2024-2025學(xué)年高中生物專題2細(xì)胞工程2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)課時(shí)練習(xí)含解析新人教版選修3

PAGE10-動(dòng)物細(xì)胞培育和核移植技術(shù)(30分鐘100分)一、選擇題(共4小題,每小題6分,共24分)1.某探討小組為測(cè)定藥物對(duì)體外培育細(xì)胞的毒性,打算對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞(甲)和正常肝細(xì)胞(乙)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培育。下列說(shuō)法正確的是 ()A.在利用兩種肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時(shí),也可用胃蛋白酶處理B.細(xì)胞培育應(yīng)在含5%CO2的恒溫培育箱中進(jìn)行,CO2的作用是刺激細(xì)胞的呼吸C.甲、乙細(xì)胞在持續(xù)的原代培育過(guò)程中,乙會(huì)出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象D.僅用該培育液也能用來(lái)培育乙肝病毒【解析】選C。胃蛋白酶最適pH接近2,呈酸性,而細(xì)胞培育液的pH接近中性,所以不能用胃蛋白酶處理,A項(xiàng)錯(cuò)誤;細(xì)胞培育過(guò)程中,5%CO2的作用是調(diào)整細(xì)胞培育液的pH,B項(xiàng)錯(cuò)誤;乙是正常肝細(xì)胞,存在細(xì)胞接觸抑制現(xiàn)象,在原代培育過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象,須要傳代培育獲得細(xì)胞株和細(xì)胞系,C項(xiàng)正確;病毒沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu),不能獨(dú)立生活,必需依靠活細(xì)胞生存,應(yīng)當(dāng)用活細(xì)胞來(lái)培育病毒,D項(xiàng)錯(cuò)誤。2.下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述,正確的是 ()A.培育人的漿細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體B.用人工薄膜包裝胚狀體可以制成人工種子C.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理不同D.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳至50代以內(nèi)的細(xì)胞【解析】選B。生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)一般不干脆培育漿細(xì)胞,主要緣由是漿細(xì)胞不能無(wú)限增殖,A錯(cuò)誤;用人工薄膜包裝胚狀體可以制成人工種子,B正確;動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同,都是利用了細(xì)胞膜的流淌性,C錯(cuò)誤;10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型,因此,在體細(xì)胞核移植中,為保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ),通常采納10代以內(nèi)的細(xì)胞,D錯(cuò)誤。3.動(dòng)物細(xì)胞體外培育時(shí),通常要在培育基中補(bǔ)充肯定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對(duì)正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培育影響的試驗(yàn)結(jié)果。從該圖供應(yīng)的信息可以獲得的正確結(jié)論有 ()①有無(wú)血清對(duì)正常細(xì)胞培育的影響不同②正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同③培育基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培育④培育基中是否補(bǔ)充血清對(duì)癌細(xì)胞的培育影響不大A.②③④ B.①③④C.①②③ D.①②④【解析】選B。正常細(xì)胞在有血清和無(wú)血清培育時(shí),同一培育時(shí)間下細(xì)胞數(shù)目不同,說(shuō)明有無(wú)血清對(duì)正常細(xì)胞培育的影響不同,①正確;正常細(xì)胞與癌細(xì)胞在有血清和無(wú)血清時(shí)曲線均不重疊,說(shuō)明正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率不同,②錯(cuò)誤;正常細(xì)胞在有血清的條件下,同一培育時(shí)間的細(xì)胞數(shù)目均比無(wú)血清時(shí)多,說(shuō)明培育基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培育,③正確;癌細(xì)胞在有血清和無(wú)血清培育時(shí),細(xì)胞數(shù)目改變趨勢(shì)一樣,說(shuō)明培育基中是否補(bǔ)充血清對(duì)癌細(xì)胞的培育影響不大,④正確。4.生物技術(shù)的發(fā)展速度很快,已滅亡生物的“復(fù)生”將不再是神話。假如世界上最終一只野驢剛死亡,下列供應(yīng)的“復(fù)生”野驢個(gè)體的方法中能夠勝利的是()A.將野驢的體細(xì)胞取出,利用細(xì)胞培育技術(shù),可培育成新個(gè)體B.將野驢的體細(xì)胞兩兩融合,再經(jīng)組織培育培育成新個(gè)體C.取出野驢的體細(xì)胞核移植到母家驢的去核卵細(xì)胞中,經(jīng)孕育培育成新個(gè)體D.將野驢的一個(gè)基因?qū)爰殷H的受精卵中,培育成新個(gè)體【解析】選C。野驢的體細(xì)胞的全能性已經(jīng)受到限制,不能經(jīng)培育形成新個(gè)體;將野驢的一個(gè)基因?qū)爰殷H的受精卵中,培育成的是帶有野驢基因的家驢;野驢的體細(xì)胞核中具有發(fā)育成野驢的全部基因,因此通過(guò)核移植技術(shù),可使野驢“復(fù)生”。二、非選擇題(共6小題,共76分)5.(10分)(2024·孝感高二檢測(cè))請(qǐng)回答下列有關(guān)細(xì)胞培育的問(wèn)題:(1)動(dòng)物細(xì)胞培育利用(填“液體”或“固體”)培育基并在的培育箱中進(jìn)行,這是對(duì)動(dòng)物體的的模擬。用于植物組織培育的固體培育基大多由無(wú)機(jī)養(yǎng)分成分、有機(jī)養(yǎng)分成分、激素和四部分組成;利用發(fā)酵罐進(jìn)行人參、三七等細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)時(shí),用(填“液體”或“固體”)培育基。

