革蘭氏陰性兼性厭氧桿菌

革蘭氏陰性兼性厭氧桿菌第十章革蘭氏陰性兼性厭氧桿菌包括腸桿菌科、弧菌科、巴氏桿菌科的細(xì)菌，是與獸醫(yī)相關(guān)重要的病原菌，其中弧菌以水產(chǎn)動(dòng)物為主，這里主要介紹家畜家禽相關(guān)病原菌。第一節(jié)腸桿菌科第二節(jié)巴氏桿菌科二曼氏桿菌屬三里氏桿菌屬四放線桿菌屬五嗜血桿菌屬第2頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天第一節(jié)腸桿菌科據(jù)生化反應(yīng)、血清學(xué)試驗(yàn)、DNA同源性等，可將本科分為28個(gè)屬，至少110個(gè)菌種。對(duì)屬內(nèi)各菌種或菌型的鑒定，除按生化特性區(qū)別外，有時(shí)可根據(jù)致病性、抗原結(jié)構(gòu)、對(duì)某些噬菌體的敏感性等項(xiàng)來(lái)決定。對(duì)埃希氏菌、沙門(mén)氏菌屬等各菌株的鑒定，常用血清凝集反應(yīng)來(lái)分型，不一定用菌種名，而稱(chēng)血清型。第3頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天腸桿菌科細(xì)菌共同特征（一）形態(tài)和培養(yǎng)G－桿菌，菌體兩端鈍圓，中等大小，約0.5×3.0

m，無(wú)芽胞，有周身鞭毛，能運(yùn)動(dòng)，部分菌有莢膜，多數(shù)有菌毛。需氧或兼性厭氧。普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，形成中等大小光滑型菌落。液體培養(yǎng)呈均勻混濁。

（二）生化反應(yīng)生化反應(yīng)活潑，不同菌種分解糖、蛋白的能力不同，形成產(chǎn)物不同，以此可作菌種鑒定。第4頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天腸桿菌科細(xì)菌共同特征（三）抵抗力對(duì)熱抵抗力不強(qiáng)，濕熱60

C、30min可殺滅；對(duì)低溫有耐受；對(duì)一般消毒劑、抗生素敏感，但易產(chǎn)生耐藥株；有些菌耐膽鹽和抵抗染料的抑菌作用。（四）抗原構(gòu)造腸道桿菌抗原構(gòu)造較為復(fù)雜，主要有O抗原、H抗原、莢膜或K抗原及菌毛抗原等，均可用血清學(xué)反應(yīng)檢出。第5頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天腸桿菌科細(xì)菌共同特征（五）致病因子主要有菌毛或菌毛樣結(jié)構(gòu)、莢膜或微莢膜、外膜、內(nèi)毒素、外毒素及載鐵體（siderophore）等。第6頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天第一節(jié)腸桿菌科目錄一、埃希氏菌屬二、沙門(mén)氏菌屬三、變形桿菌屬四、腸桿菌屬第7頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、埃希氏菌屬埃希菌屬（Escherichia）包括5個(gè)種，血清型眾多，多不致病，臨床以大腸埃希氏菌最為常見(jiàn)。大腸埃希菌（E.coli）俗稱(chēng)大腸桿菌，大腸桿菌的多少是衛(wèi)生檢驗(yàn)指標(biāo)之一。部分菌為致病菌，可引起多種幼畜感染。也是最常用分子生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)材料。第8頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）形態(tài)染色G－短桿菌，有鞭毛，能運(yùn)動(dòng)，具有周身鞭毛，無(wú)莢膜。第9頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）形態(tài)染色右圖：光學(xué)顯微鏡下大腸桿菌形態(tài)。右圖：電子顯微鏡下大腸桿菌形態(tài)（偽著色）。第10頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）培養(yǎng)及生化反應(yīng)普通培養(yǎng)基上形成中等大小光滑型菌落；在麥康凱培養(yǎng)基上形成紅色菌落；在SS培養(yǎng)基上形成孤立紅色菌落；第11頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天在EMB上形成黑色帶金屬光澤閃光的菌落大腸桿菌在伊紅美蘭培養(yǎng)基上第12頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天在血平板上有

