農(nóng)藥登記用衛(wèi)生殺蟲(chóng)劑室內(nèi)藥效試驗(yàn)及評(píng)價(jià) 第10部分：模擬現(xiàn)場(chǎng) 征求意見(jiàn)稿

2GB/T13917.10—XXXX農(nóng)藥登記用衛(wèi)生殺蟲(chóng)劑室內(nèi)藥效試驗(yàn)及評(píng)價(jià)第10部分：模擬現(xiàn)場(chǎng)本部分規(guī)定了衛(wèi)生用殺蟲(chóng)劑的模擬現(xiàn)場(chǎng)藥效測(cè)定方法及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。本部分適用于衛(wèi)生殺蟲(chóng)劑在農(nóng)藥登記時(shí)對(duì)衛(wèi)生害蟲(chóng)蚊、蠅、蜚蠊、螞蟻、跳蚤、臭蟲(chóng)進(jìn)行模擬現(xiàn)場(chǎng)的藥效測(cè)定及評(píng)價(jià)。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。NY/T1964.1—2010農(nóng)藥登記用衛(wèi)生殺蟲(chóng)劑室內(nèi)試驗(yàn)試蟲(chóng)養(yǎng)殖方法第1部分：家蠅NY/T1964.2—2010農(nóng)藥登記用衛(wèi)生殺蟲(chóng)劑室內(nèi)試驗(yàn)試蟲(chóng)養(yǎng)殖方法第2部分：淡色庫(kù)蚊和致倦庫(kù)蚊NY/T1964.4—2010農(nóng)藥登記用衛(wèi)生殺蟲(chóng)劑室內(nèi)試驗(yàn)試蟲(chóng)養(yǎng)殖方法第4部分：德國(guó)小蠊3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1模擬現(xiàn)場(chǎng)analogoussite具有單獨(dú)的通排風(fēng)和溫度、濕度控制系統(tǒng)，面積近似于正方形、體積28m3、高度2.5~2.8m，可密閉、方便試驗(yàn)控制、觀察的試驗(yàn)空間系統(tǒng)。3.2敏感品系susceptiblestrain由于未曾接觸過(guò)殺蟲(chóng)藥劑而保持對(duì)殺蟲(chóng)劑敏感的遺傳上較均一的試蟲(chóng)種群。3.3擊倒率knockdownrateKT50靶標(biāo)生物在一定藥物劑量作用下，單位時(shí)間內(nèi)擊倒個(gè)體數(shù)占總個(gè)體數(shù)的百分率。3.4死亡率mortality靶標(biāo)生物在一定藥物劑量作用下，單位時(shí)間內(nèi)死亡個(gè)體數(shù)占總個(gè)體數(shù)的百分率。4供試材料4.1蚊3GB/T13917.10—XXXX淡色庫(kù)蚊（Culexpipienspallens)（北方地區(qū)）或致倦庫(kù)蚊（Culexpipiensquinquefasciatus)(南方地區(qū)按NY/T1964.2—2010飼養(yǎng)的敏感品系試蟲(chóng)，羽化后第3天~第5天、體重（2.0±0.2)mg雌性成蟲(chóng)。4.2蠅家蠅（Muscadomestica）,按NY/T1964.1—2010飼養(yǎng)的敏感品系試蟲(chóng)，羽化后第3天~第4天、體重（20.0±2.0）mg/雌16.0±1.6）mg/雄的成蟲(chóng)，雌、雄各半。4.3蜚蠊德國(guó)小蠊（Blatellagermanica）,按NY/T1964.4—2010飼養(yǎng)的敏感品系試蟲(chóng)，10日齡以上，體重（100.0±10.0）mg/雌（未帶莢50.0±5.0）mg/雄的成蟲(chóng)，雌、雄各半。