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文檔簡介
動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)
動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)
主編
崔燕八、、
編者
崔燕何俊峰王正波
課程網(wǎng)址:
動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)是動(dòng)物醫(yī)學(xué)、動(dòng)物科學(xué)等專業(yè)的一門必修的專業(yè)基礎(chǔ)課程。動(dòng)物組織
學(xué)與胚胎學(xué)課程也是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的形態(tài)學(xué)課程。實(shí)驗(yàn)課是一個(gè)重要的教學(xué)環(huán)節(jié),它可幫助
學(xué)生鞏固和加深課堂所學(xué)的理論知識(shí),培養(yǎng)學(xué)生應(yīng)用基本知識(shí)和技能,觀察動(dòng)物體微觀世界的
能力,自己動(dòng)手分析問題、解決問題的能力。為了使這些專業(yè)的學(xué)生在實(shí)習(xí)和自學(xué)中能更好的
學(xué)習(xí)、掌握組織學(xué)與胚胎學(xué)的基本理論知識(shí)和鑒別組織結(jié)構(gòu)的方法,得到必要的技能訓(xùn)練,我
們基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)解剖組織學(xué)教研室在總結(jié)以往的教學(xué)經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,編寫了這本適合于本科生和
研究生所使用的實(shí)驗(yàn)課本。本書圖文并茂,所有插圖均為照片,形象逼真,其中部分是作者在
教學(xué)、科研中積累的組織學(xué)切片通過數(shù)碼攝像技術(shù)制作而成的原創(chuàng)作品,部分來源與參考資料,
掃描收集了了大量的
根據(jù)新修訂的實(shí)驗(yàn)大綱,本書共設(shè)計(jì)了17個(gè)實(shí)驗(yàn),每個(gè)實(shí)驗(yàn)都附有作業(yè),以提高學(xué)生的學(xué)
習(xí)效果。每個(gè)實(shí)驗(yàn)所附的思考題可以活躍學(xué)生思維。在實(shí)驗(yàn)的編排上,實(shí)驗(yàn)一主要介紹了光學(xué)
顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)和使用方法;實(shí)驗(yàn)二到實(shí)驗(yàn)十三為組織學(xué)切片實(shí)習(xí)部分;實(shí)驗(yàn)十五為胚胎學(xué)
實(shí)習(xí)部分;o除了要求學(xué)生系統(tǒng)的觀察組織切片外,根據(jù)新修訂的實(shí)驗(yàn)大綱,在實(shí)驗(yàn)課的設(shè)計(jì)上,
新開設(shè)了綜合性實(shí)驗(yàn)(實(shí)驗(yàn)四血液、實(shí)驗(yàn)十五石蠟切片制作)和部分高水平的設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)(顯
微攝影、免疫組織化學(xué)方法),以加強(qiáng)學(xué)生的實(shí)際動(dòng)手能力。本書中的圖片除了實(shí)驗(yàn)中要求學(xué)生
觀察的圖片外,還有相當(dāng)多的為示教切片,以擴(kuò)展學(xué)生的知識(shí)層面。本書附錄部分的彩圖與正
文中的插圖一一對(duì)應(yīng),不但便于學(xué)生查找和使用,而且便于學(xué)生使用顯微鏡觀察組織學(xué)切片時(shí)
對(duì)照插圖進(jìn)行自學(xué);附錄部分的作業(yè)以表格形式出現(xiàn),學(xué)生即可以作為實(shí)驗(yàn)前的預(yù)習(xí)、又作為
實(shí)驗(yàn)后的復(fù)習(xí)總結(jié)。
本書雖然經(jīng)過了大量時(shí)間進(jìn)行編寫和修改,但仍然可能有不當(dāng)和錯(cuò)誤之處,望各位老師和同
學(xué)在教學(xué)實(shí)踐過程中給予批評(píng)指正,以備今后修編時(shí)參考。
覆<
2004年6月
目錄
緒論..................................................................1
實(shí)驗(yàn)一顯微鏡的使用及細(xì)胞的結(jié)構(gòu).....................................2
實(shí)驗(yàn)二上皮組織......................................................8
實(shí)驗(yàn)三結(jié)締組織......................................................11
實(shí)驗(yàn)四血液.........................................................15
實(shí)驗(yàn)五肌組織........................................................18
實(shí)驗(yàn)六神經(jīng)組織及神經(jīng)系統(tǒng)...........................................21
實(shí)驗(yàn)七循環(huán)系統(tǒng).....................................................25
實(shí)驗(yàn)八免疫系統(tǒng).....................................................28
實(shí)驗(yàn)九消化系統(tǒng).....................................................32
實(shí)驗(yàn)十呼吸系統(tǒng).....................................................39
實(shí)驗(yàn)-I-―泌尿系統(tǒng)...................................................41
實(shí)驗(yàn)十二生殖系統(tǒng)...................................................44
實(shí)驗(yàn)十三被皮系統(tǒng)...................................................48
*實(shí)驗(yàn)十四石蠟切片的制作..........................................52
實(shí)驗(yàn)十五哺乳動(dòng)物早期胚胎發(fā)育及胎膜、胎盤的結(jié)構(gòu)....................55
*實(shí)驗(yàn)十六顯微攝影方法與步驟......................................58
*為開放性選做實(shí)驗(yàn)
緒論
(-)實(shí)驗(yàn)課的目的
《動(dòng)物組織學(xué)與胚胎學(xué)》是畜牧獸醫(yī)專業(yè)的一門必修專業(yè)基礎(chǔ)課。組織學(xué)是在學(xué)習(xí)生物學(xué)
和解剖學(xué)的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步借助顯微鏡(包括光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡)研究動(dòng)物細(xì)胞、組織
和器宮等微細(xì)結(jié)構(gòu)及功能的科學(xué);胚胎學(xué)則是研究個(gè)體發(fā)生,發(fā)育的科學(xué)。本課程教學(xué)過程包
括理論課和實(shí)驗(yàn)課兩部分,實(shí)驗(yàn)課是理論課的繼續(xù)和深化,其目的不僅在于驗(yàn)證理論知識(shí),使
學(xué)生加深對(duì)基本理論的理解和記憶,正確掌握使用光學(xué)顯微鏡和制作切片等基本方法,更重要
的是引導(dǎo)學(xué)生應(yīng)用這些基本知識(shí)和技能、觀察和復(fù)習(xí)切片標(biāo)本,從而達(dá)到正確認(rèn)識(shí)不同動(dòng)物各
種器官、組織的結(jié)構(gòu)和不同染色方法所制成的切片,從而培養(yǎng)和提高學(xué)生學(xué)習(xí)的自覺性和深人
鉆研客觀事物的能力。研究和辨認(rèn)標(biāo)本時(shí),要配合必要的繪圖和記錄,借以培養(yǎng)學(xué)生掌握科學(xué)
的記錄方法和分析、綜合問題的能力。
(二)實(shí)驗(yàn)課的要求為了達(dá)到上述目的,實(shí)驗(yàn)課要求做到下列項(xiàng)目:
I.實(shí)驗(yàn)前要求學(xué)生認(rèn)真復(fù)習(xí)有關(guān)理論課內(nèi)容和預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書,明確本次實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊蟆?/p>
內(nèi)容和方法,以培養(yǎng)獨(dú)立操作的能力。
2.顯微鏡是組織學(xué)實(shí)驗(yàn)課的主要儀器,是培養(yǎng)基本技能的重要手段,因此要求每個(gè)學(xué)生必
須熟練掌握顯微鏡的使用方法。顯微鏡是貴重的光學(xué)儀器,使用時(shí)務(wù)必嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行,
切勿隨意拆卸或暴力轉(zhuǎn)動(dòng),做到輕取輕放,用畢放回原處。
3.對(duì)切片要嚴(yán)加愛護(hù),觀察切片前一定要區(qū)別其正反面,蓋玻片朝上為正面,切忌蓋玻片朝下。
必須按肉眼f低倍鏡一高倍鏡的順序進(jìn)行觀察,在低倍鏡下先觀察整體結(jié)構(gòu),然后轉(zhuǎn)換高倍鏡觀
察局部微細(xì)結(jié)構(gòu),切忌集中于切片某一部位,未加詳細(xì)觀察與思考就轉(zhuǎn)入高倍鏡。一定要做到既
認(rèn)真仔細(xì),又實(shí)事求是地觀察每張切片。觀察標(biāo)本時(shí)要配合必要的繪圖和記錄,增強(qiáng)理解和記憶,
但必須在全面觀察并掌握主要結(jié)構(gòu)和弄清主要結(jié)構(gòu)與次要結(jié)構(gòu)關(guān)系的基礎(chǔ)上,選擇器官或組織中
