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PAGE9-專題測試卷(五)(時間:60分鐘滿分:100分)一、選擇題(共15小題,1~10小題每小題3分,11~15小題每小題5分,共55分。每小題只有一個選項符合題意。)1.下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分別試驗的敘述,正確的是()A.都要用豬血細胞來做試驗B.提取細胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需用蒸餾水漲破細胞C.在蛋白質(zhì)提取和分別過程中進行透析可以去除溶液中的DNAD.蛋白質(zhì)和DNA都可以用電泳的方法進行分別純化解析:豬血細胞中不含DNA,所以不能用于提取DNA,A錯誤;提取DNA時,假如是用動物的細胞須要用蒸餾水漲破,假如用植物細胞則不須要,而是用洗滌劑溶解細胞膜,B錯誤;在蛋白質(zhì)提取和分別過程中進行透析可以去除溶液中的小分子雜質(zhì),而DNA屬于大分子物質(zhì),C錯誤;電泳法是常規(guī)分別純化的方法,蛋白質(zhì)和DNA都可以用電泳的方法進行分別純化,D正確。答案:D2.如圖表示細胞內(nèi)DNA復(fù)制和細胞外PCR擴增兩個過程,兩反應(yīng)過程的條件中相同的是()A.模塊B.原料C.酶D.能量供應(yīng)解析:細胞內(nèi)的DNA復(fù)制和細胞外的PCR擴增過程,須要的原料相同,都是四種脫氧核苷酸。答案:B3.下列關(guān)于血紅蛋白的提取和分別的敘述中,錯誤的是()A.紅細胞的洗滌效果與洗滌次數(shù)、離心速度和離心時間有關(guān)B.凝膠柱中適量氣泡的存在會提高分別的效果C.凝膠色譜法是一種依據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分別蛋白質(zhì)的方法D.推斷純化的蛋白質(zhì)是否達到要求可以采納電泳法答案:B4.通常用哺乳動物的血液來提取和分別血紅蛋白,下列敘述中正確的是()A.試驗時向簇新的血液中加入檸檬酸鈉的目的是防止血紅蛋白變性B.洗滌紅細胞的目的是避開細胞粘連在一起C.分別紅細胞時要進行較長時間的高速離心D.分別后血紅蛋白還要通過凝膠色譜法將樣品進一步純化解析:A錯誤,試驗時向簇新的血液中加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固;B錯誤,洗滌紅細胞的目的是去除雜蛋白;C錯誤,分別紅細胞時要低速短時間離心;D正確,分別后血紅蛋白還要通過凝膠色譜法將樣品進一步純化。答案:D5.在DNA粗提取與鑒定試驗中,將其次次過濾獲得的紗布上含有的DNA的黏稠物(含有較多雜質(zhì))分別處理如下:序號操作過程①放入2mol/L的NaCl溶液,攪拌后過濾②再加0.14mol/L的NaCl溶液,攪拌后過濾③再加入冷卻的、同體積的95%酒精溶液,用玻璃棒沿一個方向攪拌,卷起絲狀物上述操作過程正確的是()A.①② B.①②③C.①③ D.②③解析:其次次過濾后紗布上的是粗提取的DNA,此DNA還含有雜質(zhì),因此將其溶于2mol/L的NaCl溶液中,再進行過濾,以除去不溶于2mol/L的NaCl溶液的雜質(zhì)。然后向濾液中加入同體積的、冷卻的95%酒精即可析出DNA。然后挑出DNA進行鑒定。答案為C。答案:C6.在PCR反應(yīng)中一個DNA片段在6次循環(huán)后大約有多少個這樣的片段()A.8個 B.16個C.32個 D.64個解析:聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)技術(shù)是在人為條件下進行的DNA分子復(fù)制技術(shù),而DNA復(fù)制為半保留方式,經(jīng)過6個循環(huán)即復(fù)制6次,則合成26個DNA拷貝,原先有1個DNA,則最終可得到1×26=64個DNA分子拷貝。答案:D7.PCR(多聚酶鏈式反應(yīng))技術(shù)是一項在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù),如圖表示合成過程。下列說法錯誤的是()A.甲過程高溫使DNA變性解旋,該過程不須要解旋酶的作用B.丙過程用到的酶在高溫下失活,因此在PCR擴增時須要再添加C.假如把模板DNA的兩條鏈用15N標記,游離的脫氧核苷酸不做標記,循環(huán)3次后,在形成的子代DNA中含有15N標記的DNA占25%D.PCR中由堿基錯配引起的變異屬于基因突變解析:PCR中解旋是通過高溫進行的,故甲過程高溫使DNA變性解旋,該過程不須要解旋酶的作用,A正確;丙過程用到的酶為耐高溫的DNA聚合酶,在高溫下不會失活,因此在PCR擴增時不須要再添加,B錯誤;假如把模板DNA的兩條鏈用15N標記,游離的脫氧核苷酸不做標記,循環(huán)3次后,形成的DNA分子為8個,而含有15N標記的DNA分子為2個,故在形成的子代DNA中含有15N標記的DNA占25%,C正確;PCR中由堿基錯配引起的變異屬于基因突變,D正確。