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模塊綜合測(cè)評(píng)(二)一、單項(xiàng)選擇題(共15小題,每小題2分,共30分,每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1.和面時(shí),最佳面團(tuán)是以面團(tuán)彈性弱,面筋延伸性強(qiáng),面團(tuán)發(fā)至原體積兩倍大來(lái)判斷。中種法發(fā)酵是通過(guò)向部分面粉中添加水、酵母后揉和在一起發(fā)酵制成中種面團(tuán),然后將其余食材加到一起完成主面團(tuán)的攪拌,進(jìn)而制作成多種口味的面包,過(guò)程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.面粉中的淀粉酶可使淀粉糖化成可供酵母菌利用的糖B.面團(tuán)的發(fā)酵可理解為在面團(tuán)中進(jìn)行酵母菌等微生物的培養(yǎng)C.中種法兩次發(fā)酵使面團(tuán)含有較多的發(fā)酵生成物,面團(tuán)彈性增強(qiáng),烘烤后具有獨(dú)特風(fēng)味D.環(huán)境的溫度、濕度、酵母的活性、面團(tuán)的pH均會(huì)影響面包的發(fā)酵過(guò)程2.據(jù)《新華社》報(bào)道,北京航空航天大學(xué)研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)取自美國(guó)的黃粉蟲(chóng)腸道細(xì)菌能高效降解低密度泡沫塑料[主要成分為聚苯乙烯——(C8H8)n]。研究人員為了從黃粉蟲(chóng)腸道內(nèi)分離純化出能降解聚苯乙烯的細(xì)菌,進(jìn)行了如圖所示實(shí)驗(yàn)。下列相關(guān)敘述正確的是()用麥麩和X飼養(yǎng)黃粉蟲(chóng)兩周→解剖黃粉蟲(chóng),取出腸道內(nèi)容物→富集培養(yǎng)(擴(kuò)大菌種數(shù)量)↓挑取單菌落,進(jìn)行個(gè)體水平鑒定←用無(wú)菌水進(jìn)行稀釋涂布←在選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行選擇培養(yǎng)A.X為聚苯乙烯,可為黃粉蟲(chóng)腸道細(xì)菌提供碳源和氮源B.圖示選擇培養(yǎng)的過(guò)程中不需要加入瓊脂做凝固劑C.富集培養(yǎng)和選擇培養(yǎng)過(guò)程中都應(yīng)將培養(yǎng)基調(diào)至酸性D.將涂布器放在酒精燈火焰上灼燒后直接涂布接種3.[2023廣東卷]研究者擬從堆肥中取樣并篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌。根據(jù)堆肥溫度變化曲線(xiàn)(如圖)和選擇培養(yǎng)基篩選原理來(lái)判斷,下列最可能篩選到目標(biāo)菌的條件組合是()A.A點(diǎn)時(shí)取樣、尿素氮源培養(yǎng)基 B.B點(diǎn)時(shí)取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基C.B點(diǎn)時(shí)取樣、蛋白胨氮源培養(yǎng)基 D.C點(diǎn)時(shí)取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基4.鑒定微生物時(shí),為了觀(guān)察微生物的培養(yǎng)特性或測(cè)定微生物的生理生化反應(yīng)性質(zhì),需要配制特定的培養(yǎng)基,如用石蕊牛奶培養(yǎng)基測(cè)定細(xì)菌的生理生化特性。石蕊牛奶培養(yǎng)基由牛奶和一定量的石蕊溶液(石蕊是一種酸堿指示劑,遇酸變紅,遇堿變藍(lán),被還原時(shí)可以脫色)組成,呈現(xiàn)紫藍(lán)色(pH為6.8),常被分裝到試管中,滅菌冷卻后置于冰箱中備用。已知牛奶中有酪蛋白、乳糖等成分。下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.實(shí)驗(yàn)操作中試管等玻璃器皿常用的滅菌方法為干熱滅菌B.若培養(yǎng)基顏色變化為紅色,則培養(yǎng)的可能是能分解乳糖產(chǎn)酸的細(xì)菌C.若培養(yǎng)基顏色變化為藍(lán)色,則培養(yǎng)的可能是能分解酪蛋白產(chǎn)堿的細(xì)菌D.若培養(yǎng)基顏色變化為白色,則培養(yǎng)的是能產(chǎn)生凝乳酶使酪蛋白凝固的細(xì)菌5.右圖表示植物細(xì)胞工程中利用愈傷組織培育植株或得到細(xì)胞產(chǎn)物的過(guò)程。下列敘述正確的是()A.利用花粉通過(guò)②⑤過(guò)程獲得植株B的育種方法稱(chēng)為單倍體育種B.植物的快速繁殖技術(shù)和脫毒苗的獲得均需通過(guò)①④過(guò)程C.可通過(guò)⑧過(guò)程獲得人參皂苷,該過(guò)程體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性D.③⑦過(guò)程可用于突變體的獲取,原因是誘變劑使細(xì)胞發(fā)生了定向突變6.[2023江蘇高三四校聯(lián)考]基因組印記(通過(guò)甲基化實(shí)現(xiàn)受精卵中來(lái)自雙親的兩個(gè)等位基因一個(gè)表達(dá)另一個(gè)不表達(dá))阻礙了哺乳動(dòng)物孤雌生殖的實(shí)現(xiàn)。某研究團(tuán)隊(duì)利用甲基化酶、去甲基化酶和基因編輯技術(shù),改變了小鼠生殖細(xì)胞的“基因組印記”,使其“變性”,然后將一個(gè)極體注入修飾后的次級(jí)卵母細(xì)胞(類(lèi)似受精作用),最終創(chuàng)造出“孤雌生殖”的小鼠。實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是()A.體外培養(yǎng)卵母細(xì)胞時(shí),為防止污染,需將培養(yǎng)皿置于二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)B.甲基化可能會(huì)關(guān)閉基因的活性,對(duì)某些基因進(jìn)行去甲基化處理有利于其表達(dá)C.“孤雌小鼠”的誕生過(guò)程沒(méi)有精子參與,其基因型與提供卵母細(xì)胞的雌鼠相同D.移植后的囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大,會(huì)導(dǎo)致滋養(yǎng)層破裂,胚胎從其中伸展出來(lái)7.2023年4月27日,大熊貓“丫丫”回國(guó)在社會(huì)上引起了巨大反響。自然狀態(tài)下的大熊貓繁殖能力較低,曾一度瀕臨滅絕,我國(guó)科學(xué)家利用胚胎工程的技術(shù)手段大大提高了熊貓的繁殖率,目前我國(guó)的熊貓數(shù)量已經(jīng)有2400余只。下列說(shuō)法正確的是()A.對(duì)大熊貓進(jìn)行體外受精時(shí),可以把剛從卵巢中采集到的卵子與獲能的精子直接受精B.桑葚胚期細(xì)胞才開(kāi)始出現(xiàn)分化,因此桑葚胚期之前不存在基因的選擇性表達(dá)C.胚胎的孵化發(fā)生在囊胚期,如果不能正常孵化,胚胎就無(wú)法繼續(xù)發(fā)育D.