比較典型的部分進(jìn)行繪圖,切忌盲目臨摹掛圖或書本的插圖,要按時(shí)完成每次的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
4.繪圖方法:繪制組織學(xué)圖只要求用點(diǎn)和線繪制半模式圖。用線條繪細(xì)胞膜、核膜和纖維等連
續(xù)性結(jié)構(gòu),而細(xì)胞質(zhì)則用點(diǎn)來表示。線條要粗細(xì)均勻,點(diǎn)要大小一致,圓、細(xì)、密而不重疊。
繪圖要求真實(shí)反映顯微鏡下的結(jié)構(gòu)和比例,繪圖要用橫線指明結(jié)構(gòu),并注字說明,一般要求在
繪圖紙的左邊繪圖,右邊注字。要求字體正楷,字跡清楚,無錯(cuò)別字。在圖下方要注明標(biāo)本(圖)
名稱,染色方法和放大倍數(shù)等。
5.在學(xué)習(xí)本課程期間,要求學(xué)生充分利用實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書上的插圖、實(shí)驗(yàn)室的掛圖,實(shí)物標(biāo)本、模
型、幻燈片和圖片等直觀教具,反復(fù)比較和認(rèn)真思考,做到理論和實(shí)際、立體和切面、局部與
整體、結(jié)構(gòu)與功能、光鏡結(jié)構(gòu)與電鏡結(jié)構(gòu)等關(guān)系密切結(jié)合,達(dá)到融會(huì)貫通,全面理解的目的。
6.為檢查學(xué)生獲得知識(shí)是否鞏固,除實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行提問外,還可利用切片標(biāo)本進(jìn)行經(jīng)常性的
辨認(rèn)或小測(cè)驗(yàn),從而了解理論課或?qū)嶒?yàn)課獲得知識(shí)是否鞏固,并驗(yàn)證基本技能掌握的程度以及
獨(dú)立工作能力等。
實(shí)驗(yàn)一顯微鏡的使用及細(xì)胞的結(jié)構(gòu)
一、目的與要求
1.了解生物顯微鏡的構(gòu)造和使用。
2.掌握細(xì)胞在光鏡下的基本結(jié)構(gòu)。
3.認(rèn)識(shí)動(dòng)物不同組織的細(xì)胞,了解由于功能各異,導(dǎo)致細(xì)胞的多樣性。
4.了解細(xì)胞的主要增殖方式一有絲分裂過程中各期的形態(tài)學(xué)特征。
二、材料
生物顯微鏡、卵巢切片、脊神經(jīng)結(jié)切片、馬蛔蟲卵巢切片。
三、內(nèi)容和方法
(-)生物顯微鏡的構(gòu)造及使用
1.(徐卡)型生物顯微鏡的構(gòu)造
包括機(jī)械部分和光學(xué)部分。
機(jī)械部分
(1)鏡座一般呈蹄鐵狀或方形,有穩(wěn)固和支持鏡體的作用。
(2)鏡臂是鏡座與鏡筒的連接部分,呈弓狀,便于手握,有的在基部具一關(guān)節(jié)螺旋,可使鏡
簡傾斜,便于觀察。
(3)載物臺(tái)(鏡臺(tái))方形,上有兩個(gè)金屬片夾,供固定標(biāo)本用,或安裝標(biāo)本推進(jìn)器。載物臺(tái)
中央有一通光孔。
(4)標(biāo)本推進(jìn)器安放在載物臺(tái)上,除固定切片外,還通過轉(zhuǎn)軸連接接兩個(gè)調(diào)節(jié)螺旋,這兩個(gè)
調(diào)節(jié)螺旋可前、后、左、右移動(dòng)切片。在推進(jìn)器的縱、橫坐標(biāo)上標(biāo)有刻度,以便確定某一結(jié)
構(gòu)的方位。
(5)物鏡轉(zhuǎn)換器呈圓盤狀,上有3?4個(gè)物鏡螺旋口,供物鏡按放大倍數(shù)高低順序嵌入,以
便把物鏡根據(jù)觀察需要推到正確的使用位置上。
(6)調(diào)節(jié)螺旋分粗調(diào)節(jié)和細(xì)調(diào)節(jié)兩個(gè)螺旋。粗調(diào)節(jié)螺旋用于低倍鏡調(diào)焦;細(xì)凋節(jié)螺旋用于高
倍鏡調(diào)焦.兩螺旋結(jié)合使用,使視野清晰。
(7)眼間距調(diào)整使兩目鏡與兩眼間距離一致,不同的人兩眼間距離不同,應(yīng)根據(jù)自己的情況
加以調(diào)節(jié)。
(8)屈光度調(diào)節(jié)
光學(xué)部分
(1)物鏡作第一次放大標(biāo)本用。安裝在物鏡轉(zhuǎn)換器上,通常有3?4個(gè)接物鏡,分別是4X、
10X、40X(50X)和100X,在每個(gè)接物鏡的鏡管上分別標(biāo)有醒目的紅色、黃色、藍(lán)色和白
色線圈。4X和10義稱低倍鏡,40(50)X稱高倍鏡,100X是油浸鏡,每個(gè)接物鏡的鏡管上
通常標(biāo)有主要性能參數(shù),如40/0.65,160/0.17,40表示放大倍數(shù),0.65表示鏡口率(數(shù)值孔徑,
N-A),160表示機(jī)械管長(),0.17表示允許蓋玻片厚度()。N-A值越大,透鏡分辨率越高。
(2)目鏡亦有5X,10X,15X和20義等?目鏡的作用是將物鏡放大的標(biāo)本像(實(shí)像)再放大
成虛像。觀察者可根據(jù)工作需要和標(biāo)本的實(shí)際情況,恰當(dāng)選擇不同放大倍數(shù)的目鏡。接目鏡
內(nèi)常安放一指針,便于指示視野中的某一結(jié)構(gòu)。目鏡可旋轉(zhuǎn),目鏡底部有相應(yīng)的刻度,以供
兩眼度數(shù)不同的人調(diào)節(jié)。
(3)聚光器位于載物臺(tái)的下方,起著把光線匯聚成光柱(束),增強(qiáng)照明度之用。聚光器的
一側(cè)有調(diào)節(jié)螺旋,可以升降,可按需要調(diào)節(jié)亮度。
(4)光闌在聚光器下方,由許多金屬葉片組成。由一光圈調(diào)節(jié)桿調(diào)節(jié)光圈大小,以控制聚光
鏡的N-A值,以便符合物鏡要求。
(5)亮度調(diào)節(jié)鈕用于調(diào)整照明亮度。注意每次用完顯微鏡后應(yīng)將亮度調(diào)節(jié)鈕置于最暗的位置,
然后關(guān)閉電源。
(6)濾光片在光闌下方有一金屬圈,可安放濾光片,借以改變光源的色調(diào)和強(qiáng)弱,便于觀察
和攝影。常用濾光片有三種:①毛玻片一減弱光強(qiáng)度、使光漫射而變的柔和:②藍(lán)玻片一白
熾燈光照明時(shí)用,將黃色燈光校正成白光;③綠玻片一通常適用于黑白照片,顯微攝影用。
(7)光源有自然光源(陽光)和人工光源(燈光)之分,本機(jī)采用人工光源。
2.顯微鏡的使用
(I)顯微鏡的提取和放置顯微鏡是精密的光學(xué)儀器,從顯微鏡柜中取出時(shí),一定要按操作規(guī)
程進(jìn)行,即一手握住鏡臂,另一手托住鏡座,嚴(yán)禁單手握住鏡臂走動(dòng)。顯微鏡使用前要平放
于使用者前方偏左的位置上。用擦鏡紙輕輕擦拭目鏡和物鏡,若有臟物,則用擦鏡紙蘸少許
乙醛與酒精混合液擦拭干凈,并用紗布擦拭顯微鏡的機(jī)械部分。
(2)接通電源,打開電源開關(guān),調(diào)整光強(qiáng)度,旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器,先把低倍接物鏡對(duì)準(zhǔn)載物臺(tái)
中央的通光孔(對(duì)正光軸),根據(jù)標(biāo)本染色情況選用不同放大倍率的接物鏡,靈活應(yīng)用亮度調(diào)
節(jié)鈕、聚光器和光闌,調(diào)節(jié)至視野完全照明、亮度均勻,光強(qiáng)適宜。
(3)觀察切片觀察切片前,先用肉眼分辨切片的正反面,蓋玻片朝上為正面,并大致觀察標(biāo)
本的外形、大小和著色。將切片放置于載物臺(tái)上,置于持片夾內(nèi)固定,運(yùn)用推進(jìn)器將組織塊
對(duì)準(zhǔn)教物臺(tái)中央的通光孔。在鏡臂的兩側(cè)有調(diào)節(jié)螺旋,可調(diào)節(jié)鏡筒和物鏡或載物臺(tái)的升降。
按照低倍鏡、高倍鏡順序觀察切片,低倍鏡觀察的范圍大,便于觀察器官或組織的全貌或整
體結(jié)構(gòu)。高倍鏡觀察的范圍小,放大的倍數(shù)高,適用于分辨器官或組織某一局部的微細(xì)結(jié)構(gòu)。
兩者互相配合,可達(dá)到全面了解器官結(jié)構(gòu)的目的。觀察標(biāo)本時(shí),首先在低倍鏡下對(duì)焦至觀察
物象最清晰時(shí)為止,觀察完切片一般結(jié)構(gòu)后,需要進(jìn)一步觀察某一部分結(jié)構(gòu)時(shí),應(yīng)將此部位
移至視野中央,轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察,如圖像不清晰時(shí),只需稍調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)節(jié)螺旋,即可看到清晰
的物象。必須指出,接物鏡放大倍數(shù)愈低,其工作距離(即接物鏡前鏡片與蓋玻片上平面之
間的距離)愈長,接物鏡放大倍數(shù)愈高,其工作距離愈短。所以使用高倍物鏡時(shí),應(yīng)避免用
粗調(diào)節(jié)器。若必須便用時(shí),則應(yīng)用眼睛從側(cè)方觀看載物臺(tái)上升,當(dāng)蓋玻片至物鏡之間的距離
約為1毫米時(shí),然后用眼觀察視野,慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)器,直至看見物象清晰為止。運(yùn)用粗調(diào)
節(jié)器時(shí)應(yīng)小心,否則會(huì)壓碎切片。觀察切片時(shí)姿勢(shì)要端正,要做好繪圖或記錄。
(4)收藏觀察完畢后,移開物鏡,取下切片,放入切片盒,降下鏡筒。注意每次用完顯微鏡
后應(yīng)將亮度調(diào)節(jié)鈕置于最暗的位置,然后關(guān)閉電源,套上塑料套。
(二)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)
1.學(xué)生觀察切片
(1)光鏡下圓形細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)以初級(jí)卵母細(xì)胞為例。
A卵巢切片染色
肉眼觀察:卵巢縱切面呈橢圓形,著紫紅色。
低倍鏡觀察:參考例圖,找到卵巢的邊緣部分,可見其中有許多小而圓、單個(gè)或成群存
在的原始卵泡。選擇一個(gè)典型而清晰的原始卵泡,轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察。
高倍鏡觀察:高倍鏡下可見原始卵泡由位于中央的卵母細(xì)胞和其外圍呈扁平狀的?層卵
泡細(xì)胞組成。卵母細(xì)胞較大,圓形,中央有一個(gè)大而圓、嗜堿性的細(xì)胞核,核仁大而明顯、
染色質(zhì)呈小塊狀。細(xì)胞質(zhì)包繞在核的周圍,弱嗜酸性,呈細(xì)顆粒狀或均質(zhì)淡紅色。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)
未見任何細(xì)胞器和包含物,這是由于所有的細(xì)胞器和包含物都需要經(jīng)過特殊的染色才能顯示。
