飼料學(xué)：第三章 飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)定

飼料學(xué)FeedScience第三章飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)定飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的定義飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)定的思路飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值是指飼料本身所含的養(yǎng)分以及這些養(yǎng)分被動(dòng)物消化、吸收、利用以及滿足機(jī)體需要的程度?；瘜W(xué)分析消化試驗(yàn)代謝試驗(yàn)飼養(yǎng)試驗(yàn)養(yǎng)分含量消化量代謝量利用量百分含量消化率代謝率轉(zhuǎn)化率飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)定體系養(yǎng)分化學(xué)含量及總能的測(cè)定消化/代謝性評(píng)定生物學(xué)價(jià)值評(píng)定概略養(yǎng)分分析法VanSoest洗滌劑體系純養(yǎng)分分析法近紅外光譜法(NIR)綜合評(píng)價(jià)指數(shù)養(yǎng)分消化率與飼料消化能含量養(yǎng)分代謝率與飼料代謝能含量養(yǎng)分絕對(duì)生物學(xué)價(jià)值養(yǎng)分相對(duì)生物學(xué)價(jià)值飼料凈能含量第一層養(yǎng)分種類與絕對(duì)含量第二層進(jìn)入體內(nèi)或參與代謝的程度和數(shù)量第三層真實(shí)利用或轉(zhuǎn)化產(chǎn)品的效率和數(shù)量養(yǎng)分化學(xué)含量及總能的測(cè)定飼料養(yǎng)分的表示方法計(jì)量單位百分?jǐn)?shù)（%）常用于表示飼料中某養(yǎng)分在飼料中的重量百分比，如

概略養(yǎng)分、常量元素、氨基酸含量等。毫克/千克（mg/kg）常用于表示微量元素、水溶性維生素等養(yǎng)分。國(guó)際單位（IU）常用于表示脂溶性維生素、抗生素、酶等物質(zhì)。樣品狀態(tài)

鮮樣基礎(chǔ)：指未經(jīng)處理的按采集時(shí)的狀態(tài)測(cè)定的養(yǎng)分的含量，數(shù)值受水分含量影響大，可比性差；風(fēng)干基礎(chǔ)：指在空氣中自然存放基礎(chǔ)或自然干燥狀態(tài)，接近飼料的

存放和飼喂?fàn)顟B(tài)；一般水分含量在12%左右。絕干基礎(chǔ)：指100%干物質(zhì)狀態(tài)，完全排除了水分的干擾，但有時(shí)需

要換算。概略養(yǎng)分分析樣品105℃/3h水分干物質(zhì)550℃/3hH2SO4/CuSO4420℃乙醚72℃回流浸提灰分粗蛋白粗脂肪粗纖維無氮浸出物1.25%H2SO41.25%NaOH各煮沸30min=100-水分-粗灰分-粗蛋白-粗脂肪-粗纖維概略養(yǎng)分的指標(biāo)內(nèi)涵水分

游離水、結(jié)合水和揮發(fā)性成分；無氮浸出物

淀粉、游離單糖和低聚糖、果膠、部分半纖維素，有機(jī)酸、水溶性色素和維生素。粗纖維部分半纖維素，大部分纖維素和木質(zhì)素；粗脂肪

脂肪、蠟質(zhì)、樹脂及脂溶性色素和維生素；粗蛋白

飼料總氮×6.25(轉(zhuǎn)化系數(shù))，真蛋白質(zhì)和非蛋白含氮物；粗灰分

各種礦物質(zhì)的碳酸鹽、硫酸鹽、硅酸鹽和氧化物；概略養(yǎng)分分析方法的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)分析簡(jiǎn)單快速，使用儀器相對(duì)簡(jiǎn)單，分析成本較低；歷史悠久，應(yīng)用廣泛，不同飼料樣品養(yǎng)分?jǐn)?shù)據(jù)庫較完整，

可供參考和相關(guān)分析。缺點(diǎn)指標(biāo)簡(jiǎn)單(僅6項(xiàng))，不能滿足現(xiàn)代營(yíng)養(yǎng)學(xué)的需要(約30~40項(xiàng))；指標(biāo)劃分界限模糊，未考慮劃入同一組分中不同營(yíng)養(yǎng)成分

