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文檔簡介
四川省南充市2024-2025學年高三第一次教學質(zhì)量檢測試題生物試題考生請注意:1.答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內(nèi),不得在試卷上作任何標記。2.第一部分選擇題每小題選出答案后,需將答案寫在試卷指定的括號內(nèi),第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3.考生必須保證答題卡的整潔。考試結(jié)束后,請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.如圖為人體囊性纖維病的產(chǎn)生機理示意圖。據(jù)圖分析,以下說法不正確的是()A.圖中a表示DNA、b表示mRNA、c表示核糖體,過程①和②分別表示轉(zhuǎn)錄和翻譯B.圖中異常蛋白質(zhì)是鉀離子轉(zhuǎn)運蛋白C.核糖體沿著mRNA向左移動并合成同種肽鏈D.該圖體現(xiàn)了基因通過控制蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),直接控制生物的性狀2.某生物興趣小組在調(diào)查人類遺傳病時發(fā)現(xiàn)一個家族中出現(xiàn)下圖所示的患病情況,于是該小組對該遺傳病的遺傳特點以及該家族不同成員的基因組成進行分析。下列是小組成員甲、乙、丙、丁的分析,其中正確的是()A.甲:該病為常染色體顯性遺傳病,Ⅱ-2和Ⅱ-3再生一個正常女孩的概率為1/4B.乙:該病為X染色體隱性遺傳病,Ⅰ-3為該遺傳病致病基因的攜帶者C.丙:所有的患病個體一定都攜帶致病基因,但不能確定致病基因的顯隱性D.?。喝簪?2、Ⅱ-3的某染色體缺失,可在顯微鏡下觀察到3.當病原體侵入人體后,人體可通過免疫調(diào)節(jié)維持相對穩(wěn)定,下列相關(guān)敘述正確的是()A.人體的第一道防線在免疫調(diào)節(jié)中必不可少,它包括皮膚和黏膜B.吞噬細胞在攝取和處理病原體的過程中都有溶酶體的參與C.病原體侵入人體后,可刺激T細胞分泌淋巴因子與抗原結(jié)合D.效應T細胞對宿主細胞的攻擊屬于免疫調(diào)節(jié)的體液調(diào)節(jié)4.如圖模擬達爾文向光性研究實驗,下列敘述正確的是()A.圖2與圖3胚芽鞘尖端分別套不透光和透光小帽,說明感光部分在尖端B.實驗說明吲哚乙酸促進胚芽鞘尖端下一段背光側(cè)生長,抑制向光側(cè)生長C.實驗說明生長素對植物各器官的靈敏度不同D.實驗說明感受光刺激的是胚芽鞘尖端5.蛋白質(zhì)和核酸是細胞中兩種重要的有機物,相關(guān)敘述正確的是()A.蛋白質(zhì)和核酸的特有元素分別是N、PB.蛋白質(zhì)和核酸都是細胞生命活動的主要承擔者C.蛋白質(zhì)可在細胞器中合成,而核酸不能D.蛋白質(zhì)和核酸的生物合成過程都需要對方的參與6.核糖體RNA(rRNA)通過轉(zhuǎn)錄形成,與核糖核蛋白組裝成核糖體前體,進一步成熟,成為翻譯的場所。翻譯時rRNA參與催化肽鍵的連接。下列相關(guān)敘述錯誤的是A.rRNA的合成需要核DNA做模板B.原核生物中也有合成rRNA的基因C.mRNA上結(jié)合多個核糖體可縮短一條肽鏈的合成時間D.rRNA可降低氨基酸間脫水縮合所需的活化能二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)下圖為一種單基因遺傳病的系譜圖,相關(guān)基因用A?a表示?(圖示過程無變異發(fā)生)請據(jù)圖回答下列問題:(1)若該遺傳病是伴X染色體遺傳病,則Ⅲ2的基因型是____________,圖譜中一定為雜合子的個體是____________,Ⅰ1的致病基因的傳遞過程體現(xiàn)了_____________的遺傳特點?(2)如果該遺傳病的致病基因位于常染色體上,則第Ⅲ代中__________的一個致病基因一定來源于Ⅰ1,判斷理由是________________________。