4.4螞蟻小黃家蟻（Monomoriumpharaonis）,采用實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)的10日齡以上的工蟻。4.5跳蚤印鼠客蚤（Xenopsyllacheopis）或貓櫛首蚤（Ctenocephalidesfelis采用實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)的3日齡以上成蟲(chóng)，雌、雄各半。4.6臭蟲(chóng)溫帶臭蟲(chóng)(Cimexlectularius)，采用實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)的3日齡以上成蟲(chóng)，雌、雄各半。5儀器設(shè)備5.1模擬現(xiàn)場(chǎng)近似正方形房間，容積28m3，高度不低于2.5m，至少在相對(duì)的兩個(gè)墻面裝有能觀察到室內(nèi)各個(gè)角落的密閉玻璃窗。應(yīng)有單獨(dú)通排風(fēng)和溫度、濕度控制系統(tǒng)。5.2掛籠圓柱體形，直徑150mm，高250mm，圍以12目紗網(wǎng)。5.3無(wú)色透明缸圓柱體形，直徑200mm~270mm，高140mm~170mm。5.4白色搪瓷桶直徑400mm，高400mm。5.5具底透明圓筒內(nèi)徑80mm，高200mm。6試驗(yàn)方法6.1試驗(yàn)條件溫度，(26±2)℃;相對(duì)濕度，(60±10)%。4GB/T13917.10—XXXX6.2噴射用制劑、氣霧劑試驗(yàn)步驟6.2.1蚊、蠅在模擬現(xiàn)場(chǎng)（5.1）距離地面1.5m，兩相鄰墻壁0.5m，垂直相交的4個(gè)點(diǎn)及5.1中央共計(jì)掛籠（5.2）5個(gè)，每個(gè)籠內(nèi)釋放試蟲(chóng)20只。待試蟲(chóng)恢復(fù)正?；顒?dòng)后，試驗(yàn)人員穿戴防護(hù)服裝，站于模擬現(xiàn)場(chǎng)的中央，關(guān)閉門(mén)窗，手持氣霧劑罐，按0.3g/m3用量，噴嘴向上約45°進(jìn)行360°噴霧；室內(nèi)噴射用制劑，按推薦濃度、劑量(1.5mL試驗(yàn)劑量/m3，油稀釋劑型減半)、施藥器械噴嘴向上約45°進(jìn)行360°噴霧測(cè)試。定量氣霧劑則按委托方的推薦劑量，將試蟲(chóng)100只釋放于模擬現(xiàn)場(chǎng)（5.1）內(nèi),噴嘴向上約45°進(jìn)行噴霧。施藥畢立即離開(kāi)，關(guān)門(mén)并計(jì)時(shí)；1h將被擊倒的試蟲(chóng)收集至清潔養(yǎng)蟲(chóng)籠內(nèi)，恢復(fù)標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)，宜用5%糖水棉球飼喂，24h檢查死亡試蟲(chóng)數(shù)，未被擊倒的試蟲(chóng)計(jì)入活蟲(chóng)數(shù)。6.2.2蜚蠊、臭蟲(chóng)在模擬現(xiàn)場(chǎng)（5.1）四角各放置無(wú)色透明缸（5.3）1個(gè)，缸口內(nèi)壁涂有一圈凡士林帶，每個(gè)缸內(nèi)放入蜚蠊或臭蟲(chóng)20只，待試蟲(chóng)恢復(fù)正?；顒?dòng)后，試驗(yàn)人員穿戴防護(hù)服裝，關(guān)閉門(mén)窗，站于模擬現(xiàn)場(chǎng)的中央，手持氣霧劑罐，按5.0g/m2用量，噴嘴向下約45°進(jìn)行360°噴霧，施藥畢立即離開(kāi)，關(guān)門(mén)窗計(jì)時(shí)；室內(nèi)噴射用制劑，按推薦濃度、劑量(15mL試驗(yàn)劑量/m2，油稀釋劑型減半)、施藥器械噴嘴向下約45°進(jìn)行360°噴霧測(cè)試。