完整word版檢定菌管理規(guī)程

1、 檢定菌管理規(guī)程 1 目的： 規(guī)范藥品微生物學(xué)檢定用菌的管理，確保檢定菌正確發(fā)放、使用，銷毀。 2 范圍： 適用于檢驗(yàn)用菌種的管理，包括菌種的申購、保存、傳代、使用及銷毀。 3 職責(zé)： 檢定菌保管、使用人員及各有關(guān)部門對本規(guī)程的實(shí)施負(fù)責(zé)。 4 參考文獻(xiàn)： 4.1 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂） 4.2 中國藥典（2015年版四部） 5 定義： 5.1 檢定菌：是指微生物測定和其它檢查用的標(biāo)準(zhǔn)菌種。 5.2 標(biāo)準(zhǔn)菌株：來自認(rèn)可的國內(nèi)或國外菌種保藏機(jī)構(gòu)。 5.3 標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株：標(biāo)準(zhǔn)菌株經(jīng)過復(fù)活并在適宜的培養(yǎng)基中生長后，分裝于菌種凍存管，采用低溫冷凍干燥、液態(tài)貯存、超低溫冷凍（低于-30）等

2、方法保存。 5.4 工作菌株：采用標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株制備轉(zhuǎn)種或?qū)嶒?yàn)用的菌株。 6 規(guī)程 6.1 檢定菌的申購：檢定菌由質(zhì)量管理部根據(jù)使用情況（包括臨時(shí)檢驗(yàn)需要），列出計(jì)劃，相關(guān)領(lǐng)導(dǎo)審批。 6.2 由采購部向中檢所菌種保藏中心或?。ㄊ校┧帣z所購買凍干菌（標(biāo)準(zhǔn)菌種），或直接向?。ㄊ校┧帣z所購買傳代用菌種，購買時(shí)，需詢問與確定菌種的代數(shù)，以便傳代時(shí)控制代數(shù)。 6.3 標(biāo)準(zhǔn)菌株的接收 6.3.1 對新購進(jìn)的標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)仔細(xì)核對菌種標(biāo)簽、包裝完整性及隨菌種附有 的說明書。6.3.2 包裝破損的應(yīng)徹底進(jìn)行消毒、滅菌處理，使其不得污染其它物品。 6.3.3 符合要求的，應(yīng)點(diǎn)清數(shù)量，同時(shí)將檢定菌的所有信息，填寫檢定菌

3、接收、使用、銷毀記錄。 6.4 檢定菌的保存 6.4.1 購買的標(biāo)準(zhǔn)菌株直接存放于2-8冰箱保存。 6.4.2 工作菌種的保存：工作用菌種采用斜面低溫保存法。將菌種接種在適宜的固體斜面培養(yǎng)基上，待菌生長充分以后，轉(zhuǎn)移至28冰箱中保存。此法僅用于工作用菌種的短期保存，菌種保存人員應(yīng)定期檢查其污染雜菌和變異等情況，發(fā)現(xiàn)異常情況，應(yīng)經(jīng)滅活處理后銷毀。 6.4.3 標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株的保存：采用甘油冷凍管保藏法。 6.4.4 菌種保存應(yīng)貼菌種標(biāo)簽。 6.5 標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株的制備（復(fù)蘇、保藏） 6.5.1 菌珠的復(fù)蘇 6.5.1.1 將標(biāo)準(zhǔn)菌株凍干管從冰箱中取出，放至室溫后使用。 菌珠在打開前仔細(xì)核對標(biāo)簽上的內(nèi)