答案:B8.SCAR標記技術(shù)即特異性序列擴增DNA,是目前在育種應(yīng)用中首選的基因分子標記技術(shù)。下列有關(guān)SCAR標記技術(shù)說法正確的是()A.SCAR標記技術(shù)的原料是核糖核苷酸B.SCAR標記技術(shù)反應(yīng)的場所與轉(zhuǎn)錄的場所相同C.SCAR標記技術(shù)反應(yīng)的催化酶與轉(zhuǎn)錄的酶不同D.SCAR標記技術(shù)無法應(yīng)用于植物抗性育種解析:由于合成DNA片段,SCAR標記技術(shù)中的原料是脫氧核苷酸,A錯誤;SCAR標記技術(shù)反應(yīng)的場所與轉(zhuǎn)錄的場所不同,SCAR標記技術(shù)進行的場所是體外進行的,B錯誤;SCAR標記技術(shù)反應(yīng)催化的酶是DNA聚合酶,轉(zhuǎn)錄的酶是RNA聚合酶,故SCAR標記技術(shù)反應(yīng)的催化酶與轉(zhuǎn)錄的酶不同,C正確;SCAR標記技術(shù)可以篩選出目的基因應(yīng)用于植物基因工程育種,D錯誤。答案:C9.利用PCR技術(shù)擴增目的基因的過程中,需加入()A.耐高溫的解旋酶以保證DNA雙鏈完全解開B.2種已知核苷酸序列的引物以保證核苷酸鏈的延長C.4種足量的核糖核苷酸以保證目的基因的擴增D.肯定量的鹽酸和氫氧化鈉溶液以維持pH的穩(wěn)定解析:PCR技術(shù)中,采納高溫使DNA解旋,并沒有運用解旋酶,故A錯誤;利用PCR技術(shù)擴增DNA的過程中,須要2種已知核苷酸序列的引物以保證核苷酸鏈的延長,故B正確;PCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)制,須要4種足量的脫氧核糖核苷酸作為原料,故C錯誤;利用PCR技術(shù)擴增DNA的過程中,須要肯定量的緩沖溶液以維持pH的穩(wěn)定,因為PCR反應(yīng)須要在肯定的緩沖溶液中才能進行,故D錯誤。答案:B10.在利用雞血進行“DNA的粗提取與鑒定”的試驗中,下列敘述正確的是()A.用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14mol/L,濾去析出物B.調(diào)整NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分雜質(zhì)C.將絲狀物溶解在2mol/LNaCl溶液中,加入二苯胺試劑即呈藍色D.由于DNA對高溫耐受性較差,故需向DNA濾液中加入冷酒精解析:DNA在濃度為0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最低,因此用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14mol/L,DNA析出,應(yīng)當去除濾液,A錯誤;依據(jù)DNA和蛋白質(zhì)的溶解度以及對酶的耐受性不同,調(diào)整NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分雜質(zhì),B正確;將絲狀物溶解在2mol/LNaCl溶液中,加入二苯胺試劑后要經(jīng)過沸水浴才能呈現(xiàn)藍色,C錯誤;由于DNA不溶于酒精,蛋白質(zhì)溶于酒精,因此需向DNA濾液中加入冷酒精以進一步純化DNA,D錯誤。答案:B11.下列關(guān)于有關(guān)科學(xué)方法的敘述,錯誤的是()A.分別各種細胞器用差速離心法B.葉綠體中色素提取用紙層析法C.血紅蛋白的提取和分別時用凝膠色譜法、電泳法D.驗證DNA半保留復(fù)制用同位素標記法和密度梯度離心法解析:由于各種細胞器的質(zhì)量和密度不同,所以運用差速離心法,可以將細胞中各種細胞器相互分別開來,A正確;葉綠體中色素分別用紙層析法,B錯誤;分別與純化血紅蛋白可用凝膠色譜法,也用電泳法等,C正確;驗證DNA半保留復(fù)制時可用同位素標記法和密度梯度離心法,D正確。答案:B12.將經(jīng)處理裂開后的紅細胞混合液以2000r/min速度離心10min后,離心管中溶液分為4層,血紅蛋白位于從下至上的()A.第一層 B.其次層C.第三層 D.第四層解析:分別血紅蛋白溶液時,將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中,經(jīng)過中速長時離心后,可明顯看到試管中溶液分為4層,從上往下數(shù),第1層為甲苯層,第2層為脂溶性物質(zhì)的沉淀層,第3層為血紅蛋白水溶液,第4層為雜質(zhì)沉淀層。因此,血紅蛋白位于從下至上的其次層。答案:B13.