檢測(cè)中心培訓(xùn)-質(zhì)譜基礎(chǔ)知識(shí).ppt

1、檢測(cè)中心培訓(xùn)（一）080114,液相色譜串聯(lián)三重四級(jí)桿質(zhì)譜基礎(chǔ)知識(shí),一 液質(zhì)聯(lián)用,為什么要液質(zhì)聯(lián)用？ 有很多物質(zhì)如硝基呋喃類(lèi)、氨基糖苷類(lèi)在常規(guī)的檢測(cè)器如紫外、熒光檢測(cè)器上沒(méi)有響應(yīng)的 液質(zhì)聯(lián)用的實(shí)質(zhì) 質(zhì)譜儀作為液相色譜的檢測(cè)器,一 液質(zhì)聯(lián)用,液質(zhì)聯(lián)用儀 獸藥殘留中應(yīng)用最廣泛的一種液質(zhì)聯(lián)用儀-液相色譜串聯(lián)三重四級(jí)桿質(zhì)譜,液相色譜,質(zhì)譜,數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),一 液質(zhì)聯(lián)用,液質(zhì)聯(lián)用儀的組成,一 液質(zhì)聯(lián)用,離子源 最常用的離子源-電噴霧離子源（ESI),毛細(xì)管,四極預(yù)桿,干燥氣,一 液質(zhì)聯(lián)用,質(zhì)量分離器 獸藥殘留最常用的是三重串聯(lián)四級(jí)桿（QqQ）,Q1,q2,Q3,一 液質(zhì)聯(lián)用,整個(gè)質(zhì)譜儀的模式圖,Q1,q2

2、,Q1,電噴霧離子源,檢測(cè)器,二 質(zhì)譜基本原理,質(zhì)譜：稱(chēng)量離子質(zhì)量的工具,12 units,0 m/e,二 質(zhì)譜基本原理,質(zhì)譜：稱(chēng)量離子質(zhì)量的工具,12 units,12 m/e,二 質(zhì)譜基本原理,質(zhì)譜：稱(chēng)量離子質(zhì)量的工具,8 9 10 11 12 13 14 15 16,12 units,12 m/e,二 質(zhì)譜基本原理,質(zhì)譜：稱(chēng)量離子質(zhì)量的工具,8 9 10 11 12 13 14 15 16,12 units,14 m/e,二 質(zhì)譜基本原理,質(zhì)譜：稱(chēng)量離子質(zhì)量的工具,12 m/e,8 9 10 11 12 13 14 15 16,質(zhì)荷比,分子的數(shù)量,三 質(zhì)譜基本概念,質(zhì)譜分析法：主要是通過(guò)

3、對(duì)樣品離子質(zhì)荷比的分析而實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品進(jìn)行定性和定量的一種方法 質(zhì)荷比：指帶電粒子的質(zhì)量與所帶電荷之比值。以m/e表示。是質(zhì)譜分析中的一個(gè)重要參數(shù)，不同m/e值的粒子在一定電磁場(chǎng)下，所運(yùn)行的軌跡是不同的。,三 質(zhì)譜基本概念,只有一定質(zhì)荷比的離子才能通過(guò)質(zhì)量分離器而被檢測(cè)器所感應(yīng),三 質(zhì)譜基本概念,質(zhì)譜圖 樣品的分子在離子源內(nèi)電離，產(chǎn)生各種質(zhì)荷比（m/e）的離子，然后通過(guò)質(zhì)量分析器按其質(zhì)荷比分離，分離后的離子依次被檢測(cè)器檢測(cè)并記錄下來(lái)，形成一個(gè)按質(zhì)荷比大小排列的圖譜。,三 質(zhì)譜基本概念,質(zhì)譜圖 總離子流圖（TIC）：計(jì)算機(jī)可以把采集到的每個(gè)質(zhì)譜的所有離子相加得到總離子強(qiáng)度,總離子強(qiáng)度隨時(shí)間變化的曲線

4、就是總離子色譜圖,三 質(zhì)譜基本概念,總離子流圖（TIC）,總離子流圖的橫座標(biāo)是出峰時(shí)間,縱座標(biāo)是峰高。總離子色譜圖與一般色譜儀得到的色譜圖基本上是一樣的。,三 質(zhì)譜基本概念,質(zhì)譜圖 選擇離子流圖（SIM)：選取其中幾個(gè)特征離子掃描，對(duì)保留時(shí)間作圖，即得到選擇離子色譜圖。,三 質(zhì)譜基本概念,選擇離子流圖（SIM)：,SIM通過(guò)去除本底和其他無(wú)關(guān)離子的干擾，降低噪聲，提高選擇性、分辨率和靈敏度，可使復(fù)雜的TIC簡(jiǎn)化，對(duì)特定化合物的分析或化合物的分類(lèi)十分有用。,三 質(zhì)譜基本概念,質(zhì)譜圖： 棒狀圖： 對(duì)于電噴霧串聯(lián)三重四級(jí)桿質(zhì)譜，Q1中離子還是完整的（母離子），分子在q2中與Ar碰撞，產(chǎn)生子離子，子離