胞膜和核膜在光鏡下不能分辨。切面如不經(jīng)過細(xì)胞核或核仁,則細(xì)胞內(nèi)無細(xì)胞核或缺核仁。
核內(nèi)的各種結(jié)構(gòu)可能不在同一焦距平面上,觀察時(shí)必須上下轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)螺旋方可獲得清晰的
圖像(圖1)。
圖1卵巢切片圖2脊神經(jīng)節(jié)縱切片
B高爾基復(fù)合體脊神經(jīng)節(jié)縱切片鍍銀法
肉眼觀察:脊神經(jīng)節(jié)縱切面略呈橢圓形,染成棕黃色。
低倍鏡觀察:可見脊神經(jīng)節(jié)主要由深色的神經(jīng)纖維束和纖維束之間呈淡黃色的脊神經(jīng)
節(jié)細(xì)胞構(gòu)成。脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞成群分布,切面呈圓形或橢圓形,胞體大小不等。選擇一個(gè)細(xì)
胞質(zhì)中有黑色網(wǎng)狀物的脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察。
高倍鏡下觀察:脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞呈淡黃色,中央或偏心處有一個(gè)不著色圓形的細(xì)胞核。
核周圍的胞質(zhì)中散布棕黑色的網(wǎng)狀物即高爾基復(fù)合體。注意胞質(zhì)中的高爾基復(fù)合體數(shù)量不
等,形狀各異,有的呈網(wǎng)狀,有的則被切斷而呈粗顆粒狀。切面如不經(jīng)胞核的脊神經(jīng)節(jié)細(xì)
胞,高爾基復(fù)合體則散布于細(xì)胞質(zhì)中(圖2)。
(2)動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂馬蛔蟲子宮切片鐵蘇木精染色
肉眼觀察:切片中有4?6個(gè)圓形馬蛔蟲子宮橫切面。
低倍鏡觀察:一個(gè)馬蛔蟲子宮橫切面,可見子宮壁由高柱狀細(xì)胞構(gòu)成,子宮腔內(nèi)有許
多圓形或橢圓形的馬蛔蟲卵切面。每個(gè)蟲卵的外表面都包著一層較厚的膠質(zhì)膜,其內(nèi)是處
于不同分裂階段的卵細(xì)胞。卵細(xì)胞的胞質(zhì)著淡藍(lán)色,參考例圖,找出各分裂期的形態(tài)學(xué)特
點(diǎn),找出前期、中期、后期和末期的卵細(xì)胞,并依次置于高倍鏡下觀察。
高倍鏡下觀察:
前期:蟲卵的膠質(zhì)膜內(nèi)只有一個(gè)圓形的卵細(xì)胞,胞核中的染色質(zhì)已形成發(fā)夾樣的染色
體,并在核仁、核膜消失后群集于細(xì)胞質(zhì)中。紡錘體明顯,其兩極有深染的中心體。
中期:紡錘體移至細(xì)胞中部,染色體排列于紡錘體中部的赤道面上。
后期:染色體分為均等的兩半,并分別向兩極的中心體集中,中部的胞膜向內(nèi)縮窄而
呈啞鈴狀。
末期:膠質(zhì)膜內(nèi)的兩個(gè)子細(xì)胞已完全分開,染色體解聚變成小塊狀的染色質(zhì),核仁、
核膜相繼出現(xiàn),注意若在一個(gè)馬蛔蟲的子宮切片中,未能察見各期分裂相時(shí),可從別的子
宮切面中尋找,直至全部察見為止(圖3)。
圖3馬蛔蟲子宮內(nèi)卵細(xì)胞切片
2.教師示教切片
A立方形細(xì)胞甲狀腺切片染色
高倍鏡下觀察甲狀腺濾泡,指針?biāo)傅氖菫V泡壁的濾泡上皮細(xì)胞,呈立方形,細(xì)胞的長、
寬和高幾乎相等,細(xì)胞核圓形,位于細(xì)胞中央,細(xì)胞質(zhì)弱嗜酸性,圍繞在核的周圍(圖4)。
B柱狀細(xì)胞小腸切片染色
高倍鏡下觀察小腸絨毛,可見絨毛表面整齊地排著一層柱狀上皮。指針?biāo)傅氖且粋€(gè)柱狀細(xì)
胞,細(xì)胞的高度大于寬度,呈柱狀,細(xì)胞質(zhì)弱嗜酸性.細(xì)胞核橢圓形,位于細(xì)胞近基部?由于
細(xì)胞排列緊密,且細(xì)胞膜極薄,細(xì)胞界限不清,可從兩核之間劃一分界線,即可顯示細(xì)胞的
柱狀形態(tài)(圖5)。
C星狀有突起細(xì)胞(神經(jīng)元)脊髓切片硫堇染色
高倍鏡下觀察脊髓灰質(zhì)的腹角,指針?biāo)傅氖羌顾柽\(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞,細(xì)胞呈星狀,從胞體向外
周伸出數(shù)個(gè)突起,胞體中央有一大而圓的細(xì)胞核,核內(nèi)有較大的核仁(圖6)。
D梭形的平滑肌細(xì)胞平滑肌分離裝片
高倍鏡下觀察單個(gè)平滑肌細(xì)胞,可見平滑肌細(xì)胞(肌纖維)呈長梭形,兩端尖細(xì),中部
略寬,胞質(zhì)紅染,內(nèi)有一深藍(lán)色桿狀或長橢圓形的細(xì)胞核(圖7)。
圖4甲狀腺切片圖5小腸腸絨毛切片
圖6神經(jīng)元圖7平滑肌縱切片
3.觀察電鏡幻燈片和圖片
結(jié)合功能,了解細(xì)胞膜、各種細(xì)胞器和細(xì)胞核的亞微結(jié)構(gòu)。
四、作業(yè)
1.繪制一個(gè)原始卵泡中的卵母細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)高倍鏡圖。
2.繪制一個(gè)脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,示高爾基復(fù)合體高倍鏡圖。
五、思考題
1.粗、細(xì)調(diào)節(jié)旋鈕使物鏡上下移動(dòng)還是使載物臺(tái)上下移動(dòng)?
2.若用低倍鏡能看到切片內(nèi)容,但用高倍鏡看不到,應(yīng)考慮那些原因?
3.一般而言,細(xì)胞哪些部分嗜堿性,哪些部分嗜酸性?為什么?
實(shí)驗(yàn)二上皮組織
、目的與要求
1.掌握各種類型被覆上皮的形態(tài)結(jié)構(gòu)。
2.了解外分泌腺中幾種腺上皮細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。
3.了解上皮細(xì)胞各個(gè)面的特化結(jié)構(gòu)。
二、材料
生物顯微鏡、小腸橫切片、氣管橫切片、食管橫切片。
三、內(nèi)容和方法
1.學(xué)生觀察切片
(1)單層柱狀上皮小腸橫切片染色
肉眼觀察:小腸橫切面一般呈圓形或橢圓形,中央的空腔為腸腔,周圍紫紅色的部分為
腸壁。
低倍鏡觀察:可見腸壁腔面有許多突起的小腸絨毛,選擇一個(gè)結(jié)構(gòu)清晰的小腸絨毛進(jìn)一
步詳細(xì)觀察。
高倍鏡觀察:小腸絨毛表面由單層柱狀上皮構(gòu)成。上皮細(xì)胞的胞質(zhì)嗜酸性,細(xì)胞核橢圓
形,嗜堿性且著色較深,位于細(xì)胞近基部。轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)螺旋可見上皮的游離面有一條亮紅色
粗線樣的結(jié)構(gòu)即紋狀緣,它是由微絨毛密集而成的。上皮的基底面與結(jié)締組織交界處有著色
較深的基膜,在局部的上皮細(xì)胞之間,夾有單個(gè)呈空泡樣的杯狀細(xì)胞,屬于單細(xì)胞腺,分泌
粘液。杯狀細(xì)胞的頂部因含大量粘原顆粒而膨大成杯狀,由于粘原顆粒不著色(或著淡藍(lán)色)
而呈空泡狀。細(xì)胞的基部較小,內(nèi)含不規(guī)則或新月狀的細(xì)胞核(圖8)。
(2)假復(fù)層柱狀纖毛上皮氣管橫切片染色
肉眼觀察:氣管橫切面呈圓形,管腔較大,腔面平整,管壁中有染成藍(lán)紫色形如“C”字
的透明軟骨。
低倍鏡觀察:氣管的粘膜層較薄,被覆的是假復(fù)層柱狀纖毛上皮,選擇其中較清晰的部
分換高倍鏡觀察,
高倍鏡觀察:由于構(gòu)成上皮的三種細(xì)胞高低不一,故上皮中細(xì)胞核的位置亦高低不平。
大致可排成三層。表層的細(xì)胞核呈橢圓形,較大,著色較淡的是高柱狀細(xì)胞的核,中間層細(xì)
胞的核呈較小的橢圓形,著色較深,是梭形細(xì)胞的核;最深層的核呈圓形,著色最深,是錐
形細(xì)胞的核。三種細(xì)胞同位于基膜上,實(shí)屬單層上皮。注意高柱狀細(xì)胞的游離面有纖毛。在
有的部位上皮細(xì)胞間也見到空泡樣的杯狀細(xì)胞。上皮的基底面與結(jié)締組織之間有較明顯的基
膜(圖9)。
圖8小腸腸絨毛切片圖9氣管橫切片
(3)復(fù)層扁平上皮食管橫切片染色
肉眼觀察:食管橫切面呈橢圓形,粘膜向管腔突出形成數(shù)個(gè)皺裳,故管壁面凹凸不平。
低倍鏡觀察:找到緊靠腔面的復(fù)層扁平上皮,可見到上皮厚,層數(shù)多,選擇一清晰部位
換高倍鏡觀察。
高倍鏡觀察:從腔面向外觀察,上皮細(xì)胞可分三個(gè)層次:表層由數(shù)層扁平狀的細(xì)胞構(gòu)成,
胞質(zhì)弱嗜酸性,由于不同程度的角化,細(xì)胞核可固縮而濃染變小以至消失,最后呈鱗片狀脫
落。中間層細(xì)胞大,層數(shù)多,由多邊形或梭形的細(xì)胞構(gòu)成,細(xì)胞核圓或橢圓,著色較淺,細(xì)
胞質(zhì)亦弱嗜酸性?;讓蛹?xì)胞呈立方形或矮柱狀,位于基膜上,排列緊密,胞核橢圓著色深,
胞質(zhì)弱嗜堿性。因此,易與基膜下淡紅色的結(jié)締組織相區(qū)別(圖10)。
圖10食管橫切片圖11甲狀腺切片
2.教師示教切片
(I)立方上皮甲狀腺切片染色
高倍鏡下甲狀腺濾泡壁的單層立方上皮。可見細(xì)胞的高度和寬度大致相等,細(xì)胞核圓,位于
中央(圖11)。
(2)變移上皮(高倍)膀胱染色
當(dāng)膀胱收縮時(shí),膀胱壁的變移上皮增厚,由不同形態(tài)的4?6層細(xì)胞組成,表層細(xì)胞體積大,
核圓呈雙核,該細(xì)胞頂端的胞質(zhì)濃縮而呈深紅色,稱殼層,中間層細(xì)胞稍小,多為梭形或倒
梨形,有一個(gè)位于中央的圓形核,胞質(zhì)染色淡而清亮,基底層細(xì)胞小,呈不規(guī)則立方形,排
列較密,核圓色深。當(dāng)膀胱充盈擴(kuò)張時(shí),上皮變薄,數(shù)減少至1?3層,細(xì)胞變成扁平形(圖
12)。
(4)腺上皮頜下腺切片染色
在頜下腺中,可以見到由漿液性細(xì)胞和粘液性細(xì)胞組成的不同形態(tài)的腺泡。
A漿液性腺泡呈圓形或橢圓形,由數(shù)個(gè)錐形的漿液性細(xì)胞圍成,腺細(xì)胞基部胞質(zhì)嗜堿性,細(xì)
胞頂部含大量嗜酸性分泌顆粒而呈紅色,核圓,位于細(xì)胞基部。
B粘液性腺泡由鏈形的粘液性細(xì)胞組成,胞質(zhì)內(nèi)含大量的粘原顆粒,著色很淡,呈淡藍(lán)色,
核被擠向基底部,呈扁平月牙形。
C混合性腺泡是在粘液性腺泡的一側(cè)有幾個(gè)漿液性的細(xì)胞附著,呈半月狀排列,色紅,又稱
漿半月(圖13)。
圖12膀胱圖13頜下腺切片
(5)細(xì)胞的特化結(jié)構(gòu)通過觀察電鏡圖片和幻燈片,了解上皮細(xì)胞游離面的微絨毛,纖毛,側(cè)
面的連接復(fù)合體、縫管連接、鑲嵌連接,基底面的基膜、質(zhì)膜內(nèi)褶、半橋粒等的亞微結(jié)構(gòu)。
四、作業(yè)
1.繪制部分單層柱狀上皮細(xì)胞(含杯狀細(xì)胞)的高倍鏡圖.