間化學(xué)性質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)學(xué)意義的差別；

部分指標(biāo)分析變異度較大，如粗蛋白和無氮浸出物。概略養(yǎng)分相關(guān)指標(biāo)分析儀器

鼓風(fēng)干燥箱凱式定氮儀粗纖維全自動(dòng)分析儀全自動(dòng)脂肪測(cè)定儀電熱式馬弗爐微波馬弗爐VanSoest洗滌劑體系VanSoest(1963)提出了ADF（AcidDetergentFiber,酸性洗滌纖維）測(cè)定方法用來改善粗纖維測(cè)定方法的不足

，并于1967年提出了NDF（NeutralDetergentFiber,中性洗滌纖維)的測(cè)定方法。在該體系下，可獲得樣品的NDF、ADF和ADL（AcidDetergentLignin，酸性洗滌木質(zhì)素）等指標(biāo)，使得細(xì)胞壁的組分劃分更精細(xì)。

該體系起初主要用于牧草（粗飼料）的評(píng)定，但此后也被延伸應(yīng)用于能量飼料的纖維成分評(píng)定。牧草3%SDS煮沸1h中性洗滌纖維（NDF）酸性洗滌纖維（ADF）2%CTAB煮沸1h72%H2SO430℃3h酸性洗滌木質(zhì)素（ADL）500℃2h灰分中性洗滌可溶物（NDS）酸性洗滌可溶物（ADS）水解液（纖維素）燃燒失重（木質(zhì)素）SDS：SodiumDodecylSulfate，十二烷基硫酸鈉；CTAB：CetylTrimethylammoniumBromide，十六烷基三甲基溴化銨。VanSoest洗滌劑體系操作步驟VanSoest洗滌劑體系的指標(biāo)內(nèi)涵NDS

細(xì)胞內(nèi)容物和特殊牧草中的果膠；ADL

由木質(zhì)素和少量礦物質(zhì)或雜質(zhì)組成；水解液

纖維素ADF-ADL；ADF

由纖維素、木質(zhì)素和少量礦物質(zhì)組成；ADS

半纖維素

NDF-ADF；NDF

細(xì)胞壁成分，主要由半纖維素、纖維素、木質(zhì)素、少量蛋白質(zhì)和礦物質(zhì)組成；灰分礦物質(zhì)與雜質(zhì)。木質(zhì)素

ADL-灰分。VanSoest洗滌劑體系的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)

對(duì)細(xì)胞壁組分的劃分較準(zhǔn)確，主要用于粗料質(zhì)量的評(píng)價(jià)。缺點(diǎn)

該體系下果膠幾乎全部可溶，低估了細(xì)胞壁的含量；分析淀粉含量較高的能量飼料，需額外加入耐熱α-淀粉酶，

否則淀粉不易去除；存在蛋白質(zhì)（含美拉德反應(yīng)產(chǎn)物）殘留問題。純養(yǎng)分分析法

利用精密的分析儀器和先進(jìn)的分析技術(shù)，測(cè)定樣品中的各種氨基酸、脂肪酸、維生素、礦物元素等成分，以達(dá)到深入了解飼料的營(yíng)養(yǎng)特性的目的。氨基酸HPLC：HighPerformanceLiquidChromatography，高效液相色譜樣品粉碎（100目）脫脂（EE＞6%時(shí)）酸水解/堿水解（Trp）/過甲酸氧化柱前/柱后衍生化HPLC分離氨基酸百分含量氨基酸的分析步驟全自動(dòng)氨基酸儀及標(biāo)準(zhǔn)品分析圖譜脂肪酸油脂提取BF3-甲醇甲酯化酸法/堿法/酸堿綜合法水解GC測(cè)定脂肪酸的分析步驟GC：GasChromatography，氣相色譜

