(jī)氮源)，“N.H”型氮源(無(wú)機(jī)氮源，如NH4+)次之。在論及微生物培養(yǎng)基成份時(shí)，最慣用有機(jī)氮源是牛肉膏、蛋白胨、酵母膏及餅粕粉（黃豆餅、花生麩）蠶蛹粉、魚粉等按對(duì)氨基酸需要不一樣，可將微生物生物分為：氨基酸自養(yǎng)型生物：不需要氨基酸做氮源，能利用尿素、銨鹽、硝酸鹽甚至氮?dú)獾茸孕泻铣伤璋被嵘锇被岙愷B(yǎng)型生物：需要從外界吸收現(xiàn)成氨基酸做氮源才能滿足需要微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第7頁(yè)三能源能為微生物生命活動(dòng)提供最初能量起源營(yíng)養(yǎng)物或輻射能，稱能源。能源譜｛化學(xué)物質(zhì)輻射能｛化能異養(yǎng)微生物能源有機(jī)物無(wú)機(jī)物化能自養(yǎng)微生物能源光能自養(yǎng)和光能異養(yǎng)微生物能源單功效營(yíng)養(yǎng)物：如光能多功效營(yíng)養(yǎng)物：如銨鹽、氨基酸等微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第8頁(yè)四生長(zhǎng)因子微生物生長(zhǎng)所必需、但其本身不能合成或合成量不足以滿足機(jī)體生長(zhǎng)需要、需要量很小有機(jī)化合物.微生物生長(zhǎng)因子需要量（/ml）III型肺炎鏈球菌（Streptococcuspneumoniae） 膽堿 6ug