2.繪制高倍鏡下的部分復(fù)層扁平上皮。
五、思考題
1.總結(jié)各種被覆上皮的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及分布。
2.在組織切片上,可以根據(jù)那些形態(tài)結(jié)構(gòu)特征確認(rèn)上皮組織?
3.復(fù)層扁平上皮和變移上皮在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能上有什么不同?
實(shí)驗(yàn)三結(jié)締組織
一、目的與要求
1.掌握固有結(jié)締組織中特別是疏松結(jié)締組織和網(wǎng)狀組織的形態(tài)特點(diǎn)。
2.掌握軟骨的一般結(jié)構(gòu)和三種軟骨的特點(diǎn),并了解骨組織的結(jié)構(gòu)特征。
二、材料
生物顯微鏡、結(jié)締組織鋪片、淋巴結(jié)切片(鍍銀法)、淋巴結(jié)切片()、氣管橫切片、骨干橫
磨片。
三、內(nèi)容和方法
1.學(xué)生觀察切片
(1)疏松結(jié)締組織鋪片結(jié)締組織鋪片(活體注射臺(tái)盼藍(lán))及特殊的彈性纖維染色法復(fù)染
肉眼觀察:鋪片染成藍(lán)紫色,形態(tài)不規(guī)則且厚薄不均勻。
低倍鏡觀察:可見縱橫交錯(cuò)呈淡紅色的膠原纖維和深紫色單根的彈性纖維,纖維間有許
多散在的細(xì)胞。選擇一薄而清晰的部位換高倍鏡觀察,
高倍鏡觀察:可以辨認(rèn)以下幾種纖維和兩種細(xì)胞成分:
A膠原纖維染成淡紅色,數(shù)量多,為長短粗細(xì)均不等的纖維束,呈現(xiàn)波浪狀且有分支,
相互交織成網(wǎng)。
B彈性纖維數(shù)量少,呈深紫色的發(fā)絲狀,長而比較直,斷端有卷曲。
C成纖維細(xì)胞數(shù)量最多,胞體大,具有多個(gè)突起的星形或多角形的細(xì)胞。由于胞質(zhì)染色
極淺而細(xì)胞輪廓不清,只能根據(jù)細(xì)胞核較大,橢圓形,有1?2個(gè)明顯的核仁等特點(diǎn)來判斷。
這些細(xì)胞多沿膠原纖維分布。另外還可見到一些橢圓形、較小且深染,核仁不明顯的細(xì)胞核,
此系功能不活躍的纖維細(xì)胞的細(xì)胞核。
D巨噬細(xì)胞又稱組織細(xì)胞,一般呈梭形或星形,最大的特征是胞質(zhì)內(nèi)有許多被吞噬的臺(tái)
盼藍(lán)顆粒。細(xì)胞核較小,橢圓形且染色較深,見不到核仁,可借助于胞質(zhì)中吞噬顆粒的存在
來判斷它的形狀和大?。▓D14)o
(2)網(wǎng)狀細(xì)胞淋巴結(jié)切片染色
肉眼觀察:淋巴結(jié)切面,周圍色深的部分是淋巴結(jié)的皮質(zhì),中央色較淺的部分是淋巴結(jié)
的髓質(zhì)。
低倍鏡觀察:找到淋巴結(jié)髓質(zhì),把細(xì)胞分布比較稀疏的部分(髓竇)置高倍鏡下觀察。
高倍鏡觀察:可見網(wǎng)狀細(xì)胞較大,有數(shù)目不等的胞質(zhì)突起,相鄰網(wǎng)狀細(xì)胞的突起可互相
連接成網(wǎng),胞質(zhì)和突起呈弱嗜堿性,胞核圓形或橢圓形,著色淺(圖15)。
圖14疏松結(jié)締組織圖15淋巴結(jié)髓質(zhì)
(3)網(wǎng)狀纖維淋巴結(jié)切片鍍銀法
肉眼觀察:淋巴結(jié)的切面被染成棕黑色。
低倍鏡觀察:找到粗細(xì)不等交織成網(wǎng)的黑色纖維,換高倍鏡觀察。
高倍鏡觀察:可見纖維著色深淺不同,其中較細(xì)呈黑色的是網(wǎng)狀纖維,較粗呈棕色或灰
黑色的是膠原纖維。因鍍銀時(shí)兩種纖維都著色,只是著色深淺程度不同而已(圖16)。
(4)透明軟骨氣管橫切片染色
肉眼觀察:在氣管壁中有一條染成深藍(lán)紫色的“C”形軟骨環(huán),即透明軟骨。
低倍鏡觀察:找到透明軟骨后,即可見到表面有嗜酸性的軟骨膜,中央的基質(zhì)著淺藍(lán)紫
色,其中散布著許多軟骨細(xì)胞。
高倍鏡觀察:軟骨膜由致密結(jié)締組織構(gòu)成,可見嗜酸性平行排列的膠原纖維束,束間夾
有扁平的成纖維細(xì)胞。軟骨細(xì)胞位于軟骨陷窩內(nèi),邊緣的軟骨細(xì)胞小,呈扁平形或橢圓形,
越靠近中央,細(xì)胞體積漸大變成卵圓形或圓形。生活狀態(tài)下軟骨細(xì)胞充滿軟骨陷窩,制片后
因胞質(zhì)收縮,軟骨細(xì)胞與陷窩壁之間出現(xiàn)空隙。由于軟骨細(xì)胞分裂增值,一個(gè)陷窩內(nèi)??梢?/p>
到2?4個(gè)軟骨細(xì)胞,稱同源細(xì)胞群?軟骨基質(zhì)呈均質(zhì)凝膠狀,埋于其中的膠原纖維不能分辨。
在軟骨陷窩周圍的基質(zhì)中含有較多的硫酸軟骨素而顯強(qiáng)嗜堿性,稱軟骨囊(圖17)。
圖16網(wǎng)狀纖維圖17透明軟骨
(5)密質(zhì)骨骨干橫磨片原色
肉眼觀察:骨磨片形狀呈方形,著淡黃色。
低倍鏡觀察:由于是磨片,骨中的骨膜、骨細(xì)胞、血管及神經(jīng)等已不存在,只留下骨板、
骨陷窩及骨小管等結(jié)構(gòu)。從外向內(nèi)可見骨板、分為外、中,內(nèi)三層。外層骨板較厚,內(nèi)層骨
板較薄,它們分別圍繞骨表面和骨髓腔作環(huán)行排列,稱外環(huán)骨板和內(nèi)環(huán)骨板。中間層骨板最
厚,有許多同心圓排列的骨板系統(tǒng)即哈佛氏系統(tǒng)(骨單位)。哈佛氏系統(tǒng)中央的深色管腔稱哈
佛氏管,周圍環(huán)形的骨板是哈氏骨板。位于哈佛氏系統(tǒng)之間的一些呈不規(guī)則形狀的骨板稱骨
間板。在上述各種骨板周圍可見到淺色的分界線即粘合線。在骨板面成骨板內(nèi)有許多深染的
小窩為骨陷窩,其周圍伸出的細(xì)管為骨小管。骨陷窩和骨小管是骨細(xì)胞及其突起存在的腔隙。
另外還有少數(shù)呈橫行或斜行的管進(jìn)穿,與內(nèi)、外環(huán)骨板相通,并與哈佛氏管相通,稱伏克曼
氏管(圖18)。
圖18骨干橫磨片
2.教師示教切片
(1)脂肪細(xì)胞與脂肪組織皮膚切片染色
高倍鏡下的脂肪組織呈蜂窩狀,由大量脂肪細(xì)胞及少量結(jié)締組織和毛細(xì)血管構(gòu)成。脂肪
細(xì)胞較大,胞質(zhì)內(nèi)充滿脂滴,胞核被擠到邊緣,染色深呈扁平狀,由于脂滴被溶去,故脂肪
細(xì)胞呈空泡狀(圖19)o
(2)致密結(jié)締組織腱切片染色
腱是規(guī)則的致密結(jié)締組織。高倍鏡下可見它由平行排列著的粗大淡紅色的膠原纖維束和
夾于纖維束之間的腱細(xì)胞構(gòu)成。腱細(xì)胞核呈細(xì)長狀,著色深,胞質(zhì)少而不易看見(圖20)。
圖19脂肪細(xì)胞圖20腱切片
(3)彈性軟骨耳廓切片染色
高倍鏡下彈性軟骨的主要特征是基質(zhì)中含有大盤染成深藍(lán)色的彈性纖維交織成網(wǎng)。在軟
骨邊緣的彈性纖維稀疏,深部的粗大而致密。軟骨膜及軟骨細(xì)胞的結(jié)構(gòu),基本同透明軟骨(圖
21)。
(4)纖維軟骨椎間盤切片染色
高倍鏡下可見基質(zhì)中有大量呈淡紅色平行排列的膠原纖維束,纖維束之間有較小的單個(gè)、
兩個(gè)或成行排列的軟骨細(xì)胞(圖22)。
圖21彈性軟骨圖22纖維軟骨
四、作業(yè)
1.繪圖:高倍鏡下疏松結(jié)締組織結(jié)構(gòu)圖.
