@綜合實(shí)驗(yàn)剖析

實(shí)驗(yàn)七綜合實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.學(xué)習(xí)并掌握小鼠旋轉(zhuǎn)桿平衡實(shí)驗(yàn)、跳臺(tái)回避實(shí)驗(yàn)以及無創(chuàng)血壓測(cè)試方法2.了解各個(gè)測(cè)試指標(biāo)的意義實(shí)驗(yàn)原理1.旋轉(zhuǎn)桿平衡實(shí)驗(yàn)是測(cè)試小鼠肌肉協(xié)調(diào)性、疲勞的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)所使用的疲勞轉(zhuǎn)棒儀可用于研究藥物對(duì)動(dòng)作協(xié)調(diào)性和抗疲勞特性的影響。2.跳臺(tái)回避實(shí)驗(yàn)屬一次性刺激回避反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，是衡量小鼠智能優(yōu)劣的一種方法。通過給予小鼠厭惡刺激，觀察小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。3.無創(chuàng)血壓測(cè)量通過大、小鼠尾動(dòng)脈固定，通過壓力感應(yīng)裝置檢測(cè)血壓變化特點(diǎn)，采用計(jì)算機(jī)分析可以獲得動(dòng)物的收縮壓、舒張壓及脈搏波頻率變化的系列數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)對(duì)象小鼠實(shí)驗(yàn)儀器ZB-200疲勞轉(zhuǎn)棒儀STD-88通道大小鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)大小鼠無創(chuàng)血壓測(cè)定系統(tǒng)計(jì)算機(jī)實(shí)驗(yàn)步驟一、旋轉(zhuǎn)桿平衡實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練階段：1.將動(dòng)物從飼養(yǎng)室轉(zhuǎn)移入實(shí)驗(yàn)操作室，適應(yīng)60min。2.將旋轉(zhuǎn)杠的速度調(diào)至24r/min，打開旋轉(zhuǎn)設(shè)置裝置，置動(dòng)物與旋轉(zhuǎn)桿上，測(cè)定其從旋轉(zhuǎn)桿上滑落的時(shí)間，即潛伏期。設(shè)定最長潛伏期為60s。3.每天每只動(dòng)物訓(xùn)練4次，每次間隔5-10min，連續(xù)訓(xùn)練3天。4.訓(xùn)練結(jié)束后，將動(dòng)物送回飼養(yǎng)室，以70%的乙醇清潔訓(xùn)練裝置。測(cè)試階段:將動(dòng)物從飼養(yǎng)室轉(zhuǎn)移入實(shí)驗(yàn)操作室，適應(yīng)60min。打開旋轉(zhuǎn)設(shè)置裝置，測(cè)定動(dòng)物在不同旋轉(zhuǎn)速度下的潛伏期，轉(zhuǎn)速分別為5、8、15、20、24、31、33、44r/min。每個(gè)速度測(cè)定兩次，在計(jì)算時(shí)取其平均值。測(cè)試結(jié)束后，將動(dòng)物送回飼養(yǎng)室，以70%的乙醇清潔訓(xùn)練裝置。編號(hào)58152024313344CE12CE19CE20CE21CE25AE6AE9AE11AE14AE15二、跳臺(tái)回避實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)1.打開SDT-8跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)視頻分析系統(tǒng)軟件，點(diǎn)擊“打開攝像頭”按鈕，再打開實(shí)驗(yàn)箱，將其中所有的跳臺(tái)全部翻面，使背面黑色的部分朝上并靠角落放置，再關(guān)閉試驗(yàn)箱。點(diǎn)擊“曝光+”和“曝光-”兩個(gè)按鈕調(diào)節(jié)曝光強(qiáng)度，使軟件自動(dòng)識(shí)別到跳臺(tái)區(qū)域，點(diǎn)擊“區(qū)域設(shè)定”按鈕。設(shè)定完畢后，將所有跳臺(tái)翻面，使黑色部分朝下置放，使得區(qū)域設(shè)定后倒置跳臺(tái)時(shí)將跳臺(tái)卡入從右上角開始的第二根刺激棒內(nèi)便能保證其放回原位置。關(guān)閉試驗(yàn)箱。2.實(shí)驗(yàn)包括兩次相隔60min的電擊訓(xùn)練和一次24h后的記憶保持實(shí)驗(yàn)。①電擊訓(xùn)練：將小鼠放置于跳臺(tái)之上，當(dāng)它往下跳至刺激柵極時(shí)，給予能夠引起小鼠發(fā)聲和退縮的最小電壓（28V）的電擊。將小鼠放回籠內(nèi)，清潔箱體。1h后重復(fù)上述訓(xùn)練，記錄跳臺(tái)潛伏期。如果小鼠在跳臺(tái)上的滯留時(shí)間超過60s，即認(rèn)為它已經(jīng)記住先前的厭惡刺激，不給電擊，放回籠內(nèi)；如果小鼠跳臺(tái)潛伏期少于60s，則在1h后再次重復(fù)訓(xùn)練一次。如仍不達(dá)標(biāo)，則予以淘汰。②記憶保持實(shí)驗(yàn)：在第一次訓(xùn)練后的24h進(jìn)行。方法與訓(xùn)練相同，但不給電擊。記錄小鼠從跳臺(tái)跳下的錯(cuò)誤次數(shù)。如小鼠300s后仍不跳下跳臺(tái)，則終止實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)除記錄錯(cuò)誤次數(shù)外，還記錄達(dá)到回避標(biāo)準(zhǔn)的動(dòng)物數(shù)。達(dá)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)為：“記憶保持測(cè)試”的潛伏期大于“第二次訓(xùn)練”潛伏期的3倍且超過60s。以錯(cuò)誤反應(yīng)次數(shù)為判斷記憶力的定性指標(biāo)，達(dá)標(biāo)動(dòng)物的百分比為記憶的定量指標(biāo)。編號(hào)潛伏期錯(cuò)誤次數(shù)編號(hào)潛伏期錯(cuò)誤次數(shù)CE12AE6CE19AE9CE20AE11CE21AE14CE25AE15三、大小鼠無創(chuàng)血壓測(cè)試預(yù)熱無創(chuàng)血壓測(cè)試儀，使箱體溫度達(dá)到37℃將小鼠的四肢和頭部固定住固定裝置中，將加壓裝置和壓力傳感器固定在小鼠尾部，放入箱體使其適應(yīng)環(huán)境通過充氣、放氣對(duì)尾動(dòng)脈加壓和釋壓的同時(shí)監(jiān)測(cè)血流信號(hào)，得出血壓值測(cè)量記錄平均動(dòng)脈壓、收縮壓、舒張壓和心率編號(hào)血壓心率編號(hào)血壓心率CE12AE6CE