(3)圖中三代全部個體中的_______與正常人婚配,最容易驗證基因A?a是否位于X染色體上,若A?a位于X染色體上,則其后代表現(xiàn)型特點為___________________。8.(10分)神經(jīng)纖毛蛋白-1(NRP-1)能在腫瘤細胞內(nèi)表達,是血管內(nèi)皮生長因子家族成員的受體,通過參與多種信號轉(zhuǎn)導來促進腫瘤血管的生成。研究人員從腫瘤細胞中擴增出NRP-1基因并將其導入大腸桿菌體內(nèi)進行發(fā)酵培養(yǎng),分離提純相應NRP-1,并將其免疫小鼠,以制備抗NRP-1的單克隆抗體(NRP-1MAb)。分析回答下列回題:(1)利用PCR技術(shù)可以從腫瘤細胞的基因組中分離擴增得到完整的NRP基因,其原因是__________。將擴增后的目的基因構(gòu)建成表達載體后,導入用__________處理的大腸桿菌體內(nèi)完成轉(zhuǎn)化。(2)研究人員將分離提純的NRP-1免疫小鼠后,取其脾臟中B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選,在該培養(yǎng)基上不能存活的是__________。選取檢測抗體陽性的雜交瘤細胞進行體外培養(yǎng)時需要的氣體環(huán)境是__________。(3)為進一步確定NRP-1MAb靶向治療時的用藥方式,研究人員將直腸癌組織塊制成單細胞懸液,等量注入4組裸鼠右前腋下,接種3后天開始向培養(yǎng)液中施加NRP-1MAb藥物,每隔10天給藥1次,共4次。給藥后測算一次腫瘤體積,結(jié)果如下圖所示:分析上圖可以得出的結(jié)論是__________。根據(jù)實驗結(jié)果,請給出使用NRP-1MAb進行靶向治療癌癥時的臨床建議:__________。9.(10分)為研究供氮水平對某植物幼苗光合作用的影響,某研究小組采用水培方法,每天定時澆灌含不同氮素濃度的培養(yǎng)液,適宜條件下培養(yǎng)一段時間后,分別測定各組植物幼苗葉片的相關(guān)指標,結(jié)果如圖所示。請回答下列問題:注:羧化酶能催化CO2的固定;氣孔導度指的是氣孔張開的程度。(1)該植物幼苗葉片葉綠體中色素的分離方法是_____,葉片通常呈現(xiàn)綠色的原因是_______。(2)該實驗的因變量有_________,當培養(yǎng)液中氮素濃度在4mmol/L條件下,該植物幼苗的葉肉細胞中,葉綠體在光反應階段產(chǎn)生的O2去路有_________________________。(3)根據(jù)實驗結(jié)果推測,當培養(yǎng)液中氮素濃度大于8mmol/L以后,該植物幼苗葉肉細胞間CO2濃度會變大,原因是____________________________。10.(10分)蜘蛛絲是自然界中機械性能最好的天然蛋白纖維,其強度高于制作防彈衣的凱夫拉纖維,有廣泛的應用前景,但如何大量獲取蜘蛛絲纖維的問題一直未解決。近期,中國科學家利用基因工程技術(shù)成功的在家蠶絲腺細胞中大量表達蜘蛛絲蛋白。(1)在轉(zhuǎn)基因過程中,若利用圖所示質(zhì)粒構(gòu)建基因表達載體,需要用_____________酶來切割目的基因,該切割方法的優(yōu)點是_____________________________________________(答出一點即可)。(2)為獲取大量的蜘蛛絲基因,常采用_______________技術(shù)對該基因進行擴增。擴增蜘蛛絲基因前,需根據(jù)目的基因的核苷酸序列設計__________種引物。進行擴增時需先加熱至90~95℃,加入引物后冷卻至55~60℃,以上調(diào)控溫度操作的目的是____________________。(3)載體中的啟動子是____________酶的識別結(jié)合位點,以便于驅(qū)動遺傳信息的表達過程;而載體本身的擴增,需借助于載體上的_________________;載體上的標記基因的作用是_____________________________。(4)研究人員發(fā)現(xiàn)若將蛛絲蛋白31號位的色氨酸替換為酪氨酸,蛛絲韌性可提高50%,這項成果用到的生物工程技術(shù)為____________________________。11.