免疫題答案.doc

1、試述T 淋巴細(xì)胞的活化機(jī)制?答：T細(xì)胞特異性識(shí)別APC 所提呈的MHC-抗原肽復(fù)合物，并被激活和發(fā)生增生，進(jìn)而分化成效應(yīng)細(xì)胞。在上述過程中，T細(xì)胞均需要兩個(gè)來自胞外的信號(hào)刺激,即淋巴細(xì)胞活化的雙信號(hào)作用。 T 細(xì)胞的第一激活信號(hào)主要來自TCR與MHC 分子-抗原肽復(fù)合物的特異性結(jié)合,即抗原識(shí)別。另外,CD4和CD8分子作為共受體,可分別與MHC-II 及MHC-I 類分子結(jié)合,除可增強(qiáng)T細(xì)胞與APC 間的黏附作用外,還參與第一激活信號(hào)的啟動(dòng)和轉(zhuǎn)導(dǎo)。 T細(xì)胞活化的第二信號(hào)來自協(xié)同刺激分子,故又稱協(xié)同刺激信號(hào),即由抗原提呈細(xì)胞（APC）或靶細(xì)胞表面的協(xié)同刺激分子（如：B-7、ICOSL、CD40、ICAM-1等）與T細(xì)胞表面的協(xié)同刺激分子（如：CD28、CTLA-4、ICOS、CD40L、LFA-1等）相互作用產(chǎn)生。其中如B-7與CD28結(jié)合對(duì)T細(xì)胞早期活化起協(xié)同刺激作用，B-7與CTLA-4結(jié)合為T細(xì)胞活化后起抑制性協(xié)同刺激作用。缺乏協(xié)同刺激信號(hào)，T細(xì)胞活化不充分，不能表現(xiàn)效應(yīng)功能，或使抗原特異性T淋巴細(xì)胞凋亡，或被誘導(dǎo)呈無能狀態(tài)。T細(xì)胞活化需要第一，第二信號(hào)共同作用，兩者缺一不可。2、試述NK細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的殺傷途徑及分子機(jī)制?答：（1）穿孔素/顆粒酶途徑：即抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性（ADCC）?；罨腘K細(xì)胞可釋放穿孔素與顆粒酶，其中穿孔素可發(fā)揮類似補(bǔ)體膜攻擊復(fù)合物的功能，在有鈣離子存在的條件下，可在靶細(xì)胞膜上形成“孔道”，使水電解質(zhì)迅速進(jìn)入胞內(nèi)至靶細(xì)胞崩解破壞。顆粒酶是一種絲氨酸蛋白酶，可循穿孔素形成的“孔道”進(jìn)入靶細(xì)胞內(nèi)，通過激活凋亡相關(guān)的酶系統(tǒng)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。（2）Fas/FasL途徑：活化后NK細(xì)胞（FasL）靶細(xì)胞（Fas） 形成Fas三聚體 胞漿內(nèi)的死亡結(jié)構(gòu)域相聚成簇 與Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白結(jié)合 募集和激活caspase8 caspase8級(jí)聯(lián)反應(yīng)導(dǎo)致靶細(xì)胞凋亡。（3）TNF-/TNFR-1途徑：TNF- 靶細(xì)胞（I型TNF受體）結(jié)合形成TNF-R三聚體 胞漿內(nèi)的死亡結(jié)構(gòu)域相聚成簇 激活caspase8 導(dǎo)致靶細(xì)胞凋亡。（4）抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（ADCC）：NK細(xì)胞表達(dá)的FcRA (CD16)主要結(jié)合人的IgG1和IgG3的Fc端（C2、C3功能區(qū)），在針對(duì)靶細(xì)胞特異性IgG抗體的介導(dǎo)下，可殺傷相應(yīng)的靶細(xì)胞，這一殺傷過程稱為抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。IL-2和IFN-明顯增強(qiáng)NK細(xì)胞介導(dǎo)的ADCC作用。NK細(xì)胞發(fā)揮ADCC后，其本身表達(dá)Fas并可通過Fas/FasL機(jī)制發(fā)生化活誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡。3、試述腫瘤免疫治療的方法有哪些？簡(jiǎn)述其原理？答：腫瘤免疫治療是指通過激發(fā)和增強(qiáng)及機(jī)體的免疫功能，以達(dá)到控制和殺傷腫瘤細(xì)胞的目的。根據(jù)機(jī)體抗腫瘤免疫效應(yīng)機(jī)制，腫瘤免疫治療可分為:(1)非特異性免疫治療:是指應(yīng)用一些免疫調(diào)節(jié)劑通過非特異性地增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能,激活機(jī)體的抗腫瘤免疫應(yīng)答,以達(dá)到治療腫瘤的目的。