脂肪酸具有一定的揮發(fā)性，可用氣相色譜法測(cè)定。但長(zhǎng)鏈脂肪酸的沸點(diǎn)高，高溫氣化不僅測(cè)定速度慢，且一些不飽和脂肪酸易發(fā)生分解，故可采用甲酯化，使之轉(zhuǎn)變?yōu)榈头悬c(diǎn)的衍生物后進(jìn)行測(cè)定。脂肪酸的氣相色譜圖礦物質(zhì)樣品粉碎（35目）干法/濕法消解原子吸收光譜法（AAS）/原子發(fā)射光譜法（AES）/比色法標(biāo)準(zhǔn)曲線礦物元素含量的分析步驟AAS:AtomicAbsorptionSpectrometry;AES:AtomicEmissionSpectrometry測(cè)定礦物元素涉及的主要儀器微波硝解儀原子吸收光譜儀原子發(fā)射光譜儀紫外/可見分光光度計(jì)維生素維生素的測(cè)定方法一般有液相色譜法、比色法和微生物效價(jià)評(píng)定法。維生素類型測(cè)定方法國(guó)標(biāo)代碼維生素A高效液相色譜法GB/T17817-2010葉黃素高效液相色譜法GB/T23187-2008維生素B1熒光分光光度法、高效液相色譜法GB/T14700-2002維生素B2熒光分光光度法、高效液相色譜法GB/T14701-2002維生素B6高效液相色譜法GB/T14702-2002維生素B12高效液相色譜法GB/T17819-1999維生素C鄰苯二胺熒光法GB/T17816-1999維生素D3高效液相色譜法GB/T17818-2010維生素E高效液相色譜法GB/T17812-2008維生素K3高效液相色譜法GB/T18872-2002煙酸、葉酸高效液相色譜法GB/T17813-1999泛酸高效液相色譜法GB/T18397-2001d-生物素高效液相色譜法、分光光度法GB/T17778-2005氯化膽堿離子色譜法、雷氏鹽分光光度法GB/T17481-2008測(cè)定飼料中維生素含量的國(guó)標(biāo)方法純養(yǎng)分分析方法的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)

對(duì)養(yǎng)分的定性和定量較準(zhǔn)確；

可排除其他組分的干擾，實(shí)現(xiàn)研究組分的動(dòng)態(tài)定向監(jiān)測(cè)。缺點(diǎn)

對(duì)測(cè)定所需儀器設(shè)備的要求較高；測(cè)定費(fèi)用較高；對(duì)操作技能具有一定的要求。近紅外分析技術(shù)(NearInfraredSpectroscopy,NIRS）是利用各種養(yǎng)分(化合物官能團(tuán))在紅外波譜區(qū)(700~2500nm)的特征吸收譜帶，使用數(shù)學(xué)模型和統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行定量。近紅外分析技術(shù)近紅外分析技術(shù)的應(yīng)用成分分析

分析飼料中水分、粗蛋白、粗纖維、粗脂肪、氨基酸、維生素、植酸、棉酚等成分；質(zhì)量監(jiān)控

用于飼料加工過程的在線分析（美拉德反應(yīng)、霉菌污染、飼料摻假）。營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)定

用于青貯飼料的采食量和有機(jī)物消化率測(cè)定；近紅外分析技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)

適合快速分析，操作簡(jiǎn)便，一次可測(cè)定多種成分，樣品不損失，不需化學(xué)試劑，維持費(fèi)用低。缺點(diǎn)

依托于可靠的樣品數(shù)據(jù)庫和統(tǒng)計(jì)分析方法，樣品制備是干擾分析的誤差的主要因素。綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)：必需氨基酸指數(shù)(EAAI)必需氨基酸指數(shù)（EAAI,EssentialAminoAcidIndex）以全卵蛋白為標(biāo)準(zhǔn)物，計(jì)算待測(cè)飼料中10種必需氨基酸含量與標(biāo)準(zhǔn)物中對(duì)應(yīng)氨基酸含量百分比的幾何平均數(shù)?？偰軠y(cè)定根據(jù)飼料能量在動(dòng)物體內(nèi)的轉(zhuǎn)化規(guī)律，可將飼料能量分為總能和有效能兩部分。準(zhǔn)確測(cè)定飼料或糞、尿、動(dòng)物產(chǎn)品的熱值是研究動(dòng)物能量代謝的基本方法。關(guān)系式：飼料燃燒熱=水吸熱+水當(dāng)量(儀器吸熱+實(shí)驗(yàn)期間散熱)–燃燒絲的燃燒熱消化/代謝性評(píng)定消化試驗(yàn)主要用于評(píng)價(jià)動(dòng)物的消化能力，衡量飼料的可消化性。消化試驗(yàn)體內(nèi)消化試驗(yàn)（invivo）體外消化試驗(yàn)（invitro）尼龍袋法人工消化液消化道消化液全收糞法指示劑法肛門收糞回腸末端收糞套算法內(nèi)源指示劑外源指示劑體內(nèi)消化試驗(yàn)全收糞法

準(zhǔn)備試驗(yàn)籠具和相關(guān)試驗(yàn)用具

選擇生長(zhǎng)發(fā)育、營(yíng)養(yǎng)狀況、食欲、體質(zhì)均正常的健康供試動(dòng)物

，一般選

擇公畜，以便于糞尿分離。

供試動(dòng)物數(shù)量：每種飼料牛3頭，豬4~5只，禽8~15只。

試驗(yàn)飼糧的準(zhǔn)備：參照動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)需要，根據(jù)試驗(yàn)動(dòng)物采食量與試驗(yàn)天數(shù)估