1h將全部試蟲(chóng)收集至清潔器皿中，恢復(fù)標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)，宜用混合飼料塊加浸水棉球飼喂，臭蟲(chóng)可不飼喂。24h（蜚蠊72h）檢查死亡試蟲(chóng)數(shù)。6.2.3跳蚤、螞蟻在模擬現(xiàn)場(chǎng)（5.1）四角，各放置筒底墊有白色濾紙的具底透明圓筒（5.5）1個(gè)，每個(gè)圓筒內(nèi)放入跳蚤25只，或皿口內(nèi)壁涂一圈95%乙醇和滑石粉（1:1）混懸液帶，皿底墊有白濾紙，直徑為90mm的培養(yǎng)皿，每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)放入螞蟻25只。待試蟲(chóng)恢復(fù)正?；顒?dòng)后，試驗(yàn)人員穿戴防護(hù)服裝，關(guān)閉門(mén)窗，站于模擬現(xiàn)場(chǎng)的中央，手持氣霧劑罐，按0.3g/m3用量，噴嘴向下約45°進(jìn)行360°噴霧；室內(nèi)噴射用制劑，按推薦濃度、劑量(4.2mL試驗(yàn)劑量/m2，油稀釋劑型減半)、施藥器械噴嘴向下約45°進(jìn)行360°噴霧測(cè)試。施藥畢立即離開(kāi)，關(guān)門(mén)窗計(jì)時(shí)。1h將全部試蟲(chóng)收集至清潔器皿中，恢復(fù)標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)，螞蟻和跳蚤可不飼喂。24h檢查死亡試蟲(chóng)數(shù)。6.3煙劑、蚊香、電熱蚊香片、電熱蚊香液試驗(yàn)步驟根據(jù)所測(cè)藥劑要求選擇相應(yīng)試蟲(chóng)（蚊100只,或家蠅100只，或蜚蠊60只,）釋放于模擬現(xiàn)場(chǎng)（5.1）內(nèi)，或跳蚤100只，分為4組(每組25只)，置于模擬現(xiàn)場(chǎng)(5.1)四角，待試蟲(chóng)復(fù)正?；顒?dòng)后，將供試藥劑放置于5.1地面中央，接通電源，或點(diǎn)燃供試藥劑（電熱蚊香片、電熱蚊香液應(yīng)測(cè)試所定5個(gè)時(shí)段中最后一個(gè)時(shí)段；煙劑按推薦用量折算模擬現(xiàn)場(chǎng)用量)，試驗(yàn)人員立即離開(kāi)，關(guān)閉門(mén)窗，并計(jì)時(shí)，蚊、蠅、跳蚤1h（蜚蠊2h）。蚊、蠅、蜚蠊未被擊倒的試蟲(chóng)不收回，計(jì)入活蟲(chóng)數(shù)，跳蚤全部收集至清潔器皿中，恢復(fù)標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)(蚊、蠅宜用5%糖水棉球飼喂，蜚蠊宜用混合飼料塊加浸水棉球飼喂，跳蚤可不飼喂）。蚊、蠅、跳蚤24h(蜚蠊72h)檢查死亡試蟲(chóng)數(shù)。熱霧劑試驗(yàn)時(shí)，蚊，蠅采用6.2.1掛籠(5.2)；蜚蠊采用6.2.2無(wú)色透明缸(5.3)，跳蚤采用6.2.3具底透明圓筒(5.5)，按推薦劑量試驗(yàn)人員站于模擬現(xiàn)場(chǎng)（5.1）門(mén)口或噴煙孔進(jìn)行操作。1h將被擊倒的試蟲(chóng)收集至清潔養(yǎng)蟲(chóng)籠內(nèi)，跳蚤全部收集至清潔器皿中，恢復(fù)標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)，24h(蜚蠊72h)檢查死亡試蟲(chóng)數(shù)。