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文檔簡介
1、發(fā)酵工程實驗報告,一.實驗?zāi)康?1.復(fù)習(xí)酶活力的測定方法。 2. 鑒定搖瓶發(fā)酵的黑曲霉的產(chǎn)酶能力,二.實驗原理,植酸酶活性單位:樣品在植酸鈉濃度為5.0mol/L,溫度37,PH5.5的條件下,每分鐘從植酸鈉中釋放1umol無機磷,即為1個植酸酶活性單位。 在酸性溶液中正磷酸與鉬酸作用生成磷鉬酸,后者當(dāng)有還原劑(如Vc)存在時,立即轉(zhuǎn)化為藍色還原物質(zhì),其最大吸收在660nm處,三.試劑,1.乙酸緩沖液 2.植酸鈉溶液 3.10%TAC 4.2.5%鉬酸鈉 5.10%Vc 6.17%硫酸 7.硫酸二氫鉀(標(biāo)準(zhǔn)磷液) 8.顯色液:(17%硫酸):(水):(2.5%鉬酸鈉):(10%Vc)=1:2:
2、1:1,四.實驗步驟,1.先將實驗所需溶液按相應(yīng)濃度配置好,2.標(biāo)準(zhǔn)曲線制作,1)按表稀釋磷溶液,水浴加熱,將裝好的溶液搖勻,放在37水浴鍋中持續(xù)20min,冷卻,顯色反應(yīng),測稀釋液的吸光值,在波長為660nm處測吸光值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,以無機磷為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,3.樣品中植酸酶活力的測定,1)酶液制備:搖瓶液為試樣,在離心機中以3000r/min轉(zhuǎn)速離心15min,取清液,2)酶活的測定,五.實驗結(jié)果,1.取吸光度OD=3.159,將其替換為標(biāo)準(zhǔn)直線中的y=1.0579x-0.1094中的y值,得到x=3.0895,此值即為無機磷的質(zhì)量。 2.由酶活的計算方法 酶活=Fm/3031V 其中V=0.
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