例如：卡介苗、一些細(xì)胞因子如IL-2等均屬于此類。 （2）主動(dòng)免疫治療：是指給機(jī)體輸入具有抗原性的瘤苗，刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗腫瘤免疫以治療腫瘤的方法。該法應(yīng)用的前提是腫瘤抗原能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。此種方法對(duì)地手術(shù)后清除微小的轉(zhuǎn)移瘤灶和隱匿瘤、預(yù)防腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)有較好的應(yīng)用效果。（3）被動(dòng)免疫治療：是指給機(jī)體輸注外源的免疫效應(yīng)物質(zhì)，由這些外源性效應(yīng)物質(zhì)在機(jī)體內(nèi)發(fā)揮治療腫瘤作用。主要有以下兩大類：抗腫瘤導(dǎo)向治療，利用高度特異性的單克隆抗體為載體，將細(xì)胞毒性的殺傷分子帶到腫瘤病灶處，可特異地殺傷腫瘤細(xì)胞；過繼免疫療法，是取對(duì)腫瘤有免疫力的供者淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)輸給腫瘤者，或取患者自身的免疫細(xì)胞在體外活化、增殖后，再轉(zhuǎn)輸入患者體內(nèi)，使其在患者體內(nèi)發(fā)揮腫瘤作用。4、試述腫瘤干細(xì)胞的靶向治療手段有哪些？簡(jiǎn)述其原理？答：（1）干擾CSC傳導(dǎo)通路：如Wnt通路、Hedgehog傳導(dǎo)通路、Norch傳導(dǎo)通路、通路等，這些通路多與腫瘤干細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、自我更新、逃逸凋亡等密切相關(guān)。（2）針對(duì)CSC特定基因的治療：在CSC中特定基因的表達(dá)或沉默對(duì)CSC的增殖、凋亡具有調(diào)控作用，靶向作用于這些基因，改變其表達(dá)，可以抑制CSC生長(zhǎng)或誘導(dǎo)其凋亡。（3）針對(duì)表面標(biāo)志的靶向治療：針對(duì)CSC表面存在一些特異性的標(biāo)志物，以這些標(biāo)志物為靶向殺滅CSC。 （4）針對(duì)CSC微環(huán)境的治療：微環(huán)境對(duì)維持CSC自我更新及異質(zhì)性具有重要調(diào)節(jié)功能,在正常干細(xì)胞中,微環(huán)境通過提供抑制信號(hào)、抑制增殖和分化來保持干細(xì)胞的自身穩(wěn)態(tài)、抑制腫瘤的形成，同時(shí)提供短暫的信號(hào)促進(jìn)干細(xì)胞的增殖、支持受損組織的再生。一旦抑制增殖和分化的信號(hào)與短暫促進(jìn)增殖的信號(hào)之間的平衡被打破，干細(xì)胞就會(huì)轉(zhuǎn)化為CSC促進(jìn)腫瘤的形成。干擾微環(huán)境和破壞其賴以生存的物質(zhì)基礎(chǔ)，可以有效地抑制CSC。（5）誘導(dǎo)分化：CSC具有無限增殖能力，促進(jìn)其分化,為腫瘤終末細(xì)胞既能防止進(jìn)一步增殖，同時(shí)又增加了放化療敏感性。全反式維甲酸作為分化誘導(dǎo)劑治療急性早幼粒細(xì)胞白血病是一個(gè)成功的范例。5、舉例闡述腫瘤微環(huán)境因素對(duì)腫瘤發(fā)生、發(fā)展、診斷及預(yù)后的影響?答：腫瘤微環(huán)境在腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖過程中起著重要作用。一方面它為腫瘤細(xì)胞提供充足的營(yíng)養(yǎng)和調(diào)控生長(zhǎng)分化的多種因子，另一方面它也為腫瘤細(xì)胞抵抗外界損害提供了有利的屏障。如腫瘤微環(huán)境中的抑制性成分Treg細(xì)胞：Treg細(xì)胞是指CD4+CD25+T細(xì)胞。其可通過細(xì)胞間接觸依賴機(jī)制發(fā)揮作用或分泌IL-10和TGF-等細(xì)胞因子，起負(fù)性抑制作用。可抑制CD4+CD25-T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞以及樹突狀細(xì)胞等其他免疫細(xì)胞的活性和功能。從而至機(jī)體免疫功能低下，以利于腫瘤細(xì)胞的產(chǎn)生與生長(zhǎng)。大量的研究報(bào)道表明CD4+CD25+Treg細(xì)胞是抑制機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答的關(guān)鍵成分之一。