食用菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程.doc

食用菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程食用菌種是指人工培養(yǎng)的食用菌純菌絲體，通常分為母種、原種和栽培種。母種是通過(guò)嚴(yán)格篩選，確認(rèn)為生產(chǎn)上有價(jià)值的純菌絲體。母種用試管斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)，又稱試管種或一級(jí)種。母種再擴(kuò)繁轉(zhuǎn)移到木屑或谷料培養(yǎng)基上所得到的菌種，稱為原種或二級(jí)種，培養(yǎng)容器多用罐頭瓶或菌種瓶。由原種再擴(kuò)繁的菌種稱栽培種或三級(jí)種，可直接用于生產(chǎn)栽培。 一、母種制法 1.配制母種斜面培養(yǎng)基。最常用的是PDA培養(yǎng)基，配制方法是：取無(wú)病害的馬鈴薯數(shù)個(gè)，洗凈去皮，切成薄片，稱取200克，加水1000毫升煮沸，煮至馬鈴薯酥而不化為度，所得液用6層紗布過(guò)濾，濾液用清水補(bǔ)足至1000毫升，再加瓊脂及葡萄糖各20克，繼續(xù)加熱至溶化，趁熱分裝至試管中，每管8毫升左右。試管用18010毫米規(guī)格的，用前刷洗干凈。分裝完后塞上棉塞；每10支捆成一束，豎放在小鐵絲籠中，用高壓或土蒸鍋滅菌，然后趁熱擺成斜面，待培養(yǎng)基凝固即可用于接種。 2.組織分離法制母種。選擇生長(zhǎng)健壯、外形整齊、朵大肉厚、無(wú)病蟲害、具有該品種特征的子實(shí)體，于七八分成熟時(shí)采下，作為分離材料。切去菇柄，用75%酒精棉球擦拭菇體表面，移至接種箱。接種箱事先用甲醛熏蒸。將子實(shí)體材料再用酒精棉擦一遍，從菌蓋處縱向撕開，用消毒刀片或小鑷子從菌蓋和菌杯交接處取材料，切取麥粒大小的組織即可，用接種針移至試管斜面培養(yǎng)基中間，每管移入1塊。接種過(guò)程中試管口始終在酒精燈火焰上方，接種針也要在火焰上燒紅并在試管口待冷后，再取接種材料。每次可接種數(shù)十管，然后送至恒溫箱中或培養(yǎng)室中培養(yǎng)。溫度保持2326，空氣相對(duì)濕度保持70%左右。經(jīng)過(guò)3天培養(yǎng)就看到組織塊四周長(zhǎng)出白色絨毛狀菌絲，約一周即可長(zhǎng)滿試管。如斜面培養(yǎng)基上出現(xiàn)綠、紅、黃、黑、乳白色的菌落，即是被雜菌污染，應(yīng)及時(shí)淘汰。對(duì)長(zhǎng)滿斜面的菌種進(jìn)行嚴(yán)格挑選，選擇生長(zhǎng)快、菌絲濃白粗壯的再轉(zhuǎn)管1次即得母種。 3.母種轉(zhuǎn)管培養(yǎng)。轉(zhuǎn)管在接種箱中進(jìn)行，接種箱內(nèi)事先放入斜面培養(yǎng)基若干，接種箱常規(guī)消毒。操作人員洗凈雙手，穿白大褂、戴白帽子，掩住頭發(fā)，用75%酒精棉擦手和試管壁。左手拿母種試管和培養(yǎng)基試管，右手拿接種針在酒精燈火焰上面打開試管棉塞，將接種針和試管口同時(shí)在火焰上燒灼一下，試管口始終不離火焰旁。將燒過(guò)的接種針在管口壁待冷，然后用針尖切取長(zhǎng)滿菌絲的培養(yǎng)基約麥粒大小一小塊，迅速?gòu)墓芸谌〕?，接入培養(yǎng)基斜面中間，再將試管口在火焰上燒一下，迅速塞好棉塞，再接下一管。全部接種完，送恒溫箱或培養(yǎng)室。 二、原種制法 1.原種培養(yǎng)基配制。配方：闊葉樹木屑78%、麥麩20%、蔗糖和石膏粉各1%，pH值6.5，含水60%。也有用玉米粒或麥粒制原種培養(yǎng)基的，但成本高。根據(jù)生產(chǎn)數(shù)量，按配方比例稱料，充分混合，使含水適宜，即用手攥料指間有水珠但不滴下為度，然后裝瓶，裝至瓶肩部為止，用手指粗木棒在中央打一圓洞，以增加通氣性，瓶口用聚丙烯薄膜扎好，及時(shí)滅菌，高壓或土蒸鍋均可。 2.接種和培養(yǎng)。接種室及接種箱常規(guī)消毒。將滅菌的原種培養(yǎng)基罐頭瓶或菌種瓶拿人接種箱，每次可拿人200瓶，再用甲醛熏蒸一次。操作者嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作。將母種試管用酒精棉擦拭外壁，拿人接種箱，在火焰上打開棉塞，右手拿接種鏟或大鑷子，并在火焰上燒紅待冷，再?gòu)哪阜N管內(nèi)挑出豆粒大小一塊菌絲（附帶有培養(yǎng)基），打開原種培養(yǎng)基瓶薄膜，將母種菌絲迅速放入原種培養(yǎng)基中央，使菌絲面緊貼瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基料面，立即蓋好薄膜，再依次接下一瓶。1支母種可接1520瓶原種。接種完的菌種瓶，及時(shí)貼上標(biāo)簽，注明食用菌品種、級(jí)別（幾級(jí)種）、接種日期、接種人等。及時(shí)送培養(yǎng)室培養(yǎng)。溫度保持在2326，空氣相對(duì)濕度保持70%左右。室內(nèi)要遮光或微弱的散射光即可。培養(yǎng)30天左右菌絲長(zhǎng)滿瓶即可用于擴(kuò)繁栽培種。如暫時(shí)不用，要放在干燥、低溫、避光條件下短期貯存。 三、栽培種制法 栽培種是直接用于生產(chǎn)栽培的菌種，和原種的制法基本相同。1瓶原種可擴(kuò)繁栽培種約100余瓶。培養(yǎng)基同原種，經(jīng)滅菌后，在接種箱中接