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文檔簡介

1、實驗一,用生長譜法測定微生物的碳源要求,1,一、目的要求,學(xué)習(xí)用生長譜法測定微生物營養(yǎng)需要（碳源）的基本原理和方法。,2,二、基本原理,為了使微生物生長、繁殖，必須供給所需要的碳源、氮源、無機鹽、生長因子等，如果缺少其中一種，微生物便不能生長。 培養(yǎng)基的六大營養(yǎng)因素： 碳源 氮源 能源 無機鹽 生長因子 水,3,根據(jù)這一特性，可將微生物接種在一種只缺少某種營養(yǎng)物的完全合適的瓊脂培養(yǎng)基中，倒成平板，再將所缺的營養(yǎng)物（例如各種碳源）點植于平板上，經(jīng)適溫培養(yǎng)，該營養(yǎng)物便逐漸擴散于植點周圍。該微生物若需要此種營養(yǎng)物，便在這種營養(yǎng)物擴散處生長繁殖，微生物繁殖之處便出現(xiàn)圓形落圈，即生長圖形，故稱此法為生長

2、譜法。 這種方法可以定性的測定微生物對各種營養(yǎng)物質(zhì)的需要。在微生物育種和營養(yǎng)缺陷型的鑒定中也常用此法。,4,三、實驗材料,1培養(yǎng)基：基礎(chǔ)鹽合成培養(yǎng)基（無碳培養(yǎng)基），固體 NaCl 1g KH2PO4 0.5g K2HPO4 0.5g NH4SO4 2g MgSO47H2O 0.2g 瓊脂 20g pH 7.0 / 1L 2. 糖類（10%,v/v ，115oC，30min高壓滅菌） 木糖，葡萄糖，甘露醇，麥芽糖，蔗糖，乳糖 3. 實驗材料：無菌平板，無菌濾紙片，打孔器等 4. 實驗菌種：大腸桿菌（E.coli）,5,四、實驗內(nèi)容,1、將無碳培養(yǎng)基溶化后冷卻至到50左右。 2、用無菌吸管吸取0.5ml E.coli 懸液于直徑為12的無菌培養(yǎng)皿中，將上述冷卻的培養(yǎng)基傾倒于培養(yǎng)皿中，輕輕在桌面混勻。 3、待培養(yǎng)基凝固后，在平板背面用記號筆劃分為六個區(qū)，在平板背面邊緣處標(biāo)記要點植的各種糖類。 4、在桌面酒精燈火焰處用鑷子分別加入蘸有不同糖類的濾紙片。 5、待平板吸收干燥后，倒置

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