第十四單元 生物技術(shù)實踐（作業(yè)）

第十四單元生物技術(shù)實踐

1.（2019北京卷?3）篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，若細菌能分解淀

粉，培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理，會出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈（如圖），實驗結(jié)果見下表。

菌種菌落直徑：c（m透明圈直徑：H（mm）H/C

m）

細菌I5.111.22.2

細菌II8.113.01.6

有關(guān)本實驗的敘述，簿送的是

A.培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營養(yǎng)物質(zhì)

B.篩選分解淀粉的細菌時，菌液應(yīng)稀釋后涂布

C.以上兩種細菌均不能將淀粉酶分泌至細胞外

D.H/C值反映了兩種細菌分解淀粉能力的差異

【答案】C

【解析】

【分析】該選擇培養(yǎng)基上的唯一碳源是淀粉，只有能利用淀粉的微生物才能存活，微生物分解淀粉后，

會產(chǎn)生透明圈。

【詳解】培養(yǎng)基一般含有碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子等成分，A正確；篩選淀粉分解菌時，需

要對菌液進行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，B正確；

由題意可知，兩種菌均會產(chǎn)生透明圈，說明兩種菌均可以產(chǎn)生淀粉酶并分泌到細胞外分解淀粉，C錯誤;

H/C越大，說明該淀粉分解菌分解淀粉的能力越強，D正確。因此，本題答案選C。

2.（2019江蘇卷?9）下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述，正確的是

A,利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵

B.家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵

C.果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果酒制作過程中情況相反

D.毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶和纖維素酶參與腐乳發(fā)酵

【答案】B

【解析】

【分析】

制作果酒的酵母菌的代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型，制作酸奶的乳酸菌屬于厭氧菌，只能在無氧條件下繁

殖，制作果醋的醋酸菌的代謝類型是異養(yǎng)需養(yǎng)型；腐乳是用豆腐發(fā)酵制成，多種微生物參與發(fā)酵，其中

起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌具發(fā)達的白色菌絲。毛霉等微生物產(chǎn)生的以蛋白酶為主各種

酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。

【詳解】乳酸菌是一種嚴格的厭氧菌，有氧氣存在時，其發(fā)酵會受到抑制，因此利用乳酸菌制作酸奶的

過程中，應(yīng)一致處于密閉狀態(tài)，否則會導(dǎo)致發(fā)酵失敗，A錯誤；家庭制作果酒、果醋與腐乳過程中所用

的菌種均來源于自然環(huán)境，有多種微生物參與發(fā)酵過程，因此均不是純種發(fā)酵，B正確；果醋制作過程

中，醋酸菌有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳和水，二氧化碳溶于水形成碳酸，隨著二氧化碳濃度的增加，溶液的

pH逐漸降低；果酒制作過程中，酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳與酒精，二氧化碳溶于水形成碳酸，隨

著二氧化碳濃度的增加，溶液的pH逐漸降低，因此果酒、果醋制作過程中溶液的pH都是逐漸降低，C

錯誤；毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶參與腐乳發(fā)酵，D錯誤。

3.（2019江蘇卷?10）下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的敘述，錯誤的是

A.用同樣方法從等體積兔血和雞血中提取的DNA量相近

B.DNA析出過程中，攪拌操作要輕柔以防DNA斷裂

C.預(yù)冷的乙醇可用來進一步純化粗提的DNA

D.用二苯胺試劑鑒定DNA需要進行水浴加熱

【答案】A

【解析】

【分析】DNA粗提取選材的標準：DNA含量高，并且材料易得.由于哺乳動物成熟的紅細胞中沒有細

胞核和細胞器，因此不采用哺乳動物的血液。

DNA粗提取和鑒定的原理：1、DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶

解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質(zhì)

溶于酒精。

2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。3、DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被

染成藍色。

【詳解】兔屬于哺乳動物，其紅細胞沒有細胞核及各種細胞器，提取不到DNA,而雞屬于鳥類，其紅

細胞內(nèi)含有細胞核與各種細胞器，DNA含量較多，A錯誤；DNA分子從細胞中被釋放出來且除去蛋白

后是非常容易斷裂的，如果太過劇烈的攪拌，DNA鏈可能會被破環(huán)，因此輕柔攪拌的目的是為了獲得較

完整的DNA分子，B正確；在冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低，DNA的沉淀量最大。如果用