(15分)回答下列與人體神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)相關(guān)的問題。(1)縮手反射弧的低級神經(jīng)中樞位于___________,產(chǎn)生痛覺的神經(jīng)中樞為____________。無意間,某同學被釘扎時有縮手反應,而醫(yī)生在給他打破傷風針前做皮試時,他并沒有把手縮回去,這說明___________。(2)將離體的神經(jīng)纖維置于生理鹽水溶液中,適當增加溶液的Na+濃度,有效電刺激后其動作電位的峰值___________(填“增大”“減小”或“不變”)。(3)與激素一樣,CO2也可以作為體液調(diào)節(jié)因子,參與體液調(diào)節(jié),支持這一觀點的事實之一是細胞代謝產(chǎn)生的CO2可通過___________運輸?shù)竭_其作用部位,進而對呼吸活動進行調(diào)節(jié)。體液調(diào)節(jié)的概念是___________。(4)與神經(jīng)調(diào)節(jié)相比,體液調(diào)節(jié)具有的特點是______________________(答出三點即可)。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、B【解析】
1、過程①表示轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)錄過程以四種核糖核苷酸為原料,以DNA分子的一條鏈為模板,在DNA解旋酶、RNA聚合酶的作用下消耗能量,合成RNA。2、過程翻譯②表示翻譯,翻譯過程以氨基酸為原料,以轉(zhuǎn)錄過程產(chǎn)生的mRNA為模板,在酶的作用下,消耗能量產(chǎn)生多肽鏈.多肽鏈經(jīng)過折疊加工后形成具有特定功能的蛋白質(zhì)。3、圖中a表示DNA、b表示mRNA、c表示核糖體。【詳解】A、圖中a表示DNA、b表示mRNA、c表示核糖體,過程①和②分別表示轉(zhuǎn)錄和翻譯,A正確;B、圖中異常蛋白質(zhì)是CFTR蛋白,是氯離子轉(zhuǎn)運蛋白,B錯誤;C、由圖可知,左邊合成的肽鏈長,所以翻譯過程中,核糖體沿著mRNA由右向左移動,且合成同種肽鏈,C正確;D、該圖體現(xiàn)了基因通過控制蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)直接控制生物的性狀,D正確。故選B。2、D【解析】
分析系譜圖可知,Ⅰ-3和Ⅰ-4正常,Ⅱ-3患病,說明為隱性遺傳病,若為伴X隱性遺傳病,由于Ⅰ-2患病,則Ⅱ-1應患病,但Ⅱ-1正常,所以該病為常染色體隱性遺傳。【詳解】A、根據(jù)Ⅰ-3和Ⅰ-4正常,Ⅱ-3患病,說明為隱性遺傳病,A錯誤;B、若為伴X隱性遺傳病,則母親患病,兒子應患病,根據(jù)Ⅰ-2患病,但Ⅱ-1正常,可知該病不屬于伴X隱性遺傳,B錯誤;C、根據(jù)上述分析可知,該病為常染色體隱性遺傳病,所有患病個體均為隱性純合子,C錯誤;D、染色體變異可通過顯微鏡觀察,D正確。故選D。3、A【解析】
1、人體的三道防線:第一道防線是由皮膚和黏膜構(gòu)成的,他們不僅能夠阻擋病原體侵入人體,而且它們的分泌物(如乳酸、脂肪酸、胃酸和酶等)還有殺菌的作用。第二道防線是體液中的殺菌物質(zhì)--溶菌酶和吞噬細胞。第三道防線主要由免疫器官(扁桃體、淋巴結(jié)、胸腺、骨髓、和脾臟等)和免疫細胞(淋巴細胞、吞噬細胞等)借助血液循環(huán)和淋巴循環(huán)而組成的。2、體液免疫過程為:(1)感應階段:除少數(shù)抗原可以直接刺激B細胞外,大多數(shù)抗原被吞噬細胞攝取和處理,并暴露出其抗原決定簇;吞噬細胞將抗原呈遞給T細胞,再由T細胞呈遞給B細胞;(2)反應階段:B細胞接受抗原刺激后,開始進行一系列的增殖、分化,形成記憶細胞和漿細胞;(3)效應階段:漿細胞分泌抗體與相應的抗原特異性結(jié)合,發(fā)揮免疫效應。3、細胞免疫過程為:(1)感應階段:吞噬細胞攝取和處理抗原,并暴露出其抗原決定簇,然后將抗原呈遞給T細胞;(2)反應階段:T細胞接受抗原刺激后增殖、分化形成記憶細胞和效應T細胞,同時T細胞能合成并分泌淋巴因子,增強免疫功能;(3)效應階段:效應T細胞發(fā)揮效應?!驹斀狻緼、皮膚和粘膜是保衛(wèi)人體的第一道防線,A正確;B、吞噬細胞攝取病原體中沒有溶酶體的參與,只是在處理病原體中有溶酶體的參與,B錯誤;C、與抗原結(jié)合的是漿細胞分泌的抗體,不是T細胞分泌的淋巴因子,C錯誤;D、效應T細胞對宿主細胞的攻擊屬于免疫調(diào)節(jié)的細胞免疫,D錯誤。故選A。4、D【解析】