算所需飼料的總量，一次配齊，并按每日每頭(組)稱重分裝，同時(shí)取樣測(cè)

定其中水分和養(yǎng)分含量。試驗(yàn)動(dòng)物與條件準(zhǔn)備試驗(yàn)期

預(yù)試期：排空消化道內(nèi)原有飼料，適應(yīng)試驗(yàn)日糧和環(huán)境；牛羊10~14天，

豬5~10天，禽類3~5天；觀測(cè)動(dòng)物的采食習(xí)性、采食量和排糞規(guī)律。

試驗(yàn)期：準(zhǔn)確記錄每天的采食量，回收剩余飼料；全部收集3~5天的糞

便(代謝試驗(yàn)同時(shí)收集尿液)，取樣保存；試驗(yàn)周期與預(yù)試期時(shí)間相同。樣品處理糞樣需經(jīng)酸化、防腐處理后，-20℃保存，以減少氨氮損失。樣品用于分

析前，需將鮮樣制成風(fēng)干樣品，并計(jì)算初水分的含量。記錄采食量第1天第2天第3天第4天第5天第6天第7天收糞第1天第2天第3天第4天第5天回腸末端收糞法

由于動(dòng)物的后腸微生物發(fā)酵既能分解食糜中剩余的氨基酸，也能合成菌體氨基酸，因此可導(dǎo)致排出物中氨基酸組成改變，從而掩蓋單胃動(dòng)物對(duì)飼料氨基酸的真實(shí)消化狀況。主要采用的方法：回-直吻合術(shù)法、回腸末端瘺管法、盲腸切除法（禽）。指示劑法指示劑法是根據(jù)指示劑隨飼料攝入和排出濃度的變化，推測(cè)營(yíng)養(yǎng)素被消化的程度。指示劑的選擇要求

含量穩(wěn)定，與飼料同步移動(dòng)，測(cè)定方便

在消化道內(nèi)不消化、不吸收，回收率100%

在飼料及糞樣中含量必須具有高度均勻性與代表性

添加量少(<0.5%)，背景值低

對(duì)動(dòng)物無毒副作用指示劑的種類

內(nèi)源性指示劑

SiO2、木質(zhì)素、酸不溶灰分和蠟質(zhì)等外源性指示劑

Cr2O3、TiO2、BaSO4、PEG和Cr-EDTA等指示劑法的計(jì)算公式式中，DN：日糧中養(yǎng)分N的消化率（%）；Ir：日糧中指示劑的含量(%)；If：糞中指示劑的含量(%)；Nr：日糧中養(yǎng)分N的含量(%)；Nf：糞中養(yǎng)分N的含量(%)。例：利用外源指示劑法測(cè)定日糧粗蛋白消化率時(shí)，假定日糧中指示劑濃度為0.2%，粗蛋白濃度為20%；糞中指示劑濃度為0.5%，粗蛋白含量為25%，請(qǐng)計(jì)算日糧粗蛋白的表觀消化率，并寫出計(jì)算過程。指示劑法計(jì)算舉例指示劑法的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)

可減少收集全部糞便的麻煩，省時(shí)省力，尤其是在收集全部糞

便困難的情況下（放牧、采食量過大、部分消化道消化率測(cè)

定），采用該法更具優(yōu)越性。缺點(diǎn)

指示劑的回收率一般很難達(dá)達(dá)到100%；進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)的指示劑與食糜會(huì)經(jīng)常發(fā)生分離；指示劑自身的分析誤差和測(cè)值準(zhǔn)確性與重現(xiàn)性較難把握。套算法當(dāng)試驗(yàn)飼糧的營(yíng)養(yǎng)極端不平衡，含抗?fàn)I養(yǎng)因子/毒素高或適口性差時(shí)，會(huì)造成飼糧無法單一飼喂。此時(shí)，一般采取套算法測(cè)定該飼糧養(yǎng)分的消化率。套算法一般需經(jīng)過兩次消化試驗(yàn)才能得出需要的結(jié)果。假定基礎(chǔ)飼糧的消化率在兩次消化實(shí)驗(yàn)中保持穩(wěn)定，養(yǎng)分消化率具有可加性。第一次消化試驗(yàn)：測(cè)定基礎(chǔ)日糧的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率；第二次消化試驗(yàn)：試驗(yàn)日糧=基礎(chǔ)飼糧（80%~50%）+待測(cè)原料