2.繪圖:高倍鏡下網(wǎng)狀組織的結(jié)構(gòu)圖。
五、思考題
1.比較上皮組織和結(jié)締組織的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。
2.疏松結(jié)締組織中有哪幾種細(xì)胞和纖維.
3.三種軟骨的組織結(jié)構(gòu)有什么不同?
實(shí)驗(yàn)四血液
一、目的與要求
掌握血液涂片的制作方法,并觀察血液涂片。
二、材料
生物顯微鏡、牛血液、駱駝血液、雞血液、瑞特氏染液、香柏油、吸水紙、擦鏡紙、載玻片、
蒸儲(chǔ)水、二甲苯、染色缸。
三、內(nèi)容和方法
1.血涂片的制作
(1)血涂片的染色
取一滴新鮮的血液,置于玻片的一端,以左手拿該片的兩端,迅速用右手拿住另一載玻
片的一端,在左手載玻片上由前向后接觸血滴,使兩載玻片約成45o角度,輕輕移動(dòng),使血
滴成一直線,然后由前向后推為一均勻的薄片。涂片在空氣中干燥后置于染色架上,滴加染
色液,使涂片被染色液覆蓋,染1后,再加等量的緩沖液于染色液上,浸染約5~8。此時(shí)涂
片表面呈現(xiàn)一層古銅色,用蒸儲(chǔ)水迅速?zèng)_洗,見涂片呈粉紅色后,以吸水紙吸干。
(2)將干燥好的血涂片加香柏油一滴,置顯微鏡下觀察。
肉眼觀察制作良好的血涂片厚薄適宜,血膜分布均勻,呈粉紅色。有些血片涂抹厚薄不均勻,
主要是推片不齊,用力不勻及玻片不潔所致。選一厚薄適宜部位置顯微鏡下觀察。
2.學(xué)生觀察切片
(1)家畜血液涂片(圖23)
低倍鏡觀察可見到大量圓形而細(xì)小的紅細(xì)胞。白細(xì)胞很少,稀疏地散布于紅細(xì)胞之間,具
有藍(lán)紫色的細(xì)胞核。選白細(xì)胞較多的部位(--般在血膜邊緣和血膜尾部,因體積大的細(xì)胞常在
此出現(xiàn)),換油鏡觀察。
油鏡下區(qū)別血液中各種有形成分時(shí),可參考第三版教材的彩色圖版1或3,結(jié)合圖5-1各
種血細(xì)胞模式圖的特點(diǎn)進(jìn)行觀察。應(yīng)該指出的是,圖版中的細(xì)胞形態(tài)都是經(jīng)過典型化了的,實(shí)
際上,血細(xì)胞的形態(tài)不僅因動(dòng)物而異,而且常因制片技術(shù)和染色偏酸、偏堿均可使細(xì)胞形態(tài)或
染色反應(yīng)異常。如血膜過厚,細(xì)胞重疊而細(xì)胞直徑縮小,血膜太薄,白細(xì)胞多集中于邊緣。
染色結(jié)果偏酸,則紅細(xì)胞和嗜酸性顆粒偏紅,白細(xì)胞的細(xì)胞核呈極淺藍(lán)色或不著色。染色結(jié)
果偏堿,所有的紅、白細(xì)胞呈灰藍(lán)色,顆粒深暗等。故觀察時(shí)不能生搬硬套,一定要根據(jù)具體
情況,靈活掌握,對(duì)比分析,才能做出正確的判斷。
A紅細(xì)胞數(shù)量最多,體積小而均勻分布,呈粉紅色的圓盤狀,邊緣厚,著色較深,中央薄,
著色較淺,無核無細(xì)胞器,胞質(zhì)內(nèi)充滿血紅蛋白。
B中性粒細(xì)胞是白細(xì)胞中較多的一種,體積比紅細(xì)胞大,主要的特征是胞質(zhì)中的特殊顆粒細(xì)小,分
布均勻,著淡紅色或淺紫色。胞核著深紫紅色,形態(tài)多樣,有豆形、桿狀(為幼稚型,胞核細(xì)長,
彎曲盤繞成馬蹄形、S形、W形或U形等多種形態(tài))或分葉狀,一般分3-5葉或更多,葉間
以染色質(zhì)絲相連,各葉的大小、形狀和排列各不相同。核分葉的多少與該細(xì)胞年齡有關(guān)。
C嗜酸粒細(xì)胞比中性粒細(xì)胞略大,數(shù)量少,胞核常分兩葉,著紫藍(lán)色。主要特點(diǎn)是胞質(zhì)內(nèi)充
滿粗大的嗜酸性特殊顆粒,色鮮紅或桔紅。馬的嗜酸性顆粒粗大,晶瑩透亮,呈圓形或橢圓
形,其他家畜的嗜酸性顆粒較小。
D嗜堿粒細(xì)胞數(shù)量很少,體積與嗜酸粒細(xì)胞相近或略小。主要特征是胞質(zhì)中含有大小不等,
形狀不一的嗜堿性特殊顆粒,顆粒著藍(lán)紫色,常蓋于胞核上。胞核呈"S”形或雙葉狀,著淺紫
紅色。此種白細(xì)胞由于數(shù)量極少,,必須多觀察一些視野方能察見。
E淋巴細(xì)胞有大、中、小三種類型,其中小淋巴細(xì)胞最多,血膜上很易見到,體積與紅細(xì)胞
相近或略大。核大而圓,幾乎占據(jù)整個(gè)細(xì)胞,核一側(cè)常見凹陷,染色質(zhì)呈致密塊狀,著深紫
藍(lán)色。胞質(zhì)極少,僅在核的一側(cè)出現(xiàn)一線狀天藍(lán)色或淡藍(lán)色的胞質(zhì),有時(shí)甚至完全不見。中淋
巴細(xì)胞體積與中性粒細(xì)胞相近,形態(tài)與小淋巴細(xì)胞相似,但胞質(zhì)較多呈薄層圍繞在核的周圍。
在核的凹陷處胞質(zhì)較多且透亮,偶見少量紫紅色的嗜天青顆粒。大淋巴細(xì)胞在正常血液中不
常見到,體積與單核細(xì)胞相近或略小,胞核圓形著深紫藍(lán)色,胞質(zhì)更多,呈天藍(lán)色。圍繞核
周圍的胞質(zhì)呈一淡染區(qū)。
F單核細(xì)胞是白細(xì)胞中體積最大的一種,胞核呈腎形、馬蹄形或不規(guī)則形,著色淺,染色質(zhì)
呈細(xì)網(wǎng)狀。細(xì)胞質(zhì)豐富,弱嗜堿性,呈灰藍(lán)色,偶見細(xì)小紫紅色的嗜天青顆粒。
G血小板體積很小,常三五成群散布于紅細(xì)胞之間,形態(tài)有圓形、橢圓形、星形或多角形的
藍(lán)紫色小體,,中央著色深的是血小板的顆粒區(qū),周邊著色淺的是透明區(qū)。
(2)家禽血液涂片(圖24)
雞血的有形成分與家畜比較有以下不同:
A紅細(xì)胞呈橢圓形,中央有一深染的橢圓形細(xì)胞核,不見核仁,胞質(zhì)呈均質(zhì)的淡紅色。
B中性粒細(xì)胞,又稱異嗜性粒細(xì)胞,圓形,具有2—5個(gè)分葉核,胞質(zhì)內(nèi)嗜酸性的特殊顆粒呈桿狀
或紡錘形。
C凝血細(xì)胞,又稱血栓細(xì)胞,相當(dāng)于家畜的血小板。凝血細(xì)胞具有典型細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu),
比紅細(xì)胞略小,兩端鈍圓,核呈橢圓形、染色質(zhì)致密。胞質(zhì)微嗜堿性,內(nèi)有1~2個(gè)紫紅色的
嗜天青顆粒。其它血細(xì)胞基本上與其它家畜的血細(xì)胞相似。
圖23牛血涂片圖24雞血涂片
3.教師示范切片
駱駝血涂片
高倍鏡下觀察駱駝血液中的有形成分,見紅細(xì)胞呈橢圓形,無細(xì)胞核。其余血細(xì)胞的形態(tài)結(jié)
構(gòu)與一般家畜血液的有形成分相似(圖25)。
圖25駱駝血涂片
四、作業(yè)
1.寫出血涂片制作的操作步驟。
2.繪制自制血涂片中的各種血細(xì)胞。
五、思考題
1.比較哺乳動(dòng)物和禽類紅細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。
2.比較哺乳動(dòng)物和禽類各種白細(xì)胞的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。
實(shí)驗(yàn)五肌組織
一、目的與要求
以骨骼肌為重點(diǎn),掌握三種肌纖維的形態(tài)和結(jié)構(gòu)特點(diǎn),要求在顯微鏡下準(zhǔn)確識(shí)別它們縱橫切
面的不同。
二、材料
生物顯微鏡、骨骼肌切片、心肌切片、平滑肌切片。
三、內(nèi)容和方法
1.學(xué)生觀察切片
(1)骨骼肌縱、橫切鐵蘇木素(或)染色
低倍鏡觀察:骨骼肌的縱切面上有許多平行排列著的圓柱狀肌纖維,具有明暗相間的橫紋,
邊緣有很多細(xì)胞核。橫切面上可見肌纖維集聚成束,被切成許多圓形或多邊形斷面。無論縱
切面或橫切面的肌纖維周圍都有疏松結(jié)締組織包裹(肌內(nèi)膜和肌束膜),結(jié)締組織內(nèi)含豐富的
血管。
高倍鏡觀察:在縱切面找出一條橫紋清晰的肌纖維,在肌纖維膜下分布著一些橢圓形的
細(xì)胞核,可以見到核仁。肌纖維內(nèi)含有順長軸平行排列的肌原纖維,很多肌原纖維上的明帶
(I帶)和暗帶(A帶)相間排列,就形成了橫紋。仔細(xì)觀察在暗帶中有一淡染的窄帶稱H
帶,H帶中央還有一細(xì)的M線。在一般光鏡下,M線不能見到。在明帶中央有一條隱約可見
的Z線(間線),相鄰兩條Z線之間的一段肌原纖維,即為一個(gè)肌節(jié)。
肌纖維的橫切面上可見肌原纖維被切成點(diǎn)狀或短桿狀(斜切),有的均勻分布,有的則被