據(jù)圖分析:圖1在單側(cè)光照射下,胚芽鞘向光彎曲生長;圖2胚芽鞘頂端戴上不透明的小帽,胚芽鞘直立生長;圖3胚芽鞘頂端戴上透明的小帽,胚芽鞘向光彎曲生長;圖4用不透明的套筒將頂端以下的部位戴上,胚芽鞘向光彎曲生長?!驹斀狻緼、圖2與圖3對照的自變量是胚芽鞘的尖端是否接受單側(cè)光照和小帽的不同,胚芽鞘向光彎曲可能是小帽本身的特點導致的的,A錯誤;B、該實驗的自變量是胚芽鞘遮光的部位,不能說明吲哚乙酸在胚芽鞘尖端以下的作用效應,B錯誤;C、該實驗沒有涉及生長素對植物各器官的靈敏度的研究,C錯誤;D、通過圖2、圖3、圖4三組實驗,可得出感受光刺激的部位是胚芽鞘的尖端,彎曲部位在胚芽鞘的尖端下部,D正確。故選D。本題考查了生長素的向光性的知識,考生要能夠根據(jù)對照實驗的設計原則,結(jié)合圖示處理判斷胚芽鞘的生長情況,判斷出胚芽鞘的尖端是感受光刺激的部位,同時也是感光部位,尖端的下面是彎曲部位和生長部位。5、D【解析】
DNA主要在細胞核中合成,此外線粒體和葉綠體也能合成少量的DNA。蛋白質(zhì)的合成是以mRNA為直接模板,以tRNA為搬運氨基酸的工具,以核糖體為場所翻譯形成的,核酸在形成時需要酶的催化。【詳解】蛋白質(zhì)含有C、H、O、N元素,有的含有P和S元素,核酸的元素組成為C、H、O、N、P,A錯誤;蛋白質(zhì)是生命活動的主要承擔者,核酸是遺傳信息的攜帶者,B錯誤;蛋白質(zhì)在核糖體中合成,核酸也可在細胞器中合成,例如線粒體和葉綠體中DNA的合成,C錯誤;蛋白質(zhì)通過翻譯過程合成,該過程需要mRNA、tRNA等核酸參與,核酸的形成過程需要相應聚合酶的參與,聚合酶是蛋白質(zhì),D正確。故選D。6、C【解析】
1、基因的表達即基因控制蛋白質(zhì)的合成過程,包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個主要階段。
(1)轉(zhuǎn)錄:是指以DNA的一條鏈為模板,按照堿基互補配對原則,合成RNA的過程。
轉(zhuǎn)錄的場所:細胞核;
轉(zhuǎn)錄的模板:DNA分子的一條鏈;
轉(zhuǎn)錄的原料:四種核糖核苷酸(“U”代替“T”與“A”配對,不含“T”);
與轉(zhuǎn)錄有關(guān)的酶:RNA聚合酶;
轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物:mRNA,tRNA,rRNA。
(2)翻譯:是指以mRNA為模板,合成具有一定氨基酸排列順序的蛋白質(zhì)的過程。
翻譯的場所:細胞質(zhì)的核糖體上。
翻譯的本質(zhì):把DNA上的遺傳信息通過mRNA轉(zhuǎn)化成為蛋白質(zhì)分子上氨基酸的特定排列順序。
2、RNA分子的種類及功能:
(1)mRNA:信使RNA;功能:蛋白質(zhì)合成的直接模板;
(2)tRNA:轉(zhuǎn)運RNA;功能:mRNA上堿基序列(即遺傳密碼子)的識別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運者;
(3)rRNA:核糖體RNA;功能:核糖體的組成成分,蛋白質(zhì)的合成場所。【詳解】rRNA是以DNA的一條鏈為模板轉(zhuǎn)錄形成的,因此rRNA的合成需要DNA做模板,A正確;原核生物也有核糖體也需要rRNA,所以原核生物中也有合成rRNA的基因,B正確;每個核糖體上都可以合成一條肽鏈,多個核糖體分別完成多肽鏈的翻譯,C錯誤;rRNA能催化肽鍵的連接,可見其具有催化功能,即可降低氨基酸之間脫水縮合所需的活化能,D正確。