已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種物質(zhì),其分子大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量狀況如圖所示。下列敘述正確的是()A.將樣品以2000r/min的速度離心10min,若分子戊存在于沉淀中,則分子甲也肯定存在于沉淀中B.若五種物質(zhì)為蛋白質(zhì),則用凝膠色譜柱分別時,甲的移動速度最快C.將樣品裝入透析袋中透析12h,若分子乙保留在袋內(nèi),則分子甲也保留在袋內(nèi)D.若五種物質(zhì)為蛋白質(zhì),用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分別樣品中的蛋白質(zhì)分子,則分子甲和分子丙形成的電泳帶相距最遠解析:A.由于甲的分子量小于戊,將樣品以2000r/min的速度離心10min,若分子戊存在于沉淀中,則分子甲不肯定存在于沉淀中,A錯誤;B.由于甲蛋白質(zhì)分子量最小,最簡單進入凝膠內(nèi)部的通道,路程最長,移動的速度最慢,B錯誤;C.分子量大小是甲<乙,透析時分子乙保留在袋內(nèi),則分子甲不肯定保留在袋內(nèi),C錯誤;D.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的遷移速率完全取決于分子本身的大小,由于甲和戊的分子量差距最小,因此二者之間的電泳帶相距最近,D正確。答案:D14.利用PCR技術(shù)將某DNA分子擴增n代的過程中,下列敘述錯誤的是()A.引物越短,PCR出來的非目標DNA就越多B.在適溫延長過程中,須要供應(yīng)ATPC.引物中G/C含量越高,復(fù)性溫度越高D.共有2n-1對引物參加子代DNA分子的合成解析:在適溫延長過程中,不須要供應(yīng)ATP。答案:B15.蛋白質(zhì)的提取和分別分為哪幾步,依次是()A.樣品處理、凝膠色譜操作、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳B.樣品處理、凝膠色譜操作、純化C.樣品處理、粗分別、純化、純度鑒定D.樣品處理、純化、粗分別、純度鑒定解析:蛋白質(zhì)的提取和分別的程序分為:樣品處理、粗分別、純化、純度鑒定四步。A項描述的是試驗操作過程中的技術(shù)。答案:C二、非選擇題(共5小題,共45分)16.(8分)如右圖是利用雞血粗提取DNA的基本操作,據(jù)圖分析回答:(1)若乙為雞血細胞液,則甲為________,該操作的試驗?zāi)康氖莀_________________________________________________。(2)若乙為含DNA的濃NaCl溶液,則甲為________,該操作的試驗?zāi)康氖侨コ齙_______(填“不溶”或“可溶”)性雜質(zhì)。(3)若該操作玻璃棒上能卷起白色絲狀物,則甲為______________。解析:(1)向雞血細胞液中加蒸餾水,其目的是使雞血細胞吸水漲破釋放出DNA。(2)向含DNA的濃NaCl溶液中加入蒸餾水,DNA溶解度降低會析出,從而去除可溶性雜質(zhì)。(3)DNA和雜質(zhì)分子在95%的冷酒精溶液中溶解度存在差異,DNA不溶于酒精溶液,但細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精溶液,故可去除溶于酒精溶液的雜質(zhì),向燒杯內(nèi)溶解有DNA的NaCl溶液中加入95%的冷酒精溶液,可用玻璃棒卷起白色絲狀物(DNA)。答案:(1)蒸餾水使雞血細胞吸水漲破釋放出DNA(2)蒸餾水可溶(3)95%的冷酒精溶液17.(9分)用基因工程技術(shù)從分別、提純的圓褐固氮菌中獲得固氮基因,然后進行PCR擴增。表1和表2分別表示用PCR擴增固氮基因的反應(yīng)體系及反應(yīng)條件。表1PCR反應(yīng)體系緩沖液脫氧核苷酸引物A引物BDNA聚合酶模板DNA50μL50μL0.5μL50μL0.5μL0.5U1~2μL加去離子水補足至50μL表2反應(yīng)條件復(fù)性延長30次循環(huán)后保溫溫度55℃72℃相宜4℃時間30s1min5~10min2h(1)從表1和表2中可得出,PCR技術(shù)與DNA復(fù)制相比較,主要區(qū)分之一是________。此外,從反應(yīng)條件看,所運用的DNA聚合酶應(yīng)具有________的特點。每次循環(huán)都須要2種引物的主要緣由是__________________。(2)在對固氮基因產(chǎn)物的生產(chǎn)探討中,須要從困難的細胞混合物中提取、分別高純度的蛋白質(zhì)。下圖表示蛋白質(zhì)提取和分別試驗涉及的相關(guān)原理。圖甲圖乙①圖甲表示相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠色譜法分別的過程。