5、子在Q3中分離，并為計(jì)算機(jī)所記錄，可得到棒狀圖,三 質(zhì)譜基本概念,棒狀圖：,橫坐標(biāo)是質(zhì)荷比(m/z)、縱坐標(biāo)是離子的相對(duì)強(qiáng)度，以基峰為100%、經(jīng)過(guò)計(jì)算機(jī)處理的質(zhì)譜棒狀譜圖稱(chēng)為棒圖。,三 質(zhì)譜基本概念,棒狀圖：,分子離子峰：進(jìn)入質(zhì)譜離子源的物質(zhì)在電離過(guò)程中失去一個(gè)電子而形成的單電荷離子，它代表該物質(zhì)的分子量,分子離子峰,碎片離子峰,三 質(zhì)譜基本概念,棒狀圖：,基峰：豐度最高的那個(gè)峰 離子豐度: 檢測(cè)器檢測(cè)到的離子信號(hào)強(qiáng)度.,分子離子峰,碎片離子峰,基峰,四 質(zhì)譜進(jìn)行定性分析,質(zhì)譜怎么確證物質(zhì)的？ 色譜的保留時(shí)間 母離子的質(zhì)荷比 子離子的特征,四 質(zhì)譜進(jìn)行定性分析,歐盟2002/657/EC指令

6、中規(guī)定在農(nóng)藥和獸藥殘留分析中以質(zhì)譜作為確認(rèn)方法，必須達(dá)到4點(diǎn)的要求，才能滿足鑒定 LC/MS/MS，一個(gè)母離子為1點(diǎn)，一個(gè)子離子為1.5點(diǎn)，那么確認(rèn)時(shí)只需選擇1個(gè)母離子和2個(gè)子離子即可達(dá)到4點(diǎn)的要求二級(jí)質(zhì)譜很容易到達(dá)此要求,四 質(zhì)譜進(jìn)行定量分析,質(zhì)譜的定量計(jì)算 用LC-MS/MS進(jìn)行定量分析，其基本方法與普通液相色譜法相同。 即通過(guò)色譜峰面積和標(biāo)樣進(jìn)行定量。,五 質(zhì)譜是如何得到如此豐富的圖譜的？（質(zhì)譜的掃描方式）,質(zhì)譜的掃描方式 Full Scan（全掃描）,五 質(zhì)譜是如何得到如此豐富的圖譜的？（質(zhì)譜的掃描方式）,質(zhì)譜的掃描方式 Full Scan（全掃描）,殘留分析的樣品基質(zhì)較為復(fù)雜，用全掃

7、描的話，得到的圖可能一個(gè)特征的峰都沒(méi)有,五 質(zhì)譜是如何得到如此豐富的圖譜的？（質(zhì)譜的掃描方式）,質(zhì)譜的掃描方式 SIM（選擇離子監(jiān)控）,五 質(zhì)譜是如何得到如此豐富的圖譜的？（質(zhì)譜的掃描方式）,質(zhì)譜的掃描方式 SIM（選擇離子監(jiān)控）,與全掃描相比，基質(zhì)的影響大大降低，得到一個(gè)m/z特定的峰。 但這就能定性了嗎？,五 質(zhì)譜是如何得到如此豐富的圖譜的？（質(zhì)譜的掃描方式）,質(zhì)譜的掃描方式 MRM（多級(jí)反應(yīng)監(jiān)測(cè)）,五 質(zhì)譜是如何得到如此豐富的圖譜的？（質(zhì)譜的掃描方式）,質(zhì)譜的掃描方式 MRM（多級(jí)反應(yīng)監(jiān)測(cè)）,在藥殘分析中，常用的掃描 方式是多反應(yīng)監(jiān)測(cè),五 質(zhì)譜是如何得到如此豐富的圖譜的？（質(zhì)譜的掃描方式）,質(zhì)譜的掃描方式 MRM（多級(jí)反應(yīng)監(jiān)測(cè)） 多組分同時(shí)分析 共流出物的分析 母離子-子離子關(guān)系明確，定性能力