-溶血大腸桿菌在血液培養(yǎng)基上（有溶血環(huán)）第13頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天生化反應(yīng)活潑對(duì)葡萄糖、乳糖、麥芽糖等產(chǎn)酸產(chǎn)氣靛基質(zhì)（吲哚）試驗(yàn)陽(yáng)性、甲基紅（M-R）試驗(yàn)陽(yáng)性、V-P試驗(yàn)陰性、檸檬酸鹽利用試驗(yàn)陰性，不產(chǎn)生H2S，尿素酶試驗(yàn)陰性。第14頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（三）抵抗力在土、水中可生存數(shù)月；在含余氯的水中不能生存；膽鹽、煌綠等對(duì)大腸桿菌有明顯的抑菌作用；氯霉素、慶大霉素對(duì)其敏感，但易產(chǎn)生耐藥性。（四）抗原構(gòu)造主要有O、H、K及菌毛抗原：O抗原有173種；K抗原有105種；H抗原有56種。例如：O157:K15:H16

。第15頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（五）致病性不同血清型的大腸桿菌常使不同各類(lèi)動(dòng)物發(fā)病，也有好幾種血清型能對(duì)多種動(dòng)物致病。引起人、畜腸道感染的大腸桿菌可分成：腸產(chǎn)毒性大腸桿菌（ETEC）腸致病性大腸桿菌（EPEC）腸侵襲性大腸桿菌（EIEC）腸出血性大腸桿菌（EHEC）腸粘附性大腸桿菌（EAEC）。第16頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天1、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(EnterotoxigenicE.coli，ETEC)(1)產(chǎn)生外毒素——腸毒素。包括不耐熱腸毒素(LT)和耐熱腸毒素(ST)。(2)粘著素抗原：主要有F4(K88)、F5(K99)、F6(987P)、F41等四種粘著素抗原，可增強(qiáng)細(xì)菌的致病。如仔豬黃痢。(3)外毒素：神經(jīng)毒素(neurotoxin)：可致腸毒血癥，引起水腫與神經(jīng)癥狀。如仔豬水腫病。ETEC型菌株均可能對(duì)仔豬、犢、駒和羔羊致病。第17頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天大腸桿菌患病情況仔豬黃白痢第18頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天大腸桿菌患病情況仔豬黃白痢第19頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天大腸桿菌病畜情況仔豬水腫病第20頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（五）致病性2、腸致病性大腸桿菌（enteropathogenicE.coli.

，EPEC）：為發(fā)展中國(guó)家嬰兒腹瀉的重要病原。3、腸侵襲性大腸桿菌（enteroinvasiveE.coli.,EIEC）：粘膜和潰瘍。亦可引起豚鼠角膜結(jié)膜炎(Serenytest)。4、腸出血性大腸桿菌（enterohemorrhagicE.coli.