金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus） 硫胺素0.5ng 白喉棒桿菌（Cornebacteriumdiphtherriae） B-丙氨酸1.5ug 破傷風(fēng)梭狀芽孢桿菌（Clostridiumtetani） 尿嘧啶 0-4ug 腸膜狀串珠菌（Leuconostocmesenteroides） 吡哆醛 0.025ug微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第9頁(yè)廣義生長(zhǎng)因子——維生素、生物堿、卟啉、甾醇、短鏈分支或直鏈脂肪酸、氨基酸等狹義生長(zhǎng)因子——僅指維生素生長(zhǎng)因子自養(yǎng)型微生物：多數(shù)真菌、放線菌和不少細(xì)菌生長(zhǎng)因子異養(yǎng)型微生物：乳酸菌、營(yíng)養(yǎng)缺點(diǎn)型突變株及致病菌等生長(zhǎng)因子過(guò)量合成微生物：可用其生產(chǎn)相關(guān)生長(zhǎng)因子（如維生素），如阿舒假囊酵母生產(chǎn)B2，謝氏丙桿菌、有些鏈霉菌生產(chǎn)B12等。配制培養(yǎng)基時(shí)，常使用生長(zhǎng)因子豐富天然物質(zhì)制備物作為補(bǔ)充生長(zhǎng)因子培養(yǎng)基成份。如：酵母膏、玉米漿、麥芽汁、肝浸液等。微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第10頁(yè)五無(wú)機(jī)鹽參加微生物中氨基酸和酶組成；調(diào)整微生物原生質(zhì)膠體狀態(tài)，維持細(xì)胞滲透與平衡酶激活劑除C、H、O外元素，有時(shí)又稱無(wú)機(jī)鹽，其基本作用：依據(jù)微生物對(duì)礦質(zhì)元素需要量大小，可分為：微量元素——指那些在微生物生長(zhǎng)過(guò)程中起主要作用，而機(jī)體對(duì)這些元素需要量極其微小元素，需要量通常在10-6--10-8mol/L，如：鋅、錳、鈉、氯、鉬、硒、鈷、銅、鎢、鎳、硼等。大量元素：Na、K、Mg、Ca、S、P等。配制培養(yǎng)基時(shí)，大量元素普通首選K2HPO4、MgSO4等，可同時(shí)提供4種大量元素。慣用天然水、自來(lái)水來(lái)配制培養(yǎng)基以提供各種微量元素.微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第11頁(yè)六水生理功效主要有：①起到溶劑與運(yùn)輸介質(zhì)作用；②參加細(xì)胞內(nèi)一系列化學(xué)反應(yīng)；③維持蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子穩(wěn)定天然構(gòu)象；④高比熱、高汽化熱等，以確保微生物生命活動(dòng)⑤經(jīng)過(guò)水合作用與脫水作用控制由多亞基組成結(jié)構(gòu).微生物細(xì)胞含水量很高，細(xì)菌、酵母和霉菌菌體分別是80%、75%和85%，而霉菌孢子含水39%，細(xì)菌芽孢含水很低，約為30%左右。微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第12頁(yè)第二節(jié)微生物營(yíng)養(yǎng)類型異養(yǎng)型生物自養(yǎng)型生物生長(zhǎng)所需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生長(zhǎng)過(guò)程中能量起源光能營(yíng)養(yǎng)型化能營(yíng)養(yǎng)型依據(jù)微生物生長(zhǎng)所需要主要營(yíng)養(yǎng)要素即碳源和能源不一樣，能夠?qū)⑽⑸飫澐譃椴灰粯訝I(yíng)養(yǎng)類型：微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第13頁(yè)依據(jù)碳源、能源及電子供體性質(zhì)不一樣，可將微生物分為：光能無(wú)機(jī)自養(yǎng)型(photolithoautotrophy)光能有機(jī)異養(yǎng)型(photoorganoheterotrophy)化能無(wú)機(jī)自養(yǎng)型(chemolithoautotrophy)化能有機(jī)異養(yǎng)型(chemoorganoheterotrophy)微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第14頁(yè)1．光能無(wú)機(jī)自養(yǎng)型（光能自養(yǎng)型）能以CO2為唯一或主要碳源；進(jìn)行光合作用獲取生長(zhǎng)所需要能量；以無(wú)機(jī)物如H2、H2S、S等作為供氫體或電子供體，使CO2還原為組成細(xì)胞物質(zhì)有機(jī)物；比如，藻類及藍(lán)細(xì)菌等和植物一樣，以水為電子供體（供氫體），進(jìn)行產(chǎn)氧型光合作用，合成細(xì)胞物質(zhì)。而紅硫細(xì)菌，以H2S為電子供體，產(chǎn)生細(xì)胞物質(zhì)，并伴隨硫元素產(chǎn)生。CO2+2H2S光能光合色素[

CH2O]+2S+H2O微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第15頁(yè)2．光能有機(jī)異養(yǎng)型（光能異養(yǎng)型）不能以CO2為主要或唯一碳源；以有機(jī)物作為供氫體，利用光能將CO2還原為細(xì)胞物質(zhì)；在生長(zhǎng)時(shí)大多數(shù)需要外源生長(zhǎng)因子；比如，紅螺菌屬中一些細(xì)菌能利用異丙醇作為供氫體，將CO2還原成細(xì)胞物質(zhì)，同時(shí)積累丙酮。CHOH+CO2H3CH3C2光能光合色素2CH3C0CH3+[CH2O]+H2O微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第16頁(yè)3．化能無(wú)機(jī)自養(yǎng)型（化能自養(yǎng)型）生長(zhǎng)所需要能量來(lái)自無(wú)機(jī)物氧化過(guò)程中放出化學(xué)能；以CO2或碳酸鹽作為唯一或主要碳源進(jìn)行生長(zhǎng)時(shí)，利用H2、H2S、Fe2+、NH3或NO2-等作為電子供體使CO2還原成細(xì)胞物質(zhì)?；軣o(wú)機(jī)自養(yǎng)型只存在于微生物中，可在完全無(wú)機(jī)及無(wú)光環(huán)境中生長(zhǎng)。它們廣泛分布于土壤及水環(huán)境中,參加地球物質(zhì)循環(huán)；微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第17頁(yè)4．化能有機(jī)異養(yǎng)型（化能異養(yǎng)型）生長(zhǎng)所需要能量均來(lái)自有機(jī)物氧化過(guò)程中放出化學(xué)能；生長(zhǎng)所需要碳源主要是一些有機(jī)化合物，如淀粉、糖類、纖維素、有機(jī)酸等。有機(jī)物通常既是碳源也是能源；

