實驗室生物安全與個人防護(hù)最新版本

1、.,實驗室生物安全與個人防護(hù),浦東新區(qū)人民醫(yī)院 程斌,.,主要內(nèi)容,一、實驗室生物安全 二、個人防護(hù),.,一、實驗室生物安全,（一）中國實驗室生物安全相關(guān)法律法規(guī) 1、國家法律： 中華人民共和國刑法修正案 中華人民共和國主席令（第51號）2006.6.29 中華人民共和國傳染病防治法 中華人民共和國主席令（第17號）2004.12.1,.,2、國務(wù)院條例 病原微生物實驗室生物安全管理條例 中華人民共和國國務(wù)院令（第424號）2004.11.12 突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急條例 中華人民共和國國務(wù)院令（第376號）2003.5.9 醫(yī)療廢物管理條例 中華人民共和國國務(wù)院令（第380號）2003.6.6

2、,.,3、部門規(guī)章 可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定 中華人民共和國衛(wèi)生部令（第45號）2006.2.1 人間傳染的病原微生物名錄 中華人民共和國衛(wèi)生部文件（衛(wèi)科教發(fā)200615號）2006.2.1 人間傳染的高致病性病原微生物實驗室和實驗活動生物安全審批管理辦法 中華人民共和國衛(wèi)生部令（第50號）2006.8.1 病原微生物實驗室安全環(huán)境管理辦法 國家環(huán)境保護(hù)總局令（第32號）2006.5.1 醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法 中華人民共和國衛(wèi)生部令（第35號）2003.10.15,.,醫(yī)療廢物管理行政處罰辦法 中華人民共和國衛(wèi)生部、環(huán)境保護(hù)總局令（第21號）2004.

3、6.1 醫(yī)療廢物分類目錄 中華人民共和國衛(wèi)生部、環(huán)境保護(hù)總局（衛(wèi)醫(yī)發(fā)2003287號）2003.10.10 醫(yī)療廢物專用包裝物、容器標(biāo)準(zhǔn)和警示標(biāo)識規(guī)定 環(huán)境保護(hù)總局（環(huán)發(fā)2003188號）2003.11.20 醫(yī)療廢物集中處置技術(shù)規(guī)范 環(huán)境保護(hù)總局（環(huán)發(fā)2003206號）2003.12.26 人間傳染的病原微生物菌（毒）種保藏機構(gòu)管理辦法 中華人民共和國衛(wèi)生部令（第68號）2009.7.18,.,4、國家標(biāo)準(zhǔn)及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 實驗室生物安全通用要求 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)（GB19489-2008）2008.12.26 生物安全實驗室建筑技術(shù)規(guī)范 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)（GB50346-2004）2

4、004.9.1 微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準(zhǔn)則 中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（WS233-2002）2003.8.1 生物安全柜 中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（YY0569-2005）2008.6.1 生物安全柜 中華人民共和國建筑工業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（JG170-2005）2005.6.1,.,(二)、實驗室生物安全,實驗室不可能完全沒有風(fēng)險。應(yīng)考慮實驗過程中涉及的所有因素，盡可能降低風(fēng)險。 1.充分保障工作人員避免所操作生物因子的 危害，確保其不受實驗對象的侵染 2.保證危險生物因子不向?qū)嶒炇彝鈹U散, 確保周圍環(huán)境不受其污染,.,病原微生物根據(jù)危害不同可以分為4類,第一類，是指能夠引起人類或者

5、動物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。 第二類，是指能夠引起人類或者動物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者 間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。 第三類，是指能夠引起人類或者動物疾病，但一般情況下對人、動 物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險有限，實驗室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。 第四類，是指在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物。,.,國務(wù)院發(fā)布的病原微生物實驗室生物安全管理條例中要求，根據(jù)實驗室對病原微生物的生物安全防護(hù)水平不同，將實驗室分為一級、二級、三級和四級。一級、二級實驗室不得從事高致病性病原微生物的實驗活動