故選C。本題主要考查基因表達的有關(guān)知識,解答本題的關(guān)鍵是掌握轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程以及多聚核糖體合成蛋白質(zhì)的過程和意義。二、綜合題:本大題共4小題7、XAXA或XAXaⅠ2、Ⅱ2和Ⅱ4交叉遺傳Ⅲ1Ⅲ1患病,則其基因型為aa,其中一個基因a遺傳自母親,其外祖父I1患病,基因型為aa,而其母親正常,故其母親的基因a必然遺傳自其外祖父(或Ⅲ1的外祖父患病,為隱性純合子,母親正常,基因型為Aa,所以Ⅲ1母親的基因a遺傳自其外祖父。Ⅲ1患病,則其基因型為aa,故其母親的基因a遺傳給了Ⅲ1)Ⅲ3女孩均正常,男孩均患病【解析】
1、判斷患病遺傳方式的“口訣”:無中生有為隱性,隱性遺傳看女病,父子正常非伴性;有中生無為顯性,顯性遺傳看男病,母女正常非伴性。2、Ⅱ1和Ⅱ2正常,出生患病Ⅲ1,故該病屬于隱性遺傳病?!驹斀狻浚?)若該遺傳病是伴X染色體遺傳病,則是X染色體隱性遺傳病,Ⅱ1和Ⅱ2表現(xiàn)正常,Ⅲ1基因型是XaY,Ⅱ1和Ⅱ2的基因型是XAY和XAXa,所以Ⅲ2的基因型是XAXA、XAXa;由于Ⅲ3、Ⅱ3、Ⅰ1是該病的患者,所以Ⅰ2、Ⅱ2和Ⅱ4是雜合子;Ⅰ1將其患病基因傳遞至Ⅱ2,Ⅱ2將致病基因傳遞至Ⅲ1,體現(xiàn)了X染色體隱性遺傳病的交叉遺傳的特點。(2)如果該遺傳病的致病基因位于常染色體上,Ⅲ1患病,則其基因型為aa,其中一個基因a遺傳自母親,其外祖父I1患病,基因型為aa,而其母親正常,故其母親的基因a必然遺傳自其外祖父(或Ⅲ1的外祖父患病,為隱性純合子aa,母親正常,基因型為Aa,所以Ⅲ1母親的基因a遺傳自其外祖父I1),所以第Ⅲ代中Ⅲ1的一個致病基因一定來源于Ⅰ1。(3)基因A?a如果位于X染色體上,則選擇患病女孩Ⅲ3(XaXa)和正常人XAY婚配,所生孩子女孩(XAXa)均正常,男孩(XaY)均患病。本題結(jié)合系譜圖,考查人類遺傳病及伴性遺傳,要求考生識記人類遺傳病的特點,能利用口訣,根據(jù)系譜圖判斷遺傳病的遺傳方式,進而判斷相應個體的基因型。8、使用與NRP-1基因兩端特異性結(jié)合的引物可以從模板DNA中擴增出該基因Ca2+未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞95%的空氣和5%的CO2NRP-1MAb能有效的降低腫瘤的體積,中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的更顯著使用中劑量給藥【解析】
1、利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,由于DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈,因此要用兩種引物才能確保DNA兩條鏈同時被擴增;引物I延伸而成的DNA單鏈會與引物Ⅱ結(jié)合,進行DNA的延伸,這樣,DNA聚合酶能特異地復制處于兩個引物之間的DNA序列。2、分析圖可知,實驗組與對照組比較,NRP-1MAb能有效的降低腫瘤的體積;低、中、高劑量組比較可知,中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的更顯著?!驹斀狻浚?)由分析可知,使用與NRP-1基因兩端特異性結(jié)合的引物,可以從模板DNA中擴增出處于兩個引物之間的該基因。將目的基因?qū)氪竽c桿菌,最常用的轉(zhuǎn)化方法是,用Ca2+處理細胞使其處于感受態(tài)。(2)用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選,在該培養(yǎng)基上不能存活的是B淋巴細胞、骨髓瘤細胞、B淋巴細胞與B淋巴細胞融合的細胞、骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合的細胞。進行動物細胞培養(yǎng)時,通常將培養(yǎng)基放置于95%的空氣和5%的CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。(3)由圖示可以看出,與對照組比較,NRP-1MAb能有效的降低腫瘤的體積;低、中、高劑量組比較可知,中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的更顯著,因此使用NRP-1MAb進行靶向治療癌癥時采用中劑量給藥,用藥量少,效果明顯。本題考查PCR擴增目的基因和單克隆抗體的相關(guān)知識,要求考生識記PCR技術(shù)的原理、動物細胞培養(yǎng)的條件;識記制備單克隆抗體的原理及過程,能結(jié)合所學的知識準確答題。9、紙層析法葉綠素對綠光吸收最少,綠光被反射出來凈光合速率、葉綠素含量、氣孔導度、羧化酶含量等進入線粒體和釋放到外界環(huán)境氣孔導度不變,但羧化酶含量減少,CO2消耗速率降低【解析】
