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…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁,總=sectionpages22頁第=page11頁,總=sectionpages11頁2025年浙教版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍:全部知識點;考試時間:120分鐘學校:______姓名:______班級:______考號:______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題,共16分)1、研究人員用下圖1中質粒和圖2中含目的基因的片段構建重組質粒(圖中標注了相關限制酶切割位點);將重組質粒導入大腸桿菌后進行篩選及PCR鑒定。以下敘述不正確的是()

A.構建重組質粒的過程應選用BclⅠ和HindⅠ兩種限制酶B.使用DNA連接酶將酶切后的質粒和目的基因片段進行重組C.能在添加四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存的一定是含有重組質粒的大腸桿菌D.利用PCR鑒定含目的基因的大腸桿菌時應選用引物甲和引物丙2、如圖表示果酒;果醋和泡菜生產過程中的物質變化情況;下列敘述錯誤的是()

A.參與果醋、泡菜發(fā)酵的生物為原核生物B.酶的種類不同導致過程②⑥的差異C.導致過程④⑤差異的原因是糖源是否充足D.過程②④⑥所需要的最適溫度相同3、基因工程的核心是構建基因表達載體,下列不屬于載體作用的是()A.載體能防止目的基因被受體細胞限制酶“切割”B.載體能協(xié)助目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在C.載體含有啟動子和終止子協(xié)助目的基因表達D.載體具有標記基因,便于篩選含目的基因的受體細胞4、下列關于農桿菌轉化法的敘述,錯誤的是()A.農桿菌是一種生活在土壤中的微生物,能在自然情況下侵染雙子葉植物和裸子植物B.可以將新鮮的從葉片上取下的圓形小片與農桿菌共同培養(yǎng),然后篩選轉化細胞,并再生成植株C.可以將花序直接浸沒在含有農桿菌的溶液中一段時間,然后培養(yǎng)植物并獲得種子,再進行篩選鑒定D.由于農桿菌自然狀態(tài)下對大多數(shù)單子葉植物沒有侵染能力,所以不可能利用農桿菌轉化法轉化玉米、水稻等單子葉植物細胞5、對某一線性DNA分子用一系列限制酶進行酶切處理,根據(jù)酶切的電泳分析結果,對照酶切片段大小的數(shù)據(jù)進行邏輯推理,然后確定各酶切片段的排列順序和各酶切位點的相對位置,即可繪出限制性酶切圖譜。下表是某小組進行的相關實驗。根據(jù)表中數(shù)據(jù)分析,下列限制性酶切圖譜正確的是()。已知一線性DNA序列共有5000bp第一步水解產物/bp第二步水解產物/bpA酶切割2100將第一步水解產物分離后,分別用B酶切割19002001900200140080060014008006001000100010001000500500500500B酶切割2500將第一步水解產物分離后,分別用A酶切割19006001900600130080050013008005001200100020012001000200經A酶和B酶同時切割1900100080060050020019001000800600500200

A.B.C.D.6、在基因工程的操作過程中,下列敘述正確的是()A.限制性核酸內切酶只能用于切割目的基因B.DNA連接酶一般作用于堿基對之間的氫鍵C.質??纱嬖谟诩毦徒湍妇壬锏募毎蠨.目的基因成功導入受體細胞后一定能表達7、菊花是一種雙子葉植物,易感桃蚜。桃蚜不但直接影響植物生長,還是多種植物病毒的傳播媒介。雪花蓮凝集素基因GNA的表達產物能有效抑制桃蚜生長,某科研團隊運用農桿菌轉化法獲得了轉GNA基因菊花。下列有關敘述不正確的是()A.受體細胞可以選擇菊花葉片細胞或桃蚜細胞B.需經過植物組織培養(yǎng)過程獲得轉基因菊花C.將目的基因GNA插入到Ti質粒的T-DNA上構建表達載體D.外植體產生的酚類化合物能吸引農桿菌移向受體細胞8、如圖是將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”的示意圖。已知細菌B細胞內不含質粒A,也不含質粒A上的基因。判斷下列說法正確的是()

A.將重組質粒導入細菌B常用的方法是顯微注射法B.導入了重組質粒的細菌B能在涂布四環(huán)素的培養(yǎng)基生長C.導入了質粒A的細菌B能在涂布氨芐青霉素的培養(yǎng)基生長D.目的基因成功表達的標志是細菌B能在涂布氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長評卷人得分二、多選題(共5題,共10分)9、2012年6月29日,中國首例設計嬰兒誕生。這個嬰兒的父母均為地中海貧血基因的攜帶者。此前,二人曾育有一女,患有重度地中海貧血,為了再生一個健康的孩子,用他的臍帶血幫助姐姐進行造血干細胞移植,設計了這個嬰兒。下列有關說法正確的是()A.“設計試管嬰兒”利用體外受精、胚胎移植、植入前胚胎遺傳學診斷技術等B.“設計試管嬰兒”與“試管嬰兒”均為有性生殖C.“設計試管嬰兒”與“試管嬰兒”都要進行胚胎選擇,二者選擇的目的相同D.設計嬰兒性別是“設計試管嬰兒”的第一步10、從藍光到紫外線都能使綠色熒光蛋白(GFP)激發(fā);發(fā)出綠色螢光。研究人員將某病毒的外殼蛋白(L1)基因與GFP基因連接,獲得了L1-GFP融合基因,并將其插入質粒PO,構建了重組質粒P1。下圖為P1部分結構和限制酶酶切位點的示意圖,相關敘述正確的是()

A.將L1-GFP融合基因插入質粒PO時,使用了E1、E2和E4三種限制性核酸內切酶B.可借助基因工程、核移植技術、早期胚胎培養(yǎng)及胚胎移植技術獲得轉基因的克隆牛C.可采用抗原-抗體雜交技術檢測該融合基因是否存在于轉基因牛的不同組織細胞中D.若在某轉基因牛皮膚細胞中觀察到綠色熒光,則說明L1基因在該細胞中完成表達11、RNA經逆轉錄后再進行PCR擴增的技術稱為RT-PCR,過程如圖所示。下列相關敘述正確的是()

A.過程①需要RN逆轉錄酶、引物、核糖核苷酸等條件B.真核細胞的mRNA經過程①②獲得的DNA無內含子片段C.過程③PCR擴增時引物中的CG含量會影響退火溫度D.RT-PCR技術可應用于新冠病毒(RNA病毒)的核酸檢測12、免疫PCR是對微量抗原的一種檢測方法。下圖是利用該技術檢測牛乳中微量抗生素的流程圖:首先將抗體1固定在微板上,沖洗后加入待檢的牛乳,再加入DNA標記的抗體2,進行PCR擴增,最后進行電泳檢測,相關敘述正確的是()

A.圖示中的DNA可以是非牛乳基因中的DNA片段B.如果第三次沖洗不充分則有可能出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象C.電泳檢測結果只能判斷陽性與否,無法判斷牛乳中抗生素的含量D.微量抗原抗體反應通過PCR技術間接擴增放大,從而達到可檢測的水平13、生活中常見的果酒、果醋和泡菜的制作離不開傳統(tǒng)發(fā)酵技術。下列相關敘述正確的是()A.家庭釀酒、制果醋和酸奶均需要選純種菌進行發(fā)酵B.果醋制作的溫度一般控制在30~35℃,果酒發(fā)酵的溫度一般控制在18~25℃C.制作泡菜壇口密封的目的是保證壇內乳酸菌發(fā)酵時所需的無氧環(huán)境D.果醋制作中期通入氮氣,有利于醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿嵩u卷人得分三、填空題(共8題,共16分)14、人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求,配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質一一培養(yǎng)基。其中,配制成的_______________的基質稱為液體培養(yǎng)基,配制成的固體狀態(tài)的基質稱為________________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后,制成瓊脂固體培養(yǎng)基,它是實驗室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長,可以形成肉眼可見的菌落。(瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化,在44℃以下凝固,在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)固態(tài)。)15、1.基因檢測引發(fā)的倫理問題。

(1)基因身份證:基因身份證指把個人的_____和_____檢測出來;記錄在磁卡上,而做成的個人基因身份證。

(2)基因檢測引發(fā)的爭論①_____②_____③_____④_____⑤_____⑥_____

。項目。

反對。

支持。

技術方面。

目前人類對①及基因間的相互作用尚缺乏足夠的認識;通過基因檢測達到②的目的是很困難的;基因檢測結果會給受檢者帶來巨大的③。

通過基因檢測可以對遺傳性疾病及早采取④;適時進行治療,達到挽救患者生命的目的。

道德方面。

基因資訊的泄露造成⑤;如個人婚姻困難;人際關系疏遠,更明顯的是造成一支遺傳性失業(yè)大軍。

對于基因歧視現(xiàn)象;可以通過正確的科學知識傳播;⑥教育和立法得以解決。

2.試管嬰兒與設計試管嬰兒的比較①_____②_____③_____④_____

。項目。

設計試管嬰兒。

試管嬰兒。

技術手段。

胚胎移植前①(填“需要”或“不需要”)進行遺傳學診斷這一環(huán)節(jié)。

②(填“需要”或‘不需要”)進行遺傳學診斷。

實踐應用。

用于白血??;貧血病等遺傳性疾病的預測。

解決不孕不育問題。

聯(lián)系。

二者都是③受精;體外進行早期胚胎發(fā)育,再進行胚胎移植,從生殖方式上都為④

16、本課題對能分解尿素的細菌進行了初步的篩選。但是,這只是分離純化菌種的第一步。對分離的菌種作進一步的鑒定,還需要借助生物化學的方法。在細菌分解尿素的化學反應中,細菌合成的___________將尿素分解成了_____________。氨會使培養(yǎng)基的________________,pH______________。因此,我們可以通過檢測培養(yǎng)基______________來判斷該化學反應是否發(fā)生。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_____________,培養(yǎng)某種細菌后,如果pH升高,指示劑將變________________。17、植物基因工程:______。18、動物基因工程:______。19、動物細胞培養(yǎng)的流程:

取動物組織塊(動物胚胎或幼齡動物的器官或組織)→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉入培養(yǎng)瓶中進行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。20、在我國市場上究竟有多少種轉基因產品呢?一位同學帶著這樣的問題,進行了調查并將結果歸納成下圖?

對該同學的調查和歸納結果,有人表示認同,有人提出質疑?質疑者認為:目前我國市場上根本沒有大豆?玉米或甜菜的轉基因產品?我們的觀點是什么_____?21、近年來,克隆技術的發(fā)展取得了巨大突破?在日常生活中,我們遇到過與克隆技術有關的問題嗎?_____。評卷人得分四、判斷題(共1題,共9分)22、利用基因工程技術建立移植器官工廠是目前基因工程取得實際應用成果非常多的領域。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題,共28分)23、被稱為“水中小白鼠”的斑馬魚是一種體長4厘米左右的熱帶淡水魚;與人類基因同源性高達87%,并有相似的器官;生理功能和信號通路。由于發(fā)育周期短、費用低、體外受精、透明等優(yōu)點,斑馬魚現(xiàn)在越來越廣泛地應用于毒性檢測、疾病模型創(chuàng)制、藥物篩選等領域中。

研究人員欲通過使胰島素基因表達受阻從而構建糖尿病模型斑馬魚。嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑;通過將其注入斑馬魚受精卵可阻礙相關基因的表達。針對其作用原理,現(xiàn)有兩種假說:

假說1:嗎啉反義寡核苷酸導致RNA前體上內含子2的對應序列不能被剪切。

假說2:嗎啉反義寡核苷酸導致RNA前體上內含子2和外顯子3的對應序列同時被剪切。

為了驗證上述假說;研究人員進行了如下實驗:

(1)從受精卵發(fā)育了3天的實驗組和對照組的細胞中提取總RNA,再通過逆轉錄獲得cDNA。若假說1成立,選擇上圖所示引物2和引物3進行PCR后的結果為______(填字母)。A.實驗組有雜交帶B.實驗組無雜交帶C.對照組有雜交帶D.對照組無雜交帶(2)若要證明假說2成立,進行PCR時,需要選擇上圖所示引物有____________。

(3)采用PCR技術擴增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)為了獲取大量斑馬魚胚胎干細胞用于藥物篩選,可加入__________________,用于分散斑馬魚囊胚中的__________________。再取分散細胞作為初始材料進行______培養(yǎng),然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加輸卵管上皮細胞作為______細胞,以提高斑馬魚胚胎干細胞的數(shù)量。24、金黃色葡萄球菌是一種常見的病原菌;具有高度耐鹽化的特性,在血平板(培養(yǎng)基中添加適量血液)上生長時,可破壞菌落周圍的紅細胞,使其褪色。某研究小組進行了測定某處土壤中金黃色葡萄球菌數(shù)量的實驗?;卮鹣铝袉栴}:

(1)實驗小組選用含7.5%NaCl的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)金黃色葡萄球菌,制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的操作步驟是_________(用文字和箭頭表示)。培養(yǎng)基中加入7.5%NaCl有利于金黃色葡萄球菌的篩選,原因是_________。

(2)在制作血平板時需要等平板冷卻后,方可加入血液,以防止_________。在血平板上,金黃色葡萄球菌菌落的周圍會出現(xiàn)_________。

(3)土壤是微生物天然的培養(yǎng)基,測定土壤中金黃色葡萄球菌的數(shù)量時,一般采用_________法。為了保證獲得菌落數(shù)在_________之間適于計數(shù)的平板,需要選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng)。測定土壤中金黃色葡萄球菌、放線菌和真菌的數(shù)量時,稀釋倍數(shù)較低的是_________。實驗結果統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低,其原因是_________。25、氨基丁酸(GABA)是具有降血壓;抗焦慮等功能的水溶性氨基酸。科研人員通過實驗研究了白方腐乳在前發(fā)酵鹽腌和后發(fā)酵過程中GABA的含量變化;為尋找生產富含GABA腐乳的工藝奠定基礎。實驗步驟如下:

①豆腐白坯表面接種毛霉孢子后;在適宜的溫度和濕度下培養(yǎng)48h,獲得毛坯。

②將毛坯分層整齊地擺放在瓶中;鹽腌5天。

③腌制后加入鹵湯;置于28℃恒溫箱中后發(fā)酵90天。

④分別采集各時段的腐乳坯樣品;測定GABA含量,結果如圖。

請分析并回答問題:

(1)前發(fā)酵過程中,毛坯的GABA含量發(fā)生明顯變化的原因是毛霉產生的_______促進蛋白質水解產生GABA。

(2)步驟②中,加鹽腌制的正確操作是______________。此過程腐乳干重中的GABA含量下降,一方面與食鹽抑制毛霉生長,酶活性降低有關;另一方面,豆腐中的水分滲出,部分GABA會____________而導致測定值減小。

(3)后發(fā)酵所加的鹵湯中,具有抑菌防腐和調味的成分主要有_______。此過程中,發(fā)酵_______天后的白方腐乳出廠銷售比較適宜。26、三氯生是一種抑菌物質,具有優(yōu)異的貯存穩(wěn)定性,可以替代抗生素用于基因工程中篩選含目的基因的受體細胞。已知fabV(從霍亂弧菌中發(fā)現(xiàn)的烯脂酰ACP還原酶)基因可以使大腸桿菌抵抗三氯生。

(1)通過PCR方法擴增fabV基因時,先要根據(jù)_____設計兩種特異性引物序列,以確保Taq酶從引物的3′端延伸DNA鏈,至少需要經過_____次擴增才能獲得8個雙鏈等長的目的基因。

(2)基因工程的核心步驟是_____;某科研團隊將可以受溫度調控的基因插入上述選出的重組質粒中,構建了溫度調控表達質粒(如圖2)。其中C基因在低溫下會抑制P2,R基因在高溫下會抑制P1,如果將lacZ基因和GFP(綠色熒蛋白)基因插入圖2質粒中,使得最后表現(xiàn)為低溫下只表達GFP蛋白,而高溫下只表達lacZ蛋白。則lacZ基因插在_____之間,GFP基因的插入位置及注意點是_____。

(3)若以大腸桿菌為受體細胞,篩選上述插入了GFP基因的受體細胞的依據(jù)是:大腸桿菌能在含_____的培養(yǎng)基上生長,且_____。評卷人得分六、綜合題(共1題,共3分)27、科學家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應器中表達出了多種蛋白產品。下圖為培育轉基因山羊生產人酪蛋白的流程圖。回答下列問題:

(1)圖中的目的基因可通過_________方法獲得;通常利用__________技術來擴增其數(shù)量。

(2)進行①過程時;需要用_________酶切割載體和含目的基因的DNA片段,切割后用_________酶將其連接起來。

(3)進行②過程時;移植前可取___________________細胞對胚胎進行性別鑒定。

(4)為檢測轉基因山羊的染色體DNA上是否插入目的基因,可采用_________技術,通常是在含有目的基因的DNA片段上用_________等作標記,以此作為探針。參考答案一、選擇題(共8題,共16分)1、C【分析】【分析】

根據(jù)質粒的特點確定限制酶的種類。

1;所選限制酶要與切割目的基因的限制酶相一致;以確保具有相同的黏性末端。

2;質粒作為載體必須具備標記基因等;所以所選擇的限制酶盡量不要破壞這些結構,如果所選酶的切點不止一個,則切割重組后可能丟失某些片段,若丟失的片段含復制起點區(qū),則切割重組后的片段進入受體細胞后不能自主復制。

【詳解】

A;選擇的限制酶應在目的基因兩端存在識別位點;但BamHⅠ可能使質粒中的兩種標記基因都破壞,因此只能選BclⅠ和HindⅢ兩種限制酶切割,A正確;

B;酶切后的質粒和目的基因片段要用DNA連接酶連接;構建重組載體,B正確;

C;能在添加四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存的也可能是只含有質粒的大腸桿菌;C錯誤;

D;PCR技術要求兩種引物分別和目的基因的兩條單鏈結合;沿相反的方向合成子鏈,故所用的引物組成為圖2中引物甲和引物丙,D正確。

故選C。2、D【分析】【分析】

分析題圖:圖示是果酒和果醋生產過程中的物質變化情況;其中①是細胞呼吸的第一階段,發(fā)生在細胞質基質中;②是無氧呼吸的第二階段,為酒精發(fā)酵,發(fā)生在細胞質基質中;③為有氧呼吸的第二;三階段,發(fā)生在線粒體中;④⑤均為醋酸發(fā)酵,發(fā)生在細胞質基質中。

【詳解】

A;參與果醋、泡菜發(fā)酵的微生物分別為醋酸菌、乳酸菌;它們均為原核生物,A正確;

B;酶的催化具有特異性;酶的種類不同導致過程②⑥的差異,B正確;

C;過程④是醋酸菌在缺少糖源時;將酒精變成乙醛,再將乙醛變成醋酸,過程⑤是醋酸菌在氧氣、糖源充足時,將葡萄糖轉變成醋酸,C正確;

D;過程②酒精發(fā)酵所需要的最適溫度是18~25℃;④醋酸發(fā)酵所需要的最適溫度是30~35℃,⑥過程發(fā)酵的適宜溫度是20~30℃,D錯誤。

故選D。3、A【分析】【分析】

1;基因表達載體的構建:(1)目的:使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達和發(fā)揮作用;(2)基因表達載體的組成:目的基因+啟動子+終止子+標記基因。啟動子是RNA聚合酶的識別和結合的位點;能啟動轉錄過程;終止子控制著轉錄的結束。

2;在基因操作過程中使用運載體有兩個目的:(1)一是用它作為運載工具;將目的基因轉移到宿主細胞中去;(2)二是利用它在宿主細胞內對目的基因進行大量的復制(稱為克?。?/p>

3;作為運載體必需具有四個條件:(1)在受體細胞中能保存下來并能大量復制;(2)有一個至多個限制酶切點;而且每種酶切位點最好只有一個;(3)有一定的標記基因,便于進行篩選;(4)對受體細胞無害。

【詳解】

A;載體不能防止目的基因被受體細胞限制酶“切割”;A錯誤;

B;載體在受體細胞中能夠穩(wěn)定存在;并且自我復制,使目的基因數(shù)量擴大,B正確;

C;啟動子是RNA聚合酶的識別和結合的位點;能啟動轉錄過程;終止子控制著轉錄的結束,所以載體含有的啟動子和終止子可協(xié)助目的基因的表達,C正確;

D;載體具有標記基因;標記基因便于篩選含有目的基因的受體細胞,D正確。

故選A。4、D【分析】【分析】

農桿菌是普遍存在于土壤中的一種革蘭氏陰性細菌;它能在自然條件下趨化性地感染大多數(shù)雙子葉植物的受傷部位,并誘導產生冠癭瘤或發(fā)狀根。

根癌農桿菌和發(fā)根農桿菌細胞中分別含有Ti質粒和Ri質粒;其上有一段T-DNA,農桿菌通過侵染植物傷口進入細胞后,可將T-DNA插入到植物基因組中。因此,農桿菌是一種天然的植物遺傳轉化體系。人們將目的基因插入到經過改造的T-DNA區(qū),借助農桿菌的感染實現(xiàn)外源基因向植物細胞的轉移與整合,然后通過細胞和組織培養(yǎng)技術,再生出轉基因植株。

農桿菌介導法起初只被用于雙子葉植物中;近年來,農桿菌介導轉化在一些單子葉植物(尤其是水稻)中也得到了廣泛應用。

【詳解】

A;在自然條件下;農桿菌感染雙子葉植物和裸子植物,A正確;

B;農桿菌轉染法可以將新鮮的從葉片上取下的圓形小片與農桿菌共同培養(yǎng);然后篩選轉化細胞,并再生成植株,B正確;

C;農桿菌轉染法可以將花序直接浸沒在含有農桿菌的溶液中一段時間;然后培養(yǎng)植物并獲得種子,再進行篩選鑒定,C正確;

D;在自然條件下;農桿菌感染雙子葉植物和裸子植物,而對大多數(shù)單子葉植物沒有感染能力,但是通過改造還是可以轉化玉米、水稻的細胞的,D錯誤。

故選D。5、B【分析】【分析】

限制性核酸內切酶(限制酶)主要是從原核生物中分離純化出來的;能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。

【詳解】

分析表格中的數(shù)據(jù):線性DNA序列共有5000bp(2100+1400+1000+500=5000),經A酶切割后形成2100bp、1400bp、1000bp、500bp共4個片段,說明酶A有3個切割位點;如果用B酶切割形成了2500bp、1300bp、1200bp三個片段;所以B酶有2個酶切位點;

如果先用A酶處理再經B酶切割后,2100bp被切割成了1900bp和200bp,1400bp被切割成了800bp和600bp,1000bp和500bp沒有被切割;說明酶B的酶切位點位于酶A之間。

因此限制性酶切圖譜是:

故選B。6、C【分析】【分析】

基因工程是指按照人類的愿望;將不同生物的遺傳物質在體外人工剪切并和載體重組后轉入細胞內進行擴增,并表達產生所需蛋白質的技術。

基因工程至少需要三種工具:限制性核酸內切酶(限制酶);DNA連接酶、運載體。(1)限制酶:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列;并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。形成黏性末端和平末端兩種。(2)DNA連接酶:連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。(3)運載體:常用的運載體:質粒、噬菌體、動植物病毒。

【詳解】

A;限制性核酸內切酶還可以切割質粒;A錯誤;

B;DNA連接酶一般作用于兩個脫氧苷酸之間的磷酸二酯鍵;B錯誤;

C;質粒存在于許多細菌以及酵母菌等生物的細胞中;是細胞核或擬核外能夠自主復制的很小的環(huán)狀DNA,C正確;

D;當目的基因導入受體細胞后;能否穩(wěn)定維持和表達其遺傳特性,還需要進行鑒定和篩選,D錯誤。

故選C。7、A【分析】【分析】

菊花是一種雙子葉植物;桃蚜是害蟲??茖W家用農桿菌轉化法獲得了轉GNA基因菊花,可知雪花蓮凝集素基因GNA是目的基因,受體細胞為菊花細胞。

【詳解】

A;要獲得轉基因菊花;可以選擇菊花葉片細胞作為受體細胞,但不能選擇桃蚜細胞作為受體細胞,A錯誤;

B;導入的目的基因的受體細胞為菊花細胞;要將其培養(yǎng)成個體,需要經過植物組織培養(yǎng),B正確;

C;Ti質粒的T-DNA可以轉移到受體細胞中;并且整合到受體細胞染色體的DNA上,根據(jù)這一特點,構建表達載體時,應該將目的基因GNA插入到Ti質粒的T-DNA上,C正確;

D;菊花外植體產生的酚類化合物能吸引農桿菌移向受體細胞;有利于目的基因成功導入,D正確;

故選A。8、C【分析】【分析】

題圖分析:圖示表示將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”的過程。質粒A上含有四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因;構建基因表達載體后,破壞了質粒A的四環(huán)素抗性基因,但氨芐青霉素抗性基因正常,所以導入重組質?;蚱胀ㄙ|粒的大腸桿菌都能抗氨芐青霉素,但導入重組質粒的大腸桿菌不能抗四環(huán)素。

【詳解】

A、將基因表達載體導入細菌B之前,一般要先用Ca2+處理細菌;使之處于感受態(tài),從而能夠吸收重組質粒,顯微注射法是導入動物細胞的方法,A錯誤;

B;質粒A中含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因;而重組質粒中抗四環(huán)素基因被破壞,只含抗氨芐青霉素基因,則在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長的是導入質粒A或重組質粒的細菌,能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長的是導入了質粒A的細菌,B錯誤;

C;質粒A中含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因;而重組質粒中抗四環(huán)素基因被破壞,只含抗氨芐青霉素基因,則在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長的是導入質粒A或重組質粒的細菌,能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長的是導入了質粒A的細菌,C正確;

D;根據(jù)題干信息分析;目的基因(人的生長激素基因)成功表達的標志是受體細胞能產生人的生長激素,D錯誤。

故選C。二、多選題(共5題,共10分)9、A:B【分析】【分析】

1;試管嬰兒技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精;并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后,再經移植后產生后代的技術。

2;設計試管嬰兒技術是通過體外受精獲得許多胚胎;然后從中選擇符合要求的胚胎,再經移植后產生后代的技術。

【詳解】

A;“設計試管嬰兒”利用體外受精、胚胎移植、植入前胚胎遺傳學診斷技術等;A正確;

B;“設計試管嬰兒”與“試管嬰兒”均利用了體外受精技術;均為有性生殖,B正確;

C;“設計試管嬰兒”與“試管嬰兒”都要進行胚胎選擇;但二者選擇的目的不同,C錯誤;

D;體外受精獲得許多胚胎是“設計試管嬰兒”的第一步;D錯誤。

故選AB。

【點睛】10、B:D【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟:

(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲??;利用PCR技術擴增和人工合成。

(2)基因表達載體的構建:是基因工程的核心步驟;基因表達載體包括目的基因;啟動子、終止子和標記基因等。

(3)將目的基因導入受體細胞:根據(jù)受體細胞不同;導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法;基因槍法和花粉管通道法;將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術;②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術;③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定;抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A;將L1-GFP融合基因插入質粒P0時;使用了El和E4兩種限制性核酸內切酶,A錯誤;

B;可借助基因工程、核移植技術、早期胚胎培養(yǎng)及胚胎移植技術獲得轉基因的克隆牛;B正確;

C;可采用DNA分子雜交技術檢測該融合基因是否存在于轉基因牛的不同組織細胞中;抗原-抗體雜交技術用于檢測目的基因是否成功表達,C錯誤;

D;若在某轉基因牛皮膚細胞中觀察到綠色熒光;則說明L1基因在該細胞中完成表達,D正確。

故選BD。11、B:C:D【分析】【分析】

PCR技術:1;概念:PCR全稱為聚合酶鏈式反應;是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。2、原理:DNA復制。3、前提條件:要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。4、條件:模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)5、過程:①高溫變性:DNA解旋過程(PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶,高溫條件下氫鍵可自動解開);低溫復性:引物結合到互補鏈DNA上;③中溫延伸:合成子鏈。

【詳解】

A;過程①是由mRNA形成單鏈DNA的過程;表示逆轉錄,需要RNA、逆轉錄酶、引物、脫氧核苷酸等條件,A錯誤;

B;真核細胞中DNA的外顯子部分轉錄的RNA拼接形成mRNA;因此真核細胞的mRNA經過程①②逆轉錄過程獲得的DNA無內含子片段,B正確;

C;CG含量越高;氫鍵越多,結構越穩(wěn)定,因此過程③PCR擴增時引物中的CG含量會影響退火溫度,C正確;

D;新冠病毒遺傳物質是RNA;RT-PCR技術可應用于新冠病毒的核酸檢測,D正確。

故選BCD。

【點睛】12、A:B:D【分析】【分析】

免疫PCR是一種抗原檢測系統(tǒng);將一段已知序列的DNA片段標記到抗體2上,通過抗原抗體的特異性識別并結合,抗體2會和固定抗體1;抗生素形成復合物“固定抗體1—抗生素—抗體2”,再用PCR方法將這段DNA進行擴增,通過檢測PCR產物的量,即可推知固定抗體1上吸附的抗生素的量。

【詳解】

A;免疫PCR中所用的DNA不選用受檢樣品(牛乳)中可能存在的DNA。待檢測的牛乳中可能含有牛乳腺細胞的DNA(其上含有牛乳基因的DNA片段);若圖示中的DNA用牛乳基因中的DNA片段,經過PCR擴增后的產物中,不僅有抗體2上的DNA擴增產物,還可能有牛乳中本身含有的牛乳基因片段的擴增產物,使檢測結果偏大,A正確;

B;如果第三次沖洗不充分;可能使殘留的、呈游離狀態(tài)的抗體2上的DNA也作為PCR的模板參與擴增,會出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象,B正確;

CD;微量抗原抗體反應;是通過PCR技術擴增抗體2上連接的DNA,最后通過檢測擴增產物—DNA的量來確定抗生素的量的方法。因此,PCR擴增產物的量與牛乳中抗生素的量呈正相關,抗原、抗體的數(shù)量可通過PCR技術間接擴增放大,C錯誤,D正確。

故選ABD。13、B:C【分析】【分析】

制作果醋的菌種為原核生物中的醋酸菌。醋酸菌是一種好氧菌。當氧氣;糖源都充足時;醋酸菌將果汁中的糖分分解成醋酸;當氧氣充足、糖源缺乏時,醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A;家庭制作果酒、果醋和酸奶過程中有多種微生物參與發(fā)酵過程;因此均不是純種發(fā)酵,A錯誤;

B;果醋制作的溫度一般控制在30~35℃;果酒發(fā)酵的溫度一般控制在18~25℃,B正確;

C;泡菜腌制時需要乳酸菌發(fā)酵;乳酸菌是厭氧細菌,在無氧的情況下,將葡萄糖分解成乳酸,因此壇子加水密封的目的是營造缺氧環(huán)境,利于乳酸菌發(fā)酵,C正確;

D;當氧氣充足、糖源缺乏時;醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿幔珼錯誤。

故選BC。

【點睛】

本題考查考生運用所學知識解決問題的能力。三、填空題(共8題,共16分)14、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖15、略

【分析】【分析】

1.基因檢測可以把人體內的致病基因和易感基因檢測出來;通過采取一定的預防措施預防遺傳病的發(fā)生,但同時可能會帶來基因歧視等倫理道德方面的問題。

2.設計試管嬰兒不同于試管嬰兒;試管嬰兒是為了解決不孕不育的問題,而設計試管嬰兒是為了解決器官移植方面的醫(yī)療問題。

【詳解】

1.(1)基因身份證是指把每個人的致病基因和易感基因都檢測出來;并記錄在磁卡上,這樣到醫(yī)院看病時,只要帶上這種身份證,醫(yī)生就可以“對證”治療。

(2)反對基因檢測的人認為:目前人類對基因結構及基因間相互作用尚缺乏足夠的認識;要想通過基因檢測達到預防疾病的目的是困難的;況且人類的多基因病,既與基因有關,又與環(huán)境和生活習慣有關,有某種致病基因的人不見得就會患病。但是,基因檢測結果本身就已經足以給受檢者帶來巨大的心理壓力。個人基因資訊的泄露所造成的基因歧視,勢必造成奇特的失業(yè)大軍,即遺傳性失業(yè)大軍。個人基因資訊被暴露之后,還會造成個人婚姻困難;人際關系疏遠等嚴重后果。支持基因檢測的人認為:通過基因檢測可以對遺傳性疾病及早采取預防措施,適時進行治療,達到挽救患者生命的目的。對于基因歧視現(xiàn)象,可以通過正確的科學知識傳播、倫理道德教育和立法得以解決。

2.設計試管嬰兒需要因而具有特定的性別或遺傳性狀;因此胚胎移植前需要進行遺傳學診斷這一環(huán)節(jié),而試管嬰兒是為了解決不孕不育問題,不需要考慮嬰兒的性別等問題,不需要進行遺傳學診斷。二者的共同點是:兩者都是體外受精,并進行體外早期胚胎培養(yǎng),都要經過胚胎移植,都是有性生殖。

【點睛】

1.基因與疾病的關系:具有致病基因的個體不一定患遺傳?。灰驗樯锏男誀钸€受到環(huán)境因素的影響;沒有致病基因也可能患病,因為基因表達的蛋白質,在加工或修飾過程中出現(xiàn)錯誤,也會出現(xiàn)癥狀。

2.明確設計試管嬰兒和試管嬰兒目的的不同是解答本題的關鍵之一?!窘馕觥恐虏』蛞赘谢蚧蚪Y構預防疾病心理壓力預防措施基因歧視倫理道德需要不需要體外有性生殖16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】脲酶氨堿性增強升高pH的變化酚紅指示劑紅17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】抗蟲、抗病、抗逆轉基因植物,利用轉基因改良植物的品質18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提高動物生長速度、改善畜產品品質、用轉基因動物生產藥物19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個細胞細胞懸液原代傳代20、略

【分析】【詳解】

目前我國市場上的轉基因食品,從原料來源看,進口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關產品,國內生產的有棉籽油和番木瓜,故我國市場上有大豆等的轉基因產品?!窘馕觥磕壳拔覈袌錾系霓D基因食品,從原料來源看,進口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關產品,國內生產的有棉籽油和番木瓜。21、略

【分析】【詳解】

在日常生活中;我們遇到過的與克隆技術有關的問題有:

①瀕臨滅絕動物的克隆:克隆可以拯救瀕危的國家保護動物以及植物;我們可運用克隆,復制瀕臨滅絕的生物,讓其不至于在我們的生活中消失;

②農業(yè)克?。簯糜谵r業(yè)等領域;通過轉基因的方式,增加糧食的畝產量,提高土地的單位出產量;

③細胞克隆替代或者修復人體細胞問題;比如胚胎干細胞;

④畜牧業(yè)克隆:應用于畜牧業(yè),提升優(yōu)良品種群體基數(shù),縮短畜牧育種年限?!窘馕觥坑?,比如:①瀕臨滅絕動物的克?。虎谵r業(yè)克?。簯糜谵r業(yè)等領域,通過轉基因的方式,增加糧食的畝產量,提高土地的單位出產量;③細胞克隆替代或者修復人體細胞問題,比如胚胎干細胞;④畜牧業(yè)克?。簯糜谛竽翗I(yè),提升優(yōu)良品種群體基數(shù),縮短畜牧育種年限。四、判斷題(共1題,共9分)22、B【分析】【詳解】

基因工程技術可以使建立移植器官工廠的設想成為現(xiàn)實;說明并未開始實際應用。

故錯誤。五、實驗題(共4題,共28分)23、略

【分析】【分析】

根據(jù)題干信息分析;糖尿病模型斑馬魚的構建的原理是使胰島素基因表達受阻,而使胰島素基因表達受阻是通過給斑馬魚受精卵注射嗎啉反義寡核苷酸實線的;嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑,其作用的機理有兩種假說:可能是導致RNA前體上內含子2的對應序列不能被剪切,也可能是導致RNA前體上內含子2和外顯子3的對應序列同時被剪切。

(1)

根據(jù)引物2和引物3在胰島素基因片段上的位置;通過PCR擴增能得到內含子2的序列,若假說1成立,即嗎啉反義寡核苷酸導致RNA前體上內含子2的對應序列不能被剪切,故實驗組中應含有內含子2的序列,而對照組的該片段被切除了,因此用引物2和引|物3進行PCR反應,其結果為實驗組中有雜交帶,而對照組中無雜交帶。

故選AD。

(2)

若要證明假說2成立;即RNA前體上內含子2和外顯子3的對應序列同時被剪切下去,則可以選擇圖示引物5和引物2;引物5和引物6進行PCR,觀察是否有雜交帶出現(xiàn)。

(3)

由于DNA聚合酶不能從頭合成DNA;而只能從引物3′端延伸DNA鏈,因此DNA復制需要引物。

(4)

用胰蛋白酶處理斑馬魚囊胚中的內細胞團;可以獲得分散的斑馬魚胚胎干細胞,然后對其進行原代培養(yǎng),接著分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加輸卵管上皮細胞作為飼養(yǎng)層細胞,以提高斑馬魚胚胎干細胞的數(shù)量。

【點睛】

解答本題的關鍵是掌握基因的表達的相關知識點,明確基因轉錄出來的mRNA是要經過加工成為成熟的mRNA才能作為翻譯的模板的,并能夠根據(jù)題干提取有效信息進行答題?!窘馕觥?1)AD

(2)5、65;2

(3)DNA聚合酶不能從頭合成DNA;只能從3′端延伸DNA鏈,因此DNA復制需要引物。(得分點:“只能從3′端延伸DNA鏈”)

(4)胰蛋白酶內細胞團原代飼養(yǎng)層24、略

【分析】【分析】

制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基;其基本過程為計算;稱量、溶化、滅菌、倒平板。培養(yǎng)基中加入某種化學物質,以抑制不需要的微生物的生長,促進所需要的微生物生長,培養(yǎng)、分離出特定的微生物(如培養(yǎng)酵母菌和霉菌,可在培養(yǎng)基中加入青霉素;培養(yǎng)金黃色葡萄球菌,可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽)。

(1)

制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的基本操作步驟是計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。金黃色葡萄球菌具有高度耐鹽化的特性;培養(yǎng)基中加入7.5%NaC1不影響金黃色葡萄球菌生長的同時會抑制其他雜菌生長,起到了選擇的目的。

(2)

在制作血平板時需要等平板冷卻后;方可加入血液,以防止高溫破壞血細胞。在血平板上,由于金黃色葡萄球菌可破壞紅細胞而使其褪色,因此菌落的周圍會出現(xiàn)褪色圈。

(3)

測定土壤中金黃色葡萄球菌的數(shù)量時,一般采用稀釋涂布平板法。為了保證獲得菌落數(shù)在30~300之間適于計數(shù)的平板,需要選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng)。測定土壤中金黃色葡萄球菌的數(shù)量,一般選用104、105和106倍的稀釋液進行平板培養(yǎng);測定放線菌的數(shù)量,一般選用103、104、105倍的稀釋液進行平板培養(yǎng);測定真菌的數(shù)量,一般選用102、103、104倍的稀釋液進行平板培養(yǎng)。因此稀釋倍數(shù)較低的是真菌。由于當兩個或多個細胞連在一起時;平板上觀察到的只是一個菌落,因此實驗結果統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低。

【點睛】

本題主要考查微生物的培養(yǎng)與分離,考查學生的實驗與探究能力?!窘馕觥?1)計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板7.5%NaC1不影響金黃色葡萄球菌生長的同時會抑制其他雜菌生長。

(2)高溫破壞血細胞褪色圈(或溶血圈)

(3)稀釋涂布平板30~300真菌當兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落25、略

【分析】【分析】

腐乳的制作過程主要是:讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。

1;讓豆腐上長出毛霉:將豆腐塊平放在籠屜內;將籠屜中的溫度控制在15~18℃,并保持在一定的濕度。約48h后,毛霉開始生長,3d之后菌絲生長旺盛,5d后豆腐塊表面布滿菌絲。豆腐塊上生長的毛霉來自空氣中的毛霉孢子。

2;加鹽腌制:將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中;同時逐層加鹽,隨著層數(shù)的加高而增高鹽量,接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。加鹽研制的時間約為8d左右.加鹽可以析出豆腐中的水分,使豆腐塊變硬,在后期的制作過程中不會過早酥爛。同時,鹽能抑制微生物的生長,避免豆腐塊腐敗變質。

3;加鹵湯裝瓶:鹵湯直接關系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的。鹵湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等;含量一般控制在12%左右。加酒可以抑制微生物的生長,同時能使腐乳具有獨特的香味。香辛料種類很多,如胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等。香辛料可以調制腐乳的風味,也具有防腐殺菌的作用。可據(jù)個人口味配置鹵湯。

4;密封腌制。

【詳解】

(1)前發(fā)酵過程中,毛霉等微生物產生的蛋白酶促進豆腐中的蛋白質水解產生GABA,使得毛坯的GABA含量明顯升高。

(2)步驟②中;加鹽腌制的正確操作是將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中,同時逐層加鹽,隨著層數(shù)的加高而增高鹽量,接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。鹽能抑制微生物的生長,避免豆腐塊腐敗變質。此過程腐乳干重中的GABA含量下降的原因可能是:①食鹽會抑制毛霉生長,酶的活性降低;②豆腐中的水分滲出,部

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