胚胎移植前,應(yīng)該用促性腺激素對(duì)供體和受體熊貓進(jìn)行同期發(fā)情處理8.第三代試管嬰兒技術(shù)(PGD/PGS)是對(duì)早期胚胎細(xì)胞進(jìn)行基因診斷和染色體檢測(cè)后再進(jìn)行胚胎移植,流程如圖所示。圖中檢測(cè)包括PGD、PGS(PGD是指胚胎植入前的基因診斷,PGS是指胚胎植入前的染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)檢測(cè))。下列敘述正確的是()A.受精前需將采集的卵子培養(yǎng)至MⅡ期,精子在含Mg2+載體的獲能液中獲能B.PGD和PGS技術(shù)可分別用于篩選唐氏綜合征和紅綠色盲C.進(jìn)行胚胎移植前需要對(duì)夫妻雙方進(jìn)行免疫檢查,以防止移植后出現(xiàn)免疫排斥反應(yīng)D.“理想胚胎”需培養(yǎng)至桑葚胚或囊胚期才能植入子宮9.常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)是將細(xì)胞在平面條件下培養(yǎng),培養(yǎng)出的單層細(xì)胞在藥物研究中具有一定的局限性,不同于人體內(nèi)的組織結(jié)構(gòu),三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是在體外為細(xì)胞提供類(lèi)似體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境,使細(xì)胞形成立體的三維結(jié)構(gòu),更有利于藥理學(xué)的研究。下列敘述不正確的是()A.制備細(xì)胞懸液前需對(duì)組織進(jìn)行酶解處理,長(zhǎng)時(shí)間處理效果好B.培養(yǎng)環(huán)境中的二氧化碳可以維持培養(yǎng)液的pHC.三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以用于檢測(cè)某種藥物對(duì)內(nèi)部細(xì)胞的作用特點(diǎn)D.正常情況下,常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)與三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)均存在細(xì)胞接觸抑制的現(xiàn)象10.可用堿裂解法從轉(zhuǎn)化后的菌體中提取質(zhì)粒,再通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳篩選出重組質(zhì)粒。堿裂解法的原理是細(xì)胞在堿裂解液作用下裂解,同時(shí)細(xì)胞中的線(xiàn)性DNA、質(zhì)粒DNA和蛋白質(zhì)均變性,加入酸后,質(zhì)粒DNA復(fù)性,線(xiàn)性DNA和蛋白質(zhì)難以復(fù)性而析出,離心后的上清液去除雜質(zhì)后得到較純凈的質(zhì)粒DNA,如圖1所示。將利用上述方法提取的兩組樣品進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,結(jié)果如圖2所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()圖1圖2A.Ⅰ過(guò)程不宜劇烈振蕩,以防止線(xiàn)性DNA斷裂混入上清液中B.Ⅲ過(guò)程中冷酒精的作用是使DNA析出C.2、3結(jié)果對(duì)應(yīng)的樣品分別為重組質(zhì)粒、非重組質(zhì)粒D.DNA分子具有可解離的基團(tuán),在電場(chǎng)中會(huì)帶上正電荷或負(fù)電荷11.[2023新課標(biāo)卷]某同學(xué)擬用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA連接酶為工具,將目的基因(兩端含相應(yīng)限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn))和質(zhì)粒進(jìn)行切割、連接,以構(gòu)建重組表達(dá)載體。限制酶的切割位點(diǎn)如圖所示。下列重組表達(dá)載體構(gòu)建方案合理且效率最高的是()A.質(zhì)粒和目的基因都用酶3切割,用E.coliDNA連接酶連接B.質(zhì)粒用酶3切割、目的基因用酶1切割,用T4DNA連接酶連接C.質(zhì)粒和目的基因都用酶1和酶2切割,用T4DNA連接酶連接D.質(zhì)粒和目的基因都用酶2和酶4切割,用E.coliDNA連接酶連接12.噬菌體展示技術(shù)(如下圖)可將某些蛋白質(zhì)呈遞至噬菌體表面,便于對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行篩選、鑒定。以下對(duì)該技術(shù)的分析不正確的是()A.用含有碳源、氮源等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基培養(yǎng)噬菌體B.建立噬菌體展示庫(kù)需限制性?xún)?nèi)切核酸酶和DNA連接酶C.可利用抗原—抗體雜交技術(shù)篩選目標(biāo)蛋白D.經(jīng)誘變及多輪篩選可能獲得與抗原親和力更強(qiáng)的抗體及其基因13.生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)常需要控制溫度才能呈現(xiàn)應(yīng)有的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下列敘述不正確的是()A.PCR時(shí),需將溫度下降到50℃左右,讓引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合B.利用二苯胺試劑鑒定溶解于NaCl溶液的DNA時(shí),需要沸水浴加熱C.做電泳所需的緩沖液和酶應(yīng)在-20℃的低溫下儲(chǔ)存D.PCR時(shí),需將反應(yīng)體系的溫度控制在70~75℃以使DNA解旋14.為使玉米獲得抗除草劑性狀,需進(jìn)行如圖所示的操作。報(bào)告基因的產(chǎn)物能催化無(wú)色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。轉(zhuǎn)化過(guò)程中,愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌,導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化愈傷組織也可能在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。下列敘述不正確的是()A.篩選1需要用含氨芐青霉素和無(wú)色物質(zhì)K培養(yǎng)基篩選出藍(lán)色菌落的農(nóng)桿菌B.T-DNA可將目的基因G轉(zhuǎn)移并整合到愈傷組織細(xì)胞的染色體DNA上C.篩選2用無(wú)色物質(zhì)K處理愈傷組織,篩選出呈現(xiàn)藍(lán)色的組織D.為檢測(cè)植株A是否具有抗除草劑性狀,可用相應(yīng)除草劑噴灑待測(cè)植株15.實(shí)驗(yàn)人員將一段外源DNA片段(包含約850個(gè)基因)與絲狀支原體(一種原核生物)的DNA進(jìn)行重組后,植入大腸桿菌,制造出一種“新的生命”。