熱的95%酒精會提高DNA的溶解度，不能完全使DNA沉淀，C正確；將析出的DNA溶解在2moi/L的

NaCl溶液中，加入二苯胺試劑后需要水浴加熱才會呈現(xiàn)藍色，D正確。

4.（2019江蘇卷?13）下列關(guān)于加酶洗滌劑的敘述，錯誤的是

A.加酶洗衣粉中一般都含有酸性脂肪酶

B.用加酶洗滌劑能減少洗滌時間并節(jié)約用水

C.含纖維素酶洗滌劑可以洗滌印花棉織物

D.加酶洗衣粉中的蛋白酶是相對耐高溫的

【答案】A

【解析】

【分析】

加酶洗衣粉指含有酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有四類：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶。

其中，應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

【詳解】加酶洗衣粉中應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶，A錯誤；加酶洗衣粉含

酶制劑，酶具有高效性，故可以節(jié)約洗滌時間，B正確；棉織物的主要成分是纖維素，纖維素酶可以使

織物更蓬松，有利于洗去污漬，C正確；科學(xué)家通過基因工程生產(chǎn)出了耐酸、耐堿、忍受表面活性劑和

較高溫度的酶，制作加酶洗衣粉，D正確。故選A。

5.（2019江蘇卷?19）下列關(guān)于產(chǎn)纖維素酶菌分離及運用的敘述，不合理的是

A,篩選培養(yǎng)基中應(yīng)含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生長營養(yǎng)

B.可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌

C.在分離平板上長出的菌落需進一步確定其產(chǎn)纖維素酶的能力

D.用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈可提高其飼用價值

【答案】A

【解析】

【分析】

纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖昔酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種

酶將纖維二糖分解成葡萄糖。

【詳解】應(yīng)該用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌，只有纖維素分解菌能夠存活，A錯誤;

木材、秸稈中富含纖維素，故可以從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌，B正確；用以纖維素

為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌后，為了確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素

酶的實驗，c正確；用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈，可以把纖維素分解成葡萄糖，提高飼用價值,

D正確。故選A。

6.（2019江蘇卷?20）為探究矮牽牛原生質(zhì)體的培養(yǎng)條件和植株再生能力，某研究小組的實驗過程如下圖。

下列敘述正確的是

A.過程①獲得的原生質(zhì)體需懸浮在30%蔗糖溶液中

B.過程②需提高生長素的比例以促進芽的分化

C.過程③需用秋水仙素處理誘導(dǎo)細胞壁再生

D.原生質(zhì)體雖無細胞壁但仍保持細胞的全能性

【答案】D

【解析】

【分析】

由圖可知，①用纖維素酶和果膠酶處理得到原生質(zhì)體的過程；②③再分化。

【詳解】原生質(zhì)體在30%的蔗糖溶液中會失水皺縮，A錯誤；②誘導(dǎo)芽分化時，需要提高細胞分裂素的

比例，B錯誤；③可以表示誘導(dǎo)根的分化形成幼苗，此時細胞壁已經(jīng)形成，C錯誤；原生質(zhì)體無細胞壁,

但由于含有一整套的遺傳物質(zhì)，故具有全能性，D正確。故選D。

【點睛】植物組織培養(yǎng)時植物激素處理的不同處理：生長素與細胞分裂素比例適中時，有利于愈傷組織

的形成；生長素/細胞分裂素比例升高，利于根的分化；生長素/細胞分裂素比例降低，利于芽的分化。

7.（2018北京卷?4）以下高中生物學(xué)實驗中，操作不正確的是

A.在制作果酒的實驗中，將葡萄汁液裝滿整個發(fā)酵裝置

B.鑒定DNA時，將粗提產(chǎn)物與二苯胺混合后進行沸水浴

C.用蘇丹III染液染色，觀察花生子葉細胞中的脂肪滴（顆粒）

D.用龍膽紫染液染色，觀察洋蔥根尖分生區(qū)細胞中的染色體

【答案】A

【解析】在制作果酒的實驗中，葡萄汁液不能裝滿發(fā)酵裝置，要留出1/3的空間，A錯誤；在DNA鑒

定實驗中，DNA遇二苯胺（沸水?。境伤{色，B正確；用蘇丹III染液可以把花生子葉細胞中的脂肪顆

粒染成橘黃色，c正確；用龍膽紫染液能將細胞中的染色體染成深紫色，在洋蔥根尖分生區(qū)細胞中能清

晰地觀察到，D正確。

8.（2018江蘇卷?8）花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。下圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖，下

