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PAGE4-特別“組合4”主觀題模擬真演練(五)1.[2024·四川省綿陽市高三四模]科學(xué)家Burton等將人的抗體編碼基因體外克隆后,插入噬菌體中并轉(zhuǎn)染大腸桿菌得到工程菌。目的基因在工程菌中進(jìn)行表達(dá),獲得了具有高度免疫活性的人抗體,該項(xiàng)技術(shù)被稱為噬菌體抗體庫技術(shù)?;卮鹣铝邢嚓P(guān)問題:(1)提取人的抗體編碼基因時(shí),若限制酶切出的DNA片段是平末端,則須要用____________________酶進(jìn)行連接。若要在短時(shí)間內(nèi)獲得較多的抗體編碼基因,可以利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA,擴(kuò)增目的基因時(shí)須要加入兩種引物,其緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)運(yùn)用逆轉(zhuǎn)錄法獲得的抗體編碼基因,只是該基因的________序列,須要插入載體的________________之間才能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。(3)大腸桿菌經(jīng)常被用作基因工程的受體菌,其主要優(yōu)點(diǎn)是________________________________________________________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。(4)將重組DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞時(shí),一般不須要用CaCl2處理大腸桿菌以制備感受態(tài)細(xì)胞,其緣由是__________________________________________________________________________________________________________________________。2.[2024·四川省成都市蓉城名校聯(lián)盟高三聯(lián)考]CAR-T細(xì)胞療法是通過設(shè)計(jì)CAR基因,并導(dǎo)入癌癥患者的T細(xì)胞中,使其轉(zhuǎn)化為CAR-T細(xì)胞,CAR-T細(xì)胞膜上的CAR蛋白與癌細(xì)胞表面抗原特異結(jié)合后,激活CAR-T細(xì)胞使其增殖、分化,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)癌細(xì)胞的特異性殺傷和記憶,主要過程如下圖。請(qǐng)回答:(1)過程①中,須要先要用________切割不同的DNA片段形成黏性末端,再利用________連接形成CAR基因。(2)將CAR基因?qū)牖颊逿細(xì)胞前,必需先完成過程②,一是因?yàn)镃AR基因片段小,在細(xì)胞中簡(jiǎn)潔丟失;二是因?yàn)槿鄙賍_______,CAR基因在T細(xì)胞中不能復(fù)制。(3)完成過程③常用方法是________。此外,還可以先將CAR基因整合到逆轉(zhuǎn)錄病毒載體中,再利用病毒的________特性導(dǎo)入并將CAR基因整合到T細(xì)胞的________上。(4)依據(jù)圖示,CAR-T細(xì)胞對(duì)癌細(xì)胞的特異性殺傷主要取決于CAR蛋白________區(qū)。CAR-T細(xì)胞療法具有長(zhǎng)久性是因?yàn)镃AR-T細(xì)胞能夠在體內(nèi)______________________。3.[2024·河南省新鄉(xiāng)市高三其次次模擬]請(qǐng)回答下列有關(guān)基因工程和生物技術(shù)平安性的問題:(1)霍拉納(H.G.Khorana)用試驗(yàn)證明了尼倫伯格提出的遺傳密碼的存在,不僅使人們相識(shí)到自然界中從微生物到人類共用一套________,而且為基因的分別和合成等供應(yīng)了理論依據(jù)。錢嘉韻是第一個(gè)勝利分別出耐高溫DNA聚合酶的中國(guó)臺(tái)灣科學(xué)家,該酶的發(fā)覺為基因工程中________技術(shù)的獨(dú)創(chuàng)供應(yīng)了前提條件。(2)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因,可以采納DNA分子雜交技術(shù),即將轉(zhuǎn)基因生物的基因組DNA提取出來,在含有目的基因的DNA片段上用________等作標(biāo)記,以此作為探針,使探針與基因組DNA雜交,假如顯示出________,就表明目的基因已插入受體的染色體DNA中。(3)日前科學(xué)家已在牛和山羊等動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白、生長(zhǎng)激素和a-抗胰蛋白酶等重要醫(yī)藥產(chǎn)品。在用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥用蛋白時(shí),須要先將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的________等調(diào)控組件重組在一起,通過________等法,導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中。(4)部分公眾認(rèn)為轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物可能會(huì)對(duì)生物多樣性構(gòu)成威逼,依據(jù)所學(xué)的生物學(xué)學(xué)問,列舉兩個(gè)理由,減輕或消退他們的擔(dān)憂:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。4.[2024·遼寧省高三第一次模擬]膠原蛋白廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、化妝品、化工原料等領(lǐng)域,科研人員開展了利用家蠶生產(chǎn)人膠原蛋白的探討。請(qǐng)回答下列問題:(1)家蠶核型多角體病毒(BmNPV)專性寄生于鱗翅目昆蟲,將人膠原蛋白基因與________重組后,構(gòu)建________。體外克隆目的基因的方法是________。(2)BmNPV的pl0基因是極強(qiáng)的啟動(dòng)子,將目的基因連接在pl0基因的下游,目的是________________________________。目的基因與pl0基因連接時(shí),斷裂與連接的化學(xué)鍵都是________。(3)重組BmNPV感染家蠶幼蟲后,在幼蟲淋巴液中提取蛋白質(zhì),用________的方法檢測(cè)目的基因是否勝利表達(dá)。相比于大腸桿菌,選擇家蠶作為人膠原蛋白的生物反應(yīng)器,其優(yōu)點(diǎn)是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。特別“組合4”主觀題模擬真演練(五)1.(1)T4DNA連接DNA聚合酶只能從3′端延長(zhǎng)DNA鏈,用兩種引物才能確保DNA的兩條鏈同時(shí)被擴(kuò)增(2)編碼區(qū)啟動(dòng)子和終止子(3)大腸桿菌結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)潔、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少、繁殖速度快(4)噬菌體可以侵染大腸桿菌,將重組DNA分子注入大腸桿菌解析:(1)限制酶切出的DNA片段若是平末端,須要用T4DNA連接酶進(jìn)行連接。由于DNA聚合酶不能從頭合成DNA,而只能從3′端延長(zhǎng)DNA鏈,只有用兩種引物引導(dǎo)才能確保DNA的兩條鏈同時(shí)被擴(kuò)增,所以利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)須要加入兩種引物。(2)由于轉(zhuǎn)錄時(shí)只有目的基因編碼區(qū)的信息傳遞到了mRNA上,所以運(yùn)用逆轉(zhuǎn)錄法獲得的抗體編碼基因,只是該基因的編碼區(qū)序列,不含基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控序列,故上述抗體編碼基因須要插入載體的啟動(dòng)子和終止子之間才能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。(3)大腸桿菌具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)潔、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少、繁殖速度快等優(yōu)點(diǎn),常被用作基因工程的受體菌。(4)在噬菌體抗體庫的構(gòu)建過程中,理論上可以不利用Ca2+處理大腸桿菌,依據(jù)是噬菌體可以侵染大腸桿菌,將重組DNA分子注入大腸桿菌。2.(1)限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)DNA連接酶(2)復(fù)制原點(diǎn)(3)顯微注射侵染染色體DNA(4)胞外結(jié)合形成記憶細(xì)胞解析:依據(jù)題意可得,CAR-T細(xì)胞療法實(shí)際為通過基因工程變更患者T細(xì)胞的基因,使其能夠產(chǎn)生CAR蛋白以特異性殺傷癌細(xì)胞。過程①表示獲得目的基因,過程②表示獲得重組DNA分子,過程③表示將重組DNA分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞;過程④表示對(duì)癌細(xì)胞的特異性殺傷和記憶。(1)過程①獲得目的基因時(shí),須要的工具酶為限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶,用限制性核酸內(nèi)切酶切割不同的DNA片段,再利用DNA連接酶形成CAR基因;(2)基因的復(fù)制須要復(fù)制原點(diǎn),過程①獲得的CAR基因不包含復(fù)制原點(diǎn),所以須要與pCDH質(zhì)粒結(jié)合,由pCDH質(zhì)粒供應(yīng)復(fù)制原點(diǎn);(3)受體細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞時(shí),常用的將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞的方式為顯微注射法;病毒為寄生生物,因此可利用病毒的侵染性將CAR基因整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上;(4)依據(jù)題圖分析,CAR-T細(xì)胞對(duì)癌細(xì)胞的特異性殺傷是通過與癌細(xì)胞特異性結(jié)合再使癌細(xì)胞裂解,故起主要作用的是CAR蛋白的胞外結(jié)合區(qū),CAR-T細(xì)胞療法具有長(zhǎng)久性是因?yàn)镃AR-T細(xì)胞與細(xì)胞免疫相像,能夠在體內(nèi)形成記憶細(xì)胞。3.(1)遺傳密碼PCR(2)放射性同位素雜交帶(3)啟動(dòng)子顯微注射(4)轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物與其他種類的植物存在生殖隔離,很難與其他植物發(fā)生雜交;很多農(nóng)作物的花粉傳播距離有限、花粉存活時(shí)間有限解析:(1)從微生物到人類共用一套遺傳密碼,耐高溫DNA聚合酶的發(fā)覺為基因工程中PCR技術(shù)的獨(dú)創(chuàng)供應(yīng)了前提條件;(2)DNA分子雜交技術(shù),即在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作標(biāo)記,以此作為探針,使探針與基因組DNA雜交,假如顯示出雜交帶,就表明目的基因已插入受體細(xì)胞染色體的DNA中;(3)在用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥用蛋白時(shí),須要先將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子調(diào)控組件重組在一起,使藥用蛋白基因可以和乳腺蛋白基因一起表達(dá);目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞一般通過顯微注射等方法;(4)轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物會(huì)對(duì)生物多樣性構(gòu)成威逼較小,緣由有:轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物與其他種類的植物存在生殖隔離,很難與其他植物發(fā)生雜交;很多農(nóng)作物的花粉傳播距離有限、花粉存活時(shí)間有限等。轉(zhuǎn)基因的農(nóng)作物難以將目的基因擴(kuò)散開來。4.(1)BmNPV基因基因表達(dá)載體PCR技術(shù)(2)使目的基因在pl0基因的驅(qū)動(dòng)下高效表達(dá)磷酸二酯鍵(3)抗原—抗體雜交家蠶細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體會(huì)對(duì)人膠原蛋白進(jìn)行加工使表達(dá)的膠原蛋白與人的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)和功能相像解析:(1)因?yàn)锽mNPV專性寄生于鱗翅目昆蟲,故將目的基因與BmNPV基因重組,構(gòu)建基因表達(dá)載體,更有利于
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