(2)在動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程中,通常在條件下保存細(xì)胞,因?yàn)樵谠摋l件下。

(3)在動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程中,將動(dòng)物組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞、使貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞脫落都常用處理。

【解析】(1)固體培育基:在液體培育基中加入凝固劑,或用麩皮等固體原料配制。常用的凝固劑是瓊脂,瓊脂固體培育基廣泛應(yīng)用于植物組織培育、微生物的分別培育、菌種鑒定和保存等;液體培育基:由各種養(yǎng)分成分加水配成,組分均一,適于動(dòng)物細(xì)胞培育及各類微生物的養(yǎng)分生長(zhǎng),廣泛應(yīng)用于試驗(yàn)探討及大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中,有利于獲得大量菌體或代謝產(chǎn)物。依據(jù)兩種培育基的用途可知?jiǎng)游锛?xì)胞培育須要用液體培育基,而植物組織培育須要用固體培育基,且動(dòng)物細(xì)胞培育須要在含95%空氣和5%CO2混合氣體的培育箱中進(jìn)行,這是對(duì)動(dòng)物體的內(nèi)環(huán)境的模擬。由于植物組織培育用的是固體培育基,須要加入凝固劑瓊脂,除此之外,還須要加入無(wú)機(jī)養(yǎng)分成分、有機(jī)養(yǎng)分成分和激素;利用發(fā)酵罐進(jìn)行人參、三七等細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)時(shí),用液體培育基,以便于得到大量須要的產(chǎn)物。(2)在動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程中,通常在低溫(或冷凍、液氮)條件下保存細(xì)胞,因?yàn)樵谠摋l件下細(xì)胞中酶的活性降低,細(xì)胞新陳代謝的速率降低。(3)在動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程中,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí),細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分別下來(lái),須要用酶處理,可用的酶是胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)。答案:(1)液體含95%空氣和5%CO2混合氣體內(nèi)環(huán)境瓊脂液體(2)低溫(或冷凍、液氮)細(xì)胞中酶的活性降低,細(xì)胞新陳代謝的速率降低(3)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)6.(14分)(2024·北京高二檢測(cè))淀粉樣蛋白前體(APP)是細(xì)胞膜上的跨膜蛋白,在多種腫瘤細(xì)胞中表達(dá)異樣。試驗(yàn)人員采納RNA干擾技術(shù),靶向干擾鼻咽癌細(xì)胞中APP表達(dá)的方法來(lái)探討APP的生物學(xué)功能。(1)培育鼻咽癌細(xì)胞。細(xì)胞培育時(shí),通常在培育液中加入適量的以補(bǔ)充合成培育基中缺乏的物質(zhì),待細(xì)胞貼壁長(zhǎng)成單層后用處理,分瓶接著培育。