大多數(shù)細(xì)菌、真菌、原生動(dòng)物都是化能有機(jī)異養(yǎng)型微生物；全部致病微生物均為化能有機(jī)異養(yǎng)型微生物；微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第18頁(yè)不一樣營(yíng)養(yǎng)類型之間界限并非是絕正確異養(yǎng)型微生物并非絕對(duì)不能利用CO2；自養(yǎng)型微生物也并非不能利用有機(jī)物進(jìn)行生長(zhǎng)；有些微生物在不一樣生長(zhǎng)條件下生長(zhǎng)時(shí),其營(yíng)養(yǎng)類型也會(huì)發(fā)生改變:比如紫色非硫細(xì)菌(purplenonsulphurbacteria)：沒(méi)有有機(jī)物時(shí)，同化CO2，

為自養(yǎng)型微生物；有機(jī)物存在時(shí)，利用有機(jī)物進(jìn)行生長(zhǎng)，為異養(yǎng)型微生物；光照和厭氧條件下，利用光能生長(zhǎng)，為光能營(yíng)養(yǎng)型微生物；黑暗與有氧條件下，依靠有機(jī)物氧化產(chǎn)生化學(xué)能生長(zhǎng)，為化能營(yíng)養(yǎng)型微生物微生物營(yíng)養(yǎng)類型可變性無(wú)疑有利于提升其對(duì)環(huán)境改變適應(yīng)能力微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第19頁(yè)第三節(jié)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞方式營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)能否進(jìn)入細(xì)胞取決于三個(gè)方面原因：①營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)本身性質(zhì)（相對(duì)分子量、質(zhì)量、溶解性、電負(fù)性等;②微生物所處環(huán)境（溫度、pH等）；③微生物細(xì)胞透過(guò)屏障（原生質(zhì)膜、細(xì)胞壁、莢膜等）。除原生動(dòng)物外，各種微生物都是經(jīng)過(guò)細(xì)胞膜滲透和選擇性吸收作用而從外界吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。依據(jù)物質(zhì)運(yùn)輸過(guò)程特點(diǎn)，可將微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸方式分為：?jiǎn)渭償U(kuò)散促進(jìn)擴(kuò)散主動(dòng)運(yùn)輸基團(tuán)轉(zhuǎn)移微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第20頁(yè)1．單純擴(kuò)散（自由擴(kuò)散、簡(jiǎn)單擴(kuò)散）原生質(zhì)膜是一個(gè)半透性膜，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)經(jīng)過(guò)原生質(zhì)膜上小孔，經(jīng)過(guò)物理擴(kuò)散方式由高濃度胞外環(huán)境向低濃度胞內(nèi)進(jìn)行擴(kuò)散。特點(diǎn)①不消耗能量；不需要載體；③不能逆濃度運(yùn)輸；運(yùn)輸速率與膜內(nèi)外物質(zhì)濃度差成正比；②物質(zhì)在擴(kuò)散過(guò)程中沒(méi)有發(fā)生任何改變；微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第21頁(yè)水是唯一能夠經(jīng)過(guò)自由擴(kuò)散穿過(guò)原生質(zhì)膜分子；另外脂肪酸、乙醇、甘油、一些氣體（O2、CO2）及一些氨基酸分子在一定程度上也可經(jīng)過(guò)自由擴(kuò)散進(jìn)出細(xì)胞。