5GB/T13917.10—XXXX6.4餌劑試驗(yàn)步驟6.4.1蠅模擬現(xiàn)場(chǎng)（5.1）中放入200只家蠅，按一個(gè)房間推薦的餌劑用量放于兩個(gè)培養(yǎng)皿中，對(duì)角放置，另一對(duì)角放置家蠅飼料，模擬現(xiàn)場(chǎng)中央放置一個(gè)盛有浸水棉球的培養(yǎng)皿，關(guān)閉門(mén)窗，并計(jì)時(shí)。24h檢查死亡試蟲(chóng)數(shù)。6.4.2蜚蠊模擬現(xiàn)場(chǎng)（5.1）中設(shè)置蜚蠊藏匿場(chǎng)所。釋放100只蜚蠊于模擬現(xiàn)場(chǎng)內(nèi)。待試蟲(chóng)恢復(fù)正?；顒?dòng)后，按推薦的一個(gè)房間餌劑的實(shí)際用量對(duì)角放置于兩個(gè)培養(yǎng)皿中，另一對(duì)角放置蜚蠊飼料，各培養(yǎng)皿旁再平行放置一個(gè)盛有浸水棉球的培養(yǎng)皿?；虬答D劑的推薦方法設(shè)置投餌點(diǎn)。關(guān)閉門(mén)窗，并計(jì)時(shí)。每天檢查并記錄死亡蟲(chóng)數(shù)，連續(xù)觀察至投餌后12d。6.4.3螞蟻采用白色搪瓷桶（5.4）。在桶口內(nèi)壁涂抹50mm寬的95%乙醇和滑石粉（1:1）混懸液帶，桶內(nèi)重疊放置100mm×100mm紙片2塊，放人小黃家蟻的蟻后2只，工蟻100只，同時(shí)放置螞蟻餌料和盛有浸水棉球的培養(yǎng)皿，正常喂養(yǎng)24h后再放入餌劑樣品，觀察期內(nèi)搪瓷桶應(yīng)保持敞口狀態(tài)，每天檢查并記錄死亡蟲(chóng)數(shù)，連續(xù)觀察至投餌后12d。7記錄記錄噴射用制劑、氣霧劑、煙劑、蚊香、電熱蚊香片、電熱蚊香液，餌劑模擬現(xiàn)場(chǎng)藥效測(cè)定的理論用藥量和實(shí)際用藥量及被測(cè)試?yán)ハx(chóng)的生物學(xué)反應(yīng)。8計(jì)算重復(fù)測(cè)試的數(shù)據(jù)按線(xiàn)性加權(quán)回歸法計(jì)算KT50、毒力回歸方程；按式（1）計(jì)算死亡率，結(jié)果保留2位小數(shù)。式中：P——死亡率，%；K——表示死亡蟲(chóng)數(shù)，單位為只；N——表示處理總蟲(chóng)數(shù)，單位為只。9評(píng)價(jià)9.1蚊香、電熱蚊香片、電熱蚊香液根據(jù)1h擊倒率進(jìn)行藥效評(píng)價(jià)。擊倒率≥70％，評(píng)價(jià)所測(cè)定產(chǎn)品為合格；擊倒率?70％，評(píng)價(jià)所測(cè)定產(chǎn)品為不合格。9.2噴射用制劑、氣霧劑9.2.1蚊、蠅根據(jù)1h擊倒率、24h死亡率進(jìn)行藥效評(píng)價(jià)。6GB/T13917.10—XXXX擊倒率≥90％、死亡率≥90％，評(píng)價(jià)所測(cè)定產(chǎn)品為合格；擊倒率、死亡率有一項(xiàng)達(dá)不到評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，所測(cè)定產(chǎn)品為不合格。9.2.2蜚蠊根據(jù)72h死亡率進(jìn)行藥效評(píng)價(jià)。死亡率≥90％，評(píng)價(jià)所測(cè)定產(chǎn)品為合格；死亡率<90％，評(píng)價(jià)所測(cè)定產(chǎn)品為不合格.9.2.3螞蟻、跳蚤、臭蟲(chóng)根據(jù)24h死亡率進(jìn)行藥效評(píng)價(jià)。死亡率≥90％，評(píng)價(jià)所測(cè)定產(chǎn)品為合格；死亡率<90％評(píng)價(jià)所測(cè)定產(chǎn)品為不合格.9.3煙劑根據(jù)蚊、蠅、跳蚤熏煙1h的24h死亡率，蜚蠊熏煙2h的72h死亡率進(jìn)行藥效評(píng)價(jià)。死亡率：