肌漿分別成一個(gè)個(gè)小區(qū)。在橫切面上還可以見到少量位于周邊的圓形細(xì)胞核(圖26,27)。
圖26骨骼肌縱切圖27骨骼肌橫切
(2)心肌心肌切片染色
低倍鏡觀察:由于心肌纖維呈螺旋狀排列,故在切面中可同時(shí)觀察到心肌纖維的縱切、斜切
或橫切面,各心肌纖維之間由結(jié)締組織相連系并含有豐富的血管。
高倍鏡觀察:先觀察縱切的心肌纖維,細(xì)胞呈短柱狀,平行排列,并以較細(xì)而短的分支與鄰
近的肌纖維相吻合,互連成網(wǎng)。胞核橢圓形,位于細(xì)胞中央,注意核周圍由于肌漿較多而呈
淡染區(qū)。心肌纖維亦可見明暗相間的橫紋,但不如骨骼肌明顯。
心肌橫切面呈大小不等的圓形或橢圓形切面,心肌無骨骼肌那樣結(jié)構(gòu)典型的肌原纖維,
中間有一圓形胞核,核周圍清亮,但很多切面未能切到核(圖28、29)0
(3)平滑肌小腸橫切片染色
肉眼觀察:切片呈紅色,本實(shí)驗(yàn)觀察的是小腸的肌層,呈更深的紅色,而且比較厚。
低倍鏡觀察:從小腸的腔面向外觀察,依次是粘膜層,粘膜下層(淡紅色)、肌層(深紅
色)和漿膜。肌層發(fā)達(dá),由平滑肌纖維呈內(nèi)環(huán)行、外縱行排列,在此切而上內(nèi)環(huán)肌呈縱切,
外縱肌呈橫切。
高倍鏡觀察:縱切的平滑肌纖維呈細(xì)長紡錘形,彼此嵌合緊密排列,胞核為長橢圓形,
位于肌纖維中央,若見到扭曲的細(xì)胞核,是由于平滑肌收縮所引起。胞質(zhì)嗜酸性,呈均質(zhì)狀,
不具橫紋。橫切的肌纖維呈大小不等的圓形切面,較大的切面上可見到圓形的細(xì)胞核,偏離
2.教師示教切片
(1)心肌閏盤鐵蘇木素或鉀破一蘇木紅染色
高倍鏡下可清楚見到肌纖維的分支和橫紋,在兩個(gè)心肌纖維的連接處,
藍(lán)色呈階梯狀的閏盤(圖31)。
圖30平滑肌圖31心肌閏盤
(2)觀察肌節(jié)的超微結(jié)構(gòu)從圖片或幻燈片中了解I帶、A帶、H帶、M線、Z線形成及構(gòu)造。
四、作業(yè)
1.繪制骨骼肌、心肌、平滑肌纖維的縱、橫切面高倍鏡圖。
五、思考題
1.試述肌組織的基本結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。
2.如何在光鏡下分辨三種肌組織。
實(shí)驗(yàn)六神經(jīng)組織及神經(jīng)系統(tǒng)
一、目的與要求
掌握神經(jīng)元、脊髓、小腦和脊神經(jīng)節(jié)的構(gòu)造。
二、材料
生物顯微鏡、脊髓橫切片、小腦切片。
三、內(nèi)容和方法
1.學(xué)生觀察切片
(1)多極神經(jīng)元脊髓橫切片硫堇(或)染色
肉眼觀察:標(biāo)本略呈橢圓形,中間著色較深呈蝶翼狀的是脊髓灰質(zhì),灰質(zhì)周圍呈淡藍(lán)色的是
白質(zhì)。
低倍鏡觀察:先觀察脊髓全貌,找到脊髓中央管,把灰質(zhì)置視野中心,可見在灰質(zhì)中有成群
或單個(gè)呈藍(lán)色、大小不等、形態(tài)各異的多極神經(jīng)元,位于腹角的神經(jīng)元多而大。選擇一個(gè)大
而突起多,胞核清晰的神經(jīng)元換高倍鏡觀察。
高倍鏡觀察:神經(jīng)元呈星狀,由胞體(核周體)和胞突構(gòu)成。
A胞體中央有一個(gè)大而圓,著色很淡的細(xì)胞核,核與核仁均很清晰,染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀。胞
質(zhì)中分布著許多深藍(lán)色、大小不等的塊狀物即尼氏體。在的切片上尼氏體不甚清楚,呈淡紫
紅色。胞體內(nèi)還有許多細(xì)絲狀的神經(jīng)原纖維,用鍍銀法方可顯示,見示教片。
B.胞突有樹突和軸突兩種,突起的數(shù)目與切面有關(guān)。胞突的起始部較粗,含有尼氏體的是樹
突,數(shù)目較多。不含尼氏體的是軸突,起始部稱軸丘。軸突只有一個(gè),因切面關(guān)系不易呈現(xiàn),
需多觀察幾個(gè)神經(jīng)元,方能見到。胞突內(nèi)均有神經(jīng)原纖維伸入。
在神經(jīng)元的周圍還可見到許多被切斷的神經(jīng)纖維和一些神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞核。主要是
星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞的核(圖32)。
(2)腰部脊髓橫切面染色
肉眼觀察:脊髓橫切面呈橢圓形,中間著色較深呈蝶翼狀的是脊髓灰質(zhì),周圍著色淺的
是白質(zhì)。
低倍鏡觀察:移動(dòng)標(biāo)本觀察脊髓全貌,外表面包有薄層結(jié)締組織即脊軟膜。脊髓背側(cè)有
背正中隔,腹側(cè)有一深溝為腹正中溝。脊髓中央是灰質(zhì),其尖細(xì)的角為背角(背灰柱)。鈍而
寬大的角為腹角(腹灰柱),在胸腰部脊髓,背角與腹角之間還有外側(cè)角。脊髓中央的小孔是
脊髓中央管,由室管膜上皮圍成。
高倍鏡觀察:在脊髓灰質(zhì)可見到背角有胞體較小的多極神經(jīng)元,即中間神經(jīng)元。腹角有
許多胞體較大的多極運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元。外側(cè)角有植物性神經(jīng)的節(jié)前神經(jīng)元的胞體。在神經(jīng)元之間
還有神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和無髓神經(jīng)纖維。白質(zhì)位于灰質(zhì)周圍,主要由粗細(xì)不等的有髓神經(jīng)纖維橫
切面和散布于其間的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞構(gòu)成。由于染色不能顯示神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài),僅見到形
態(tài)和大小各異的細(xì)胞核,如核較大,圓形或橢圓形的星狀細(xì)胞核。核較小呈圓形的少突膠質(zhì)
細(xì)胞核。核小而濃染,卵圓形或三角形的小膠質(zhì)細(xì)胞核等(圖33)。
圖32多極神經(jīng)元圖33腰部脊髓橫切面
(3)小腦小腦切片染色
肉眼觀察:小腦表面許多平行的淺溝把小腦分隔成許多小腦葉,每一個(gè)小腦葉表層紫紅色部
分是皮質(zhì),深部淡紅色為髓質(zhì)(白質(zhì))。
低倍鏡觀察:分清面的腦軟膜、皮質(zhì)和髓質(zhì)。轉(zhuǎn)高倍鏡觀察皮質(zhì)和髓質(zhì)。
A小腦皮質(zhì)依次觀察下列各層:
a分子層位于腦軟膜的深面,很厚、著淡紅色,內(nèi)有大量淡紅色的無髓神經(jīng)纖維縱切面(主要
是浦金野氏細(xì)胞的樹突)、少量神經(jīng)細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的核。
b浦金野氏細(xì)胞(節(jié)細(xì)胞)層由一層胞體呈梨狀,大而不連續(xù)的浦金野氏細(xì)胞構(gòu)成,其胞
體頂端的主樹突伸入分子層,軸突穿過顆粒層進(jìn)入髓質(zhì)。
c顆粒層緊靠浦金野氏細(xì)胞層,較厚,由大量胞體較小的顆粒細(xì)胞和少量胞體較大的高爾基
型細(xì)胞構(gòu)成。由于細(xì)胞小且排列緊密,細(xì)胞輪廓不易分辨,僅見大量圓形或橢圓形嗜堿性的
細(xì)胞核,似密集的顆粒而得名。細(xì)胞核之間深紅色的塊狀物,即小腦小球。
B小腦髓質(zhì)(白質(zhì))在顆粒層深面,由許多縱行排列的有髓神經(jīng)纖維和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞構(gòu)成。
有髓神纖維的髓鞘已在制片過程中被脂溶劑溶去,僅見到神經(jīng)纖維中央著紅色的軸索和其兩
側(cè)的神經(jīng)角蛋白網(wǎng)及神經(jīng)膜(圖34)。
(4)脊神經(jīng)節(jié)脊神經(jīng)節(jié)切片染色
肉眼觀察和低倍鏡觀察:脊神經(jīng)節(jié)縱切面呈橢圓形,著紫紅色,外表面有致密結(jié)締組織
被膜,并伸入節(jié)內(nèi)分布于神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和神經(jīng)纖維之間。節(jié)內(nèi)的假單極神經(jīng)元成群分布于神經(jīng)
纖維束之間。選擇結(jié)構(gòu)清晰的神經(jīng)細(xì)胞群,轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察。