（20%~50%），在相同試驗(yàn)條件下測(cè)定試驗(yàn)日

糧的消化率。試驗(yàn)方法套算法計(jì)算公式式中，DB：基礎(chǔ)日糧的養(yǎng)分消化率；DT：試驗(yàn)日糧的養(yǎng)分消化率；f：試驗(yàn)日糧養(yǎng)分中待測(cè)飼料養(yǎng)分所占的比例。套算法計(jì)算舉例例：某試驗(yàn)要測(cè)定某蛋白質(zhì)飼料（CP含量40%）中蛋白質(zhì)的消化率。第一次測(cè)得基礎(chǔ)飼糧（CP含量20%）粗蛋白消化率為72%；第二次5天共喂5Kg（基礎(chǔ)飼糧80%+20%待測(cè)飼料），測(cè)得糞中排出粗蛋白300g，求該蛋白質(zhì)飼料蛋白質(zhì)消化率。套算法的注意要點(diǎn)由于飼料間的互作及其他條件的影響，套算法假定的的基礎(chǔ)日糧養(yǎng)分消化率在兩次測(cè)定中保持一致的條件很難達(dá)到。為保證測(cè)定結(jié)果相對(duì)準(zhǔn)確，需保持基礎(chǔ)日糧養(yǎng)分消化率的穩(wěn)定?；A(chǔ)日糧應(yīng)是營(yíng)養(yǎng)平衡的配合飼料，且基礎(chǔ)日糧中含約10%的待測(cè)飼料

；兩次試驗(yàn)所需的基礎(chǔ)日糧一次性配齊；待測(cè)飼料在試驗(yàn)日糧中替代基礎(chǔ)日糧的比例不宜太低，一般20%~50%為宜。尼龍袋法

尼龍袋法主要用于反芻動(dòng)物飼料中干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)和淀粉等養(yǎng)分的瘤胃降解率的測(cè)定。隨著反芻動(dòng)物的瘤胃動(dòng)態(tài)降解動(dòng)力學(xué)體系在飼料配方設(shè)計(jì)與生產(chǎn)實(shí)踐中的廣泛應(yīng)用及瘤胃降解率數(shù)學(xué)模型的建立，人們也不斷完善了尼龍袋法估算的動(dòng)力學(xué)參數(shù)a,b,c和有效的降解率數(shù)據(jù)。尼龍袋試驗(yàn)方法每種飼料需3~4頭瘺管動(dòng)物；飼喂典型日糧，接近實(shí)際飼養(yǎng)水平；尼龍袋孔徑40~60

m；飼料2.0gDM；培養(yǎng)時(shí)間0,6,12,24,48,96,120h；每時(shí)間點(diǎn)3~4個(gè)重復(fù)。尼龍袋法瘤胃養(yǎng)分降解率數(shù)學(xué)模型的建立D(t)=a+b(1-e-ct)式中，D（t）：t時(shí)間點(diǎn)某養(yǎng)分的降解率；

t：發(fā)酵時(shí)間；a：飼料中快速可溶且完全在瘤胃降解的部分(%)；b：飼料中不溶但可降解的部分(%)；c：為b部分在瘤胃的降解速率常數(shù)，即Kd(%/h)。有效降解率（effectivedegradation,ED）ED=a+[(b×c)/(Kp+c)]式中，Kp：瘤胃食糜的流通速率常數(shù)，指單位時(shí)間內(nèi)流出瘤胃的未降解部分占原有總量的比例(%/h)。一般的，粗飼料Kp取4.5%/h，精飼料Kp取6%/h。原料名稱干物質(zhì)降解參數(shù)粗蛋白降解參數(shù)淀粉降解參數(shù)abcDDM*abcRUP*abcDST*大麥444513.575296511.071524820.589玉米24725.55614564.04323775.560軟質(zhì)小麥524212.080276716.076584239.094小麥麩45354.861524416.575782220.595全脂米糠48356.566424110.568198112.073豆粕32655.86722766.063----干甜菜渣4909.5593897.552----脫水苜蓿26477.55226579.060----*：表中DDM、RUP和DST分別為原料干物質(zhì)、粗蛋白和淀粉的有效降解率，且數(shù)據(jù)基于降解底物基礎(chǔ)而言，需經(jīng)折算才可轉(zhuǎn)化為占飼喂?fàn)顟B(tài)的比例。數(shù)據(jù)來源：INRA（2004）&劉建新（2009）部分反芻動(dòng)物飼料尼龍袋法的瘤胃養(yǎng)分降解動(dòng)力學(xué)參數(shù)尼龍袋法的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)是體內(nèi)法和體外法相結(jié)合的測(cè)定飼料養(yǎng)分消化率的新方法，具有速度快、所需樣品小、費(fèi)用低、可操作性強(qiáng)等特點(diǎn)；該法在估測(cè)飼料干物質(zhì)、能量及除混合飼料外其他飼料蛋白質(zhì)消化率方面與傳統(tǒng)法所得結(jié)果相當(dāng)一致。缺點(diǎn)影響試驗(yàn)結(jié)果的因素較多：尼龍袋的孔徑、樣品量與尼龍袋表面積的比值、樣品的粉碎細(xì)度、基礎(chǔ)日糧的構(gòu)成與飼養(yǎng)水平、培養(yǎng)后袋內(nèi)殘留的微生物等。因此在評(píng)定飼料降解率前需對(duì)尼龍袋法測(cè)量中的各影響因素加以控制，使之標(biāo)準(zhǔn)化。體外消化試驗(yàn)