該生物能夠正常生長(zhǎng)、繁殖。下列有關(guān)該技術(shù)應(yīng)用的敘述,錯(cuò)誤的是()A.該技術(shù)可以制造某些微生物,用于生產(chǎn)藥品、制造染料、降解有毒物質(zhì)等B.由于存在生殖隔離,因此人造生命進(jìn)入自然界并不會(huì)破壞生物多樣性C.人造生命擴(kuò)散到自然界,有可能造成環(huán)境安全性問(wèn)題D.此項(xiàng)技術(shù)可能被用來(lái)制造生物武器,從而危及人類(lèi)安全二、不定項(xiàng)選擇題(共5小題,每小題3分,共15分,每小題有一個(gè)或多個(gè)選項(xiàng)符合題目要求,全部選對(duì)得3分,選對(duì)但不全的得1分,有選錯(cuò)的得0分)16.即墨老酒以黃米為主要原料,經(jīng)蒸煮、加曲、糖化、發(fā)酵、過(guò)濾、煎酒(90℃)過(guò)程釀造而成。下列說(shuō)法正確的是()A.蒸煮能在滅菌的同時(shí)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),促進(jìn)淀粉的釋放B.加曲前需要加水浸曲,目的是活化曲中的微生物C.后期發(fā)酵過(guò)程中酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精和CO2D.煎酒可使酒體中的蛋白質(zhì)變性,同時(shí)殺死酒體中的全部微生物17.[2023江蘇泰州高二階段測(cè)試]利用山金柑愈傷組織細(xì)胞(2n)和早花檸檬葉肉細(xì)胞(2n)進(jìn)行體細(xì)胞雜交可以得到品質(zhì)高、抗逆性強(qiáng)的雜種植株。下圖是7組雜種植株核DNA和線(xiàn)粒體DNA來(lái)源鑒定的結(jié)果。下列分析正確的是()A.獲得的融合原生質(zhì)體需放在無(wú)菌水中以防止雜菌污染B.用滅活病毒誘導(dǎo)兩種細(xì)胞原生質(zhì)體的融合依賴(lài)于細(xì)胞膜的流動(dòng)性C.可通過(guò)觀(guān)察融合后細(xì)胞的顏色對(duì)雜種細(xì)胞進(jìn)行初步篩選D.雜種植株是二倍體,其核基因來(lái)自早花檸檬,線(xiàn)粒體基因來(lái)自山金柑18.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞,下列有關(guān)圖中實(shí)驗(yàn)研究的敘述錯(cuò)誤的是()A.已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能通過(guò)①獲得誘導(dǎo)多能干細(xì)胞B.過(guò)程①的效果相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的脫分化C.將②所得的細(xì)胞移植回甲小鼠體內(nèi)不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng),是因?yàn)榛蛐屯耆嗤珼.過(guò)程③得Z細(xì)胞還需通過(guò)接種病毒進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的檢測(cè)19.[2023江蘇泰州中學(xué)高二月考]CD47是一種在多種細(xì)胞中廣泛表達(dá)的跨膜糖蛋白,能夠與巨噬細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,并抑制其吞噬作用。結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍??蒲腥藛T嘗試合成抗CD47的單克隆抗體,并進(jìn)一步探究其對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬作用的影響。過(guò)程如下圖所示,下列分析錯(cuò)誤的是()注:吞噬指數(shù)越大,代表吞噬能力越強(qiáng)。A.可用滅活病毒誘導(dǎo)②過(guò)程兩種細(xì)胞融合,該方法也適用于植物體細(xì)胞的雜交B.③過(guò)程可利用CD47糖蛋白篩選出目標(biāo)雜交瘤細(xì)胞C.抗CD47單克隆抗體與巨噬細(xì)胞結(jié)合,增強(qiáng)其吞噬作用D.在腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)液中加入抗CD47抗體將抑制腫瘤細(xì)胞的增殖20.[2023江蘇南京師范大學(xué)附中高二期中]研究人員用圖1中質(zhì)粒和圖2中含目的基因的片段構(gòu)建重組質(zhì)粒(圖中標(biāo)注了相關(guān)限制酶切割位點(diǎn)),將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌后進(jìn)行篩選及PCR鑒定。以下敘述正確的是()圖1圖2A.構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程應(yīng)選用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶B.使用DNA連接酶將酶切后的質(zhì)粒和目的基因片段進(jìn)行重組C.能在添加四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存一定是含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌D.利用PCR鑒定含目的基因的大腸桿菌時(shí)應(yīng)選用引物甲和引物丙三、非選擇題(共5小題,共55分)21.(11分)乳酸菌是著名的“長(zhǎng)壽益生菌”,具有改善胃腸功能,抑制腐生菌生長(zhǎng),調(diào)節(jié)胃腸菌群平衡,提高免疫力,降低血清膽固醇等多種功能。培養(yǎng)與鑒定乳酸菌常用MRS培養(yǎng)基,其配方如下表,回答下列問(wèn)題。成分牛肉膏蛋白胨酵母膏葡萄糖乙酸鈉檸檬酸二銨含量8.0g10.0g4.0g20.0g5.0g2.0g成分Na2HPO4MgSO4MnSO4瓊脂碳酸鈣H2O含量2.0g0.2g0.05g20.0g30.0g加水定容到1L(1)分析表格可知,該MRS培養(yǎng)基是(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基。葡萄糖為乳酸菌的生長(zhǎng)繁殖提供,培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的主要目的是。
(2)乳酸菌的含量是衡量酸奶品質(zhì)的重要指標(biāo)(國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)為2×106個(gè)/mL),為調(diào)查市場(chǎng)上A、B兩款暢銷(xiāo)酸奶產(chǎn)品中乳酸菌活菌數(shù)量,甲、乙兩名同學(xué)分別獨(dú)自進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)操作步驟:第一步,取1mL酸奶注入裝有XmL無(wú)菌水的試管中,充分混合均勻,得到稀釋10倍的菌液,依上述方法逐步稀釋到103倍;第二步,從稀釋103倍的試管中取菌液0.1mL均勻涂布在MRS培養(yǎng)基平板上,置于37℃恒溫箱培養(yǎng)24~48h;第三步,觀(guān)察菌落的特征和透明圈,統(tǒng)計(jì)乳酸菌的菌落數(shù),得到如下實(shí)驗(yàn)結(jié)果:酸奶產(chǎn)品A款B款甲同學(xué)實(shí)驗(yàn)平板12345678菌落數(shù)/個(gè)02402382420152150148乙同學(xué)實(shí)驗(yàn)平板①②③④①②③④菌落數(shù)/個(gè)2226526826218189189186①X為,菌落的特征主要包括菌落的形態(tài)、大小、等方面,不同菌種的菌落特征一般不同,具有菌種特異性。