(2)將上述鼻咽癌細(xì)胞分成三組,分別用人工脂雙層包袱的siAPP-A、siAPP-B、NC的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染細(xì)胞。其中siAPP-A、siAPP-B是不同的靶向干擾APP表達(dá)的RNA序列,NC是無(wú)義RNA序列,由這三種RNA的功能推想它們的肯定不同;利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染讓外源RNA進(jìn)入癌細(xì)胞依據(jù)的是。

(3)部分試驗(yàn)結(jié)果如圖:①由圖1結(jié)果可知,細(xì)胞中β-actin蛋白的表達(dá)量相對(duì)穩(wěn)定,在試驗(yàn)中可作為,以解除細(xì)胞培育操作、點(diǎn)樣量、檢測(cè)方法等無(wú)關(guān)變量對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響。試驗(yàn)結(jié)果支持靶向干擾APP表達(dá)勝利,推斷依據(jù)是。②分析圖2結(jié)果可知,試驗(yàn)組的細(xì)胞周期比比照組,說(shuō)明干擾APP的表達(dá)可以。

(4)試驗(yàn)人員進(jìn)一步探討發(fā)覺,干擾APP表達(dá)后鼻咽癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移實(shí)力顯著降低,作出此推斷的依據(jù)是。

【解析】(1)動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí),通常在培育液中加入適量的動(dòng)物血清,以供應(yīng)血清中細(xì)胞生活必需的一些未知成分,補(bǔ)充合成培育基中缺乏的物質(zhì);由于細(xì)胞在培育過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制,所以待細(xì)胞貼壁長(zhǎng)成單層后就要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,使細(xì)胞相互分別,同時(shí)使細(xì)胞從培育瓶壁上脫落下來(lái),分散成單個(gè)細(xì)胞后,再分瓶接著培育。(2)siAPP-A、siAPP—B和NC是不同的RNA,功能不同,因此這三種RNA中的核糖核苷酸序列(堿基序列)不同;分別用含有siAPP-A、siAPP-B、NC的脂質(zhì)體(人工脂雙層)轉(zhuǎn)染癌細(xì)胞時(shí),通過(guò)膜的流淌性,讓外源RNA進(jìn)入癌細(xì)胞內(nèi)。(3)①由圖甲結(jié)果可知,分別轉(zhuǎn)入siAPP-A、siAPP-B和NC的細(xì)胞中β-actin蛋白的表達(dá)量相對(duì)穩(wěn)定,在試驗(yàn)中可作為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比照,解除了細(xì)胞培育操作、點(diǎn)樣量、檢測(cè)方法等無(wú)關(guān)變量對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響;轉(zhuǎn)入siAPP-A和siAPP-B的試驗(yàn)組中的細(xì)胞內(nèi)APP表達(dá)量比NC組少,但是不影響β-actin蛋白的表達(dá),說(shuō)明轉(zhuǎn)入的siAPP-A和siAPP-B能靶向干擾癌細(xì)胞中APP的表達(dá)。②由圖2結(jié)果可知,轉(zhuǎn)入siAPP-A和siAPP-B的試驗(yàn)組中的細(xì)胞比作為比照的NC組細(xì)胞數(shù)量少,說(shuō)明癌細(xì)胞的增殖受到了肯定程度的抑制,相同時(shí)間內(nèi)細(xì)胞的分裂次數(shù)削減,細(xì)胞周期比比照組長(zhǎng)。(4)細(xì)胞膜表面的糖蛋白削減,癌細(xì)胞之間的黏著性下降是癌細(xì)胞簡(jiǎn)單發(fā)生擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移的重要緣由。干擾APP表達(dá)后鼻咽癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移實(shí)力顯著降低,推想可能的緣由是干擾APP表達(dá)后,鼻咽癌細(xì)胞細(xì)胞膜上糖蛋白增多,細(xì)胞黏著性增加,癌細(xì)胞不易發(fā)生擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。答案:(1)動(dòng)物血清胰蛋白酶(膠原蛋白酶)(2)核糖核苷酸序列(堿基序列)膜的流淌性(細(xì)胞膜的流淌性)(3)參照(標(biāo)準(zhǔn)或比照)siAPP-A、siAPP-B組APP表達(dá)量低于NC組長(zhǎng)抑制鼻咽癌細(xì)胞的增殖(4)干擾APP表達(dá)后鼻咽癌細(xì)胞細(xì)胞膜上糖蛋白增多,細(xì)胞黏著性增加,不易發(fā)生擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移7.(10分)現(xiàn)有A和B兩個(gè)肉牛品種,A品種牛的細(xì)胞組成可表示為A細(xì)胞核、A細(xì)胞質(zhì);B品種牛則為B細(xì)胞核、B細(xì)胞質(zhì)。(1)假如要獲得一頭克隆牛,使其細(xì)胞由A細(xì)胞核和B細(xì)胞質(zhì)組成,基本步驟是:從A品種牛體內(nèi)取出體細(xì)胞,進(jìn)行體外培育。然后再?gòu)呐嘤?xì)胞中取出注入B品種牛的卵母細(xì)胞,經(jīng)過(guò)某種刺激和培育后,可形成胚胎,該胚胎被稱為,將該胚胎移入代孕母牛的中,通過(guò)培育可達(dá)到目的。