微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第22頁(yè)2．促進(jìn)擴(kuò)散特點(diǎn)①不消耗能量②需要載體參加③不能進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸④運(yùn)輸速率與膜內(nèi)外物質(zhì)濃度差成正比⑤參加運(yùn)輸物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)不發(fā)生本身改變，但運(yùn)輸速度加緊細(xì)胞外溶質(zhì)借助于細(xì)胞膜上載體蛋白（酶）幫助，向胞內(nèi)運(yùn)輸方式,。微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第23頁(yè)

經(jīng)過(guò)促進(jìn)擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要有氨基酸、單糖、維生素及無(wú)機(jī)鹽等。普通微生物經(jīng)過(guò)專一載體蛋白運(yùn)輸對(duì)應(yīng)物質(zhì)，但也有微生物對(duì)同一物質(zhì)運(yùn)輸由一個(gè)以上載體蛋白來(lái)完成。微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第24頁(yè)3．主動(dòng)運(yùn)輸它一個(gè)主要特點(diǎn)是物質(zhì)運(yùn)輸過(guò)程中需要消耗能量和載體，而且能夠進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸。用于各種離子和一些糖類運(yùn)輸。主動(dòng)運(yùn)輸是廣泛存在于微生物中一個(gè)主要物質(zhì)運(yùn)輸方式。與促進(jìn)擴(kuò)散相比,主動(dòng)運(yùn)輸有何主要意義?最關(guān)鍵是，微生物經(jīng)過(guò)主動(dòng)運(yùn)輸能夠從各種環(huán)境中吸收到營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，從而對(duì)提升其環(huán)境適應(yīng)性含有主要作用。微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第25頁(yè)4．基團(tuán)移位

基團(tuán)移位是另一個(gè)類型主動(dòng)運(yùn)輸，它與主動(dòng)運(yùn)輸不一樣之處于于它有一個(gè)復(fù)雜運(yùn)輸系統(tǒng)(酶系統(tǒng))來(lái)完成物質(zhì)運(yùn)輸。其特點(diǎn)是：需要能量，需要載體，能夠逆濃度運(yùn)輸，而且物質(zhì)結(jié)構(gòu)在運(yùn)輸過(guò)程中會(huì)發(fā)生化學(xué)改變。

基團(tuán)移位主要存在于厭氧型和兼性厭氧型細(xì)胞中，主要用于各種糖類運(yùn)輸，脂肪酸、核苷酸、堿基等也能夠經(jīng)過(guò)這種方式運(yùn)輸。微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第26頁(yè)比較項(xiàng)目單純擴(kuò)散 促進(jìn)擴(kuò)散主動(dòng)運(yùn)輸基團(tuán)移位特異載體蛋白無(wú) 有 有 有

運(yùn)輸速度 慢 快 快 快

溶質(zhì)運(yùn)輸方向由濃至稀由濃至稀 由稀至濃由稀至濃平衡時(shí)內(nèi)外濃度內(nèi)外相等 內(nèi)外相等 內(nèi)部高內(nèi)部高

運(yùn)輸分子 無(wú)特異性 特異性 特異性特異性

能量消耗 不需要 需要 需要 需要 運(yùn)輸前后溶質(zhì)分子不變 不變 不變 改變 載體飽和效應(yīng) 無(wú) 有 有 有 與溶質(zhì)類似物無(wú)競(jìng)爭(zhēng)性 有競(jìng)爭(zhēng)性 有競(jìng)爭(zhēng)性有競(jìng)爭(zhēng)性