②乙同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果能否作為判斷兩款酸奶產(chǎn)品中乳酸菌數(shù)目是否符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的依據(jù)?,原因是。
③根據(jù)甲同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,請(qǐng)你判斷兩款酸奶產(chǎn)品是否符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)并說(shuō)明理由:。
22.(12分)Ⅰ.紫花苜蓿是全世界栽培歷史最悠久、利用最廣泛的豆科牧草,但易造成家畜鼓脹病。百脈根富含單寧,單寧可與植物蛋白質(zhì)結(jié)合,不引起家畜采食后鼓脹。為培育抗鼓脹病的新型牧草,科研人員利用野生型清水紫花苜蓿和里奧百脈根為材料進(jìn)行了實(shí)踐研究。研究主要流程如下圖(注:IOA可抑制植物細(xì)胞呼吸第一階段,R-6G可阻止線(xiàn)粒體的功能)。(1)在制備兩種植物原生質(zhì)體時(shí),先將兩種細(xì)胞分別置于0.5~0.6mol/L的甘露醇溶液中,使細(xì)胞在較高滲透壓環(huán)境下處于較穩(wěn)定狀態(tài),從而有利于用去除細(xì)胞壁。兩種細(xì)胞融合成功的標(biāo)志是。
(2)①過(guò)程可使用的物理方法有法(答出一種即可),步驟②為。經(jīng)過(guò)步驟②③到形成再生植株,體現(xiàn)的主要原理是。
(3)利用圖示技術(shù)進(jìn)行育種的優(yōu)點(diǎn)是。
Ⅱ.在體細(xì)胞克隆牛的培育過(guò)程中,請(qǐng)回答以下問(wèn)題。(4)采集卵子之前,需給母牛注射適量的,以增加排卵。卵母細(xì)胞需培養(yǎng)到期。
(5)胚胎移植前,需要對(duì)代孕母牛進(jìn)行處理,為即將移入的胚胎提供合適的生理環(huán)境。胚胎移植的實(shí)質(zhì)是。胚胎分割可以增加胚胎數(shù)量,在對(duì)囊胚進(jìn)行分割時(shí)注意內(nèi)細(xì)胞團(tuán)要均等分割。
23.(8分)科研人員采用轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因綿羊,以便通過(guò)乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人凝血因子Ⅸ醫(yī)用蛋白,該技術(shù)的操作過(guò)程如圖所示?;卮鹣铝袉?wèn)題。(1)由過(guò)程①獲得的A為,將獲得的人凝血因子Ⅸ基因?qū)氤衫w維細(xì)胞常用的方法是。
(2)在核移植之前,必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核,目的是。培養(yǎng)經(jīng)過(guò)核移植獲得的重組細(xì)胞的培養(yǎng)基中,除營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外,還需要提供(答出2點(diǎn))等環(huán)境條件。
(3)胚胎移植時(shí),一般選擇發(fā)育至階段的胚胎進(jìn)行移植。
(4)經(jīng)培育獲得的轉(zhuǎn)基因綿羊除能分泌人凝血因子Ⅸ外,其與核供體動(dòng)物的性狀基本相似,但又不完全相同,從遺傳物質(zhì)角度分析,其原因是。
24.(12分)[2023浙江6月選考]賴(lài)氨酸是人體不能合成的必需氨基酸,而人類(lèi)主要食物中的賴(lài)氨酸含量很低,利用生物技術(shù)可提高食物中賴(lài)氨酸含量?;卮鹣铝袉?wèn)題。(1)植物細(xì)胞合成的賴(lài)氨酸達(dá)到一定濃度時(shí),能抑制合成過(guò)程中兩種關(guān)鍵酶的活性,導(dǎo)致賴(lài)氨酸含量維持在一定濃度水平,這種調(diào)節(jié)方式屬于。根據(jù)這種調(diào)節(jié)方式,在培養(yǎng)基中添加,用于篩選經(jīng)人工誘變的植物懸浮細(xì)胞,可得到抗賴(lài)氨酸類(lèi)似物的細(xì)胞突變體,通過(guò)培養(yǎng)獲得再生植株。
(2)隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞工程結(jié)合和發(fā)展,2011年我國(guó)首次利用轉(zhuǎn)基因和體細(xì)胞核移植技術(shù)成功培育了高產(chǎn)賴(lài)氨酸轉(zhuǎn)基因克隆奶牛。其基本流程為:①構(gòu)建乳腺專(zhuān)一表達(dá)載體。隨著測(cè)序技術(shù)的發(fā)展,為獲取富含賴(lài)氨酸的酪蛋白基因(目的基因),可通過(guò)檢索獲取其編碼序列,用化學(xué)合成法制備得到。再將獲得的目的基因與含有乳腺特異性啟動(dòng)子的相應(yīng)載體連接,構(gòu)建出乳腺專(zhuān)一表達(dá)載體。
②表達(dá)載體轉(zhuǎn)入牛胚胎成纖維細(xì)胞(BEF)。將表達(dá)載體包裹到磷脂等構(gòu)成的脂質(zhì)體內(nèi),與BEF膜發(fā)生,表達(dá)載體最終進(jìn)入細(xì)胞核,發(fā)生轉(zhuǎn)化。
③核移植。將轉(zhuǎn)基因的BEF作為核供體細(xì)胞,從牛卵巢獲取卵母細(xì)胞,經(jīng)體外培養(yǎng)及去核后作為。將兩種細(xì)胞進(jìn)行電融合,電融合的作用除了促進(jìn)細(xì)胞融合,同時(shí)起到了重組細(xì)胞發(fā)育的作用。
④重組細(xì)胞的體外培養(yǎng)及胚胎移植。重組細(xì)胞體外培養(yǎng)至,植入代孕母牛子宮角,直至小牛出生。
⑤檢測(cè)。DNA水平檢測(cè):利用PCR技術(shù),以非轉(zhuǎn)基因牛耳組織細(xì)胞作為陰性對(duì)照,以為陽(yáng)性對(duì)照,檢測(cè)到轉(zhuǎn)基因牛耳組織細(xì)胞中存在目的基因。RNA水平檢測(cè):從非轉(zhuǎn)基因牛乳汁中的脫落細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因牛乳汁中的脫落細(xì)胞和轉(zhuǎn)基因牛耳組織細(xì)胞,提取總RNA,對(duì)總RNA進(jìn)行處理,以去除DNA污染,再經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA,并以此為,利用特定引物擴(kuò)增目的基因片段。結(jié)果顯示目的基因在轉(zhuǎn)基因牛乳汁中的脫落細(xì)胞內(nèi)表達(dá),而不在牛耳組織細(xì)胞內(nèi)表達(dá),原因是什么?