6、，三級、四級實驗室從事高致病性病原微生物的實驗活動。,.,BSL-1 、BSL-2實驗室設(shè)施和設(shè)備要求,根據(jù)實驗室生物安全通用要求GB19489-2008的要求， BSL-1實驗室標(biāo)準(zhǔn)條款有： 實驗室的門應(yīng)有可視窗并可鎖閉，門鎖及門的開啟方向應(yīng)不妨礙室內(nèi)人員逃生。 每個實驗室應(yīng)設(shè)洗手池，宜設(shè)置在靠近出口處。 在實驗室門口處應(yīng)設(shè)掛衣裝置，個人便裝與實驗室工作服分開設(shè)置。 實驗室的墻壁、天花板和地面應(yīng)宜清潔、不滲水、耐化學(xué)品和消毒滅菌劑的腐蝕。地面應(yīng)平整、防滑，不應(yīng)鋪設(shè)地毯。 實驗室臺柜和座椅應(yīng)穩(wěn)固，邊角應(yīng)圓滑。 實驗室臺柜和其擺放應(yīng)便于清潔，實驗臺面防水，耐腐蝕、耐熱和堅固。,.,實驗室應(yīng)有足夠

7、空間和臺面擺放實驗設(shè)備和物品。 根據(jù)工作性質(zhì)和流程合理擺放實驗室設(shè)備、臺柜、物品等，避免相互干擾、交叉污染，并應(yīng)不妨礙逃生和急救。 實驗室可以利用自然通風(fēng)。如果應(yīng)用機械通風(fēng)，應(yīng)避免交叉污染。理解：機械通風(fēng)應(yīng)單向風(fēng)流動，空調(diào)不與其他房間交叉 如果有可開啟的窗戶，應(yīng)安裝紗窗。 實驗室內(nèi)應(yīng)避免不必要的反光和強光。 若操作刺激和腐蝕性物質(zhì)，應(yīng)在30m內(nèi)設(shè)洗眼裝置，必要時設(shè)緊急噴淋裝置。 若操作有毒、刺激性、放射性揮發(fā)物質(zhì)，應(yīng)在風(fēng)險評估的基礎(chǔ)上，配備適當(dāng)?shù)呢?fù)壓排風(fēng)柜。 若使用高毒性、放射性等物質(zhì)，應(yīng)配備相應(yīng)的安全設(shè)施、設(shè)備和個體防護(hù)裝備，應(yīng)符合國家和地方的相關(guān)規(guī)定和要求。,.,若使用高壓氣體，應(yīng)有安全措

8、施，應(yīng)符合國家、地方的相關(guān)規(guī)定和要求。 應(yīng)設(shè)緊急照明裝置。 應(yīng)有足夠的電力供應(yīng)。 應(yīng)有足夠的電源插座，避免多臺設(shè)備使用共同的電源插座 供水和排水管道系統(tǒng)應(yīng)不滲漏，下水應(yīng)有防回流設(shè)計。 應(yīng)配備使用的應(yīng)急器材，如消防器材，救急器材等。 應(yīng)配備適用的通訊設(shè)備。 必要時應(yīng)配備適當(dāng)?shù)南緶缇O(shè)備。,.,BSL-2實驗室設(shè)施和設(shè)備要求,BSL-2實驗室在符合BSL-1實驗室的要求基礎(chǔ)上，滿足以下7條。 實驗室主入口的門、放置生物安全柜實驗室間的門應(yīng)可自動關(guān)閉；實驗室主入口的門應(yīng)有進(jìn)入控制措施。 實驗室工作區(qū)域外應(yīng)有存放備用物品的條件。 應(yīng)在實驗室工作區(qū)配備洗眼裝置設(shè)施。 應(yīng)在實驗室或其所在的建筑物內(nèi)配備高

9、壓蒸汽滅菌器或其他適當(dāng)?shù)南緶缇O(shè)備，所配備的消毒滅菌設(shè)備應(yīng)以風(fēng)險評估為依據(jù)。理解：高壓蒸汽滅菌器可多個實驗室公用，應(yīng)靠近BSL-2 應(yīng)在操作病原微生物樣本的實驗間內(nèi)配備生物安全柜。,.,應(yīng)按照產(chǎn)品的設(shè)計要求安裝和使用生物安全柜，如果安全柜的排風(fēng)在室內(nèi)循環(huán)，室內(nèi)應(yīng)具備通風(fēng)換氣的條件；如果需要使用管道排風(fēng)的生物安全柜，應(yīng)通過獨立于建筑物其他公共通風(fēng)系統(tǒng)的管道排出。 應(yīng)有可靠的電力供應(yīng)。必要時，重要設(shè)備如培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰箱等設(shè)備應(yīng)配置備用電源。,BSL-2實驗室設(shè)施和設(shè)備要求,.,分子生物學(xué)相關(guān)檢測的生物安全級別,分子生物學(xué)抗體檢測抗原檢測和相關(guān)的免疫學(xué)檢測應(yīng)在符合二級生物安全實驗室（BSL

10、-2）要求的PCR實驗室中進(jìn)行. PCR實驗室要求分為試劑準(zhǔn)備區(qū)，樣本制備區(qū)，產(chǎn)物擴增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)。 3. 核酸提取和檢測應(yīng)在符合二級生物安全實驗室（BSL-2）要求的PCR實驗室中進(jìn)行。,.,二、個人防護(hù),個人防護(hù)裝備 工作人員的自我防護(hù),.,（一）個人防護(hù)裝備,所涉及的防護(hù)部位 ： 裝備包括： 1、眼睛 1、 眼鏡（安全鏡、護(hù)目鏡） 2、頭面部 2、口罩、帽子 3、軀體 3、防護(hù)衣 4、手 4、手套 5、足 5、鞋套,.,職 業(yè) 暴 露 主要方 式,皮膚針刺傷或銳器切割傷； 粘膜或破損皮膚（如皸裂、皮膚炎癥等）接觸感染性材料； 皮膚雖然完整無破損，但大面積或長時間（幾分鐘或更長）接觸感染

11、性材料,.,（二）工作人員的自我防護(hù),WHO推薦的普遍性防護(hù)原則認(rèn)為，在為病人提供醫(yī)療服務(wù)時，無論是病人還是病人的血液和體液，也不論他們是陽性還是陰性，都應(yīng)當(dāng)作為具有潛在性傳染性加以防護(hù)。,.,檢驗人員自我防護(hù)的主要內(nèi)容,手套 1、 手套應(yīng)在實驗室工作時使用。 2、在接觸感染性物質(zhì) （血液、體液、分泌液、滲出液、以及接觸粘膜和非完整皮膚時），必須使用合適的手套以保護(hù)工作人員避免受到污染物濺出或生物污染的事故所造成的損害。 3、手套被污染，應(yīng)該盡可能早的脫下，消毒后丟棄。 4、手套應(yīng)按所從事操作的性質(zhì)符合舒適、靈活、握牢、耐磨、耐扎和耐撕的要求，并應(yīng)對所涉及的危險提供足夠的防護(hù)。 5、對實驗室工

12、作人員進(jìn)行手套選擇、使用前及使用后的配戴及摘 除等培訓(xùn)。 6、一次性手套不得重復(fù)使用。 7、一次性手套必須先消毒后丟棄。,.,檢驗人員自我防護(hù)的主要內(nèi)容,口罩和防護(hù)眼鏡,當(dāng)處理血液、體液、分泌物、排泄物等有可能濺出時，應(yīng)戴口罩和防護(hù)眼鏡。 安全鏡 護(hù)目鏡,.,檢驗人員自我防護(hù)的主要內(nèi)容,防護(hù)服 （實驗服、隔離衣、連體衣、圍裙以及正壓防護(hù)服） 1、在實驗室中工作人員應(yīng)該一直或持續(xù)穿上防護(hù)服 2、清潔的防護(hù)服應(yīng)放置在專用存放處 3、污染的防護(hù)服應(yīng)放置在有標(biāo)志的防漏消毒袋中 4、每隔適當(dāng)?shù)臅r間應(yīng)更換防護(hù)服以確保清潔 5、當(dāng)防護(hù)服已被危險材料污染后應(yīng)立即更換 6、離開實驗室區(qū)域之前應(yīng)脫去防護(hù)服。,.,

13、檢驗人員自我防護(hù)的主要內(nèi)容,鞋套 當(dāng)實驗室中存在物理、化學(xué)和生物危險因 子的情況下，穿合適的鞋子和鞋套或靴套。 可以防止實驗人員足部（鞋襪）避免受到 損傷。 BSL-2和BSL-3實驗室要堅持穿鞋套或靴套。,.,.,檢驗人員自我防護(hù)的主要內(nèi)容,銳器 實驗用過的一次性槍頭應(yīng)將其直接放入堅固、不能穿透的容器內(nèi)，待實驗結(jié)束之后一并焚燒處理。,.,實驗室人員的防護(hù)要點,實驗室檢測工作過程中要嚴(yán)格執(zhí)行實驗室安全操作規(guī)程，并實施普遍性防護(hù)措施； 實驗室應(yīng)備有必要的消毒劑和消毒設(shè)備； 把所有標(biāo)本都應(yīng)看作潛在的傳染源； 病人的標(biāo)本應(yīng)放在固定的容器里，避免污染到容器外，如果潑灑出來，應(yīng)盡快用消毒劑進(jìn)行處理； 標(biāo)

14、本的運送均應(yīng)放入有蓋的容器內(nèi)； 離心、攪拌、超聲、吸吹標(biāo)本時會產(chǎn)生大量的氣溶膠，這些操作應(yīng)在超凈工作臺中進(jìn)行； 盡量避免使用銳器，如果確實需要使用銳器，建議在使用銳器前更換兩副新的手套，并小心操作，避免戳傷； 操作時如有標(biāo)本、檢測試劑外濺時應(yīng)及時消毒； 工作結(jié)束后，在收檢和消毒工作臺面時應(yīng)小心避免被利器損傷。,.,總結(jié),遇到手部皮膚有開放性傷口及其他不適于工作的情況，應(yīng)暫停工作。 皮膚的微小傷口、擦傷、皸裂等，應(yīng)用防水敷料嚴(yán)密覆蓋。 應(yīng)為每一名在實驗室工作的人員提供充足的防護(hù)服、一次性乳膠手套、口罩、帽子和鞋套。應(yīng)將清潔的防護(hù)服和其他個人防護(hù)用品置于實驗室清潔區(qū)內(nèi)的專用處存放。 實驗室應(yīng)設(shè)應(yīng)急沖洗眼睛裝置。,.,總結(jié),工作人員上崗前必須經(jīng)過HIV抗體和乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等肝炎病毒標(biāo)志物檢測，應(yīng)接種乙肝疫苗。應(yīng)每年對工作人員采血檢測HIV抗體，血清應(yīng)長期保留。 進(jìn)實驗室工作前要摘除首飾，修剪長的帶刺的指甲，以免刺破手套。 嚴(yán)禁在實驗室內(nèi)進(jìn)食、飲水、吸煙和化妝。 實驗操作時應(yīng)穿合適的防護(hù)服（白大衣、隔離衣或一次性工作服）、戴手套和口罩、鞋套。如接觸物的傳染性大，應(yīng)戴雙層手套；含有HIV的樣品有可能噴濺時，應(yīng)戴防護(hù)眼鏡、防水（如塑料）圍裙。工作完畢，先脫去手套，再脫去防護(hù)服，用肥皂和流動水洗手。穿過的污染的防護(hù)服應(yīng)及時放入污