，

EHEC）：出血性結(jié)腸炎。5、腸凝聚性大腸桿菌（enteroaggregativeE.coli.,EAggEC）：兒童持續(xù)性腹瀉的病因之一。第21頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天畜禽致病大腸桿菌的分離與鑒定程序（六）微生物學(xué)檢查法第22頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（七）免疫1、自家菌苗免疫；（仔豬E.coli.苗可用在母豬產(chǎn)仔前1月、半月分別免疫兩次，據(jù)說(shuō)免疫效果較好。）2、ST、LT及F4（K88）、F5(K99)、F6(987P)、F41共同制備菌苗免疫；3、基因工種菌免疫。第23頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、沙門(mén)氏菌屬Salmonella的細(xì)菌種類(lèi)繁多，迄今為止已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了2500個(gè)以上的血清型。它們主要寄生于人類(lèi)及各種溫血?jiǎng)游锬c道，可引起各種性質(zhì)的疾病。這些由沙門(mén)菌引起的疾病統(tǒng)稱(chēng)為沙門(mén)菌病(salmonellosis)。第24頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、沙門(mén)氏菌屬（一）形態(tài)染色、培養(yǎng)和生化反應(yīng)染色：G－桿菌，除雞傷寒與雞白痢沙門(mén)氏菌外，其余都有周鞭毛和菌毛。第25頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天沙門(mén)氏菌的革蘭色染色鞭毛染色第26頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天沙門(mén)氏菌在不同培養(yǎng)基上生長(zhǎng)性狀沙門(mén)氏菌在麥康凱培養(yǎng)基上生長(zhǎng)性狀。沙門(mén)氏菌在HEK培養(yǎng)基上形成黑色菌落第27頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）形態(tài)染色、培養(yǎng)和生化反應(yīng)培養(yǎng)：營(yíng)養(yǎng)要求不高，（有雞白痢沙門(mén)氏菌、雞傷寒沙門(mén)氏菌、豬傷寒沙門(mén)氏菌、羊流產(chǎn)和甲型副傷寒沙門(mén)氏菌等菌型在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)貧瘠，形成細(xì)小的菌落）在普通培養(yǎng)基上形成中等大小、半透明菌落，不分解乳糖，在腸道桿菌鑒別培養(yǎng)基上形成不著色菌落。沙門(mén)氏菌屬各菌的生化反應(yīng)較有規(guī)律性，對(duì)細(xì)菌有重要價(jià)值。第28頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）形態(tài)染色、培養(yǎng)和生化反應(yīng)大腸桿菌與沙門(mén)氏菌的生化反應(yīng)對(duì)照第29頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）抗原構(gòu)造及分類(lèi)分類(lèi)比較復(fù)雜，有O、H、Vi及菌毛等重要抗原。O、H是用于分型的基本抗原。1、O抗原：為細(xì)菌菌體抗原，即脂多糖；O抗原有許多組成成分，分別以1、2、3、4……等數(shù)字表示。每種細(xì)菌常帶有數(shù)種O抗原；不同種的細(xì)菌可有共同的O抗原。將具有共同抗原的沙門(mén)氏菌歸為一組，用A、B、C、D……表示，繼Z之后，則用阿拉伯?dāng)?shù)字O51-O67表示。對(duì)溫血?jiǎng)游镏虏〉难逍痛蠖鄶?shù)都在A-E組。第30頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）抗原構(gòu)造及分類(lèi)2、H抗原為鞭毛蛋白，性質(zhì)不穩(wěn)定，濕熱60

C、15min酒精處理即被破壞。沙門(mén)氏菌H抗原有兩種，稱(chēng)第一相和第二相。前者為特異相，用a、b、c……z以后用z1、z2、z3……表示；后者為非特異相，用1、2、3、……表示。具有兩種相抗原的細(xì)菌叫雙相菌、僅有某一相者稱(chēng)為單相菌。第31頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）抗原構(gòu)造及分類(lèi)3、Vi抗原成分為不耐熱的聚－N-乙酰D－半乳糖胺醛酸。有抗吞噬作用，并保護(hù)菌體不受抗體和補(bǔ)體作用。初次分離的傷寒沙門(mén)氏菌、丙型副傷寒沙門(mén)氏菌有Vi抗原。具有Vi抗原的細(xì)菌可用Vi噬菌體分型。目前傷寒沙門(mén)氏菌的Vi噬菌體型已超過(guò)100個(gè)。第32頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（三）抵抗力在水中能存活2-3周，糞便中可活1-2個(gè)月，在冰凍土壤中可過(guò)冬。對(duì)熱耐力差，濕熱65