運(yùn)輸抑制劑 無(wú) 有 有 有

運(yùn)輸對(duì)象舉例水、O2

糖、SO42-氨基酸、乳糖葡萄糖\嘌呤四種運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)方式比較微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第27頁(yè)第四節(jié)培養(yǎng)基培養(yǎng)基:應(yīng)科研或生產(chǎn)需要，由人工配制、適合于不一樣微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物用營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)（混合養(yǎng)料）。培養(yǎng)基幾乎是一切對(duì)微生物進(jìn)行研究和利用工作基礎(chǔ)任何培養(yǎng)基都應(yīng)該具備微生物所需要六大營(yíng)養(yǎng)要素（碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、能源、生長(zhǎng)因子、水）且百分比適當(dāng).任何培養(yǎng)基一旦配成，必須馬上進(jìn)行滅菌處理:慣用高壓蒸汽滅菌：

1.05kg/cm2,121.3℃,15-20min；0.56kg/cm2,112.6℃,15-30min;微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第28頁(yè)絕大多數(shù)微生物都能夠在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，除少數(shù)嚴(yán)格寄生或共生微生物外。

另外，有一個(gè)觀點(diǎn)，認(rèn)為自然界中還存在著一類不可培養(yǎng)微生物。當(dāng)前這類微生物作為一個(gè)資源已受到廣泛關(guān)注。微生物培養(yǎng)基用途：促進(jìn)微生物生長(zhǎng)繁殖；積累代謝產(chǎn)物；分離微生物菌種；判定微生物種類；微生物細(xì)胞計(jì)數(shù)；菌種保藏；制備微生物制品微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第29頁(yè)1）生態(tài)模擬調(diào)查所培養(yǎng)菌生態(tài)條件，查看其“癖好”，對(duì)“癥”下料———初級(jí)天然培養(yǎng)基.2）查閱文件查閱、分析文件，調(diào)查前人工作資料，借鑒人家經(jīng)驗(yàn)，方便從中得到啟發(fā)設(shè)計(jì)有自己特色培養(yǎng)基配方.3）精心設(shè)計(jì)借助優(yōu)選法或正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法等方法.1.設(shè)計(jì)培養(yǎng)基方法微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第30頁(yè)4）試驗(yàn)比較

*不一樣培養(yǎng)基配方選擇比較*單種成份起源和數(shù)量比較*幾個(gè)成份濃度百分比調(diào)配比較*小型試驗(yàn)放大到大型生產(chǎn)條件比較*pH和溫度試驗(yàn)微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第31頁(yè)2培養(yǎng)基類型按所培養(yǎng)微生物類群分類①細(xì)菌培養(yǎng)基②放線菌培養(yǎng)基③酵母菌培養(yǎng)基④霉菌培養(yǎng)基等按培養(yǎng)目標(biāo)來(lái)分類①種子培養(yǎng)基(seedculturemedium)②發(fā)酵培養(yǎng)基(fermentationmedium)按培養(yǎng)基組成成份分類①天然培養(yǎng)基(complexmedium)②合成（組合）培養(yǎng)基(syntheticmedium)③半合成（組合）培養(yǎng)基(semi-definedmedium)按培養(yǎng)基物理狀態(tài)分類①液體培養(yǎng)基(liquidmedium)②固體培養(yǎng)基(solidmedium)：③半固體培養(yǎng)基(semi-solidmedium)按培養(yǎng)基功效（或用途）分類①基礎(chǔ)培養(yǎng)基(minimummedium)②加富（又稱富集）培養(yǎng)基(enrichedmedium)③判別性培養(yǎng)基(differentialmedium)培養(yǎng)基種類微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第32頁(yè)1）依據(jù)微生物類群來(lái)分①細(xì)菌培養(yǎng)基②放線菌培養(yǎng)基③酵母菌培養(yǎng)基④霉菌培養(yǎng)基等。2）依據(jù)培養(yǎng)目標(biāo)來(lái)分

①種子培養(yǎng)基(seedculturemedium)——是為確保發(fā)酵生產(chǎn)取得大量?jī)?yōu)質(zhì)種子而設(shè)計(jì)培養(yǎng)基。特點(diǎn)是營(yíng)養(yǎng)較豐富，氮源百分比較高。有時(shí)為使菌種能快速適應(yīng)后面發(fā)酵條件，還有意識(shí)地加入發(fā)酵培養(yǎng)基基質(zhì)。