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25.(12分)黃瓜花葉病毒能感染多種植物,對(duì)煙草的危害尤其嚴(yán)重。病毒的Cu-4基因表達(dá)所形成的蛋白是子代病毒形成和釋放的關(guān)鍵蛋白。研究人員利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得能表達(dá)Cu-4基因反義RNA的轉(zhuǎn)基因煙草,反義RNA與Cu-4基因轉(zhuǎn)錄獲得的mRNA互補(bǔ)結(jié)合形成雙鏈RNA,阻止了mRNA的翻譯,從而獲得了抵抗該病毒的能力。在Cu-4基因(A鏈?zhǔn)悄0彐?一側(cè)連接了帶有細(xì)菌啟動(dòng)子的四環(huán)素抗性基因(在植物細(xì)胞中該基因會(huì)被完整切除),如圖1所示。圖2是Ti質(zhì)粒相關(guān)基因圖譜。圖1圖2備注:Cu-4基因長(zhǎng)度為300bp,tet'基因長(zhǎng)度為500bp。Ⅰ~Ⅳ是四種引物。LB和RB是T-DNA的界,EcoRⅠ和XhoⅠ是兩種限制酶,切割后形成的黏性末端不互補(bǔ)。Piss和Tkc是僅在植物細(xì)胞中發(fā)揮功能的啟動(dòng)子和終止子。tet'和amp'分別是四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因。所用農(nóng)桿菌不具有氨芐青霉素、四環(huán)素和潮霉素抗性。(1)人工合成如圖1所示的DNA片段后,利用引物組合(A.引物Ⅰ和Ⅳ;B.引物Ⅱ和Ⅲ;C.引物Ⅰ和Ⅲ;D.引物Ⅱ和Ⅳ)進(jìn)行PCR擴(kuò)增,為使圖1所示的DNA片段能與載體正確連接,在引物的5'端分別添加酶的識(shí)別序列,將Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌后,可使用含有的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。
(2)在將農(nóng)桿菌接種在煙草葉片前用砂紙輕微摩擦煙草葉片,目的是。接種一段時(shí)間后,將煙草葉片酶解,獲取分散的葉肉細(xì)胞。將葉肉細(xì)胞培養(yǎng)在含有潮霉素的培養(yǎng)基中擴(kuò)增培養(yǎng),其中潮霉素的作用是。
(3)提取葉肉細(xì)胞的總DNA,酶切后用相應(yīng)的PCR引物進(jìn)行擴(kuò)增,電泳后若觀(guān)察到長(zhǎng)度的片段,則說(shuō)明所需的基因?qū)胫参锛?xì)胞中。
(4)將具有黃瓜花葉病毒抗性的煙草進(jìn)行自然種植時(shí),需考慮轉(zhuǎn)基因作物的安全性問(wèn)題。研究人員發(fā)現(xiàn)將目的基因轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞線(xiàn)粒體或葉綠體中可降低基因漂移發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn),原理是。
模塊綜合測(cè)評(píng)(二)1.C一般能被細(xì)胞直接吸收的糖類(lèi)是單糖,淀粉酶可催化淀粉水解為葡萄糖,酵母菌能直接利用葡萄糖,所以面粉中的淀粉酶可使淀粉糖化成可供酵母菌利用的糖,A項(xiàng)正確;面團(tuán)的發(fā)酵就是酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成過(guò)程,可理解為在面團(tuán)中進(jìn)行酵母菌等微生物的培養(yǎng),B項(xiàng)正確;最佳面團(tuán)是以面團(tuán)彈性弱,面筋延伸性強(qiáng),面團(tuán)發(fā)至原體積兩倍大來(lái)判斷,中種法兩次發(fā)酵使得發(fā)酵時(shí)間更長(zhǎng),令面團(tuán)的特性更加成熟,這種面團(tuán)更好,彈性弱,所以中種法兩次發(fā)酵不能使面團(tuán)彈性增強(qiáng),C項(xiàng)錯(cuò)誤;環(huán)境的溫度、濕度、酵母的活性、面團(tuán)的pH均會(huì)影響酵母菌的繁殖和生命活動(dòng),從而影響面包的發(fā)酵過(guò)程,D項(xiàng)正確。2.CX為聚苯乙烯,可為黃粉蟲(chóng)腸道細(xì)菌提供碳源,但不能提供氮源,A項(xiàng)錯(cuò)誤;一般選擇培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基,故需要加入瓊脂作為凝固劑,B項(xiàng)錯(cuò)誤;該細(xì)菌生活在腸道中,所以需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性,C項(xiàng)正確;將涂布器放在酒精燈火焰上灼燒后不可直接涂布接種,要冷卻一會(huì),待溫度下降后進(jìn)行涂布,否則會(huì)將細(xì)菌殺死,D項(xiàng)錯(cuò)誤。3.D本實(shí)驗(yàn)的目的是篩選能高效降解角蛋白的嗜熱菌,因此既要耐高溫,又要能夠高效降解角蛋白,所以在C點(diǎn)取樣,并且以角蛋白氮源培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)。4.D實(shí)驗(yàn)操作中對(duì)玻璃器皿常用的滅菌方法為干熱滅菌,A項(xiàng)正確;依據(jù)題意可知,若培養(yǎng)的細(xì)菌能分解乳糖產(chǎn)酸,會(huì)使培養(yǎng)基變紅,若培養(yǎng)的細(xì)菌能分解酪蛋白產(chǎn)堿,會(huì)讓培養(yǎng)基變藍(lán),若培養(yǎng)的細(xì)菌能產(chǎn)生還原劑使石蕊還原,會(huì)讓培養(yǎng)基變白,但培養(yǎng)的細(xì)菌不一定能產(chǎn)生凝乳酶使酪蛋白凝固,B、C兩項(xiàng)正確,D項(xiàng)錯(cuò)誤。5.B利用花粉通過(guò)②⑤⑥(染色體數(shù)目加倍)過(guò)程獲得植株C的育種方法稱(chēng)為單倍體育種,A項(xiàng)錯(cuò)誤;植物的快速繁殖技術(shù)和脫毒苗的獲得均需通過(guò)①④過(guò)程獲得植株,均是植物細(xì)胞工程的應(yīng)用,B項(xiàng)正確;細(xì)胞全能性是指發(fā)育為完整個(gè)體或分化為各種細(xì)胞的潛能,⑧過(guò)程得到的是細(xì)胞產(chǎn)物,未體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性,C項(xiàng)錯(cuò)誤;③⑦過(guò)程可用于突變體的獲取,原因是細(xì)胞發(fā)生了基因突變,但不是誘變劑導(dǎo)致的,且突變是不定向的,D項(xiàng)錯(cuò)誤。6.B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)加入抗生素,防止培養(yǎng)過(guò)程中的污染,A項(xiàng)錯(cuò)誤;由題干可知,基因組印記是通過(guò)甲基化使一個(gè)基因不表達(dá),對(duì)某些基因進(jìn)行去甲基化處理有利于其表達(dá),然后促進(jìn)了細(xì)胞的全能性的表現(xiàn),獲得“孤雌小鼠”,B項(xiàng)正確;“孤雌小鼠”是由兩個(gè)生殖細(xì)胞(修飾后的次級(jí)卵母細(xì)胞和極體)結(jié)合后發(fā)育形成的,同時(shí)由于配子在形成過(guò)程中會(huì)經(jīng)歷基因重組,或發(fā)生基因突變,將導(dǎo)致兩個(gè)生殖細(xì)胞結(jié)合后的“孤雌小鼠”的基因型不一定與提供卵母細(xì)胞的雌鼠相同,C項(xiàng)錯(cuò)誤;囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大,會(huì)導(dǎo)致透明帶破裂,胚胎從其中伸展出來(lái),這一過(guò)程叫做孵化,D項(xiàng)錯(cuò)誤。