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第五章遺傳信息表示1遺傳信息的表達(dá)專家講座第1頁(yè)中心法則:prDNARNA轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄翻譯
第一節(jié)轉(zhuǎn)錄(transcription)以DNA為模板合成RNA過(guò)程2遺傳信息的表達(dá)專家講座第2頁(yè)3遺傳信息的表達(dá)專家講座第3頁(yè)(4)模板:復(fù)制:兩條全部DNA分子;轉(zhuǎn)錄:一條DNA分子部分與復(fù)制相同之處:(1)都以DNA為模板.(2)都以nt為原料,合成方向都是5'
3'.(3)都服從堿基配對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不一樣之處:(1)四種原料不一樣:DNA
dNTP,RNA
NTP(2)配對(duì)堿基不一樣:A=T;A=U(3)酶不一樣: DNA聚合酶;RNA聚合酶4遺傳信息的表達(dá)專家講座第4頁(yè)一、原核生物RNA生物合成(一)RNA聚合酶(RNApolymerase):1種RNA合成錯(cuò)誤率為10-6(DNA合成錯(cuò)誤率為10-9-10-10)大腸桿菌中:全酶為:五聚體(
2
'
):
:識(shí)別結(jié)合開(kāi)啟子
2:開(kāi)啟子上游
:催化形成二酯鍵
':酶與模板結(jié)合部位需Mg2+,Mn2+,無(wú)校對(duì)功效5遺傳信息的表達(dá)專家講座第5頁(yè)(二)轉(zhuǎn)錄模板基因1:鏈2:轉(zhuǎn)錄模板鏈(templatestrand)or反意義鏈(antisensestrand)鏈1:信息鏈or有意義鏈(sensestrand)or編碼鏈(codingstrand)基因2:鏈1:轉(zhuǎn)錄模板鏈(templatestrand)or反意義鏈(antisensestrand)鏈2為信息鏈or有意義鏈(sensestrand)or編碼鏈(codingstrand)6遺傳信息的表達(dá)專家講座第6頁(yè)(三)轉(zhuǎn)錄過(guò)程
1、起始階段:不需要引物,全酶中
識(shí)別并結(jié)合開(kāi)啟子
DNA構(gòu)象發(fā)生改變
RNA聚合酶催化兩個(gè)相鄰nt與模板配對(duì)
第一個(gè)nt為5'pppGorpppA,第二個(gè)nt有游離3'-OH繼續(xù)加入NTP,延長(zhǎng)
幾個(gè)nt之后
因子脫落全酶-DNA-pppGpN'-OH稱為起始復(fù)合物7遺傳信息的表達(dá)專家講座第7頁(yè)2、延長(zhǎng)階段:關(guān)鍵酶(coreenzyme)沿模板3'
5'滑行,RNA按5'
3'方向合成
>12nt,RNA5'端與DNA模板脫離mRNA:
45nt/sec,rRNA:
90nt/sec3、.終止階段兩種方式:
因子不依賴終止
因子依賴終止8遺傳信息的表達(dá)專家講座第8頁(yè)RNA酶行進(jìn)到模板終止子部位(富含GC,可在RNA上形成發(fā)夾結(jié)構(gòu))
發(fā)夾結(jié)構(gòu)影響RNA酶行進(jìn)
RNA鏈先從DNA上釋放,再與關(guān)鍵酶分離
終止轉(zhuǎn)錄(1)因子不依賴終止圖5-19遺傳信息的表達(dá)專家講座第9頁(yè)
因子與RNA聚合酶結(jié)合(終止子)
使RNA-DNA雜交體解開(kāi)
因子、RNA聚合酶與DNA分離
轉(zhuǎn)錄終止(2)因子依賴終止圖5-210遺傳信息的表達(dá)專家講座第10頁(yè)11遺傳信息的表達(dá)專家講座第11頁(yè)(四)、轉(zhuǎn)錄后加工初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物(primarytranscrips):一個(gè)操縱子轉(zhuǎn)錄出一條完整RNA。mRNA:不需要加工rRNA:需加工、修飾tRNA:需加工、修飾6個(gè)基因:3個(gè)tRNA16srRNA23srRNA稱為30sRNA5srRNA間隔序列如大腸桿菌rrnD操縱子(rRNA、tRNA混排)圖5-312遺傳信息的表達(dá)專家講座第12頁(yè)13遺傳信息的表達(dá)專家講座第13頁(yè)30sRNA