②發(fā)酵培養(yǎng)基(fermentationmedium)——用于生產(chǎn)預(yù)定發(fā)酵產(chǎn)物，普通以碳為主要元素，碳源含量往往高于種子培養(yǎng)基。大規(guī)模生產(chǎn)時(shí)，原料應(yīng)價(jià)廉易得，還應(yīng)有利于下游分離提取。微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第33頁(yè)如：味精生產(chǎn)一級(jí)種子（北京棒狀桿菌AS1.299，用搖床培養(yǎng)）培養(yǎng)基配方：葡萄糖3%玉米漿2.5~3.5%尿素0.3~0.5%K2HPO40.1~0.2%MgSO40.05%二級(jí)種子（1200升發(fā)酵罐）培養(yǎng)基配方：以3-5%淀粉水解糖代替3%葡萄糖，其它成份同一級(jí)種子。發(fā)酵培養(yǎng)基（50-100t發(fā)酵罐）：基本同二級(jí)種子液。微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第34頁(yè)3）依據(jù)對(duì)培養(yǎng)基成份了解程度來(lái)分A天然培養(yǎng)基(complexmedium)：也稱作chemicallyundefinedmedium。利用化學(xué)成份還不完全清楚或不恒定天然物質(zhì)（如肉湯、蛋白胨、麥芽汁、酵母汁、豆芽汁、玉米粉、牛奶、血清等）制成培養(yǎng)基。天然培養(yǎng)基比較經(jīng)濟(jì)，除試驗(yàn)室經(jīng)常使用外，更適宜于在生產(chǎn)上用來(lái)大規(guī)模地培養(yǎng)微生物和生產(chǎn)微生物產(chǎn)品。B合成（組合）培養(yǎng)基(syntheticmedium)：也稱作chemicallydefinedmedium。

由化學(xué)成份完全了解物質(zhì)配制而成培養(yǎng)基。該類培養(yǎng)基組成成份清楚，重復(fù)性強(qiáng)，但微生物生長(zhǎng)較慢，且價(jià)格較貴。故普通適于在試驗(yàn)室范圍內(nèi)及相關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)需要、代謝、分類判定、生物測(cè)定以及菌種選育、遺傳分析等方面研究工作。如高氏培養(yǎng)基、察氏培養(yǎng)基等都是合成培養(yǎng)基。C半合成（組合）培養(yǎng)基(semi-definedmedium)：在合成培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加些天然成份，以更有效地滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物需要。如馬鈴薯-蔗糖培養(yǎng)基。微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第35頁(yè)4依據(jù)培養(yǎng)基物理狀態(tài)來(lái)分1）液體培養(yǎng)基(liquidmedium)：