在非小細(xì)胞肺癌和卵巢癌患者的腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞中Treg的含量明顯增多。在胃腸道腫瘤患者中CD4+CD25-T細(xì)胞明顯減少而Treg細(xì)胞數(shù)量增多，而且Treg細(xì)胞數(shù)量的增高與較差的預(yù)后和較低的生存率高度相關(guān)。6、試述異常表達(dá)的共刺激分子在自身免疫病發(fā)生機(jī)制中可能的作用？如何通過共刺激分子對(duì)自身免疫疾病進(jìn)行輔助診斷和治療？答：共刺激分子可大致分為“正性協(xié)同刺激分子”和“負(fù)性協(xié)同刺激分子”，兩者的異常表達(dá)與自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。其中“正性協(xié)同刺激分子”的異常增高表達(dá)可導(dǎo)致機(jī)體免疫功能平衡的失調(diào)，打破自身耐受，導(dǎo)致自身免疫性疾病?！柏?fù)性協(xié)同刺激分子”介導(dǎo)的抑制信號(hào)在維持免疫耐受中發(fā)揮著關(guān)鍵性作用，其缺失導(dǎo)致自身耐受性的改變是也是自身免疫病的致機(jī)制之一。另外協(xié)同刺激分子表達(dá)異常，導(dǎo)致免疫系統(tǒng)紊亂可至T、B細(xì)胞的異常活化，也是影響自身免疫病發(fā)生的重要因素。共刺激分子有助于自身免疫性疾病的輔助診斷：如可通過檢測(cè)共刺激分子的表達(dá)情況（如檢測(cè)CD4+CD28-T細(xì)胞比例、CD4+T細(xì)胞上OX40和ICOS表達(dá)）來輔助診斷何種自身免疫性疾病。其次通過檢測(cè)共刺激分子表達(dá)水平，還可以用于判斷疾病嚴(yán)重程度，從而指導(dǎo)臨床用藥等。另外檢測(cè)治療前后共刺激分子表達(dá)率變化可提示治療效果及復(fù)發(fā)幾率。共刺激分子還可有助于自身免疫性疾病的治療，如共刺激分子“OX40”分子只表達(dá)在炎癥部位的抗原特異性T細(xì)胞上，若只針對(duì)OX40/OX40L進(jìn)行的治療，則治療效應(yīng)只會(huì)作用于這群T細(xì)胞，而不會(huì)影響其他外周T細(xì)胞的功能，從而大大減少了治療所引起的副作用。7、試述維持造血干細(xì)胞增殖及分化的方法？答：維持造血干細(xì)胞增殖及分化一般需滿足如下條件。（1）基質(zhì)細(xì)胞：造血干細(xì)胞的長(zhǎng)期維持與造血微環(huán)境的基質(zhì)細(xì)胞是分不開的，在培養(yǎng)體系中加入基質(zhì)細(xì)胞可以發(fā)揮三個(gè)方面的主要作用：支持HSPC的體外擴(kuò)增。增強(qiáng)擴(kuò)增后細(xì)胞的歸巢與植入能力。減少分化、抗凋亡。（2）培養(yǎng)基：血清是良好的天然培養(yǎng)液，但血清成分復(fù)雜、變異大，增加了實(shí)驗(yàn)的不確定因素，尤其動(dòng)物血清存在動(dòng)物攜帶病原體傳染人類的隱患以及異種蛋白免疫原性，現(xiàn)多主張使用無血清培養(yǎng)基，研究表明無血清、無基質(zhì)的培養(yǎng)體系配合多種細(xì)胞因子也能支持臍血HSPC的體外擴(kuò)增，擴(kuò)增后的細(xì)胞能成功地植入到亞致死量照射的 NOD/SCID鼠內(nèi)并維持了長(zhǎng)期造血的能力。（3）造血細(xì)胞因子組合：至今最佳的細(xì)胞因子組合尚未確定，理想的HSPC移植物應(yīng)該是由HSC及定向HPC共同組成的混合體，擴(kuò)增應(yīng)關(guān)注維持HSC質(zhì)與量的最佳契合點(diǎn)，細(xì)胞因子的搭配應(yīng)該以此為前提。早期作用因子干細(xì)胞因子（SCF）和Flt3配基（FL）是擴(kuò)增中最重要的協(xié)同生長(zhǎng)因子，它們能協(xié)同其它造血調(diào)節(jié)因子（IL-3、GM-CSF、G-CSF等）調(diào)控干細(xì)胞的存活、增殖和抗凋亡，尤其體現(xiàn)在多能干細(xì)胞階段。（4）染色質(zhì)修飾：經(jīng)修飾后的干細(xì)胞可能阻止體外HSC活性下降，同時(shí)促使表達(dá)HSC表型的細(xì)胞數(shù)量的增加，并保持體內(nèi)造血功能重建的潛能。8、舉例闡述抗體（多抗、單抗或基因工程抗體）在基礎(chǔ)研究或臨床疾病診斷或治療中的應(yīng)用？答：基礎(chǔ)研究中用到的抗體：ELISA中需要到雙抗夾心法，其中的抗體為與所檢測(cè)的蛋白特異性結(jié)合的單克隆