列敘述正確的是

A.為了防止微生物污染，過程①所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30min

B.過程②的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細胞分裂素以利于根的分化

C.過程③逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體

D.過程④應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上

【答案】C

【解析】植物組織培養(yǎng)過程應(yīng)該在無菌的條件下進行，因此過程①所用的花藥需在70%乙醇中浸泡

lOmin,以防止雜菌污染，A錯誤；過程②的培養(yǎng)基中需添加比值適中的細胞分裂素和生長素，以利于

形成愈傷組織，B錯誤；過程③得到的植株是經(jīng)過花藥離體培養(yǎng)和秋水仙素處理的，因此可篩選獲得純

合的二倍體，C正確；過程④獲得的植株可以進行光合作用了，因此培養(yǎng)基中不需要加入蔗糖，D錯誤。

9.（2018江蘇卷?14）下列關(guān)于酵母細胞固定化實驗的敘述，正確的是

A.用溫水使海藻酸鈉迅速溶解，待其冷卻到室溫后用于包埋細胞

B.進行包埋時，用于懸浮細胞的CaCb溶液濃度要適宜

C.注射器（或滴管）出口應(yīng)盡量貼近液面以保證凝膠珠成為球狀

D.包埋酵母細胞的凝膠珠為淡黃色半透明狀，并具有一定的彈性

【答案】D

【解析】在酵母細胞固定化實驗中，應(yīng)該用小火、間斷加熱的方式使海藻酸鈉緩慢溶解，A錯誤；將混

合液用注射器緩慢滴加到CaCl2溶液進行固定化酵母細胞，CaCl2的作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠，B

錯誤；注射器（或滴管）出口應(yīng)與液面保持適當(dāng)?shù)木嚯x，以保證凝膠珠成為球狀，C錯誤；包埋酵母細

胞的凝膠珠為淡黃色半透明狀，并具有一定的彈性，D正確。

10.（2018江蘇卷?16）某高校采用如圖所示的發(fā)酵罐進行葡萄酒主發(fā)酵過程的研究，下列敘述錯誤的是

A.夏季生產(chǎn)果酒時，常需對罐體進行降溫處理

B.乙醇為揮發(fā)性物質(zhì)，故發(fā)酵過程中空氣的進氣量不宜太大

C.正常發(fā)酵過程中罐內(nèi)的壓力不會低于大氣壓

D.可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時終止發(fā)酵

【答案】B

【解析】根據(jù)以上分析已知，果酒發(fā)酵的適宜溫度為18C-25C,因此夏季生產(chǎn)果酒時，常需對罐體進

行降溫處理，A正確；乙醇是酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物，因此分解過程中不需要通入空氣，B錯誤；無

氧呼吸產(chǎn)生了二氧化碳，但是沒有消耗氧氣，因此發(fā)酵罐中的氣壓不會低于大氣壓，C正確；葡萄酒

發(fā)酵的原料是糖類，因此可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時終止發(fā)酵，D正確。

11.（2018江蘇卷?17）關(guān)于還原糖、蛋白質(zhì)和DNA的鑒定實驗，下列敘述正確的是

A.在甘蔗莖的組織樣液中加入雙縮胭試劑，溫水浴后液體由藍色變成磚紅色

B.在大豆種子勻漿液中加入斐林試劑，液體由藍色變成紫色

C.提取DNA時，在切碎的洋蔥中加入適量洗滌劑和食鹽，充分研磨，過濾并棄去濾液

D.將DNA粗提物溶解在2moi/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑，沸水浴后液體由無色變成藍色

【答案】D

【解析】甘蔗莖的組織樣液富含蔗糖，而蔗糖屬于非還原糖，且不能用斐林試劑檢測，A錯誤；大豆

種子中富含蛋白質(zhì)，先后加入雙縮版試劑A液和B液搖勻后，液體由藍色變?yōu)樽仙?，B錯誤；提取

DNA時，在切碎的洋蔥中加入適量的洗滌劑和食鹽，充分研磨，過濾并棄去濾紙上的粘稠物，留下濾

液，C錯誤；將DNA粗提物溶解在2moi/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑并水浴加熱，溶液由無色變

為藍色，D正確。

12.（2018江蘇卷?21）下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述，錯誤的是

A.洗衣粉中添加的酶通常是由微生物發(fā)酵生產(chǎn)而來

B.洗衣粉中的蛋白酶通常會將添加的其他酶迅速分解

C.在50℃熱水中用加酶洗衣粉洗衣時，其中的酶會迅速失活

D.加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，不會影響其中酶的活性

【答案】BCD

【解析】加酶洗衣粉中加入的酶多是微生物發(fā)酵產(chǎn)生的，其本質(zhì)與生物體內(nèi)的酶無明顯差異，A正確；

洗衣粉中的蛋白酶通常不會將添加的其他酶迅速分解，這是因為加酶洗衣粉中的酶經(jīng)過了特殊的化學(xué)

物質(zhì)的包裹，使之與其他成分隔離，這些酶在遇水后，包裹層分解，酶才能發(fā)揮作用，B錯誤；加酶

洗衣粉的pH值一般不大于10,在水溫45?60℃時，能充分發(fā)揮洗滌作用，因此在50℃熱水中用加酶

洗衣粉洗衣時，其中的酶不會失活，C錯誤；加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，會導(dǎo)致其中酶的活性