C經(jīng)15-20min即被殺死。5％石炭酸或1:500升汞中5分鐘殺死。膽鹽、煌綠及其它染料對(duì)沙門(mén)氏菌的抑制作用較其它腸道菌小，故可用此染料制選擇培養(yǎng)基分離培養(yǎng)。第33頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（四）變異1、H－O變異；2、S－R變異；3、V－W變異；（帶有ViAg為V菌株；丟失ViAg的為W菌株。）4、位相變異。第34頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（五）致病性本屬桿菌均有致病性，它們通常侵害幼年動(dòng)物，發(fā)生急性敗血癥、胃腸炎以及其它局部炎癥。第35頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天雛雞白痢第36頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（五）致病性據(jù)其對(duì)寄主的嗜好不同，可分兩種不同類(lèi)型：1、對(duì)寄主有專(zhuān)嗜性――它們只對(duì)某一種類(lèi)的寄主產(chǎn)生一定的疾病。（很少）2、具有廣泛寄主范圍的――能在類(lèi)以及多種畜禽中致病。（占大多數(shù)）第37頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（六）微生物學(xué)診斷第38頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天三、變形桿菌屬(Proteus)其代表菌種為普通變形桿菌（P.vulgaris）奇異變形桿菌（P.mirabills）。為廣泛分布于自然界的腐生菌，偶爾可致病。第39頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）生物學(xué)性狀G－桿菌，呈卵圓形或長(zhǎng)絲狀等多形性。第40頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）生物學(xué)性狀不形成莢膜、有鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑，有菌毛。第41頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）生物學(xué)性狀在濕潤(rùn)的固體培養(yǎng)基上呈擴(kuò)散生長(zhǎng)，于瓊脂表面形成一層波紋狀薄膜，稱(chēng)遷徙生長(zhǎng)現(xiàn)象(Swarminggrowth)。第42頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）生物學(xué)性狀本菌常為污染菌，以3％-4％瓊脂培養(yǎng)可獲得孤立菌落。本菌能分解葡萄糖，不發(fā)酵乳糖。能迅速分解尿素在鑒別是有參考價(jià)值。第43頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）致病性偶爾致牛、綿羊、山羊、犬等的幼畜腹瀉，間或致成年家畜腹瀉或犬的外耳炎，偶爾致人的下痢或食物中毒，在人的泌尿系統(tǒng)或傷口中可成為繼發(fā)感染菌。在自然界中，對(duì)有機(jī)物分解有重要作用，在實(shí)驗(yàn)室常以污染菌出現(xiàn)。第44頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、腸桿菌屬（Enterobacter）腸桿菌即產(chǎn)氣桿菌。多分布于土壤和污水中。本屬有兩個(gè)主要種：陰溝腸桿菌(Ent.cloaca)和產(chǎn)氣腸桿菌(Ent.aerogenes)，兩者均不致病，偶爾出現(xiàn)于膿液或病灶組織中。本屬菌為G－桿菌，可利用檸檬酸鹽為唯一碳源，37