(2)克隆牛的產(chǎn)生說(shuō)明具有全能性?？寺∨５男誀钪饕憩F(xiàn)品種牛的特征。由A、B兩品種雜交得到的牛與克隆牛相比,雜交牛細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)來(lái)自個(gè)親本,細(xì)胞質(zhì)主要來(lái)自性親本,克隆牛和雜交牛的遺傳物質(zhì)組成(填“相同”或“不同”)。

【解析】(1)依據(jù)題意可知要獲得由A細(xì)胞核和B細(xì)胞質(zhì)組成的重組細(xì)胞,須要提取A細(xì)胞核,然后與去掉B細(xì)胞核的B細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行重組,得到重組細(xì)胞,進(jìn)一步培育得到重組胚胎,再進(jìn)行胚胎移植,移植到代孕母牛的子宮里進(jìn)行培育。(2)克隆動(dòng)物利用動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞核的全能性,得到的新個(gè)體的性狀主要由細(xì)胞核確定,與供核母牛的性狀基本一樣,雜交牛是由精子和卵細(xì)胞融合得到的受精卵發(fā)育來(lái)的,細(xì)胞核來(lái)自兩個(gè)親本,由于精子含有很少的細(xì)胞質(zhì),受精卵的細(xì)胞質(zhì)主要來(lái)自卵細(xì)胞,所以雜交牛和克隆牛的遺傳物質(zhì)不同。答案:(1)細(xì)胞核去核重組胚胎子宮(2)動(dòng)物體細(xì)胞核A兩雌不同【互動(dòng)探究】(1)上題中的雜交牛和克隆牛的生殖方式分別是什么?它們的遺傳物質(zhì)分別來(lái)自幾個(gè)親本?提示:①雜交牛:有性生殖,遺傳物質(zhì)來(lái)自兩個(gè)親本,分別繼承父本和母本一半的核基因。②克隆牛:無(wú)性生殖,遺傳物質(zhì)來(lái)自兩個(gè)親本,供核親本供應(yīng)全部的核基因,供應(yīng)細(xì)胞質(zhì)的親本供應(yīng)質(zhì)基因。(2)已知公牛基因型為AA,母牛基因型為Aa,則二者雜交后代(即雜交牛)基因型和性別分別是什么?母牛體細(xì)胞作為供體(核)細(xì)胞,則克隆牛的基因型和性別又分別是什么?提示:①雜交牛:AA或Aa,公?；蚰概?②克隆牛:Aa,母牛。8.(12分)下圖所示為用兩棲動(dòng)物的未受精卵所做的試驗(yàn)圖解,據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)蝌蚪腸上皮細(xì)胞核中含有青蛙發(fā)育所需的。重新組合的細(xì)胞相當(dāng)于青蛙的細(xì)胞,經(jīng)過(guò)和形成組織和器官。本試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明具有全能性。