降低，D錯誤。

【名師點睛】本題主要考查果酒和果醋的制作，要求學(xué)生理解酵母菌屬于兼性厭氧菌，既能進行有氧

呼吸，又能進行無氧呼吸。

13.（2021全國卷乙?37）工業(yè)上所說的發(fā)酵是指微生物在有氧或無氧條件下通過分解與合成代謝將某些

原料物質(zhì)轉(zhuǎn)化為特定產(chǎn)品的過程。利用微生物發(fā)酵制作醬油在我國具有悠久的歷史。某企業(yè)通過發(fā)酵制作

醬油的流程示意圖如下。

米曲毒發(fā)酉號發(fā)酣池發(fā)噩提取醬油

回答下列問題：

（1）米曲霉發(fā)酵過程中，加入大豆、小麥和麥秋可以為米曲霉的生長提供營養(yǎng)物質(zhì)，大豆中的

可為米曲霉的生長提供氮源，小麥中的淀粉可為米曲霉的生長提供O

（2）米曲霉發(fā)酵過程的主要目的是使米曲霉充分生長繁殖，大量分泌制作醬油過程所需的酶類，這些酶中

的、能分別將發(fā)酵池中的蛋白質(zhì)和脂肪分解成易于吸收、風(fēng)味獨特的成分，如將蛋白質(zhì)分解為

小分子的肽和。米曲霉發(fā)酵過程需要提供營養(yǎng)物質(zhì)、通入空氣并攪拌，由此可以判斷米曲霉屬

于（填“自養(yǎng)厭氧”“異養(yǎng)厭氧”或“異養(yǎng)好氧”）微生物。

（3）在發(fā)酵池發(fā)酵階段添加的乳酸菌屬于（填“真核生物”或“原核生物”）；添加的酵母菌在無

氧條件下分解葡萄糖的產(chǎn)物是。在該階段抑制雜菌污染和繁殖是保證醬油質(zhì)量的重要因素，據(jù)

圖分析該階段中可以抑制雜菌生長的物質(zhì)是（答出1點即可）。

【答案】（1）蛋白質(zhì)碳源（2）蛋白酶脂肪酶氨基酸異養(yǎng)好氧（3）原核生物酒

精和二氧化碳酒精、乳酸、食鹽（答一個即可）

【分析】

1、參與腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)

生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

2、微生物的生長繁殖一般需要水、無機鹽、碳源和氮源等基本營養(yǎng)物質(zhì)，有些還需要特殊的營養(yǎng)物質(zhì)如生

長因子，還需要滿足氧氣和pH等條件。

3、果酒制作的菌種為酵母菌，其原理是：在有氧的條件下，酵母菌大量繁殖，無氧的條件下，酵母菌產(chǎn)生

酒精和二氧化碳。

【詳解】

（1）大豆中含有豐富的蛋白質(zhì)，可為微生物的生長繁殖提供氮源。小麥中的淀粉可以為微生物的生長繁殖

提供碳源。

（2）米曲霉在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的蛋白酶能將蛋白質(zhì)分解為小分子的肽和氨基酸，產(chǎn)生的脂肪酶能將脂肪分

解為甘油和脂肪酸，使發(fā)酵的產(chǎn)物具有獨特的風(fēng)味。米曲霉發(fā)酵時需要利用現(xiàn)有的有機物和需要氧氣，說

明其代謝類型是異養(yǎng)好氧型。

（3）乳酸菌沒有核膜包被的細胞核，屬于原核生物。酵母菌屬于兼性厭氧型微生物，既可以進行有氧呼吸,

也可以進行無氧呼吸，無氧呼吸的產(chǎn)物是酒精和二氧化碳。在發(fā)酵池中酵母菌產(chǎn)生的酒精能抑制雜菌的生

長，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸使發(fā)酵液呈酸性也能抑制雜菌的生長，同時往發(fā)酵池中添加的食鹽也能抑制雜菌的

生長。

【點睛】

本題以醬油的制作為題材，本質(zhì)考查果酒和腐乳的制作，對于此類試題，需要考生注意的細節(jié)較多，如實

驗的原理、實驗條件、實驗現(xiàn)象等，需要考生在平時的學(xué)習(xí)過程中注意積累。

14.（2021全國卷甲?37）加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉。某同學(xué)通過實驗比較了幾種洗衣粉的去

漬效果（“+”越多表示去漬效果越好），實驗結(jié)果見下表。

加酶洗衣粉A加酶洗衣粉B加酶洗衣粉c無酶洗衣粉（對照）

血漬++++++++

油漬++++++++

根據(jù)實驗結(jié)果回答下列問題:

（1）加酶洗衣粉A中添加的酶是；加酶洗衣粉B中添加的酶是；加酶洗衣粉C中

添加的酶是=

（2）表中不宜用于洗滌蠶絲織物的洗衣粉有,原因是o

（3）相對于無酶洗衣粉，加酶洗衣粉去漬效果好的原因是。

（4）關(guān)于酶的應(yīng)用，除上面提到的加酶洗衣粉外，固定化酶也在生產(chǎn)實踐中得到應(yīng)用，如固定化葡萄糖異

構(gòu)酶已經(jīng)用于高果糖漿生產(chǎn)。固定化酶技術(shù)是指o固定化酶在生產(chǎn)實踐中應(yīng)用的優(yōu)點是

（答出1點即可）。

【答案】（1）蛋白酶脂肪酶蛋白酶和脂肪酶（2）加酶洗衣粉A和加酶洗衣粉C蠶絲織

物的主要成分是蛋白質(zhì)，會被蛋白酶催化水解（3）酶可以將大分子有機物分解為小分子有機物，小分

子有機物易溶于水，從而將污漬與洗滌物分開（4）利用物理或化學(xué)方法將酶固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)

固定在載體上的酶可以被反復(fù)利用，可降低生產(chǎn)成本（或產(chǎn)物容易分離，可提高產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量，或固

定化酶穩(wěn)定性好，可持續(xù)發(fā)揮作用）

【分析】

加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有四類：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶。

其中，應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有大分子

蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污跡容易從衣物上脫落。

【詳解】

（1）從表格中信息可知，加酶洗衣粉A對血漬的洗滌效果比對照組的無酶洗衣粉效果好，而血漬含有大

分子蛋白質(zhì)，因此，加酶洗衣粉A中添加的酶是蛋白酶，同理，加酶洗衣粉B中添加的酶是脂肪酶；加酶

洗衣粉C對血漬和油漬的洗滌效果比無酶洗衣粉好，油漬中有脂肪，因此，加酶洗衣粉C中添加的酶是蛋

白酶和脂肪酶。

（2）蠶絲織物中有蛋白質(zhì)，因此，表中不宜用于洗滌蠶絲織物的洗衣粉有加酶洗衣粉A、加酶洗衣粉C,

原因是蠶絲織物主要成分是蛋白質(zhì)，會被蛋白酶催化水解。

（3）據(jù)分析可知，相對于無酶洗衣粉，加酶洗衣粉去漬效果好的原因是：酶可以將大分子有機物分解為小

分子有機物，小分子有機物易溶于水，從而將污漬與洗滌物分開。

（4）固定化酶技術(shù)是指利用物理或化學(xué)方法將酶固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與

產(chǎn)物分離，所以固定在載體上的酶還可以被反復(fù)利用。所以固定化酶在生產(chǎn)實踐中應(yīng)用的優(yōu)點是：降低生

產(chǎn)成本（或產(chǎn)物容易分離，可提高產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量，或固定化酶穩(wěn)定性好，可持續(xù)發(fā)揮作用）。

【點睛】

本題考查加酶洗衣粉、酶的固定化相關(guān)知識點，難度較小，解答本題的關(guān)鍵是明確加酶洗衣粉與普通洗衣

粉去污原理的異同，以及固定化酶技術(shù)的應(yīng)用實例和優(yōu)點。

15.（2020全國卷I?37）某種物質(zhì)S（一種含有C、H、N的有機物）難以降解，會對環(huán)境造成污染，只

有某些細菌能降解So研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細菌菌株。實驗過程

中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機鹽、水和S,乙的組分為無機鹽、水、S和丫。

高效降解

S的菌株

回答下列問題：

(1)實驗時，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用的方法進行滅菌。乙培養(yǎng)基中的丫物質(zhì)是

?甲、乙培養(yǎng)基均屬于培養(yǎng)基。

(2)實驗中初步估測搖瓶M中細菌細胞數(shù)為2x107個/mL,若要在每個平板上涂布100uL稀釋后的菌液,

且保證每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋倍。

(3)在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時，某菌株對S的降解量反而下降，其原

因可能是(答出1點即可)。

(4)若要測定淤泥中能降解S的細菌細胞數(shù)，請寫出主要實驗步驟=

(5)上述實驗中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細菌的生長提供4類營養(yǎng)物質(zhì)，即

答案.高壓蒸汽滅菌瓊脂選擇IO4S的濃度超過某一值時會抑制菌株的生長取淤泥加

入無菌水，涂布(或稀釋涂布)到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后計數(shù)水、碳源、氮源和無機鹽