4、容，注意一株菌株使用一套 6.5.1.2用具，嚴(yán)防交叉污染。 6.5.1.3 應(yīng)參照標(biāo)準(zhǔn)菌株復(fù)蘇說明書進(jìn)行菌種復(fù)蘇。用適宜的方法打開標(biāo)準(zhǔn)菌株的安瓿瓶。 6.5.1.4 取少量適宜的液體培養(yǎng)基加至菌種管內(nèi)，輕輕振搖使凍干菌塊溶解。 6.5.1.5 隨即吸出管內(nèi)菌液，接種劃線到瓊脂培養(yǎng)基上或接種到液體培養(yǎng)基中，在規(guī)定的溫度和時(shí)間下培養(yǎng)，使菌種得以復(fù)蘇。 6.5.2 標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株的保藏 6.5.2.1 將復(fù)蘇后的培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種至液體培養(yǎng)基內(nèi)，在適宜的溫度和時(shí)間下進(jìn)行培養(yǎng)。 6.5.2.2 取培養(yǎng)好的菌懸液與甘油1:1比例進(jìn)行混合，振搖均勻，用凍存管進(jìn)行分裝，按工作需要每種菌種分裝成若干支。 6.5.2.

5、3 置冰箱超低溫冷凍（低于-30）保存，作為標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株。 在冷凍管外貼上檢定菌標(biāo)簽并及時(shí)在檢定菌接收、6.5.2.4 使用、銷毀記錄上登記。 工作菌株的制備 6.66.6.1 甘油凍存管標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株制備工作菌株 從冰箱取出凍存管標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株移入生物安全柜內(nèi)，在室溫放置20分鐘后，將凍存管內(nèi)的菌液接入適宜的液體培養(yǎng)基或瓊脂培養(yǎng)基上，在規(guī)定的溫度和時(shí)間下進(jìn)行培養(yǎng)，作為工作菌株。 6.6.2 工作菌株的傳代 從冰箱中取出傳代用斜面工作菌株，用無菌接種環(huán)挑取適量培養(yǎng)物接種至適宜的液體培養(yǎng)基或瓊脂培養(yǎng)基上，在規(guī)定的溫度和時(shí)間下進(jìn)行培養(yǎng)，作為下一代工作菌株。 6.6.3 所有新制備的菌種管外均應(yīng)貼上標(biāo)簽

6、，并及時(shí)填寫檢定菌傳代記錄書。 6.7 檢定菌的編號 6.7.1 從中國食品藥品檢定研究院購買的CMCC系列凍干粉標(biāo)準(zhǔn)菌株為0代菌株，其菌種編號為標(biāo)準(zhǔn)菌株標(biāo)簽上編號，如0代金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌種編號為“26003-4a”。 6.7.2 將上述0代標(biāo)準(zhǔn)菌株轉(zhuǎn)種至適宜的培養(yǎng)基上為復(fù)蘇，復(fù)蘇得到的菌種為第1代菌種。其編號為：0代標(biāo)準(zhǔn)菌株編號+復(fù)蘇日期，如“26003-4a-170520”表示由第0代編號為“26003-4a”的金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株，于2017.05.20復(fù)蘇得到的第1代菌種。 6.7.3 第1代復(fù)蘇后的菌種轉(zhuǎn)種至液體培養(yǎng)基制成第2代菌種為標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株，用甘油凍存管保存。其編號為：第

7、1代復(fù)蘇后的菌株編號+G流水號（分裝支數(shù)）。如 “26003-4a-170520-G1”表示由編號為“26003-4a-170520”的第1代菌種傳代分裝的第1只金黃色葡萄球菌甘油凍存管標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株。 6.7.4 從第2代標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株轉(zhuǎn)種至瓊脂培養(yǎng)基上制成第3代工作菌株，其編號為：標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株+A流水號（傳代支數(shù)）；從第2代標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株轉(zhuǎn)種至液體培養(yǎng)基上制成第3代工作菌株，其編號為：標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株+B流水號（傳代支數(shù)）。 6.7.5 可挑選斜面工作菌種長勢較好的一只，在其菌種編號前特殊標(biāo)記，作為傳代用斜面工作菌種制備下一代工作菌種；第4代；第5代工作菌種的編號規(guī)則均遵循6.7.4編號規(guī)則。 檢定菌的傳代、使用 6.86.8.1 每株菌種應(yīng)建立檢定菌使用及傳代記錄，斜面菌種應(yīng)根據(jù)其特性決定傳代時(shí)間間隔。 6.8.2 傳代時(shí)（使用時(shí)）須核對編號，傳代次數(shù)，傳代日期，所用培養(yǎng)基。 6.8.3 控制傳代次數(shù)，根據(jù)菌種特性