核酸內(nèi)切酶(RNaseP)16s、23s、5srRNA前體+tRNA前體
(內(nèi)、外切酶)(1)剪切作用:多出序列切除原間隔序列(2)添加和修復(fù)3‘端CCA序列(3)一些堿基化學(xué)修飾
成熟16s、23s、5srRNA成熟tRNA14遺傳信息的表達(dá)專家講座第14頁(yè)二、真核生物RNA生物合成(一)RNA聚合酶pol1:核仁:5.8S、18S、28SrRNApol2:核漿:mRNApol3:核漿:tRNA(二)轉(zhuǎn)錄單位:為一個(gè)基因(一個(gè)結(jié)構(gòu)基因加對(duì)應(yīng)調(diào)控元件)三、轉(zhuǎn)錄過(guò)程:15遺傳信息的表達(dá)專家講座第15頁(yè)1.起始階段:需一些蛋白質(zhì)參加,稱轉(zhuǎn)錄因子(transcrptionfactor,TF)(1)mRNA前體轉(zhuǎn)錄圖5-4:pol2TF2D(含一個(gè)TATAbox結(jié)合蛋白(TBP)和多個(gè)TBP結(jié)合因子(TAF))+TATAbox
TF2A,TF2B結(jié)合TF2D
TF2F+pol2結(jié)合TF2B
TF2E、TF2H加入,形成起始復(fù)合物16遺傳信息的表達(dá)專家講座第16頁(yè)17遺傳信息的表達(dá)專家講座第17頁(yè)人基因:關(guān)鍵開(kāi)啟子+上游調(diào)控元件(UCE)轉(zhuǎn)錄因子:上游結(jié)合因子(UBF1)、選擇因子1(selectivityfactor1,SL1)(含一個(gè)TBP和3個(gè)TBP結(jié)合因子)(2)rRNA前體轉(zhuǎn)錄:pol1UBF1與關(guān)鍵開(kāi)啟子和UCE結(jié)合
SL1與UBF1結(jié)合
pol1與SL1中TBP結(jié)合
起始轉(zhuǎn)錄18遺傳信息的表達(dá)專家講座第18頁(yè)19遺傳信息的表達(dá)專家講座第19頁(yè)基因:Abox、Bbox
TF3C結(jié)合與Bbox
TF3B結(jié)合與開(kāi)啟子
pol3進(jìn)入(3)tRNA、5SrRNA:pol320遺傳信息的表達(dá)專家講座第20頁(yè)3、終止階段:機(jī)制不清2、延長(zhǎng)階段:與原核生物相同,方向5'
3'21遺傳信息的表達(dá)專家講座第21頁(yè)7mG:5'-5'磷酸二酯鍵(正常:3'-5'磷酸二酯鍵)(四)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物加工5'端加帽子1.mRNA前體加工:3'端加尾巴(polyA)去除內(nèi)含子拼接外顯子(1)5'端加帽子(capping)圖5-51型帽子結(jié)構(gòu):m7G-nt1(2'-OH被甲基化)2型帽子結(jié)構(gòu):m7G-nt1(2'-OH被甲基化)-nt2(2’-OH被甲基化)兩種:22遺傳信息的表達(dá)專家講座第22頁(yè)(2)3'端加尾巴(polyAtail)圖5-6mRNA中AAUAAA序列被核酸內(nèi)切酶識(shí)別并在其下游11nt-30nt處切斷,在polyA聚合酶作用下加入polyA.23遺傳信息的表達(dá)專家講座第23頁(yè)(3)去除內(nèi)含子拼接外顯子(splicing):圖5-7剪接反應(yīng):在剪接體(spliceosome)中進(jìn)行(兩步)SnRNA:U1,U2,U3…..U6蛋白質(zhì)內(nèi)含子結(jié)構(gòu):5'GU------------------A-------AG3'(5'剪切位點(diǎn))(分支點(diǎn))(3'剪切位點(diǎn))第二步:5'外顯子攻擊3'剪接位點(diǎn),兩個(gè)外顯子拼接,同時(shí)釋放套索狀中間產(chǎn)物.