體外消化試驗(yàn)是模擬動(dòng)物消化道的環(huán)境，在體外進(jìn)行飼料的消化試驗(yàn)。體外法具有操作方便，成本低，環(huán)境條件易控制，重復(fù)性好，受試驗(yàn)動(dòng)物限制少，易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。

反芻動(dòng)物的體外法主要利用模擬反芻動(dòng)物瘤胃微生態(tài)環(huán)境的特殊裝置，評(píng)定飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，又稱為人工瘤胃法。目前比較典型的反芻動(dòng)物體外消化試驗(yàn)方法有：批次培養(yǎng)法、體外產(chǎn)氣法和體外連續(xù)培養(yǎng)法。反芻動(dòng)物體外消化試驗(yàn)方法批次培養(yǎng)法原理：將飼料樣品置于38.5℃～39.5℃，pH6.7~7.0的厭氧條件下，用NaHCO3、NaH2PO4、KCl、MgSO4等配制成“人工唾液”，與瘤胃液處理飼料樣品一定時(shí)間后，用離心法分離被降解的物質(zhì)，所剩余殘?jiān)匆暈榉墙到馕?，即可求出瘤胃非降解干物質(zhì)中有機(jī)物和能量含量。優(yōu)點(diǎn)

操作簡(jiǎn)單，可在48h內(nèi)較準(zhǔn)確地反映飼料在瘤胃液內(nèi)的消化情況，廣泛用于短期的體外培養(yǎng)。缺點(diǎn)

培養(yǎng)時(shí)間超過48h后，發(fā)酵產(chǎn)物積累，會(huì)使得瘤胃微生物生存環(huán)境發(fā)生變化，導(dǎo)致結(jié)果變異性變大。體外產(chǎn)氣法優(yōu)點(diǎn)

通過產(chǎn)氣量較真實(shí)地模擬飼草在瘤胃內(nèi)的有機(jī)質(zhì)消化率，并估計(jì)單位飼料的可降解蛋白質(zhì)含量和單個(gè)飼料或混合飼料的能值。缺點(diǎn)

發(fā)酵產(chǎn)物不能外移，造成產(chǎn)物積累，影響結(jié)果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。原理：基于飼料樣本在體外用瘤胃液消化所產(chǎn)生氣體（CO2和CH4）的比率來估計(jì)有機(jī)物消化率，主要有氣壓轉(zhuǎn)換法和注射器法。所剩余殘?jiān)匆暈榉墙到馕?，即可求出瘤胃非降解干物質(zhì)中有機(jī)物和能量含量。體外產(chǎn)氣法主要用來評(píng)價(jià)放牧家畜飼草飼用價(jià)值。體外連續(xù)培養(yǎng)法體外連續(xù)培養(yǎng)法可實(shí)現(xiàn)體外培養(yǎng)系統(tǒng)中發(fā)酵產(chǎn)物的連續(xù)排出，同時(shí)保持緩沖液連續(xù)不斷地流入發(fā)酵容器中，對(duì)瘤胃內(nèi)環(huán)境的模擬更準(zhǔn)確。目前應(yīng)用較廣的體外連續(xù)培養(yǎng)系統(tǒng)有單外流連續(xù)培養(yǎng)系統(tǒng)（Rusitec）和雙外流連續(xù)培養(yǎng)系統(tǒng)（DFCCS,