7.C卵巢中采集的卵子需要培養(yǎng)到MⅡ中期才能進(jìn)行受精,A項(xiàng)錯(cuò)誤;囊胚期胚胎出現(xiàn)了內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層的分化,而基因的選擇性表達(dá)一直貫穿整個(gè)生命歷程,B項(xiàng)錯(cuò)誤;囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大,會(huì)導(dǎo)致透明帶破裂,胚胎從其中伸展出來(lái),這一過(guò)程叫做孵化,胚胎的孵化發(fā)生在囊胚期,如果不能正常孵化,胚胎就無(wú)法繼續(xù)發(fā)育,C項(xiàng)正確;同期發(fā)情處理使用的是孕激素等激素而不是促性腺激素,促性腺激素可用于超數(shù)排卵,D項(xiàng)錯(cuò)誤。8.D體外受精前,需要將所采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)至MⅡ期,精子在含Ca2+載體的獲能液中獲能,A項(xiàng)錯(cuò)誤;PGD是指胚胎植入前的基因診斷,PGD可用于篩選紅綠色盲,PGS是指胚胎植入前的染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)檢測(cè),PGS可用于篩選唐氏綜合征,B項(xiàng)錯(cuò)誤;受體子宮對(duì)外來(lái)胚胎幾乎不發(fā)生免疫反應(yīng),因此進(jìn)行胚胎移植前不需要對(duì)夫妻雙方進(jìn)行免疫檢查,C項(xiàng)錯(cuò)誤;早期胚胎需要發(fā)育至桑葚胚或囊胚期才能進(jìn)行移植,即“理想胚胎”需培養(yǎng)至桑葚胚或囊胚才能植入子宮,D項(xiàng)正確。9.A制備細(xì)胞懸液前需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶對(duì)組織進(jìn)行處理,但長(zhǎng)時(shí)間處理會(huì)損傷細(xì)胞結(jié)構(gòu),因此需要限制處理時(shí)間,A項(xiàng)錯(cuò)誤;氣體環(huán)境為95%空氣(細(xì)胞代謝必需的)、5%的CO2(維持培養(yǎng)液的pH),B項(xiàng)正確;三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可使細(xì)胞形成立體的三維結(jié)構(gòu),可以用于檢測(cè)某種藥物對(duì)內(nèi)部細(xì)胞的作用,C項(xiàng)正確;正常情況下,常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)和三維細(xì)胞培養(yǎng)都存在接觸抑制的現(xiàn)象,D項(xiàng)正確。10.D線(xiàn)性DNA易受到外力的影響而斷裂,故Ⅰ過(guò)程不宜劇烈振蕩,以防止線(xiàn)性DNA斷裂混入上清液中,A項(xiàng)正確;DNA不溶于酒精,Ⅲ過(guò)程中冷酒精的作用是使DNA析出,B項(xiàng)正確;1為空白對(duì)照,3中質(zhì)粒大小與1相同,因此3為非重組質(zhì)粒,2為重組質(zhì)粒,C項(xiàng)正確;DNA分子具有可解離的基團(tuán),在一定的pH下,這些基團(tuán)可以帶上正電荷或負(fù)電荷,在電場(chǎng)的作用下,這些帶電分子會(huì)向著與它所帶電荷相反的電極移動(dòng),D項(xiàng)錯(cuò)誤。11.CE.coliDNA連接酶不能連接具有平末端的DNA片段,A項(xiàng)錯(cuò)誤。質(zhì)粒用酶3切割,目的基因用酶1切割,得不到相同的黏性末端,所以二者不能連接,B項(xiàng)錯(cuò)誤。質(zhì)粒和目的基因都用酶1和酶2切割,用T4DNA連接酶能將目的基因和質(zhì)粒連接起來(lái),且避免了目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化,所以效率最高,C項(xiàng)正確。酶4會(huì)破壞抗生素抗性基因,即標(biāo)記基因,D項(xiàng)錯(cuò)誤。12.A噬菌體是病毒,營(yíng)寄生生活,用培養(yǎng)基無(wú)法培養(yǎng)噬菌體,需要用相應(yīng)的宿主細(xì)胞培養(yǎng),A項(xiàng)錯(cuò)誤;建立噬菌體展示庫(kù)需將外源DNA片段插入噬菌體DNA的合適位置,需要限制酶切割和DNA連接酶連接兩個(gè)DNA片段,B項(xiàng)正確;向構(gòu)建的噬菌體展示庫(kù)中加入與目標(biāo)蛋白相應(yīng)的抗體,進(jìn)行抗原—抗體雜交,若有雜交帶出現(xiàn),表明目標(biāo)蛋白已經(jīng)出現(xiàn),C項(xiàng)正確;結(jié)合題圖可知,利用抗原—抗體雜交,根據(jù)雜交信號(hào)強(qiáng)弱判斷抗原抗體結(jié)合的親和力,繼而經(jīng)誘變及多輪篩選可能獲得與抗原親和力更強(qiáng)的抗體及其基因,D項(xiàng)正確。13.D在復(fù)性過(guò)程中,PCR反應(yīng)體系中的溫度會(huì)被降低至50℃左右,使得引物能夠與DNA單鏈結(jié)合,A項(xiàng)正確;DNA在沸水浴條件下,與二苯胺反應(yīng)呈藍(lán)色,因此可利用二苯胺溶液鑒定DNA,B項(xiàng)正確;進(jìn)行DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定實(shí)驗(yàn)所需的緩沖液和酶應(yīng)分裝成小份,并在-20℃的低溫下儲(chǔ)存,以防止酶變性失活,C項(xiàng)正確;PCR時(shí)需將反應(yīng)體系先加熱至90℃以上,此操作的目的是使目的基因解旋,D項(xiàng)錯(cuò)誤。