高倍鏡觀察:脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的胞體切面多呈圓形,大小不等,胞質(zhì)嗜酸性,尼氏體呈細(xì)
顆粒狀,胞核大而圓。偶見胞體一側(cè)有一個(gè)淡紅色的胞突起始部。圍繞胞體外周的一層扁平
或立方形細(xì)胞即衛(wèi)星細(xì)胞。在細(xì)胞群之間可見到大量神經(jīng)纖維的縱切面,其中主要是有髓神
經(jīng)纖維,無髓神經(jīng)纖維很少(圖35)。
圖34小腦皮質(zhì)切片圖35脊神經(jīng)節(jié)橫切片
2.教師示教切片
(1)環(huán)層小體腸系膜環(huán)層小體裝片
環(huán)層小體是一種大型感受器,在低倍鏡下就可見到一體積大呈圓形或橢圓形的小體。小體中
央有一根直的、呈深藍(lán)色的無髓神經(jīng)纖維終末部分,外包著十多層由扁平的結(jié)締組織細(xì)胞(注
意其扁小而深染的細(xì)胞核)排列成同心圓的被囊(圖36)。
(2)運(yùn)動(dòng)終板肋間肌壓片氯化金法
高倍鏡下觀察肋間肌壓片,可見一條較粗、呈深黑色的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)纖維,分布在許多條淡
紅色的骨骼肌纖維上。神經(jīng)纖維到達(dá)骨骼肌纖維前,分出一些爪狀的分支,每一分支的終末
形成扣狀膨大,貼附在骨骼肌表面的凹槽內(nèi),即為運(yùn)動(dòng)終板。骨骼肌纖維染成淡紅色,有不
甚明顯的橫紋(圖37)
圖36環(huán)層小體圖37運(yùn)動(dòng)終板
(3)大腦大腦切片鍍銀法
低倍鏡觀察大腦結(jié)構(gòu),表面是皮質(zhì),深層是髓質(zhì),皮質(zhì)的神經(jīng)細(xì)胞經(jīng)鍍銀法處理后,胞
體及其突起都呈黑色。由表及里分辨皮質(zhì)的分子層、外顆粒層、外錐體細(xì)胞層、內(nèi)顆粒層、
大錐體細(xì)胞層和多形細(xì)胞層等。多形細(xì)胞層的深面是大腦的髓質(zhì)(白質(zhì)),主要由有髓神經(jīng)纖
維構(gòu)成(圖38)。
圖38大腦大錐體細(xì)胞層
四、作業(yè)
1.繪制一個(gè)高倍鏡下的多極神經(jīng)元。
2.繪制一側(cè)脊髓橫切面低倍鏡圖。
3.繪制部分小腦葉皮質(zhì)低倍鏡圖。
五、思考題
1.簡述尼氏體的分布位置。
2.簡述有贛神經(jīng)纖維的結(jié)構(gòu)。
3.簡述小腦皮質(zhì)的組織結(jié)構(gòu)。
實(shí)驗(yàn)七循環(huán)系統(tǒng)
一、目的與要求
1.掌握中動(dòng)脈和心臟的基本結(jié)構(gòu),以及大動(dòng)脈和毛細(xì)血管的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。
2.顯微鏡下正確區(qū)分小動(dòng)脈和小靜脈。
二、材料
生物顯微鏡、中動(dòng)脈和中靜脈的橫切片、心臟切片、
三、內(nèi)容和方法
1.學(xué)生觀察切片
(1)中動(dòng)脈和中靜脈中動(dòng)、靜脈橫切染色
肉眼觀察:動(dòng)脈橫切面呈圓形,靜脈管壁塌陷,呈扁圓形或不規(guī)則形。
低倍鏡觀察;動(dòng)脈管壁厚、管腔小而圓;靜脈管壁薄、管腔大,常塌陷而呈不規(guī)則形。
分別置于視野中央觀察。
A中動(dòng)脈從腔面向外觀察,先分辨出內(nèi)膜、中膜和外膜,再換高倍鏡觀察。
高倍鏡觀察:
a內(nèi)膜為管璧最內(nèi)層,很薄。注意由于內(nèi)彈性膜的收縮,致使內(nèi)膜在切面上呈波紋狀。內(nèi)膜有
三層結(jié)構(gòu):
內(nèi)皮為襯于腔面的單層扁平上皮,其扁而深染的胞核向腔面突出。
內(nèi)皮下層為內(nèi)皮深面與內(nèi)彈性膜之間的結(jié)締組織,有的血管較明顯,有的則不明顯。
內(nèi)彈性膜切面上很明顯,呈亮紅色的波紋狀,它是內(nèi)膜和中膜的分界線。
b中膜很厚,其中含有大量環(huán)行排列、著色較深的平滑肌纖維。平滑肌纖維間呈淡紅色的是
彈性纖維和膠原纖維。有的中動(dòng)脈在中膜與外膜交界處有由彈性纖維構(gòu)成的外彈性膜。
c外膜較厚,由結(jié)締組織構(gòu)成,其內(nèi)可見到自養(yǎng)血管。外膜的結(jié)締組織直接移行為血管間的結(jié)
締組織(圖39)。
B中靜脈高倍鏡下與中動(dòng)脈比較有下列待點(diǎn):內(nèi)膜不發(fā)達(dá),僅由內(nèi)皮和內(nèi)皮下層構(gòu)成,缺內(nèi)
彈性膜。中膜較薄,平滑肌層數(shù)少。外膜較中膜厚,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,內(nèi)有散在的縱行
平滑肌束和自養(yǎng)血管(圖40)。
圖39中動(dòng)脈圖40中靜脈
(2)心臟心臟切片染色
肉眼觀察:心壁很厚,染成較深的紅色。切面中不平整的一面是心內(nèi)膜,其深面為心肌
膜和心外膜。
低倍鏡觀察:移動(dòng)標(biāo)本,從腔面向外觀察心壁。緊靠腔面呈淡紅色的部分為心內(nèi)膜,其
深面很厚,著深紅色部分是心肌膜。最外面是心外膜,內(nèi)可見到空泡樣的脂肪細(xì)胞。
高倍鏡下逐層觀察下列結(jié)構(gòu):
A心內(nèi)膜心壁最內(nèi)層,又分三層。
a內(nèi)皮為襯于腔面的單層扁平上皮。
b內(nèi)皮下層位于內(nèi)皮深面較致密的結(jié)締組織.
c心內(nèi)膜下層為心內(nèi)膜最深層的疏松結(jié)締組織。它與內(nèi)皮下層無明顯分界線。層內(nèi)可見到單個(gè)
或成群(束)的浦金野氏纖維的切面,它比心肌纖維粗大,橫切面呈圓形或橢圓形,胞質(zhì)嗜
酸性,肌纖維極少,胞核較?。ㄅ家婋p核),圓形、位置常偏心(圖41)。
B.心肌膜構(gòu)成心壁厚度的大部分,由心肌纖維構(gòu)成。因心肌纖維呈螺旋狀排列,故切片中可
見縱、橫、斜等各種切面。在縱切面上可見到較細(xì)的橫紋,但閏盤在染色法不能顯示。胞核
橢圓形,位于肌纖維的中央。肌纖維分支并吻合成網(wǎng)。許多心肌纖維被疏松結(jié)締組織分成大
小不等的纖維束,束間的結(jié)締組織與心肌纖維間的結(jié)締組織相連,內(nèi)見有豐富的血管(圖41)。
C心外膜心壁最外層、很薄、由疏松結(jié)締組織和外表面的間皮構(gòu)成。結(jié)締組織中可見到成群
的脂肪細(xì)胞和血管等(圖42)。
圖41心內(nèi)膜和心肌膜圖42心外膜
2.教師示教切片
(1)大動(dòng)脈大動(dòng)脈橫切片染色
高倍鏡下觀察大動(dòng)脈管壁結(jié)構(gòu),與中動(dòng)脈比較其特點(diǎn)如下:
A內(nèi)膜內(nèi)皮深面的內(nèi)皮下層較厚,內(nèi)彈性膜與中膜的彈性膜相連,分界不明顯。
B中膜強(qiáng)厚,內(nèi)有數(shù)十層粗大、亮紅色呈波紋狀排列的彈性膜,彈性膜之向夾有平滑肌
纖維、彈性纖維和膠原纖維。
C外膜比內(nèi)膜稍厚,主要由縱行膠原纖維、彈性纖維和少量平滑肌纖維、神經(jīng)和血管等
構(gòu)成(圖43)。
(2)小動(dòng)脈、小靜脈及毛細(xì)血管器官的疏松結(jié)締組織染色
高倍鏡下觀察器官的疏松結(jié)締組織,內(nèi)有許多伴行的小動(dòng)脈和小靜脈切面。指針指的是
小動(dòng)脈,其特點(diǎn)是:管壁厚、著色較深,管腔小、通常無血細(xì)胞或僅有少量血細(xì)胞。內(nèi)皮外
面圍繞著數(shù)層環(huán)行的平滑肌。平滑肌外面的結(jié)締組織與血管間的結(jié)締組織相連。小靜脈位于
小動(dòng)脈一旁,管腔大且不規(guī)則,腔內(nèi)常有血細(xì)胞,管璧薄、著色淺,內(nèi)皮細(xì)胞外面僅見到薄
層結(jié)締組織。毛細(xì)血管位于結(jié)締組織纖維之間,切面多,管腔小,腔內(nèi)常有1?2個(gè)紅細(xì)胞或
缺紅細(xì)胞,管壁僅由內(nèi)皮細(xì)胞圈成,卵圓形著色很深的細(xì)胞核向腔面突出(圖44)。
圖43大動(dòng)脈圖44小動(dòng)脈、小靜脈
四、作業(yè)
1.繪制部分中動(dòng)脈橫切面低倍鏡圖。
2.繪制一小動(dòng)脈和小靜脈高倍鏡圖。
五、思考題
1.光鏡下如何區(qū)別動(dòng)脈和靜脈?