試管中收集到的液體最先出現(xiàn)的是相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì),緣由______________________________________________。②圖乙所示試驗?zāi)M電泳現(xiàn)象,U型管左側(cè)的顏色漸漸變深,緣由是__________________________________________________。解析:PCR的含義是多聚酶鏈式反應(yīng);PCR技術(shù)反應(yīng)的條件:穩(wěn)定的緩沖溶液環(huán)境、DNA模板、合成引物、四種脫氧核苷酸、DNA聚合酶、溫控設(shè)備;PCR技術(shù)最突出的優(yōu)點是快速、高效、敏捷、易于操作;TaqDNA聚合酶的特點是:耐高溫。(1)從表1中可得出,PCR技術(shù)與DNA復(fù)制相比較,不須要ATP(或須要加入引物,或不須要解旋酶等)。PCR技術(shù)中DNA聚合酶應(yīng)具有耐高溫的特點。每次循環(huán)都須要2種引物的主要緣由是DNA聚合酶只能從3′端起先延長DNA鏈。(2)①因為蛋白質(zhì)相對分子量較大,被排阻在凝膠顆粒外面,在顆粒之間快速通過,所以試管中收集到的液體最先出現(xiàn)的是相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)。②Fe(OH)3膠體帶正電荷,在電場作用下,向陰極移動,導(dǎo)致U型管左側(cè)的顏色漸漸變深。答案:(1)不須要ATP(或須要加入引物,或不須要解旋酶等)耐高溫DNA聚合酶只能從3′端起先延長DNA鏈(2)①相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì),從凝膠顆粒之間的間隙穿過凝膠柱,路程短,移動速度較快,最先洗脫出來②Fe(OH)3膠體帶正電荷,在電場作用下,向陰極移動18.(12分)在遺傳病及刑偵破案中常須要對樣品DNA進行分析,PCR技術(shù)能快速擴增DNA片段,在幾個小時內(nèi)復(fù)制出上百萬份的DNA拷貝,有效地解決了因為樣品中DNA含量太低而難以對樣品進行分析探討的問題。據(jù)圖回答相關(guān)問題。a鏈5′—G—G……T—C—3′5′—G—G—OH(引物Ⅰ)b鏈3′—C—C……A—G—5′________(引物Ⅱ)95℃↓5′—G—G……T—C—3′3′—C—C……A—G—5′55℃↓5′—G—G—OH5′—G—G……T—C—3′3′—C—C……A—G—5′72℃↓__________________________________(1)在相應(yīng)的橫線上寫出引物Ⅱ,并在復(fù)性這一步驟中將引物Ⅱ置于合適的位置。(2)在相應(yīng)的橫線上寫出循環(huán)一次后生成的DNA分子。(3)若將作為原料的四種脫氧核苷酸用32P標記,請分析循環(huán)一次后生成的DNA分子的特點:________,循環(huán)n次后生成的DNA分子中不含放射性的單鏈占總單鏈的比例為________。(4)PCR反應(yīng)過程的前提條件是________,PCR技術(shù)利用了DNA的________原理解決了這個問題。(5)在對樣品DNA分析過程中發(fā)覺,DNA摻雜著一些組蛋白,要去除這些組蛋白可加入的物質(zhì)是________。答案:(1)5′—G—A—OH(或HO—A—G—5′)55℃↓HO—A—G—5′5′—G—G—OH5′—G—G……T—C—3′3′—C—C……A—G—5′(2)3′—C—C……A—G—5′5′—G—G……T—C—3′5′—G—G……T—C—3′3′—C—C……A—G—5′(3)每個DNA分子各有一條鏈含32Peq\f(1,2n)(4)DNA解旋熱變性(5)蛋白酶19.(8分)回答有關(guān)蛋白質(zhì)分別和純化的問題:(1)要獲得血清蛋白的粗制品,必需將含有檸檬酸鈉的血液進行________處理,然后將________裝入透析袋中除去________。(2)要獲得血紅蛋白,應(yīng)如何裂開紅細胞?________________。(3)下圖為血清蛋白通過醋酸纖維薄膜的電泳圖譜,你認為含量最多的蛋白質(zhì)是________,含負電荷最多的球蛋白是________,相對分子質(zhì)量最大的球蛋白是________。(4)電泳是目前應(yīng)用最為普遍的________蛋白質(zhì)的方法。答案:(1)離心上清液小分子物質(zhì)(2)加蒸餾水使其脹破(3)清蛋白α1-球蛋白γ-球蛋白(4)(分別)純化20.(8分)下圖為“DNA的粗提取與鑒定”試驗的相關(guān)操作。(1)圖中試驗材料A可以是________等,研磨前加入的B應(yīng)當是__________________________________________________
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