14.A氨芐青霉素抗性基因和報(bào)告基因均可作為標(biāo)記基因,鑒別并篩選含有目的基因的細(xì)胞,但報(bào)告基因中的內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的RNA序列在農(nóng)桿菌中不能被切除,“報(bào)告基因”的表達(dá)產(chǎn)物不具有相應(yīng)的活性,無(wú)法催化無(wú)色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色,所以含氨芐青霉素的培養(yǎng)基能將成功導(dǎo)入表達(dá)載體的農(nóng)桿菌篩選出來(lái),而含無(wú)色物質(zhì)K的培養(yǎng)基卻不能篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的農(nóng)桿菌,A項(xiàng)錯(cuò)誤;農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上,根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn),將目的基因(基因G)插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上,通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,就可以把目的基因(基因G)整合到愈傷組織細(xì)胞的染色體DNA上,B項(xiàng)正確;根據(jù)題干信息可知,報(bào)告基因的產(chǎn)物能催化無(wú)色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色,因此篩選2需要用無(wú)色物質(zhì)K處理愈傷組織并篩選出呈現(xiàn)藍(lán)色的組織,C項(xiàng)正確;為從個(gè)體水平上檢測(cè)圖中玉米植株A是否具有抗除草劑性狀,可采用的方法是用相應(yīng)除草劑噴灑待測(cè)玉米植株,D項(xiàng)正確。15.B通過(guò)導(dǎo)入不同的目的基因,可用于生產(chǎn)藥品、制造染料、降解有毒物質(zhì),A項(xiàng)正確;“新的生命”是一個(gè)新的物種,由于其沒(méi)有天敵,進(jìn)入自然界后,會(huì)破壞生物的多樣性,B項(xiàng)錯(cuò)誤;人造生命擴(kuò)散到自然界,競(jìng)爭(zhēng)能力強(qiáng),因此能成為“入侵的外來(lái)物種”,有可能造成環(huán)境安全性問(wèn)題,C項(xiàng)正確;利用基因工程技術(shù),在一些不致病的微生物體內(nèi)插入致病基因,或在一些致病的細(xì)菌或者病毒中插入能對(duì)抗普通疫苗或藥物的基因,就會(huì)培育出新的致病微生物或新的抗藥性增強(qiáng)的致病微生物,這些微生物可制成生物武器,D項(xiàng)正確。16.ABC蒸煮的目的是使原料在高溫下滅菌,同時(shí)使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破裂,淀粉被釋放出來(lái),淀粉由顆粒狀變?yōu)槿苣z狀態(tài),A項(xiàng)正確;加曲前需要加水浸曲,加水浸曲是將酵母菌活化,自由水增加使酵母菌新陳代謝旺盛,B項(xiàng)正確;在無(wú)氧條件下,酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵,后期發(fā)酵過(guò)程中酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精和CO2,C項(xiàng)正確;煎酒的溫度在90℃,可使酒體中的蛋白質(zhì)變性,但只能殺死酒體中的部分微生物,D項(xiàng)錯(cuò)誤。17.CD獲得的融合原生質(zhì)體不可放置在無(wú)菌水中,否則會(huì)導(dǎo)致吸水漲破,A項(xiàng)錯(cuò)誤;病毒可誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合,但不能誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,B項(xiàng)錯(cuò)誤;由于愈傷組織細(xì)胞不含葉綠體,而葉肉細(xì)胞含有葉綠體,因此可通過(guò)觀(guān)察融合后細(xì)胞的顏色進(jìn)行初步篩選,C項(xiàng)正確;由圖可知,雜種植株的線(xiàn)粒體基因只來(lái)自山金柑,核基因只來(lái)自早花檸檬,因此仍是二倍體,D項(xiàng)正確。18.CD誘導(dǎo)多能干細(xì)胞由已分化的纖維母細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來(lái),已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)獲得誘導(dǎo)多能干細(xì)胞,A項(xiàng)正確;①過(guò)程將已經(jīng)分化的細(xì)胞培養(yǎng)成分化程度低的細(xì)胞過(guò)程,類(lèi)似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的脫分化,B項(xiàng)正確;由題圖可知,由于存在“誘導(dǎo)基因”這一步驟,誘導(dǎo)多能干細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,故②所得的細(xì)胞與受體細(xì)胞的基因型并不完全相同,C項(xiàng)錯(cuò)誤;③表示動(dòng)物細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞,還需經(jīng)過(guò)分子水平的抗體檢測(cè),呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞才進(jìn)行大量培養(yǎng),D項(xiàng)錯(cuò)誤。19.ACD植物體細(xì)胞雜交過(guò)程可用物理或化學(xué)法誘導(dǎo),但不能用滅活的病毒誘導(dǎo),滅活病毒可誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞的融合,A項(xiàng)錯(cuò)誤;篩選步驟的目的就是從未融合的B淋巴細(xì)胞、兩個(gè)B淋巴細(xì)胞融合形成的細(xì)胞、未融合的骨髓瘤細(xì)胞、兩個(gè)骨髓瘤細(xì)胞融合形成的細(xì)胞及骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合形成的細(xì)胞所組成的細(xì)胞群中篩選出骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合形成的細(xì)胞,可利用CD47糖蛋白特異性結(jié)合的功能篩選目標(biāo)雜交瘤細(xì)胞,B項(xiàng)正確;實(shí)驗(yàn)組中加入了單克隆抗體,抗體與腫瘤細(xì)胞表面的CD47發(fā)生特異性結(jié)合,從而解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用,吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著高于對(duì)照組,C項(xiàng)錯(cuò)誤;利用抗CD47抗體抑制腫瘤細(xì)胞表面的CD47蛋白的活性,可促進(jìn)巨噬細(xì)胞吞噬腫瘤細(xì)胞,不能抑制腫瘤細(xì)胞的增殖,D項(xiàng)錯(cuò)誤。20.BD選擇的限制酶應(yīng)在目的基因兩端存在識(shí)別位點(diǎn),但BamHⅠ可破壞質(zhì)粒中的兩種標(biāo)記基因,因此只能選BclⅠ和HindⅢ兩種限制酶切割,A項(xiàng)錯(cuò)誤;酶切后的質(zhì)粒和目的基因片段要用DNA連接酶連接,構(gòu)建重組載體,B項(xiàng)正確;能在添加四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存的也可能是只含有質(zhì)粒的大腸桿菌,C項(xiàng)錯(cuò)誤;PCR技術(shù)要求兩種引物分別和目的基因的兩條單鏈結(jié)合,沿相反的方向合成子鏈,故利用PCR鑒定目的基因時(shí)所用的引物為引物甲和引物丙,D項(xiàng)正確。