血流感染實驗室的診斷

血流感染實驗室的診斷1血流感染概述2自動化血培養(yǎng)系統(tǒng)3標本采集和運送4陽性報警后處理方法5如何判斷是否污染第2頁,共29頁，2024年2月25日，星期天一、血流感染概述第3頁,共29頁，2024年2月25日，星期天（一）血流感染的定義血流感染（bloodstreaminfections,BSI）是指各種病原微生物侵入血循環(huán)，釋放毒素和代謝產(chǎn)物，并誘導(dǎo)細胞因子釋放，對機體所有臟器造成損害，嚴重者可導(dǎo)致休克、多臟器衰竭、彌散性血管內(nèi)凝血，甚至死亡，是一種嚴重的全身感染性疾病。第4頁,共29頁，2024年2月25日，星期天（二）血流感染的類型菌血癥（bacteremia）：細菌侵入血流，尚未大量繁殖且未引發(fā)臨床癥狀，往往是一過性的。敗血癥（septicemia）：細菌進入血液大量繁殖，分泌毒素或代謝產(chǎn)物，產(chǎn)生嚴重的臨床癥狀。膿毒敗血癥（pyemia）：細菌進入血液大量繁殖，分泌毒素或代謝產(chǎn)物，產(chǎn)生嚴重的臨床癥狀，常伴有多發(fā)性膿腫或敗血性休克。毒血癥（toxemia）：細菌毒素或代謝產(chǎn)物進入血液引起的臨床病癥。第5頁,共29頁，2024年2月25日，星期天（三）血培養(yǎng)的現(xiàn)狀送檢率低送檢量（瓶/日）床位中國大陸三甲醫(yī)院20～501000中國香港瑪麗醫(yī)院2001400中國臺灣臺大醫(yī)院3002000美國JohnHopinks300～4001039第6頁,共29頁，2024年2月25日，星期天（三）血培養(yǎng)的現(xiàn)狀不正確采樣污染問題皮膚定植菌群是血培養(yǎng)污染的最常見細菌。陽性檢出率低檢驗周期長

第7頁,共29頁，2024年2月25日，星期天二、全自動血培養(yǎng)系統(tǒng)第8頁,共29頁，2024年2月25日，星期天二、自動化血培養(yǎng)系統(tǒng)我院使用的是BacT/ALERT3D全自動細菌、分枝桿菌培養(yǎng)系統(tǒng)工作原理：細菌在培養(yǎng)基中代謝基質(zhì)時產(chǎn)生CO2,并水解成H+，H+透過瓶底濾過膜，瓶底乳膠感應(yīng)器顏色由墨綠色變成黃色。第9頁,共29頁，2024年2月25日，星期天二、自動化血培養(yǎng)系統(tǒng)儀器培養(yǎng)孔底的光電探測器測量反射光變化并按相應(yīng)公式計算。判讀公式：加速度法速率法起始閾值法第10頁,共29頁，2024年2月25日，星期天三、標本采集和運送第11頁,共29頁，2024年2月25日，星期天（一）標本采集采集時間1.盡可能在抗菌藥物使用前；2.對已經(jīng)使用抗菌藥物的病人，最好在下次用藥前采集；3.寒戰(zhàn)和發(fā)熱初起時采血可提高培養(yǎng)陽性率，心內(nèi)膜炎（持續(xù)性菌血癥）例外；4.懷疑血流感染時應(yīng)盡早采血，不要強調(diào)體溫超過39℃才抽血，而錯過時機。第12頁,共29頁，2024年2月25日，星期天（一）標本采集寒戰(zhàn)后體溫高峰前細菌含量最高。血液細菌含量隨著體溫從最高峰逐漸下降而越來越少。血液采樣的最佳時間是在寒戰(zhàn)后和發(fā)熱高峰前，此時陽性檢出率最高。第13頁,共29頁，2024年2月25日，星期天（一）標本采集采血量成人采血量為5～10ml/瓶，分別采取需氧瓶和厭氧瓶，雙部位抽血。兒童采血量為3～5ml/瓶，采取兒童瓶。第14頁,共29頁，2024年2月25日，星期天（二）標本運送采血后的血培養(yǎng)瓶應(yīng)立即送檢，不得超過2h。不能放入冰箱或冷凍，有些苛養(yǎng)菌如肺炎鏈球菌、腦膜炎奈瑟菌等遇冷很容易死亡。如在培養(yǎng)之前不得不放置一段時間，應(yīng)置于室溫。第15頁,共29頁，2024年2月25日，星期天四、陽性報警后處理方法第16頁,共29頁，2024年2月25日，星期天血培養(yǎng)陽性報警后，如何處理？觀察培養(yǎng)曲線涂片、轉(zhuǎn)種血平板革蘭染色鏡檢報告危急值若革蘭染色鏡檢未發(fā)現(xiàn)細菌，怎么辦？重新涂片，作瑞氏染色以培養(yǎng)曲線作初步判斷是否假陽性，次日觀察血平板上是否生長第17頁,共29頁，2024年2月25日，星期天第18頁,共29頁，2024年2月25日，星期天第19頁,共29頁，2024年2月25日，星期天陽性曲線第20頁,共29頁，2024年2月25日，星期天陰性曲線第21頁,共29頁，2024年2月25日，星期天假陽性曲線第22頁,共29頁，2024年2月25日，星期天五、如何判斷是否污染？第23頁,共29頁，2024年2月25日，星期天五、如何判斷是否污染？（一）陽性檢出瓶數(shù)（二）細菌種類（三）陽性檢出時間（四）重復(fù)培養(yǎng)結(jié)果第24頁,共29頁，2024年2月25日，星期天（一）陽性檢出瓶數(shù)兩瓶血培養(yǎng)，檢出一瓶，考慮污染兩瓶血培養(yǎng)，檢出兩瓶，即使是凝固酶陰性的葡萄球菌，也應(yīng)考慮為致病菌第25頁,共29頁，2024年2月25日，星期天（二）細菌種類檢出金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌及其他腸桿科細菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌時，90%以上是致病菌。檢出化膿性鏈球菌、無乳鏈球菌、產(chǎn)單核細胞李斯特菌、腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血桿菌、新生隱球菌及其他假絲酵母菌，污染的可能性更低。檢出棒桿菌、微球菌、氣球菌、芽胞桿菌、凝固酶陰性葡萄球菌，污染的可能性很大。第26頁,共29頁，2024年2月25日，星期天（三）陽性檢出時間陽性檢出時間與血標本中含菌量呈反比關(guān)系。陽性報警出現(xiàn)時間小于24h，一般為血流感染大于48h，多為污染第27頁,共29頁，2024年2月25日，星期