分析圖中的曲線可知,隨著培養(yǎng)液中氮素濃度的增加,葉綠素含量不斷增多,氣孔導度先增加后不變,羧化酶含量先增加后減少,凈光合速率先增加后降低?!驹斀狻浚?)葉綠體中色素的分離方法是紙層析法,葉綠素對綠光吸收最少,綠光被反射出來,故葉片通常呈現(xiàn)綠色。(2)由圖可知,本實驗的自變量為不同氮素濃度的培養(yǎng)液,因變量為凈光合速率、葉綠素含量、氣孔導度、羧化酶含量等,當培養(yǎng)液中氮素濃度在4mmol/L條件下,該植物幼苗凈光合速率大于0,故葉綠體在光反應階段產(chǎn)生的O2的去路有進入線粒體用于細胞呼吸和釋放到外界環(huán)境。(3)根據(jù)實驗結(jié)果推測,培養(yǎng)液中氮素濃度大于8mmol/L以后,幼苗的氣孔導度基本不變,但羧化酶含量明顯降低,CO2的消耗速率降低,故細胞間隙中CO2濃度會增大。本題著重考查了光合作用過程中的物質(zhì)變化和能量變化等方面的知識,意在考查考生能識記并理解所學知識的要點,把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系,形成一定知識網(wǎng)絡的能力,并且具有一定的分析能力和理解能力。10、XbaI和SacI防止目的基因自身環(huán)化、防止目的基因反向連接PCR2使DNA解鏈,然后使引物結(jié)合到互補DNA鏈上RNA聚合酶復制原點重組DNA的鑒別與選擇蛋白質(zhì)工程【解析】
1、基因工程的操作步驟包括:目的基因的獲取、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。其中基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟?;虮磉_載體的構(gòu)建:①過程:一般用同一種限制酶切割目的基因和運載體,再用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子。②目的:使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達和發(fā)揮作用。③基因表達載體的組成:目的基因+啟動子+終止子+標記基因。(1)啟動子在基因的首段,它是RNA聚合酶的結(jié)合位點,能控制著轉(zhuǎn)錄的開始;(2)終止子在基因的尾端,它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束;(3)標記基因便于目的基因的鑒定和篩選。2、PCR擴增技術(shù):PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構(gòu)成:(1)模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應作準備。(2)模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合。(3)引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在Taq酶的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈?!驹斀狻浚?)識圖分析可知,構(gòu)建基因表達載體時,目的基因需要插入到啟動子和終止子之間,圖中啟動子和終止子之間存在XbaI和SacI的酶切位點,因此需要用XbaI和SacI限制酶切割目的基因,以產(chǎn)生與質(zhì)粒相同的末端,相比用同一種酶進行酶切,用兩種酶切割可以防止目的基因自身環(huán)化或防止目的基因反向連接
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