液體培養(yǎng)基不含任何凝固劑，菌體與培養(yǎng)基充分接觸，操作方便。慣用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)以及在試驗(yàn)室進(jìn)行微生物生理代謝等基本理論研究工作?？梢罁?jù)培養(yǎng)后“濁度”判斷微生物生長(zhǎng)情況。微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第36頁(yè)2）固體培養(yǎng)基(solidmedium)：天然固體營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)制成培養(yǎng)基（如培養(yǎng)霉菌培養(yǎng)基），或在液體培養(yǎng)基中加入一定量凝固劑（瓊脂1.5～2％)而呈固體狀態(tài)培養(yǎng)基。為微生物生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)表面。慣用于微生物分離、純化、計(jì)數(shù)、生理測(cè)定、育種和菌種保藏等方面研究?？梢朗褂媚繕?biāo)不一樣而制成斜面、平板等形式.微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第37頁(yè)3）半固體培養(yǎng)基(semi-solidmedium)：在液體培養(yǎng)基中加入0.2-0.7％瓊脂組成培養(yǎng)基。慣用來(lái)觀察細(xì)菌運(yùn)動(dòng)特征，以進(jìn)行菌種判定.以及測(cè)定噬菌體效價(jià)等等.微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第38頁(yè)1.不被微生物分解、利用、液化；2.不因消毒滅菌而被破壞；3.在微生物生長(zhǎng)溫度內(nèi)保持固態(tài)；4.凝固點(diǎn)溫度對(duì)微生物無(wú)害；5.透明度好，粘著力強(qiáng)理想凝固劑應(yīng)具備條件微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第39頁(yè)半固體培養(yǎng)物生長(zhǎng)情況：微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第40頁(yè)3.5依據(jù)培養(yǎng)基用途來(lái)分3.5.1基礎(chǔ)培養(yǎng)基(minimummedium):是含有普通微生物生長(zhǎng)繁殖所需基本營(yíng)養(yǎng)成份培養(yǎng)基；基礎(chǔ)培養(yǎng)基也可作為一些特殊培養(yǎng)基基礎(chǔ)成份（如制備糖發(fā)酵培養(yǎng)基時(shí)）.微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第41頁(yè)3.5.2加富（又稱富集）培養(yǎng)基在基本培養(yǎng)基中加入一些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如血、血清、動(dòng)植物組織液或其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（或生長(zhǎng)因子）一類營(yíng)養(yǎng)豐富培養(yǎng)基。用來(lái)富集（使數(shù)量上占優(yōu)勢(shì)）和分離某種特定微生物?；蛴靡耘囵B(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求苛刻微生物.富集-分離微生物：依據(jù)待分離微生物特點(diǎn)設(shè)計(jì)培養(yǎng)基,用于從環(huán)境中富集和分離某種微生物——目標(biāo)微生物在這種培養(yǎng)基中較其它微生物生長(zhǎng)速度快,并逐步富集而占優(yōu)勢(shì),從而輕易到達(dá)分離到該種微生物目標(biāo).)微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第42頁(yè)3.5.3選擇性培養(yǎng)基(selectivemedium)：是依據(jù)某種或某一類群微生物特殊營(yíng)養(yǎng)需要（投其所好），或依據(jù)對(duì)某種化合物敏感性情況（取其所抗）而設(shè)計(jì)出來(lái)一類培養(yǎng)基。詳細(xì)說(shuō)，是加入對(duì)應(yīng)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或有抑菌性化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要微生物生長(zhǎng),而促進(jìn)所需微生物生長(zhǎng)。用于將某種或某類微生物從混雜微生物群體中

分離出來(lái).微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第43頁(yè)微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第44頁(yè)（續(xù)上表）微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第45頁(yè)例：伊紅美蘭（Eosin-MethyleneBlue）乳糖培養(yǎng)基（簡(jiǎn)稱EMB培養(yǎng)基）——

用于食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)，檢驗(yàn)食品樣品“大腸菌群”指標(biāo)。3.5.4判別性培養(yǎng)基(differentialmedium)：用于判別不一樣類型微生物培養(yǎng)基。在普通培養(yǎng)基中加入能與某種代謝產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng)指示劑或化學(xué)藥品，從而產(chǎn)生某種顯著特征性改變，以區(qū)分不一樣微生物方便于依據(jù)目標(biāo)選擇性挑取或計(jì)數(shù)等。微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第46頁(yè)大腸菌群定義：

指存在與大腸內(nèi)，分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣G-短桿菌,包含大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌和一些中間類型細(xì)菌。