(2)圖中A過(guò)程采納的技術(shù)手段稱為技術(shù)。為了獲得腸上皮細(xì)胞,應(yīng)先獲得腸上皮組織,剪碎后加入處理,然后進(jìn)行細(xì)胞培育獲得腸上皮細(xì)胞。

(3)圖中培育過(guò)程所用的養(yǎng)分液與植物組織培育基成分的主要不同是。

(4)通過(guò)圖示過(guò)程產(chǎn)生新個(gè)體的生殖方式是,A過(guò)程中采納卵細(xì)胞作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)有①,易于操作;②含有能促進(jìn)細(xì)胞核的物質(zhì);③含量多,為重組細(xì)胞早期發(fā)育供應(yīng)養(yǎng)分。

【解題關(guān)鍵】解答本題需關(guān)注以下兩點(diǎn):(1)圖示信息:試驗(yàn)圖解表示采納顯微注射法將細(xì)胞核注入去核卵細(xì)胞中,獲得重組細(xì)胞的過(guò)程。(2)關(guān)鍵信息:重組細(xì)胞進(jìn)行胚胎發(fā)育形成蝌蚪,再經(jīng)變態(tài)發(fā)育形成成蛙?！窘馕觥?1)蝌蚪腸上皮細(xì)胞是由受精卵有絲分裂形成的,其細(xì)胞核中含有青蛙發(fā)育所需的全部基因(全部遺傳物質(zhì));重新組合的細(xì)胞相當(dāng)于青蛙的受精卵細(xì)胞,經(jīng)過(guò)細(xì)胞分裂和分化形成組織和器官。本試驗(yàn)采納了核移植技術(shù),這說(shuō)明蝌蚪腸上皮細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。(2)題圖中A過(guò)程采納的技術(shù)手段稱為核移植技術(shù)。動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程中,分散細(xì)胞時(shí)用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,然后進(jìn)行細(xì)胞培育獲得腸上皮細(xì)胞。(3)動(dòng)物細(xì)胞培育液與植物組織培育基成分的主要不同是前者必需含有動(dòng)物血清、血漿等。(4)通過(guò)圖示過(guò)程產(chǎn)生新個(gè)體的生殖方式是無(wú)性生殖。卵細(xì)胞體積大,易于操作;含有能促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì);卵黃含量多,為重組細(xì)胞早期發(fā)育供應(yīng)養(yǎng)分,因此常采納卵細(xì)胞作為受體細(xì)胞。答案:(1)全部基因(全部遺傳物質(zhì))受精卵細(xì)胞分裂分化動(dòng)物細(xì)胞核(2)核移植胰蛋白酶或膠原蛋白酶(3)前者必需含有動(dòng)物血清、血漿等(4)無(wú)性生殖卵細(xì)胞體積大全能性表達(dá)卵黃9.(14分)(2024·包頭高二檢測(cè))轉(zhuǎn)基因豬在異樣器官移植、生物反應(yīng)器和疾病模型等方面有廣泛應(yīng)用。如圖為轉(zhuǎn)基因豬的培育過(guò)程,請(qǐng)分析回答:(1)體外培育豬胎兒成纖維細(xì)胞,需定期更換培育液,防止對(duì)細(xì)胞自身造成損害。當(dāng)細(xì)胞貼滿瓶壁時(shí),可分瓶進(jìn)行培育,讓其接著增殖,通常選用10代以內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行核移植,目的是保持細(xì)胞正常的

。

(2)為便于檢測(cè)與篩選,用紅色熒光蛋白基因作為基因參加構(gòu)建基因表達(dá)載體,將其導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞中,篩選發(fā)紅色熒光的細(xì)胞與期的去核卵母細(xì)胞融合,使供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞,利用物理或化學(xué)的方法激活重組細(xì)胞,使其完成形成重組胚胎。