2.比較中動(dòng)脈與中靜脈管壁組織結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)。
3.比較小動(dòng)脈與小靜脈組織結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。
實(shí)驗(yàn)八免疫系統(tǒng)
一、目的與要求
1.掌握淋巴結(jié)和脾臟的組織構(gòu)造及其在免疫過程中的形態(tài)變化,并了解豬淋巴結(jié)的結(jié)構(gòu)特
點(diǎn)。
2.了解胸腺和禽類腔上囊的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和B,T淋巴細(xì)胞的分化、發(fā)育過程。
二、材料
生物顯微鏡、淋巴結(jié)切片、脾臟切片、胸腺切片,腔上囊橫切片。
三、內(nèi)容和方法
1.學(xué)生觀察切片
(1)淋巴結(jié)淋巴結(jié)縱切片染色
肉眼觀察:淋巴結(jié)正中切面呈豆?fàn)睿粋?cè)凹陷處為淋巴門,表面淡紅色的是被膜,其
深面著藍(lán)紫色的部分是淋巴結(jié)皮質(zhì),中央淡紅色部分是髓質(zhì)。
低倍鏡觀察:依次分辨被膜、小梁、皮質(zhì)和髓質(zhì)。
高倍鏡觀察下列結(jié)構(gòu):
A被膜和小梁包在淋巴結(jié)外表面的被膜,著淡紅色,由致密結(jié)締組織和少量平滑肌構(gòu)成。被
膜上偶見輸入淋巴管的切面,門部結(jié)締組織較多并有輸出淋巴管和血管等切面。結(jié)締組織
從多處伸人皮質(zhì)和髓質(zhì),穿行于淋巴組織之間形成小梁,其切面呈淡紅色,粗細(xì)不等,形
態(tài)各異,有的小梁上可見到血管即小梁動(dòng)脈和小梁靜脈。
B皮質(zhì)位于被膜深面著深紫藍(lán)色的致密淋巴組織。有的淋巴組織密集成圓形或橢圓形的淋巴
小結(jié),小結(jié)中央的淡染區(qū)為生發(fā)中心(反應(yīng)中心),還有明區(qū),暗區(qū)和帽等結(jié)構(gòu),主要由B
淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等構(gòu)成。副皮質(zhì)區(qū)位于淋巴小結(jié)之間或皮質(zhì)深層的彌散淋巴組織,主
要由T淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等構(gòu)成。有的淋巴結(jié)的皮質(zhì)未見到淋巴小結(jié)或生發(fā)中心,或副
皮質(zhì)區(qū)甚薄,可能是由于切面的關(guān)系,成淋巴結(jié)不處于免疫反應(yīng)之故。移動(dòng)標(biāo)本至被膜深
面成小梁周圍,可見到一些疏網(wǎng)狀的間隙,即為皮質(zhì)淋巴竇中的被膜下竇和小梁旁竇。竇
壁由內(nèi)皮圍成,竇腔中有網(wǎng)狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等(圖45)。
C髓質(zhì)位于副皮質(zhì)區(qū)深部,即淋巴結(jié)中央的疏松部分,包括呈紫藍(lán)色的髓索和其周圍疏網(wǎng)狀
的髓質(zhì)淋巴竇,髓索是索條狀的淋巴組織,彼此吻合成網(wǎng),主要由B淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、
網(wǎng)狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等構(gòu)成。髓質(zhì)淋巴竇是髓索之間的疏網(wǎng)狀區(qū)域,竇腔較大。結(jié)構(gòu)與皮
質(zhì)淋巴竇相同且相通,是濾過淋巴液的場所(圖46)。
圖45淋巴結(jié)皮質(zhì)圖46淋巴結(jié)髓質(zhì)
(2)脾臟脾臟切片染色
注意與淋巴結(jié)作比較,分辨它們結(jié)構(gòu)的異同。
肉眼觀察:脾切面呈三角形或長橢圓形,其中呈紫紅色部分為紅髓,散布于紅髓間藍(lán)色
的塊狀結(jié)構(gòu)即白髓。
低倍鏡觀察:區(qū)分脾臟的被膜、小梁、白髓和紅髓等結(jié)構(gòu)。
高倍鏡觀察下結(jié)構(gòu):
A被膜與小梁脾的表面覆蓋著漿膜,可見到間皮的細(xì)胞核整齊地排列于表面。漿膜下是致密
結(jié)締組織和大量平滑肌纖維構(gòu)成的被膜,結(jié)締組織和平滑肌纖維深入實(shí)質(zhì),穿行于實(shí)質(zhì)之間
形成粗大的肌性小梁切面。
B實(shí)質(zhì)包括白髓和紅髓。
a白髓為略呈圓形、著藍(lán)紫色的致密淋巴組織團(tuán)塊,散布于紅髓中,由動(dòng)脈周圍淋巴鞘和脾小
體構(gòu)成。動(dòng)脈周圍淋巴鞘在切面上是圍繞著1?2個(gè)小動(dòng)脈(中央動(dòng)脈)周圈的一團(tuán)淋巴組織
(T淋巴細(xì)胞)。脾小體是位于淋巴鞘一側(cè)的淋巴小結(jié),也有生發(fā)中心、明區(qū)、暗區(qū)和帽等結(jié)
構(gòu)。
b紅髓位于白髓和小梁之間,由脾索、脾竇和邊緣區(qū)構(gòu)成。脾索在切面上呈索條狀,由網(wǎng)狀
組織、各種血細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等構(gòu)成。脾竇則位于脾索之間,可有縱,橫、斜等切面,竇壁
的長桿狀內(nèi)皮細(xì)胞(里細(xì)胞)含核部分較厚,并突向管腔。竇腔大小不等,內(nèi)含有各種血細(xì)
胞。通常由于動(dòng)物放血后,脾竇收縮變窄,以致在切面上難以分辨脾索和脾竇。邊緣區(qū)位于
白髓和紅髓交接處,切面中可見該處淋巴組織較疏松,但有較多的紅細(xì)胞和巨噬細(xì)胞(圖47)。
(3)胸腺胸腺切片染色
肉眼觀察:胸腺切片著較深的紫藍(lán)色,由淡紅色的結(jié)締組織分隔成小葉。
低倍鏡觀察:分辨出表面的被膜,伸入實(shí)質(zhì)中的小葉間隔,胸腺小葉內(nèi)的皮質(zhì)和髓質(zhì)等
結(jié)構(gòu)。
高倍鏡觀察下列結(jié)構(gòu):
A被膜位于胸腺表面,由薄層結(jié)締組織構(gòu)成,結(jié)締組織伸入實(shí)質(zhì)形成小葉間隔,把實(shí)質(zhì)分隔
成不完全的小葉。切面中常見相鄰小葉的髓質(zhì)融合在一起。
B胸腺小葉由周邊著深紫藍(lán)色的皮質(zhì)和中央著淡紅色的髓質(zhì)構(gòu)成。皮質(zhì)主要由淋巴細(xì)胞、上
皮網(wǎng)狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等構(gòu)成。淋巴細(xì)胞又稱胸腺細(xì)胞,多而密集。皮質(zhì)淺層為大、中淋巴
細(xì)胞,深層為小淋巴細(xì)胞。上皮網(wǎng)狀細(xì)胞少,細(xì)胞較大,且有多個(gè)突起,胞核圓形位于中央。
上皮網(wǎng)狀細(xì)胞彼此以突起連接成網(wǎng)狀支架,并圍繞在毛細(xì)血管的周圍形成血一胸腺屏障。由
于淋巴細(xì)胞密集,往往不易看見上皮網(wǎng)狀細(xì)胞的全貌。巨噬細(xì)胞數(shù)量較多,分散在淋巴細(xì)胞
之間。髓質(zhì)淋巴細(xì)胞少而疏松,上皮網(wǎng)狀細(xì)胞多,成群或散在于淋巴細(xì)胞之間。髓質(zhì)??梢?/p>
到一到多個(gè)略呈圓形、由二到多個(gè)上皮網(wǎng)狀細(xì)胞圈成的淡紅色結(jié)構(gòu)即胸腺小體,小體外層的
上皮網(wǎng)狀細(xì)胞略見紫藍(lán)色的細(xì)胞核,中央部的上皮網(wǎng)狀細(xì)胞的胞核模糊不清或消失,胞質(zhì)呈
均質(zhì)嗜酸性,常融合在一起(圖48)。
圖47脾臟切片圖48胸腺切片
2.教師示教切片
(1)豬淋巴結(jié)染色
低倍鏡觀察豬淋巴結(jié),與牛淋巴結(jié)比較,有下列特點(diǎn):
A含有淋巴小結(jié)及彌散淋巴組織的區(qū)城,位于淋巴結(jié)的中央,而含髓索和髓竇的區(qū)域則位于
淋巴結(jié)的周圍。
B髓質(zhì)的淋巴組織中淋巴竇數(shù)量少而狹窄,故髓索不明顯。
C被膜上多處見到輸入或輸出淋巴管切面(圖49)。
(2)禽類腔上囊(法氏囊)腔上囊橫切片染色
低倍鏡下觀察腔上囊,見囊壁由粘膜、肌層和外膜構(gòu)成。粘膜層較厚,肌層和外膜較薄,粘
膜層向囊腔形成二個(gè)縱行大皺裳。
高倍鏡觀察下列結(jié)構(gòu):
A粘膜上皮為假復(fù)層柱狀上皮。
B固有層疏松結(jié)締組織中有許多圓形、桶圓形或不規(guī)則多邊形的淋巴小結(jié)樣結(jié)構(gòu),稱淋巴濾
泡或史丹紐氏濾泡。每個(gè)濾泡由外周著色深的皮質(zhì)和中央著色淺的髓質(zhì)構(gòu)成。皮質(zhì)由網(wǎng)狀細(xì)
胞和網(wǎng)狀纖維構(gòu)成支架,其間填充著大量中、小淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。髓質(zhì)由上皮網(wǎng)狀細(xì)胞
構(gòu)成疏松的支架,內(nèi)有大、中型淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處可見到一層略呈
立方形或柱狀的未分化上皮細(xì)胞(圖50)。
圖49豬淋巴結(jié)圖50腔上囊橫切片
四、作業(yè)
1.繪制部分牛(羊)淋巴結(jié)低倍鏡圖。
2.繪制部分脾臟低倍鏡圖。
五、思考題
1.如何在光鏡下辨別淋巴結(jié)、脾臟和胸腺的組織切片。
2.比較中樞淋巴器官和周圍淋巴器官的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。
實(shí)驗(yàn)九消化系統(tǒng)
一、目的與要求
1.掌握消化管各段的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。
2.掌握肝臟和胰腺的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。
二、材料
生物顯微鏡、食管橫切片、胃底部切片、空腸切片、肝臟切片、胰腺切片。
三、內(nèi)容和方法
1.學(xué)生觀察切片
(1)食管食管橫切染色
以食管為例,從內(nèi)向外,辨認(rèn)消化管的四層結(jié)構(gòu)。
肉眼觀察:食管橫切面呈橢圓形,中央為管腔,周圍紫紅色部分為管壁。
低倍鏡觀察:找到食管腔,可見粘膜向管腔突入,形成多個(gè)縱行皺裳。從腔面向外觀察管壁,
分辨粘膜層、粘膜下層、肌層和外膜(觀察時(shí)注意各層的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、染色性和厚度)。
高倍鏡下逐層觀察各層的微細(xì)結(jié)構(gòu):
A粘膜層位于管壁內(nèi)層,襯于腔面的上皮為復(fù)層扁平上皮,很厚。注意有的部位表層細(xì)胞無
核,發(fā)生輕度角化。上皮深面的疏松結(jié)締組織是固有層,其淺層組織與上皮層互相交錯(cuò),粘
膜肌層較薄,位于固有層的深面,由一些縱行的平滑肌纖維素構(gòu)成。
B粘膜下層為疏松結(jié)締組織,內(nèi)有較大的血管和成群的混合腺即食管腺。偶見腺的導(dǎo)管穿過
固有層,開口于粘膜表面。
C肌層很厚,著深紫紅色。狗食管肌層由橫紋肌組成,分內(nèi)、外兩層,內(nèi)層厚為環(huán)肌層,外
層薄為縱肌層。兩肌層間可見副交感神經(jīng)系的神經(jīng)節(jié)(腸肌叢),內(nèi)有副交感神經(jīng)節(jié)后神經(jīng)元
的胞體。
D外膜管壁最外層,食管頸段位結(jié)締組織構(gòu)成的纖維膜,胸、腹段位漿膜。(圖51)。
圖51食
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