【解析】

【分析】

培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無機鹽等。

常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。

常用的滅菌方法：干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。

【詳解】

(1)常用高壓蒸汽滅菌法處理盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶，乙為固體培養(yǎng)基，故需要加入丫瓊脂；甲和乙培

養(yǎng)基可以用于篩選能降解S的菌株，故均屬于選擇培養(yǎng)基。

(2)若要在每個平板上涂布IOONL稀釋液后的菌液，且每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個，則搖瓶M

中的菌液稀釋的倍數(shù)至少為2x107x000x100+200=1x104倍。

(3)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度后，可能會抑制菌株的生長，從而造成其對S的降解量下降。

(4)要測定淤泥中能降解S的細菌的細胞數(shù)，可以取淤泥加無菌水制成菌懸液，稀釋涂布到乙培養(yǎng)基上,

培養(yǎng)后進行計數(shù)。

(5)甲和乙培養(yǎng)基均含有水、無機鹽、碳源、氮源。

【點睛】

培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，接種工具應(yīng)該進行灼燒滅菌，玻璃器皿等耐高溫的、需要干燥的物

品，常采用干熱滅菌。

16.(2020全國卷II-37)研究人員從海底微生物中分離到一種在低溫下有催化活性的a-淀粉酶A3,并對

其進行了研究?；卮鹣铝袉栴}：

(1)在以淀粉為底物測定A3酶活性時，既可檢測淀粉的減少，檢測應(yīng)采用的試劑是,也可采用

斐林試劑檢測的增加。

(2)在A3的分離過程中可采用聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測其純度，通常會在凝膠中添加SDS,SDS的作用

是和O

(3)本實驗中，研究人員在確定A3的最適pH時使用了三種組分不同的緩沖系統(tǒng)，結(jié)果如圖所示。某同學(xué)

據(jù)圖判斷，緩沖系統(tǒng)的組分對酶活性有影響，其判斷依據(jù)是=

卓

￡

定

遂

女

足

(4)在制備A3的固定化酶時，一般不宜采用包埋法，原因是(答出1點

即可)。

答案.碘液還原糖(或答：葡萄糖)消除蛋白質(zhì)所帶凈電荷對遷移率的影響使蛋白質(zhì)發(fā)生變

性在pH相同時，不同緩沖系統(tǒng)條件下所測得的相對酶活性不同酶分子體積小，容易從包埋材料

中漏出

【解析】

【分析】

SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳原理：在離子強度低時，主要以單體形式存在的SDS可以與蛋白質(zhì)結(jié)合，生成蛋

白質(zhì)-SDS復(fù)合物。由于SDS帶有大量負電荷，復(fù)合物所帶的負電荷遠遠超過蛋白質(zhì)原有的負電荷，這使得

不同蛋白質(zhì)間電荷的差異被掩蓋。而SDS-蛋白質(zhì)復(fù)合物形狀都呈橢圓棒形，棒的長度與蛋白質(zhì)亞基分子量

有關(guān)，所以在SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳中蛋白只存在分子大小的差別，利用這一點可將不同的蛋白質(zhì)分開

（分子篩效應(yīng)），因此SDS-PAGE常用于檢測蛋白質(zhì)亞基的分子量及鑒定純度。

【詳解】

（1）測定酶活性時，可以通過檢測反應(yīng)物的減少或生成物的增加來反映酶活性，所以可以用碘液檢測淀粉

的減少，也可用斐林試劑檢測還原糖（或葡萄糖）的增加。

（2）鑒定蛋白質(zhì)純度常用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法，凝膠中加入SDS可以消除蛋白質(zhì)所帶凈電荷對遷

移率的影響，并使蛋白質(zhì)發(fā)生變性。

（3）分析題中曲線可知，在pH相同時，不同緩沖系統(tǒng)條件下所測得的相對酶活性不同，可推測緩沖系統(tǒng)