21.答案(1)固體碳源中和乳酸菌代謝過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸和利于乳酸菌的識(shí)別和分離(2)①9顏色、光澤、質(zhì)地②不能平板被雜菌污染③A款符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),因?yàn)槠淙樗峋繛?.4×106個(gè)/mL,高于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),B款不符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),因?yàn)槠淙樗峋繛?.5×106個(gè)/mL,低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)解析(1)分析表格可知,此實(shí)驗(yàn)需要對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),并且有瓊脂作為凝固劑,故該培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基。葡萄糖為乳酸菌的生長(zhǎng)繁殖提供碳源,分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明,乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣形成溶鈣環(huán),故培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的主要目的是中和乳酸菌代謝過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸和利于乳酸菌的識(shí)別和分離。(2)①將菌液稀釋10倍,即酸奶樣品體積∶無(wú)菌水體積=1∶9,故X為9,菌落的特征主要包括菌落的形態(tài)、大小、邊緣、光澤、質(zhì)地、顏色等方面。②因?yàn)橐彝瑢W(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果中作為對(duì)照的平板1出現(xiàn)菌落,說(shuō)明平板被雜菌污染,結(jié)果不可靠,所以不能作為判斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)。③根據(jù)甲同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,計(jì)算出A款酸奶乳酸菌含量=(240+238+242)÷3÷0.1×103=2.4×106(個(gè)/mL),B款酸奶乳酸菌含量=(150+152+148)÷3÷0.1×103=1.5×106(個(gè)/mL),根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(2×106個(gè)/mL),A款酸奶符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),B款不符合。22.答案(1)纖維素酶和果膠酶雜種細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁(2)電融合/離心脫分化植物細(xì)胞具有全能性(3)打破生殖隔離,實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種(4)(外源)促性腺激素減數(shù)分裂Ⅱ中(MⅡ)(5)同期發(fā)情早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移解析(1)植物細(xì)胞壁的成分是纖維素和果膠,進(jìn)行植物細(xì)胞融合時(shí),常用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。雜種細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁是植物細(xì)胞融合成功的標(biāo)志。(2)細(xì)胞融合常用的物理方法是電融合法和離心法。步驟②由雜種細(xì)胞培育為愈傷組織的過(guò)程是脫分化,經(jīng)過(guò)脫分化和再分化形成再生植株,體現(xiàn)了植物細(xì)胞具有全能性。(3)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可打破生殖隔離,實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種。(4)在采集卵子之前,需要給卵子供體注射適量的促性腺激素,以增加排卵。從卵巢中吸取的卵子,需在體外培養(yǎng)到減數(shù)分裂Ⅱ中期才能進(jìn)行核移植,再通過(guò)顯微操作法去除細(xì)胞核,得到去核卵子。(5)胚胎移植前,為即將移入的胚胎提供合適的生理環(huán)境,需要對(duì)代孕母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理。胚胎移植的實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。23.答案(1)含目的基因的表達(dá)載體顯微注射法(2)保證核遺傳物質(zhì)來(lái)自含目的基因的成纖維細(xì)胞無(wú)菌無(wú)毒、溫度、pH和滲透壓(3)桑葚胚或囊胚(4)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)轉(zhuǎn)基因綿羊的性狀產(chǎn)生影響解析(1)要想目的基因只在乳腺組織中表達(dá),在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),需要將人的基因和乳腺組織特異性表達(dá)的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起,過(guò)程①獲得的A為含目的基因的表達(dá)載體;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法。(2)在核移植之前必須先去掉受體卵細(xì)胞的核,目的是保證核遺傳物質(zhì)來(lái)自含目的基因的成纖維細(xì)胞,培養(yǎng)經(jīng)過(guò)核移植獲得重組細(xì)胞的培養(yǎng)基中,除營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外,還應(yīng)提供無(wú)菌無(wú)毒、溫度、pH和滲透壓等環(huán)境條件。(3)胚胎移植時(shí),一般選擇發(fā)育至桑葚胚或囊胚階段的胚胎進(jìn)行移植,為使代孕母羊能接受外來(lái)胚胎,一般對(duì)其進(jìn)行同期發(fā)情處理。(4)克隆動(dòng)物的遺傳物質(zhì)來(lái)自供核的親本和提供卵母細(xì)胞(質(zhì))的親本,因此克隆動(dòng)物性狀與供體動(dòng)物性狀不完全相同,從遺傳物質(zhì)的角度來(lái)說(shuō),是因?yàn)槁涯讣?xì)胞的細(xì)胞
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