C可分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，44.5

C分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。不利用衛(wèi)矛醇，V－P試驗(yàn)陽(yáng)性、M-R試驗(yàn)陰性，可緩慢液化明膠，不產(chǎn)生H2S、無(wú)鞭毛，無(wú)運(yùn)動(dòng)性。第45頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天第二節(jié)巴氏桿菌科Pasteurella是以法國(guó)微生物學(xué)家巴斯德的姓所命名的一類(lèi)桿菌，它是引起多種動(dòng)物和人類(lèi)疾病的病原菌。本屬菌在分類(lèi)學(xué)上屬巴氏桿菌科，巴氏桿菌屬與嗜血桿菌屬、放線菌屬一起作為巴氏桿菌科的成員，現(xiàn)新建立了曼氏桿菌屬、里氏桿菌屬等等。第46頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、巴氏桿菌屬（Pasteurella）菌屬的共同特征：卵圓形或短桿狀的G－菌；病料中呈兩極染色；不運(yùn)動(dòng)，不產(chǎn)生芽胞；需氧或兼性厭氧；分解糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；不凝固牛乳；不液化明膠；氧化酶陽(yáng)性。第47頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天多殺性巴氏桿菌（P.multocida)本屬細(xì)菌已有20多種，其中以多殺性巴氏桿菌最為重要，是多種畜禽的致病菌。多殺性巴氏桿菌是引起多種畜禽巴氏桿菌病的病原。1994年第九版《伯吉氏細(xì)菌鑒定手冊(cè)》列有3個(gè)亞種，即多殺亞種（P.multocidasubspl.multicida）、敗血亞種（P.multocidasubspl.septica）及殺禽亞種（P.multocidasubspl.gallicida）。第48頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天多殺性巴氏桿菌（P.multocida)本菌為主要可致動(dòng)物的出血性敗血癥和傳染性肺炎。是牛、羊、馬、兔的出敗，豬肺疫、禽霍亂等疾病的病原。第49頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）形態(tài)染色球桿狀或短桿狀，小桿菌。單在或雙排列。病料涂片呈兩極著色。新分離的強(qiáng)毒株有莢膜。G－。第50頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）培養(yǎng)及生化需氧或兼性厭氧。營(yíng)養(yǎng)要求嚴(yán)格。在血液培養(yǎng)瓊脂上形成無(wú)溶血環(huán)，濕潤(rùn)、水滴樣小菌落。血清肉湯：呈輕度渾濁，培養(yǎng)延長(zhǎng)到4－6天，則變清，沉淀物粘稠沉于底部，表面有菌環(huán)。在血清平板上培養(yǎng)24小時(shí)，形成淡灰白、邊緣整齊、表面光滑、閃光的露珠狀菌落。第51頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）培養(yǎng)及生化生化反應(yīng)：可分解葡萄糖、果糖、蔗糖、甘露醇、單奶糖等；一般不利用乳糖、鼠李糖、楊苷、山梨醇、肌醇、菊糖、側(cè)金盞花醇等；Fo型分解伯膠糖不分解木膠糖；Fg型分解木膠糖而不分解伯膠糖。吲哚試驗(yàn)陽(yáng)性，過(guò)氧化氫酶陽(yáng)性，M-R試驗(yàn)陰性，V-P試驗(yàn)陰性、不產(chǎn)生H2S，不利用明膠。第52頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（三）血清型Carter根據(jù)K抗原將其分為A、B、D、E6群；波岡、村田則根據(jù)O抗原將其分為16個(gè)型。將K、O二種抗原相結(jié)合，共組成22種血清型。我國(guó)分離的禽多殺性巴氏桿菌以5：A為多，其次為8：A；豬的以5：A和6：B為主，8：A和2：D其次；羊的以6：B為多；家兔以7：A為主，其次是5：A。C型為犬、貓的正常棲居菌，F(xiàn)型主要發(fā)現(xiàn)于火雞，致病作用不明。第53頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（四）抵抗力抵抗力不強(qiáng)：干燥空氣中，2-3天死亡；60

C20min，75

C5-10min可被殺死。在血液內(nèi)保持毒力6－10天；冷水中能保持活力達(dá)2周，廄肥中可生存一個(gè)月。本菌易自溶：在無(wú)菌蒸餾水中或生理鹽水中迅速死亡。對(duì)消毒劑敏感：3％石炭酸，千倍升汞1min可殺滅，2％來(lái)蘇兒、福爾馬林等幾分鐘就可殺滅。第54頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（五）致病性雞、鴨、鵝――禽霍亂；豬――豬肺疫；牛、兔、羊、馬等――出敗。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中，以鴿對(duì)禽源巴氏桿菌最易感染，小鼠、家兔也易感。第55頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天禽霍亂雞冠和肉髯變青紫色，有的病雞肉髯腫脹，有熱痛感。胃腸出血。第56頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（六）微生物學(xué)診斷1、鏡檢：采集標(biāo)本（滲出液、心血、肝、脾、淋巴結(jié)、骨髓等）涂片、染色（瑞氏染色或美蘭染色）、鏡檢兩極著色小桿菌。2、分離培養(yǎng)：血平板接種、溶血情況、菌落形態(tài)、生化鑒定3、動(dòng)物試驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（小鼠、鴿、兔等）接種，24－48小時(shí)后，死亡、剖檢、重新做鏡檢和細(xì)菌分離以鑒定細(xì)菌。第57頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（七）免疫和治療1、免疫：弱毒活菌苗、氫氧化鋁死菌苗、高免血清等。2、治療：抗生素。第58頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、曼氏桿菌屬（Mannheimia）1999年Angen等根據(jù)DNA雜交及16SrRNA序列的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，建議建立這個(gè)新屬，至少有7個(gè)種，其中5種已經(jīng)定名，代表菌種為溶血性曼氏桿菌（M.haemolytica）。溶血性曼氏桿菌(M.haemolytica)危害：牛羊肺炎，新生羔羊敗血癥。第59頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天溶血性曼氏桿菌(M.haemolytica)生物學(xué)特征：G－短桿菌，有呈多形性，無(wú)運(yùn)動(dòng)性，兩極著色，莢膜有時(shí)看不到。營(yíng)養(yǎng)要求同多殺性巴氏桿菌。固體培養(yǎng)上，呈圓形、光滑、濕潤(rùn)、帶熒光。血平板上溶血明顯，多次傳代后溶血性可消失。在羔羊血瓊脂上可生成雙溶血環(huán)（內(nèi)

、外

），在麥康凱平板上，生長(zhǎng)緩慢，長(zhǎng)成紅色菌落。第60頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天溶血性曼氏桿菌(M.haemolytica)本菌可分解葡萄糖、麥芽糖、肌醇、棉子糖、淀粉和乳糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；不分解側(cè)金盞花醇、赤蘚醇和菊糖；對(duì)衛(wèi)矛醇、甘油、鼠李糖發(fā)酵不定。本菌吲哚試驗(yàn)、尿素利用試驗(yàn)、明膠試驗(yàn)均為陰性；紫乳變酸且凝固。本菌按其生化反應(yīng)和致病性可分為A和T兩個(gè)生物型（Biotypes），又按其莢膜抗原用間接血凝反應(yīng)可區(qū)分為12個(gè)血清型(serotypes)。第61頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天三、里氏桿菌屬（Riemerella）鴨疫里氏桿菌是本屬的代表種，原名鴨疫巴氏桿菌。1991年Rossau等和Segers等先后證實(shí)，該菌與巴氏桿菌的rRNA不同源，建議并得到認(rèn)可，建立了里氏桿菌新屬，具體歸屬哪科還未定。鴨疫里氏桿菌（R.anatipestifer）鴨疫里氏桿菌是雛鴨傳染性漿膜炎的病原，可引起1~8周齡、尤其是2~3周齡雛鴨大批發(fā)病死亡，生長(zhǎng)發(fā)育受阻等。第62頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天1、形態(tài)及染色菌體呈桿狀或橢圓形，大小0.3~0.5um×0.7~6.5um，偶見(jiàn)長(zhǎng)絲狀，長(zhǎng)11~24um。多為單個(gè)，少數(shù)成雙或短鏈狀排列?？尚纬汕v膜，無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛。瑞氏染色可見(jiàn)兩極著色。革蘭氏染色陰性。第63頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天2、培養(yǎng)及生化特性-培養(yǎng)本菌營(yíng)養(yǎng)要求較高，普通培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)。初次分離培養(yǎng)需要5%~10%的CO2。在巧克力或胰蛋白胨大豆蛋胨瓊脂（TSA）平板上，CO2培養(yǎng)箱或蠟燭缸中，37℃培養(yǎng)24~48h，生長(zhǎng)的菌落無(wú)色素，呈圓形、微突起、表面光滑、奶油樣，直徑1~2mm。在含血清或胰蛋白胨酵母的肉湯中，37℃48h培養(yǎng)，呈上下一致輕微渾濁，管底有少量沉淀。第64頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天2、培養(yǎng)及生化特性-生化特征本菌不發(fā)酵葡萄糖、蔗糖，可與多殺性巴氏桿菌區(qū)別。也不發(fā)酵半乳糖、乳糖、果糖、木糖、蕈糖、甘露醇、山梨醇、甘露糖和棉實(shí)糖。極少數(shù)菌株發(fā)酵麥牙糖或肌醇。靛基質(zhì)、硝酸鹽還原、檸檬酸鹽利用、V-P試驗(yàn)、M-R試驗(yàn)、硫化氫產(chǎn)生、尿素分解等均為陰性。氧化酶、觸酶試驗(yàn)為陽(yáng)性。多不溶血，多液化明膠，G+C多為35mol%。第65頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天3、血清型目前比較復(fù)雜，1991年Sandhu等其統(tǒng)一并為19個(gè)型，以阿拉伯?dāng)?shù)字定名，1995年泰國(guó)發(fā)現(xiàn)20、21型。我國(guó)以1型為主。

4、抵抗力本菌抵抗力不強(qiáng)。鮮血培養(yǎng)基上置4℃冰箱保存容易死亡，通常4~5d要傳代一次。對(duì)多種抗生素敏感，但易產(chǎn)生耐藥性。第66頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天5、致病性與免疫性本菌可引起鴨傳染性漿膜炎，雞、鵝、火雞及野生水禽也可發(fā)生。兔和小鼠不易感。本菌具有較好的免疫原性，可制備滅活菌苗免疫，效果尚可。第67頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天6、微生物學(xué)診斷取發(fā)病初期病鴨腦及心血，用巧克力培養(yǎng)基容易分離到本菌。肝、脾分離率低。第68頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、放線桿菌屬(Actinobacillus)對(duì)家畜有致病性的有：豬胸膜肺炎放線桿菌（A.pleuropneumoniae,APP）。林氏放線桿菌（A.ligniersii）；駒放線桿菌(A.equuli)；第69頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌（APP）本菌原為豬胸膜肺炎嗜血桿菌(Haemophiluspleuropneumoniae)或副溶血嗜血桿菌(H.Parahaemolyticus)，但經(jīng)DNA雜交試驗(yàn)表明，本菌與林氏放線菌有很高的同源性，因此在1983年起改為現(xiàn)名。本菌可引起豬傳染性胸膜肺炎，是集約豬場(chǎng)常見(jiàn)的傳染病之一。第70頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌1、形態(tài)染色小球桿菌，具多形態(tài)，新鮮病料呈兩極染色，有莢膜和鞭毛，具運(yùn)動(dòng)性。第71頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌2、培養(yǎng)兼性厭氧，置10%CO2中可長(zhǎng)出黏液型菌落。生長(zhǎng)溫度：37℃。普通培養(yǎng)基上不長(zhǎng)，需添加V因子，常用巧克力培養(yǎng)基培養(yǎng)。在綿羊血平板上，可產(chǎn)生穩(wěn)定的溶血，金黃色葡萄球菌可增強(qiáng)其溶血圈（CAMP試驗(yàn)+）第72頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌3、抗原性根據(jù)其莢膜多糖及LPS的抗原性差異，將本菌分為15個(gè)血清型，其中1型和5型又分1a、1b及5a、5b兩亞型。根據(jù)對(duì)NADI的依賴(lài)性，又可分為：生物I型：依賴(lài)NDAI，包括1~12、15血清型；生物II型：不依賴(lài)NDAII，包括13、14血清型。毒力：1、5、9、11型最強(qiáng)，3、6型毒力較低。第73頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌4、致病性與免疫性豬是本菌高度專(zhuān)一的宿主，寄生在豬肺壞死灶內(nèi)或扁桃體，較少在鼻腔。慢性感染豬或康復(fù)豬為帶菌者。小于6月齡仔豬最易感。毒素是本菌最重要的毒力因子，不同血清型的菌株可產(chǎn)生細(xì)胞毒素：Apx，是一種穿孔素，有ApxI、ApxII、ApxIII和ApxIV四種。ApxIV存在于所有血清型中。第74頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌人工感染APP在19h死亡口中流出血樣滲出物。第75頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌肺充血水腫，有纖維素性滲出物第76頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌整個(gè)肺表面纖維素性滲出物與胸膜中隔膜發(fā)生粘連第77頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌5、微生物學(xué)診斷取病死豬肺壞死組織、胸水、鼻及氣管滲出物做涂片，顯微鏡檢查兩極著色球桿菌。確診：取上述病料接種巧克力培養(yǎng)基或綿羊血瓊脂，置5%CO237℃培養(yǎng)過(guò)夜。第78頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌如有可疑菌落，進(jìn)一步做CAMP試驗(yàn)，檢查其脲酶活性及甘露醇發(fā)醇能力。第79頁(yè),共87頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）林氏放線桿菌（A.ligniersii）為牛