Dual-flowContinuousCultureSystem）兩種。單外流連續(xù)培養(yǎng)系統(tǒng)

消化糜固相和液相均以相同速度外流的系統(tǒng)，系統(tǒng)簡(jiǎn)單、方便，并且能夠收集發(fā)酵產(chǎn)生的氣體，其主要缺點(diǎn)是不能區(qū)分發(fā)酵流出液的液相和固相組分。Rusitec雙外流連續(xù)培養(yǎng)系統(tǒng)

將消化糜固相和液相外流速度分別加以控制的系統(tǒng)。一般液相外流速度(4-10%/h)明顯高于固相外流速度(2-7%/h)。該裝置由于有兩個(gè)外流口，無法準(zhǔn)確測(cè)定單一飼料的消化率，且操作復(fù)雜。保持細(xì)菌、原蟲正常的種類、數(shù)量和比例，觀察其活力和形態(tài)學(xué)變化；保持纖維素、淀粉和蛋白質(zhì)等的正常的消化速率，并維持它們之間正常的相互作用；具有大量預(yù)測(cè)體內(nèi)結(jié)果的能力。評(píng)定人工瘤胃技術(shù)可靠性的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)單胃動(dòng)物體外消化試驗(yàn)方法豬小腸液凍干粉法

該法分兩步，第一步模擬豬胃的消化環(huán)境，用胃蛋白酶的鹽酸溶液處理飼料樣品；第二步模擬小腸的消化環(huán)境，用豬小腸液或小腸液凍干粉（PIF）的中性溶液處理第一步水解殘?jiān)?最后將第二步殘?jiān)暈椴幌?，測(cè)其發(fā)熱量后求“離體法能量消化率”(x)，然后再與用生物學(xué)法測(cè)出的標(biāo)準(zhǔn)回歸公式校正后求能量消化率。移動(dòng)尼龍袋法

采用30×50mm，孔徑40~60μm的小尼龍袋，裝入0.5g~1.0g飼料（12mg~13mg飼料/cm2），對(duì)豬一般采用口腔采食/強(qiáng)飼，牛則從口腔/真胃/十二指腸瘺管放入尼龍袋，最后從肛門收集。尼龍袋沖洗后干燥后，測(cè)定袋內(nèi)剩余物質(zhì)中待測(cè)養(yǎng)分的含量，計(jì)算待測(cè)飼料養(yǎng)分消化率。移動(dòng)尼龍袋試驗(yàn)方法該方法具有速度快、所需樣品小、費(fèi)用低、可操作性強(qiáng)，重復(fù)性較好等優(yōu)點(diǎn)。代謝試驗(yàn)

代謝試驗(yàn)主要通過測(cè)定供試動(dòng)物采食與排出體外的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之差來比較動(dòng)物體內(nèi)組成成分變化情況，以了解各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在動(dòng)物體內(nèi)的存留能力，從而評(píng)價(jià)飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。代謝試驗(yàn)是在消化試驗(yàn)基礎(chǔ)上增加尿和氣體的收集裝置。雞表觀代謝能測(cè)定——排空強(qiáng)飼法成年公雞6×4（重復(fù)）=24只，單籠飼養(yǎng)，肛門縫合排泄物收集瓶(60mL~100mL)。預(yù)試期>3天，正試期：排空48h，強(qiáng)飼50g，禁食，自由飲水，收糞48h(繼續(xù)禁食48h收集內(nèi)源排泄物)，恢復(fù)14天。能量可消化性的綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)總可消化養(yǎng)分（TDN,TotalDigestibleNutrients）以三大有機(jī)養(yǎng)分的有效能為基礎(chǔ)，統(tǒng)一折算為可消化糖類的當(dāng)量，屬于表示能量?jī)r(jià)值的相對(duì)單位，兼有能量和養(yǎng)分的屬性?？傁B(yǎng)分

TDN=X1+2.25X2+X3+X4

式中，X1：可消化粗蛋白（%，kg）；X2：可消化粗脂肪（%，kg）；X3：可消化粗纖維（%，kg）；X4：可消化無氮浸出物（%，kg）。TDN的特點(diǎn)TDN用一個(gè)數(shù)值綜合反映了飼料可消化程度，測(cè)算和應(yīng)用方便，故長(zhǎng)期沿用。經(jīng)驗(yàn)公式：1kgTDN=18.4MJDE=15.1MJME由于TDN體系未考慮發(fā)酵氣體產(chǎn)熱及熱損失，而粗飼料較容易產(chǎn)生發(fā)酵熱和甲烷，因此TDN往往會(huì)高估動(dòng)物對(duì)粗飼料的能值。由于TDN考慮了部分能量損失，如糞能和尿能損失，因而具有消化能和部分代謝能的含義。生物學(xué)價(jià)值評(píng)定絕對(duì)生物學(xué)價(jià)值（BV）