伊紅和美藍(lán)二種苯胺染料可抑制G+細(xì)菌和一些難培養(yǎng)G-細(xì)菌生長(zhǎng)。在低酸度時(shí),這二種染料結(jié)合形成沉淀，起著產(chǎn)酸指示劑作用.試樣中各種腸道菌會(huì)在EMB培養(yǎng)基上產(chǎn)生相互輕易區(qū)分特征菌落,因而易于識(shí)別。比如：大腸桿菌強(qiáng)烈分解乳糖而產(chǎn)生大量混合酸,菌體呈酸性,菌落被染成深紫色，從菌落表面反射光中還可看到綠色金屬閃光。微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第47頁(yè)微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第48頁(yè)選擇性培養(yǎng)結(jié)果判別性培養(yǎng)結(jié)果微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第49頁(yè)二培養(yǎng)基配制標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基組分應(yīng)適合微生物營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn)（目標(biāo)明確）營(yíng)養(yǎng)物濃度與百分比應(yīng)恰當(dāng)（營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)）物理化學(xué)條件適宜（條件適宜）依據(jù)培養(yǎng)目標(biāo)來(lái)選擇不一樣起源原料（經(jīng)濟(jì)節(jié)約）微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第50頁(yè)1.培養(yǎng)基組分應(yīng)適合微生物營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn)（目標(biāo)明確）即依據(jù)不一樣微生物營(yíng)養(yǎng)需要配制不一樣培養(yǎng)基。不一樣營(yíng)養(yǎng)類型微生物，其對(duì)營(yíng)養(yǎng)物需求差異很大。如自養(yǎng)型微生物培養(yǎng)基完全能夠（或應(yīng)該）由簡(jiǎn)單無(wú)機(jī)物質(zhì)組成。異養(yǎng)型微生物培養(yǎng)基最少需要含有一個(gè)有機(jī)物質(zhì)，但有機(jī)物種類需適應(yīng)所培養(yǎng)菌特點(diǎn)。

按微生物主要類群來(lái)說(shuō)，它們所需要培養(yǎng)基成份也不一樣當(dāng)對(duì)“試驗(yàn)菌”營(yíng)養(yǎng)需求特點(diǎn)不清楚時(shí)候，能夠采取生長(zhǎng)譜法進(jìn)行測(cè)定。微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第51頁(yè)2.營(yíng)養(yǎng)物濃度與百分比應(yīng)恰當(dāng)（營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)）●濃度過(guò)高——微生物生長(zhǎng)受到抑制；濃度過(guò)小——不能滿足微生物生長(zhǎng)需要；●碳氮比（C/N）直接影響微生物生長(zhǎng)與繁殖及代謝產(chǎn)物形成與積累，故常作為考查培養(yǎng)基組成時(shí)一個(gè)主要指標(biāo)碳源中所含碳原子mol數(shù)氮源中所含氮原子mol數(shù)C/N比值=例：谷氨酸生產(chǎn)中

C/N＝4/1時(shí)，菌體大量繁殖，谷氨酸積累少；C/N＝3/1時(shí)，菌體生長(zhǎng)受抑制，而谷氨酸大量增加。注：C/N比有時(shí)也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白兩種成份含量之比）微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第52頁(yè)3.物理化學(xué)條件適宜（條件適宜）pH:

各類微生物最適生長(zhǎng)pH值各不相同：

細(xì)菌：7.0~8.0 放線菌：7.5~8.5

酵母菌：3.8~6.0 霉菌：4.0~5.8

在微生物生長(zhǎng)和代謝過(guò)程中，因?yàn)闋I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用和代謝產(chǎn)物形成與積累，培養(yǎng)基初始pH值會(huì)發(fā)生改變，為了維持培養(yǎng)基pH值相對(duì)恒定，通常采取以下兩種方式：內(nèi)源調(diào)整：在培養(yǎng)基里加一些緩沖劑或不溶性碳酸鹽；調(diào)整培養(yǎng)基適當(dāng)碳氮比。外源調(diào)整：按實(shí)際需要不停向發(fā)酵液中流加酸液或堿液微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基第53頁(yè)滲透壓和水活度（aw）滲透壓：由溶液中所含分子或離子質(zhì)點(diǎn)數(shù)決定，由2種不一樣濃度溶液產(chǎn)生。溶液質(zhì)點(diǎn)數(shù)越