第一步:分支點(diǎn)A攻擊5'側(cè)剪接位點(diǎn)G,釋放5'外顯子.24遺傳信息的表達(dá)專家講座第24頁(yè)mRNA內(nèi)含子自我剪接25遺傳信息的表達(dá)專家講座第25頁(yè)特點(diǎn):內(nèi)含子自我剪接/核酶產(chǎn)物:套索結(jié)構(gòu)(4)化學(xué)修飾:主要是甲基化修飾(5)RNA編輯(RNAediting)隱蔽基因(cryptogene)產(chǎn)物如線粒體細(xì)胞色素氧化酶C亞基mRNA:在145個(gè)不一樣位點(diǎn)插入407個(gè)U,在9個(gè)不一樣位點(diǎn)刪除19個(gè)U,編輯nt占成熟mRNA二分之一以上。26遺傳信息的表達(dá)專家講座第26頁(yè)(2)tRNA前體加工A:tRNA前體剪接:去除內(nèi)含子和5'側(cè)先導(dǎo)序列。B:添加或修復(fù)3'端CCA序列。C:化學(xué)修飾:形成稀有堿基。(3)rRNA前體加工:A:rRNA前體剪接;B:化學(xué)修飾27遺傳信息的表達(dá)專家講座第27頁(yè)第三節(jié)翻譯一、原核生物蛋白質(zhì)生物合成(一)蛋白質(zhì)生物合成體系1、mRNA:(1)密碼子(codon):每三個(gè)相鄰nt決定一個(gè)氨基酸。(2)開(kāi)放閱讀框(openreadingframe,ORF):從起始密碼子到終止密碼子。28遺傳信息的表達(dá)專家講座第28頁(yè)(3)遺傳密碼:64個(gè)密碼子統(tǒng)稱。密碼子表(P78)
(1)起始密碼子:AUG-met;(2)終止密碼子:UAG,UAA,UGA(3)讀寫(xiě)方向:5'
3';(4)連續(xù)性;(5)吞并性:幾個(gè)密碼子決定同一個(gè)氨基酸;(6)通用性;特點(diǎn):(7)擺動(dòng)性(wobble):密碼子第三位與反密碼子第一位堿基配對(duì)不十分嚴(yán)格。29遺傳信息的表達(dá)專家講座第29頁(yè)第一位(5
端)堿基第二位(中間)堿基第三位(3
端)堿基
A
G
U
C
AAAA賴氨酸AAG賴氨酸
AAU天冬酰胺AAC天冬酰胺AGA精氨酸AGG精氨酸
AGU絲氨酸AGC絲氨酸AUA異亮氨酸AUG甲硫氨酸+起始信號(hào)AUU異亮氨酸AUC異亮氨酸ACA蘇氨酸ACG蘇氨酸
ACU蘇氨酸ACC蘇氨酸AG
UC
GGAA谷氨酸GAG谷氨酸GAU天冬氨酸GAC天冬氨酸GGA甘氨酸GGG甘氨酸GGU甘氨酸GGC甘氨酸GUA纈氨酸GUG纈氨酸GUU纈氨酸GUC纈氨酸GCA丙氨酸GCG丙氨酸GCU丙氨酸GCC丙氨酸AGUC
UUAA終止信號(hào)UAG終止信號(hào)UAU酪氨酸UAC酪氨酸UGA終止信號(hào)UGG色氨酸UGU半胱氨酸UGC半胱氨酸UUA亮氨酸UUG亮氨酸UUU苯丙氨酸UUC苯丙氨酸UCA絲氨酸UCG絲氨酸UCU絲氨酸UCC絲氨酸AGUC
CCAA谷氨酰胺CAG谷氨酰胺CAU組氨酸CAC組氨酸CGA精氨酸CGG精氨酸CGU精氨酸CGC精氨酸CUA亮氨酸CUG亮氨酸CUU亮氨酸CUC亮氨酸CCA脯氨酸CCG脯氨酸CCU脯氨酸CCC脯氨酸AGUC30遺傳信息的表達(dá)專家講座第30頁(yè)主要活性部位:A位(受位acceptorsite):氨酰tRNA(tRNA-a.a)進(jìn)入部位.P位(供位donorsite,peptidesite):肽酰tRNA(tRNA-a.a-a.a-a.a-a.a…a.a)占據(jù)部位.2.核糖體(ribosome):rRNA+prs:是蛋白質(zhì)合成場(chǎng)所3.tRNA:氨基酸運(yùn)輸工具,細(xì)菌中約30種-40種。4.各種蛋白質(zhì):起始因子:IF:IF-1;IF-2;IF-3。延伸因子:EF:EF-Tu;EF-Ts;EF-G。終止因子:RF:RF-1;RF-2;RF-3。31遺傳信息的表達(dá)專家講座第31頁(yè)5.氨基酰-tRNA合成酶:催化氨基酸與tRNA結(jié)合形成tRNA-a.a,含有特異性.1.起始階段:IF-3+30S
mRNA
fmet-tRNAfmet-IF-
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