蛋白質(zhì)生物學(xué)價(jià)值(BiologicalValue,BV)是指體蛋白沉積量(氮)占吸收量的比例，是衡量飼料蛋白質(zhì)能用于合成體組織和體成分的比例。測(cè)定條件

動(dòng)物處于快速生長(zhǎng)階段；待測(cè)原料為唯一蛋白源；日糧能量充足，蛋白質(zhì)供應(yīng)不超出體蛋白的最大沉積能力(10%)。相對(duì)生物學(xué)價(jià)值（RBV）待測(cè)養(yǎng)分?jǐn)z入量敏感指標(biāo)測(cè)量值●●●●●●●●-基準(zhǔn)物●-待測(cè)原料YXtXsY=a+bsXY=a+btXRBV=bt/bs=Xs/Xt相對(duì)生物價(jià)值的測(cè)定條件

確定比較對(duì)象(基準(zhǔn)物)，一般為生產(chǎn)中最常用或消化利用效率最高的

原料，如蛋白質(zhì)(全卵蛋白、酪蛋白)，CaHPO4，CuSO4等敏感指標(biāo)在攝入量范圍內(nèi)呈線性變化；基礎(chǔ)日糧中待測(cè)養(yǎng)分含量(背景值)盡可能低；用量梯度：待測(cè)原料2~3，標(biāo)準(zhǔn)物1~2。相對(duì)生物學(xué)價(jià)值評(píng)定法同樣適用其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生物學(xué)價(jià)值的評(píng)定，尤其是微量元素和維生素等微量養(yǎng)分。Tips飼料凈能的測(cè)定

根據(jù)凈能的用途，可將其分為維持凈能和生產(chǎn)凈能兩部分。其中，維持凈能包括基礎(chǔ)代謝、保持體溫恒定、隨意活動(dòng)所需的能量；生產(chǎn)凈能包括增重、產(chǎn)奶、產(chǎn)蛋、產(chǎn)毛、繁殖和勞役等所需的能量。

凈能可通過平衡代謝試驗(yàn)結(jié)合測(cè)定產(chǎn)熱量的方法獲得，根據(jù)測(cè)定動(dòng)物產(chǎn)熱量方式的不同，又可分為直接測(cè)熱法和間接測(cè)熱法。直接測(cè)熱法直接測(cè)熱法是直接測(cè)定動(dòng)物代謝過程中釋放出的全部熱。設(shè)備儀器：測(cè)熱室（柜）或動(dòng)物測(cè)熱計(jì)測(cè)定指標(biāo)：

記錄采食量、排糞量、尿液、脫落毛發(fā)與皮屑、甲烷氣體體積，并

分別測(cè)定其燃燒熱；

記錄進(jìn)出測(cè)熱柜氣體的體積(V0,V1)、溫度(T0,T1)和濕度(H0,H1)，

并計(jì)算進(jìn)出氣體的溫度和濕度差。計(jì)算公式：機(jī)體增重?zé)?飼料熱-糞便熱-尿液熱-皮屑熱-甲烷氣體熱-（氣體和測(cè)熱柜吸熱+水分汽化熱）其中，機(jī)體產(chǎn)熱=氣體和測(cè)熱柜吸熱+水分汽化熱間接測(cè)熱法間接測(cè)熱法是根據(jù)測(cè)得動(dòng)物的代謝產(chǎn)物和氧耗，間接計(jì)算動(dòng)物的產(chǎn)熱。測(cè)定指標(biāo)與計(jì)算方法

測(cè)定的規(guī)定時(shí)間（24h）內(nèi)的耗氧量和CO2產(chǎn)量和尿氮量，其中反芻動(dòng)

物還包括CH4產(chǎn)生量；由尿氮量（×6.25）算出被氧分解的蛋白質(zhì)量，從而得出其產(chǎn)熱量、耗

氧量和CO2產(chǎn)量；

從總耗氧量和總CO2產(chǎn)生量中減去蛋白質(zhì)的耗氧量和CO2產(chǎn)生量，計(jì)算

出非蛋白呼吸商。

根據(jù)非蛋白