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實(shí)驗(yàn)復(fù)習(xí) (細(xì)胞呼吸以前內(nèi)容),必修一所學(xué)實(shí)驗(yàn) 觀察DNA和RNA在細(xì)胞中分布 檢測(cè)生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì) 顯微鏡的使用 用高倍鏡觀察線粒體和葉綠體 探究影響酶活性的因素 觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原,一. 觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布 實(shí)驗(yàn)原理:DNA遇甲基綠呈綠色,RNA可被吡羅紅染成紅色 實(shí)驗(yàn)步驟,實(shí)驗(yàn)結(jié)果: 細(xì)胞核呈綠色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色. 分布:真核生物的DNA主要分布在細(xì)胞核中,線粒體和葉綠體內(nèi)也含有少量 DNA;RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。,二.檢測(cè)生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì) 實(shí)驗(yàn)原理:可溶性糖中的還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖),與斐林試劑發(fā)生作用, 可以生成磚紅色的沉淀。脂肪可以被蘇丹III染成橘黃色。蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用, 可以產(chǎn)生紫色反應(yīng)。 1、還原糖的檢測(cè) 還原性糖:有還原性基團(tuán)游離醛基或酮基的糖;如葡萄糖、果糖、麥芽糖、 (1)材料的選取:還原糖含量高,白色或近于白色,如蘋(píng)果,梨,白蘿卜。 (2)試劑:斐林試劑(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液) ,現(xiàn)配現(xiàn)用。 (3)步驟:取樣液2mL于試管中加入剛配的斐林試劑1mL(斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入)水浴加熱2min左右觀察顏色變化(淺藍(lán)色棕色磚紅色),2、脂肪的檢測(cè) (1)材料的選?。汉玖吭礁叩慕M織越好,如花生的子葉。 (2)步驟:制作切片(切片越薄越好)將最薄的花生切片放在載玻片中央 染色(滴蘇丹染液23滴切片上23min后吸去染液滴體積分?jǐn)?shù)50%的酒精洗去浮色吸去多余的酒精) 制作裝片(滴12滴清水于材料切片上蓋上蓋玻片) 鏡檢鑒定(顯微鏡對(duì)光低倍鏡觀察高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒),3、蛋白質(zhì)的檢測(cè) (1)試劑:雙縮脲試劑(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液) (2)步驟:試管中加樣液2mL加雙縮脲試劑A液1mL,搖勻加雙縮尿試劑B液4滴,搖勻觀察顏色變化(紫色),三.顯微鏡的使用 1、顯微鏡的使用:取鏡安放對(duì)光 壓片觀察收放。 (1)低倍鏡使用:(觀察任何標(biāo)本都必須先 用低倍鏡,且標(biāo)本應(yīng)透明) (2)高倍鏡使用: 先使用低倍鏡確定目標(biāo)移動(dòng)裝片,使目標(biāo) 位于視野中央轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,換用高倍鏡 調(diào)焦(轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋)(視野較暗,可調(diào)反 光鏡或光圈),四.用高倍鏡觀察線粒體和葉綠體 1、材料:新鮮蘚類葉、黑藻葉或菠菜葉,口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片 2、原理:葉綠體在顯微鏡下觀察,綠色,球形或橢球形。 用健那綠染液染色后的口腔上皮細(xì)胞中線粒體成藍(lán)綠色,細(xì)胞質(zhì)接近無(wú)色。,五探究影響酶活性的因素,六觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原 (一)質(zhì)壁分離 原理:細(xì)胞液濃度細(xì)胞外溶液濃度時(shí),細(xì)胞吸水;細(xì)胞液濃度細(xì)胞外溶液濃度時(shí),細(xì)胞失水 細(xì)胞壁與原生質(zhì)層的伸縮能力不同。 1、條件:細(xì)胞內(nèi)外溶液濃度差,活細(xì)胞,大液泡 2、材料:紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞(具紫色大液泡),質(zhì)量濃度0.3g/mL的蔗糖溶液,清水等。 