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文檔簡介
1、酵母菌的形態(tài)觀察,一、目的要求 1.觀察酵母菌的形態(tài)及出芽生殖方式,學(xué)習(xí)區(qū)分酵母菌死活細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法 2.掌握酵母菌一般形態(tài)特征及其與細(xì)菌的區(qū)別,二、基本原理 酵母菌是不運(yùn)動的單細(xì)胞真核微生物,其大小通常比常見細(xì)菌大幾倍甚至幾十倍,大多數(shù)酵母以出芽方式進(jìn)行無性繁殖,有的分裂繁殖;有性繁殖是通過接合產(chǎn)生子囊孢子。本實(shí)驗(yàn)是通過美藍(lán)染液水浸片來觀察酵母的形態(tài)和出芽生殖方式。 美藍(lán)是一種無毒性的染料,它的氧化型呈藍(lán)色,還原型無色,用美藍(lán)對酵母的活細(xì)胞進(jìn)行染色時,由于細(xì)胞的新陳代謝作用,細(xì)胞內(nèi)具有較強(qiáng)的還原能力,能使美藍(lán)由藍(lán)色的氧化型變?yōu)闊o色的還原型,因此具有還原能力的酵母活細(xì)胞是無色的而死細(xì)胞或代謝作
2、用微弱的衰老細(xì)胞則呈藍(lán)色或淡藍(lán)色,借此即可對酵母菌的死細(xì)胞或活細(xì)胞進(jìn)行鑒別,并可計算其成活率。,三、器材 1.菌種:釀酒酵母培養(yǎng)約2d的麥芽汁斜面培養(yǎng)物 2.溶液或試劑 :0.05%和0.1%呂氏堿性美藍(lán)染色液,革蘭染色用碘液 3.儀器或其他用具: 顯微鏡,載玻片,蓋玻片等,四、操作步驟 1.美藍(lán)浸片的觀察 (1)在載玻片中央加一滴0.1%呂氏堿性美藍(lán)染色液,然后按無菌操作用接種環(huán)挑取少量酵母菌苔放在染液中,混合均勻。 (2)用鑷子取一塊蓋玻片,先將一邊與菌液接觸,然后慢慢將蓋玻片放下使其蓋在菌液上。 (3)將制片放置約3分鐘后鏡檢,先用低倍鏡然后用高倍鏡觀察酵母的形態(tài)和出芽情況,并根據(jù)顏色來區(qū)別死活細(xì)胞。 (4)染色約0.5小時后再次進(jìn)行觀察,注意死細(xì)胞數(shù)量是否增加。 (5)用0.05%呂氏堿性美藍(lán)染液重復(fù)上述操作。,2.水-碘液浸片的觀察 在載玻片中央加一小滴革蘭染色用碘液,然后在其上加3小滴水,取少許酵母菌苔放在水-碘液中混勻,蓋上蓋玻片后鏡檢。,六.實(shí)驗(yàn)報告 1.結(jié)果 繪圖說明你所觀察到的酵母菌的形態(tài)特征。 2.思考題 (1)呂氏美藍(lán)染液濃度和作用時間的不同,對酵母菌死細(xì)胞數(shù)
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