的組分對酶活性有影響。

（4）由于酶分子體積小，容易從包埋材料中漏出，所以固定化酶時，一般不采用包埋法。

【點睛】

本題比較基礎(chǔ)，考查蛋白質(zhì)的提取和分離、固定化酶技術(shù)等相關(guān)知識，對于此類試題，需要考生注意的細

節(jié)較多，如實驗的原理、實驗采用的試劑及試劑的作用、實驗操作步驟等，考生在平時的學(xué)習(xí)過程中應(yīng)注

意積累。

17.（2020全國卷m?37）水果可以用來加工制作果汁、果酒和果醋等?；卮鹣铝袉栴}：

（1）制作果汁時，可以使用果膠酶、纖維素酶等提高水果的出汁率和澄清度。果膠酶是分解果膠的一類酶

的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、（答出2種即可）。纖維素酶可以分解植物（填

細胞膜或細胞壁）中的纖維素。

（2）用果膠酶處理果泥時，為了提高出汁率，需要控制反應(yīng)的溫度，原因是o

（3）現(xiàn)有甲乙丙三種不同來源的果膠酶，某同學(xué)擬在果泥用量、溫度、pH等所有條件都相同的前提下比

較這三種酶的活性。通常，酶活性的高低可用_____________來表示。

（4）獲得的果汁（如蘋果汁）可以用來制作果酒或者果醋，制作果酒需要__________________菌，這一過

程中也需要02,。2的作用是。制作果醋需要醋酸菌，醋酸菌屬于（填

好氧或厭氧）細菌。

答案.果膠分解酶、果膠酯酶細胞壁溫度對果膠酶活性有影響，在最適溫度下酶活性最高，出汁

率最高在一定條件下，單位時間內(nèi)、單位體積中反應(yīng)物的消耗量或者產(chǎn)物的增加量酵母促進

有氧呼吸，使酵母菌大量繁殖好氧

【解析】

【分析】

1、果膠是由半乳糖醛酸聚合而成的一種高分子化合物，不溶于水，在果汁加工中，果膠不僅會影響出汁率,

還會使果汁混濁。果膠酶能分解果膠，使榨取果汁變得更容易，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶是分

解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶等。

2、果酒的制作離不開酵母菌。酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖。

在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。

3、醋酸菌是一種好氧細菌，只有當(dāng)氧氣充足時才能進行旺盛的生理活動。當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌

將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

(1)由分析可知，果膠酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶等。植物細胞壁由纖維素和果膠

構(gòu)成，故可用纖維素酶分解細胞壁。

(2)酶發(fā)揮催化作用需要適宜的溫度和pH條件，在最適溫度下，果膠酶的活性最高，出汁率最高。

(3)酶的活性是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力，酶活性的高低可以用在一定條件下，單位時間內(nèi)、單位體

積中反應(yīng)物的消耗量或者產(chǎn)物的增加量來表示。

(4)由分析可知，果酒的制作離不開酵母菌，在初期通入氧氣，可以促進酵母菌的有氧呼吸，使其大量繁

殖；醋酸菌是一種好氧細菌。

【點睛】

本題考查果酒、果醋的制作和果膠酶的相關(guān)內(nèi)容，要求考生識記制作果酒、果醋的原理，掌握果汁生產(chǎn)中

果膠酶的作用，并結(jié)合題干信息解題。

18.(2019全國卷I?37)

已知一種有機物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解，會造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土

壤中能高效降解X的細菌(目標菌)。

I號培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基中加入X(5g/L)o

II號培養(yǎng)基：氯化鈉(5g/L),硝酸鏤(3g/L),其他無機鹽(適量)，X(15g/L)。

HI號培養(yǎng)基：氯化鈉(5g/L),硝酸鏤(3g/L),其他無機鹽(適量)。X(45g/L)。

回答下列問題。

(1)在I號培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是-II、III號培養(yǎng)基中為微生物提供碳源的有

機物是o

(2)若將土壤懸浮液接種在H號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細菌比例會.

其原因是O

(3)II號培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基,若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標菌并對菌落進行計數(shù),

接種時，應(yīng)采用的方法是O

(4)假設(shè)從III號培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下,

丙酮酸可為該菌的生長提供和o

【答案】(1)牛肉膏、蛋白陳X

(2)下降不能降解X的細菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細菌能夠增殖

(3)稀釋涂布平板法

(4)能量合成其他物質(zhì)的原料

【解析】

【分析】

1、選擇培養(yǎng)基的概念：在微生物學(xué)中，將允許特定微生物種類生長，同時抑制或阻止其他種類微生物

生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基必須是固體培養(yǎng)基，本題中選擇培養(yǎng)基中的唯一碳源是

有機物X,這樣能分解X的微生物能夠從該有機物獲得碳源，其他微生物由于無法獲得碳源而不

能生存。

2、常用的接種微生物的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的

梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液涂布到固體瓊脂培養(yǎng)基上，進行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里,

將聚集在一起的微生物分散成單個細胞，獲得由單個細胞繁殖而來的菌落，微生物的計數(shù)通常采用

稀釋涂布平板法。

【詳解】(1)氮源是微生物生長需要的一類營養(yǎng)物質(zhì)，是含氮化合物，可為微生物的生長提供氮元素,

牛肉膏、蛋白陳來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)，因此在1號培養(yǎng)基中，可為

微生物提供氮源的是牛肉膏、蛋白膝。碳源也是微生物生長所需要的一類營養(yǎng)物質(zhì)，可為微生物的生

長提供碳元素，而有機物均含碳元素，II、in號培養(yǎng)基均含有有機物x,因此，n、in號培養(yǎng)基為微

生物的生長提供碳源的均為有機物X。

(2)由于n號培養(yǎng)基含有的碳源只有有機物x,因此若將土壤懸浮液接種在n號液體培養(yǎng)基中，培

養(yǎng)一段時間后，不能降解x的細菌由于無法獲得碳源而無法增殖導(dǎo)致其比例減少。

(3)微生物的接種方法很多，最常用的有平板劃線法與稀釋涂布平板法，由于稀釋涂布平板法中，稀

釋度足夠高的菌液經(jīng)涂布培養(yǎng)后，在培養(yǎng)基表面形成的一個菌落是由菌液中的一個活菌繁殖而來，所

以常用來進行微生物的計數(shù)。

(4)丙酮酸參與有氧呼吸的第二階段，能被分解產(chǎn)生能量，且丙酮酸可作為許多物質(zhì)合成的中間產(chǎn)物,

因此其可為微生物的生長提供能量和合成其他物質(zhì)的原料。

【點睛】選擇培養(yǎng)基能選擇特定的微生物。微生物的接種方法有多種，其中稀釋涂布平板法常用來進

行微生物的計數(shù)。微生物的營養(yǎng)物質(zhì)有水、碳源、氮源、無機鹽等。

19.（2019全國卷II-37）物質(zhì)W是一種含氮有機物，會污染土壤。W在培養(yǎng)基中達到一定量時培養(yǎng)基

表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細菌（目標菌）?；卮鹣铝袉栴}。

（1）要從土壤中分離目標菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是O

（2）在從土壤中分離目標菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細菌都能生長并形成菌落（如圖所示）。

如果要得到目標菌，應(yīng)該選擇_______菌落進一步純化，選擇的依據(jù)是o

（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮氣作為氮源。若要設(shè)計實驗進一步確定甲、乙菌能否利

用空氣中的氮氣作為氮源，請簡要寫出實驗思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論，即=

（4）該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶（酶E）。為了比較

酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進行如下實驗，請完善相關(guān)內(nèi)容。

①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩

沖液，C處滴加,三處滴加量相同。

②一段時間后，測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明；若A、B處形成的

透明圈直徑大小相近，說明。

【答案】（1）W

（2）乙乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W

（3）將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為

氮源

（4）①緩沖液②緩沖液不能降解W酶E與天然酶降解W的能力相近

【解析】

【分析】篩選培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或?qū)δ承┗瘜W(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的,

能選擇性地區(qū)分這種微生物的培養(yǎng)基。利用選擇培養(yǎng)基，可使混合菌群中的目標菌種變成優(yōu)勢種群,

從而提高該種微生物的篩選效率。

【詳解】（1）該研究小組的目標菌是能夠降解物質(zhì)W的細菌，而物質(zhì)W是一種含氮有機物，故可作

篩選培養(yǎng)基中的氮源。

（2）研究小組的目標菌，是能夠降解物質(zhì)W的細菌，培養(yǎng)基中乙菌落的周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌

落能夠降解物質(zhì)W,故乙菌落為該小組的目標細菌。

（3）目標菌能夠利用空氣中的氮氣作為氮源，故選用的篩選培養(yǎng)基不添加氮源，能夠在無氮源的培養(yǎng)

基上生存的細菌便是目的細菌，故實驗操作為：將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細菌能生

長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源。

（4）①C處作為空白對照，要排除作為溶劑的緩沖液對實驗可能造成的影響，故需要在C處滴加緩沖

液，且保持滴加量相同；②培養(yǎng)基中的透明圈表示物質(zhì)W被降解的情況，若C處不出現(xiàn)透明圈，則說

明緩沖液不能降解物質(zhì)W；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明物質(zhì)W被降解的程度相近，

即酶E與天然酶降解物質(zhì)W的能力相近。

【點睛】本題考查篩選培養(yǎng)基的配置和使用，針對不同要求的目標菌種，選擇不同物質(zhì)配制不同篩選

作用的培養(yǎng)基。并且要求學(xué)生理解識別目標菌種篩選的現(xiàn)象，判斷篩選結(jié)果。

20.（2019全國卷37）回答下列與細菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。

（1）在細菌培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是（填“蛋白膝”

“葡萄糖”或“NaNCh”）。通常，制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)細菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,其原

因是。硝化細菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上___（填“能夠”或“不能”）生長，原因是

（2）用平板培養(yǎng)細菌時一般需要將平板（填“倒置”或“正置。

（3）單個細菌在平板上會形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分

不同種的微生物，原因是。