3、步驟:制作洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞臨時(shí)裝片觀察蓋玻片一側(cè)滴蔗糖溶液,另一側(cè)用吸水紙吸引觀察(液泡由大到小,顏色由淺變深,原生質(zhì)層與細(xì)胞壁分離)蓋玻片一側(cè)滴清水, 另一側(cè)用吸水紙吸引觀察(質(zhì)壁分離復(fù)原) 4、結(jié)論: 細(xì)胞外溶液濃度 細(xì)胞內(nèi)溶液濃度,細(xì)胞失水 質(zhì)壁分離 細(xì)胞外溶液濃度 細(xì)胞內(nèi)溶液濃度,細(xì)胞吸水 質(zhì)壁分離復(fù)原,(二)植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和復(fù)原 1原理:成熟(有明顯液泡)的植物細(xì)胞能夠與外界溶液組成一個(gè)滲透系統(tǒng),通過(guò)滲透作用的方式吸水或失水。 2應(yīng)用:(1)可以用于測(cè)定細(xì)胞液的濃度 (2)可以用于判斷細(xì)胞的死活 3.注意問(wèn)題: (1)細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離后,細(xì)胞壁與細(xì)胞膜之間的空隙充滿的是0.3mg/mL蔗糖溶液。 (2)動(dòng)物細(xì)胞能發(fā)生滲透作用但不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離。,(三)注意事項(xiàng): 1.選材:選取紫色洋蔥鱗片葉外表皮。其細(xì)胞液為紫色,在顯微鏡下與無(wú)色透明的細(xì)胞壁容易區(qū)分,觀察到的質(zhì)壁分離和復(fù)原效果明顯。另外,取新鮮水綿、黑藻葉、南瓜表皮也可以做這個(gè)實(shí)驗(yàn)。 2.試劑:選用0.3g/ml 蔗糖糖溶液。濃度過(guò)高,細(xì)胞質(zhì)壁分離速度雖然很快,但不久就會(huì)將細(xì)胞殺死,細(xì)胞不能進(jìn)行質(zhì)壁分離復(fù)原;若濃度過(guò)低,則不能引起細(xì)胞質(zhì)壁分離或速度太慢。 另外,8% 食鹽溶液、5%的硝酸鉀溶液、一定濃度的尿素、甘油也可使用,但后面三者在引起質(zhì)壁分離后可自動(dòng)復(fù)原。 3.時(shí)間的控制:做好質(zhì)壁分離的實(shí)驗(yàn)后,不久就要做質(zhì)壁分離復(fù)原實(shí)驗(yàn)。避免使質(zhì)壁分離的細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間處于較高濃度的外界溶液中,細(xì)胞過(guò)度失水而導(dǎo)致死亡。從而觀察不到質(zhì)壁分離復(fù)原的現(xiàn)象。,用高倍顯微鏡觀察黑藻葉綠體時(shí),可見(jiàn)葉綠體 A具有雙層膜 B呈綠色帶狀 C內(nèi)部有許多粒 D呈綠色橢球形,對(duì)下表中所列待測(cè)物質(zhì)的檢測(cè),所選用 的試劑及預(yù)期結(jié)果都正確的是,A B C D,用測(cè)微尺測(cè)量某個(gè)洋蔥表皮細(xì)胞的長(zhǎng)度時(shí),下列目鏡的組合中,視野目鏡測(cè)微尺每小格所代表的實(shí)際長(zhǎng)度最小的是 目鏡10 物鏡10 目鏡16 物鏡40 B. C. D. ,下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)及顯色結(jié)果的敘述,錯(cuò)誤的有 A水浴加熱條件下,蔗糖與斐林試劑發(fā)生作用生成磚紅色沉淀 B沸水浴條件下,脫氧核苷酸與二苯胺發(fā)生作用呈現(xiàn)藍(lán)色 C常溫條件下,蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用呈現(xiàn)紫色 D常溫條件下,核糖核酸與甲基綠作用呈現(xiàn)綠色,下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)操作的敘述中,正確是 A將斐林試劑直接加入還原糖溶液中,即可產(chǎn)生磚紅色沉淀 B在高倍顯微鏡下觀察細(xì)胞,視野中有的細(xì)胞清晰,有的細(xì)胞模糊,其原因最可能是切片厚薄不均 C觀察核酸在細(xì)胞中分布的實(shí)驗(yàn)中,解離的目的是為了殺死細(xì)胞 D用二苯胺試劑鑒定DNA時(shí),需將提取的DNA絲狀物溶于酒精,用班氏試劑鑒別健康人的下列四種液體,出現(xiàn)紅黃色沉淀的是 血清 B. 唾液 C. 胃液 D. 尿液,用高倍顯微鏡觀察黑藻葉片細(xì)胞,正確的結(jié)論是 A葉綠體在細(xì)胞內(nèi)是固定不動(dòng)的 B葉綠體在細(xì)胞是均勻分布的 C葉綠體的存在是葉片呈綠色的原因 D葉肉細(xì)胞含有葉綠體,不含線粒體,對(duì)于以下三個(gè)實(shí)驗(yàn)的相關(guān)敘述正確的是 觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原 觀察DNA、RNA在細(xì)胞中的分布 低溫誘導(dǎo)染色體加倍 A三個(gè)實(shí)驗(yàn)均要使用顯微鏡進(jìn)行觀察 B三個(gè)實(shí)驗(yàn)都需要進(jìn)行染色 C三個(gè)實(shí)驗(yàn)均必須設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn) D三個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中細(xì)胞均需保持活性,用洋蔥鱗片葉表皮制備“觀察細(xì)胞質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)”的臨時(shí)
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