(3)與成年動(dòng)物細(xì)胞相比,用胚胎細(xì)胞克隆動(dòng)物的勝利率較高,緣由是。

【解析】(1)動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程中,須要不斷地更換培育液,以防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成損害。成纖維細(xì)胞貼壁分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),就會(huì)停止分裂,可以用胰蛋白酶處理后分瓶培育,即進(jìn)行傳代培育。10代以內(nèi)的細(xì)胞能夠保持正常的二倍體核型,相宜進(jìn)行核移植。(2)圖中紅色熒光蛋白基因是標(biāo)記基因;核移植時(shí),選取處在減數(shù)其次次分裂中期的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞;利用物理或化學(xué)的方法激活重組細(xì)胞,使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程形成重組胚胎。(3)胚胎細(xì)胞的分化程度低于成年動(dòng)物的體細(xì)胞,復(fù)原其全能性相對(duì)簡(jiǎn)單,故與成年動(dòng)物體細(xì)胞相比,用胚胎細(xì)胞克隆動(dòng)物的勝利率較高。答案:(1)細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累傳代二倍體核型(2)標(biāo)記減數(shù)其次次分裂中細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程(3)胚胎細(xì)胞的分化程度低于成年動(dòng)物的體細(xì)胞,復(fù)原其全能性相對(duì)簡(jiǎn)單10.(16分)現(xiàn)有甲、乙兩種可能有肯定致畸、致癌作用的化學(xué)物質(zhì),利用動(dòng)物細(xì)胞培育的方法能夠檢測(cè)它們是否有毒性,并比較二者毒性的強(qiáng)弱,請(qǐng)完成下列試驗(yàn)報(bào)告。(1)試驗(yàn)材料:小白鼠胚胎。(2)藥品用具:胰蛋白酶液、動(dòng)物細(xì)胞培育液、動(dòng)物細(xì)胞固定液、相宜濃度的龍膽紫溶液、滴管、培育皿、剪刀、錐形瓶、細(xì)胞培育箱、載玻片、蓋玻片、光學(xué)顯微鏡、小白鼠正常體細(xì)胞有絲分裂高倍顯微鏡照片等。(3)試驗(yàn)原理:

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依據(jù)這些變異細(xì)胞占全部培育細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)(以下稱Q值),可推斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性。(4)試驗(yàn)步驟:①制備細(xì)胞懸液:把小白鼠胚胎放在培育皿中并剪碎,再轉(zhuǎn)入錐形瓶中,加入胰蛋白酶液處理,使胚胎組織分散成單個(gè)細(xì)胞,再加入動(dòng)物細(xì)胞培育液,制成細(xì)胞懸液。②進(jìn)行細(xì)胞培育:a.取A、B、C3個(gè)干凈的培育瓶,分別加入。

b.向A、B兩個(gè)培育瓶中分別加入,并將培育瓶搖勻;C瓶,作為比照。

c.把3個(gè)培育瓶放在的細(xì)胞培育箱中培育。

③制作臨時(shí)裝片:a.當(dāng)細(xì)胞繁殖到大約第8代時(shí),同時(shí)從細(xì)胞培育箱中取出3個(gè)培育瓶,用處理,使培育的細(xì)胞從瓶壁上脫落,再加入快速固定細(xì)胞,將細(xì)胞固定在不同的分裂時(shí)期。

b.靜置一段時(shí)間后,分別從各培育瓶底部吸取適量的細(xì)胞懸液,滴在與培育瓶有相同編號(hào)的載玻片中心,加1～2滴肯定濃度的染色,3～5min后,蓋上蓋玻片,制成臨時(shí)裝片。

④鏡檢和統(tǒng)計(jì):把臨時(shí)裝片放在顯微鏡下,找尋處于期的細(xì)胞,并與小白鼠正常有絲分裂高倍顯微鏡照片對(duì)比以確認(rèn)發(fā)生上述變異的細(xì)胞,同時(shí)統(tǒng)計(jì)該時(shí)期變異的細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)(Q值)。

(5)試驗(yàn)結(jié)果:培育瓶ABCQ值1.3%12.5%0.1%(6)試驗(yàn)結(jié)論: