動藥生物制品考試重點

生物制品學(xué)：是在微生物學(xué)、免疫學(xué)和傳染病學(xué)的根底上，承受生物學(xué)、生物化學(xué)及生物工程學(xué)等技術(shù)和方法，爭論和制備生物制品，用于解決人、畜疫病防治的一門興應(yīng)用學(xué)科。生物制品：依據(jù)免疫學(xué)原理，利用微生物、寄生蟲及其代謝產(chǎn)物或免疫應(yīng)答產(chǎn)物〔血清〕等為原料，承受生物學(xué)、生物化學(xué)以及生物工程學(xué)的方法加工制成的、用于傳染病或其它有關(guān)疾病的預(yù)防、診斷和治療的生物制劑傳染?。杭磦魅拘约膊。怯刹≡w引起的、能在人與人、動物與動物或人與動物之間相互傳染的疾病。基因缺失疫苗:利用基因工程技術(shù)，在DNA水平上造成毒力有關(guān)基因的缺失或突變，即切去基因組中編碼致病性物質(zhì)的某一片段核苷酸序列或使其突變，使該微生物致病性喪失，但仍保持其免疫原性及復(fù)制力量。凍干:又稱冷凍真空枯燥或冷凍枯燥。是將含有大量水分的生物活性物質(zhì)，經(jīng)預(yù)先凍結(jié)成固體，再在真空和低溫條件下使固體水分子直接升華成水蒸氣，最終使生物活性物質(zhì)形成疏松多孔狀、體積不變的枯燥制品，這一過程稱冷凍枯燥，簡稱凍干。酶標(biāo)二抗:酶標(biāo)抗體是指與底物結(jié)合后能顯色的酶與抗體連接后所制備的結(jié)合物。酶標(biāo)二抗即酶標(biāo)記的抗抗體〔抗異種動物的抗體。如兔抗豬酶標(biāo)二抗、兔抗雞酶標(biāo)二抗。GMP類毒素:細(xì)胞在生長生殖過程中所產(chǎn)生的外毒素，經(jīng)化學(xué)藥品〔0.3-0.4%甲醛〕處理后，成為無毒性而保存其免疫原性的生物制劑。免疫佐劑:但凡可以增加抗原特異性免疫應(yīng)答的物質(zhì)均稱為佐劑,也稱免疫佐劑。DNA疫苗：又稱核酸疫苗，是應(yīng)用基因工程技術(shù)將編碼某種抗原蛋白質(zhì)的外源基因與載體重組后直接導(dǎo)入動物體內(nèi)，利用免疫原基因在宿主體內(nèi)表達(dá)出的抗原蛋白質(zhì)引起機體的免疫應(yīng)答，以到達(dá)預(yù)防和治療疾病的目的。滅活:指破壞或殺滅微生物使其成為無生命物質(zhì)的過程，即破壞微生物的生物學(xué)活性、生殖力量及致病性，但盡可能保存其免疫原性。基因工程亞單位疫苗：指利用基因工程技術(shù)所構(gòu)建的重組表達(dá)載體在高效表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)出來的強毒病原體的某種免疫原性成分而制成的疫苗。類毒素：又稱脫毒毒素，細(xì)胞在生長生殖過程中所產(chǎn)生的外毒素，經(jīng)化學(xué)藥品〔如0.3-0.4%甲醛〕處理后，成為無毒性而保存其免疫原性的生物制劑。多聯(lián)疫苗：指利用不同種微生物的增殖培育物或其代謝產(chǎn)物，按免疫學(xué)原理、方法組合而成的疫苗。凍干：凍干又稱冷凍真空枯燥或冷凍枯燥。是將含有大量水分的生物活性物質(zhì)，經(jīng)預(yù)先凍結(jié)成固體，再在真空和低溫條件下使固體水分子直接升華成水蒸氣，最終使生物活性物質(zhì)形成疏松多孔狀、體積不變的枯燥制品，這一過程稱冷凍枯燥，簡稱凍干。滅活疫苗：又稱死苗，以含有細(xì)菌和病毒的材料利用物理的或化學(xué)的方法處理，使其失去感染性或毒性而保存其免疫原性，接種機體后能產(chǎn)生自動免疫，預(yù)防疫病的一類生物制品。高免血清：為含有高效價特異性抗體的血清制劑。即動物經(jīng)反復(fù)屢次地免疫后，機體的體液尤其是血清中就產(chǎn)生大量抗此中抗原的抗體，實行次此種動物的血液分別所得血清，即為高免血清、免疫血清、抗血清。二填空人工獲得弱毒株的途徑有化學(xué)途徑、物理途徑和生物途徑三種。依據(jù)生物制品生產(chǎn)的性質(zhì)，可將其分為疫苗、類毒素、診斷制品、抗病血清、微生態(tài)制劑和副免疫產(chǎn)品六大類。破傷風(fēng)類毒素是將破傷風(fēng)桿菌所產(chǎn)生的外毒素經(jīng)過化學(xué)制品處理而制成的一種具有免疫原性生物制劑。生物制品生產(chǎn)中，培育病毒的方法有動物培育法、細(xì)胞培育法和雞胚培育法 三種。屬于人工主動免疫用的生物制品有類毒素和疫苗抗體、抗毒素血清及高免卵黃液等，主要用于發(fā)病時的緊急性免疫接種和治療。細(xì)胞的培育方法有靜置培育、轉(zhuǎn)瓶培育、懸浮培育、微載體培育、中空纖維培育法和微囊化技術(shù)培育法六大類。在滅活疫苗的制備過程中，最常用的滅活劑是甲醛。在破傷風(fēng)抗毒素的精制過程中常參加胃蛋白酶對制品進展處理其作用是將H鏈從鉸鏈區(qū)二硫鍵的近C端切斷獲得兩個大小不同的片段 。生物制品生產(chǎn)中，培育病毒的方法有動物培育法、細(xì)胞培育法和雞胚培育法三種。依據(jù)佐劑在體內(nèi)存留時間的長短，可將免疫佐劑分為儲存型佐劑和非儲存型佐劑兩大類，常用的白油佐劑、Al(OH)3膠均屬于儲存型佐。診斷液包括診斷抗原和診斷抗體兩大類。三、簡答題1．單價疫苗、多價疫苗和多聯(lián)疫苗有何不同？答：一、制備不同：1〕單價苗是利用同一種微生物菌〔毒〕株或同一種微生物菌〔毒〕株的單一血清型菌〔毒〕株的增殖培育物制備。2〕多價苗是用同一種微生物中假設(shè)干血清型菌〔毒〕株的增殖培育物制備。3〕多聯(lián)苗是利用不同微生物增殖培育物，按免疫學(xué)原理和方法組合而成。二、接種后的效果不同：1〕作用，而不能使免疫動物獲得完全的免疫保護。2〕多價苗能是免疫動物獲得完全的保護力，且可在不同地區(qū)使用。3〕多聯(lián)苗接種動物后，能產(chǎn)生對相應(yīng)疾病的免疫保護，具有削減接種次數(shù)和使用便利等優(yōu)點，具有一針防多病的生物制劑。2．凝集反響抗原和沉淀反響抗原各有何特點？對于可溶性抗原假設(shè)欲應(yīng)用于凝集試驗，該怎麼處理？答：凝集反響抗原是顆粒性抗原，在有電解質(zhì)存在條件下，能與特異性抗體結(jié)合，形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象。沉淀反響抗原為膠體狀態(tài)的可溶性抗原，與相應(yīng)抗體相遇，在兩者比例適宜并有電解質(zhì)存在時，抗原抗體相互交聯(lián)形成免疫復(fù)合物達(dá)肯定大時，即消滅肉眼可見的沉淀。沉淀抗原是細(xì)胞浸出成分，為微小的膠體溶液，體積小而總面積大，反響時需要的抗體量多。制備時先取可溶性抗原，然后將抗原應(yīng)用物理吸附/化學(xué)偶聯(lián)的方法連接在顆粒性載體〔紅細(xì)胞、乳膠、炭〕上，制成間接凝集抗原，用于正向間接凝集反響〔被動凝集反響〕。3．欲制備兔抗雞〔二抗〕高免血清，試設(shè)計一制備方案〔免疫程序〕，并舉例說明其在免疫學(xué)診斷中的具體應(yīng)用。制備程序：實行雞血、分別IgGIgG接種于家兔〔一般３次，每次間隔１０天左右，劑量遞增〕→最終一次注射后１０左右采血檢測其瓊擴效價，達(dá)１：３２－６４以上時，大量采血，分別血清，即得到兔抗雞高免血清。高效價特異性兔抗雞〔二抗〕高免血清在雞病的診斷和抗體檢測中具有格外重要的作用，主要用于酶聯(lián)免疫吸附試驗〔ELISA)。4答：加溫枯燥：經(jīng)預(yù)凍后即進入真空枯燥階段。該過程分兩個階段。①升華枯燥階段：加溫使制品溫度到達(dá)共熔點溫度，在共熔點溫度下將凍結(jié)物質(zhì)中的水分除去的過程稱為升華，即升華枯燥階段。在升華枯燥階段可除去85%以上的水分。②解吸枯燥階段：使與物質(zhì)結(jié)合的水分子通過加25-3015-30Pa下進展解吸枯燥。此階段可除10%的水分5.生物制品生產(chǎn)中培育細(xì)菌的方法有哪幾種?各有何特點？答：有固體外表培育法；液體靜置培育法；液體深層通氣培育法；透析培育法。固體外表培育法：可依據(jù)需要調(diào)整細(xì)菌濃度，但產(chǎn)量低，勞動強度大。液體靜置培育法：操作簡便，但細(xì)菌數(shù)量一般不高。液體深層通氣培育法：加速細(xì)菌分裂生殖，縮短培育時間，提高細(xì)菌數(shù)量。透析培育法：培育基和培育液可獨立掌握；可以攪拌和通氣；可使用任何類型的透析膜和濾膜；液體在透析器中的流向和流速可以把握；可將每個局部按比例縮小和放大，有利于制備高效力的生物制品。四、問答題1.簡述常規(guī)疫苗的種類和特點答:常規(guī)疫苗包括滅活疫苗〔死苗〕和活疫苗。死苗：是以含細(xì)菌、病毒的材料，用物理化學(xué)方法處理，使之失去感染性或毒性而保存免疫原性，接種后能使機體產(chǎn)生自動免疫，預(yù)防疾病的生物制品。優(yōu)點:1〕安全，不存在返祖返強、散毒，從而造成疫源的危急；2〕易保存、運輸，不許低溫保存及特別運輸條件；3〕穩(wěn)定，便于制備多價或多聯(lián)苗；4〕對母源抗體的干擾作用不敏感。2〕免疫途徑受限，一般需注射；3〕不加佐劑效果差，免疫期短；4〕不產(chǎn)生局部免疫，主要產(chǎn)生體5〕用量大，價格較貴?；钜呙纾喝斯ふT變的弱毒株或篩選出的自然弱毒株制成，弱毒株對原宿主喪失致病力或亞臨床感染，但仍保存免疫原性和遺傳特性?？啥嗤緩浇臃N，如滴鼻、點眼、口服等；3〕可引起整個免疫應(yīng)答，局部免疫及全身免疫；〔4〕本錢低，價格廉價。缺點：1〕具有返祖返強的危急。殘毒在自然界動物群中持續(xù)傳遞后有毒力增加的危急。2〕剩余毒力問題；3〕需要低溫、冷暗運輸貯存；4〕存在不同抗原，母源抗體干擾，影響免疫效果；5〕污染，生產(chǎn)過程中易造成其他病毒的污染。2．今有一豬場反復(fù)發(fā)生鏈球菌病，應(yīng)用商品疫苗及多種藥物均不能有效掌握，現(xiàn)欲制備自家滅活疫苗，如何制備？請詳述之。從發(fā)病仔豬中分別大量馬丁肉湯培育基，參加量為1%，37℃24h→純粹檢驗、計數(shù)→參加0.1%甲醛，37℃7-12h→參加菌液:Al(OH)3=5:1Al(OH)3，混勻，置室溫24h，棄去適量上清液→混勻、分裝。何謂單克隆抗體？簡述其制備原理及根本制備程序。答：單抗：由一個B細(xì)胞克隆分化增殖的子代細(xì)胞所產(chǎn)生的針對單一抗原打算簇的抗體?！?5分〕答：概念：由一個B細(xì)胞克隆分化增殖的子代細(xì)胞所產(chǎn)生的針對單一抗原打算簇的抗體制備原理：McAbMcAb。〔1〕應(yīng)用抗原反復(fù)免疫小鼠，使其B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體2〕從免疫小鼠分別脾細(xì)胞3〕將免疫脾細(xì)胞與小鼠骨G4〕融合細(xì)胞的篩選：融合后轉(zhuǎn)移到T選擇培育基〔含有次黃嘌呤H、氨基喋呤A〕和胸腺嘧啶核苷TA的主要途徑被氨基喋呤阻斷，又因缺乏次黃嘌呤HGPRTDNAHGPRTHAT培育基中存活和〔5〕雜交瘤細(xì)胞的克隆化：一方面是保證以后獲得的雜交瘤細(xì)胞是由一個細(xì)胞增殖而來的，即單個克隆，另一方面防止雜交瘤細(xì)胞因染色體喪失而喪失分泌抗體的力量，常用方法有有限稀釋法，顯微操