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文檔簡介
1、sysmex五分類血液分析儀xt-2000i檢測原理及臨床應(yīng)用,血細(xì)胞分析儀的發(fā)展簡史,二分群時代:淋巴細(xì)胞、非淋巴細(xì)胞 三分群時代:(大細(xì)胞、中間細(xì)胞、小細(xì)胞) 五分類時代:淋巴、單核、中性粒、嗜酸粒、 嗜堿粒,五分類血球方法學(xué)概覽,方法學(xué) 第一代:純物理原理(cd-3700,se-9000) 激光、射頻、電阻 第二代:物理+化學(xué)(sysmex sf-3000,) 酶染色、顆粒染色 特異性溶血 第三代:物理 +分子生物學(xué)(sysmex xt-1800i/xt-2000i) 分子生物學(xué)技術(shù)(dna、rna染色,內(nèi) 容,xt-2000i檢測報告組成 白細(xì)胞系統(tǒng)的檢測原理和臨床病例分析 紅細(xì)胞系統(tǒng)
2、參數(shù)的臨床意義 網(wǎng)織紅細(xì)胞的參數(shù) 血小板系統(tǒng)參數(shù)的臨床意義 標(biāo)本采集的要求,xt-2000i- 規(guī)格,參數(shù) 30項 研究參數(shù) 2項(ig,ig) 處理速度: 80標(biāo)本/小時 檢測模式: 4種模式(cbc, cbc+diff cbc+ret,cbc+diff+ret 標(biāo)本量: 手動進(jìn)樣: 85 ul 自動穿刺: 150 ul 末梢血預(yù)稀釋進(jìn)樣:40ul+160ul稀釋液,xt-2000i報告單的組成,一)2個直方圖、4個散點圖 (二) 30項數(shù)字結(jié)果: rbc、wbc、plt、hgb、hct、mcv、mch、mchc、rdw-sd、rdw-cv、mpv、pct、pdw、p-lcr、neu%/#、
3、mnon%/#、lym%/#、eo%/#、ba%/#、 ret %/#, irf, lfr, mfr, lfr,xt 分析流程,檢測模塊,分析原理,檢測通道,圖形,rbc/plt,wbc,鞘 流 電 阻 法,半導(dǎo)體激光 fcm,rbc/plt 通道,plt 直方圖,參數(shù),plt,hgb,hgb 通道,比色法,hgb,全 血 標(biāo) 本,diff 通道,ret 通道,diff散點圖,wbc# baso,ret plt-o irf,ret散點圖,lymph mono neut+ba eo *ig - research,ret,半導(dǎo)體激光 fcm,wbc/ba 通道,wbc/ba 散點圖,rbc 直方圖
4、,rbc,only for xt-2000i,白細(xì)胞系統(tǒng)的檢測原理和 臨床病例分析,白細(xì)胞系統(tǒng)參數(shù),diff散點圖、wbc/baso散點圖 :白細(xì)胞總數(shù) :中性粒細(xì)胞 :淋巴細(xì)胞 :單核細(xì)胞 :嗜酸性粒細(xì)胞 :嗜堿性粒細(xì)胞 :絕對值:百分?jǐn)?shù),半導(dǎo)體激光和流式細(xì)胞的應(yīng)用,側(cè)向散射光,rna/dna含量,細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),細(xì)胞體積大小,前向散射光,側(cè)向熒光,激光束,分光鏡,wbc/baso 原理,步驟1: 吸入標(biāo)本 通過 srv吸入標(biāo)本血樣和試劑 步驟2: 溶血 stromatolyser-fb使紅細(xì)胞溶血 除嗜堿性粒細(xì)胞以外的wbc 收縮 步驟3: 分析 分析前向散射光和側(cè)向散射光的散射圖,baso
5、 試劑系統(tǒng),baso,other wbc,rbc,hemolysed (acid, hypotonic solution,保持原形,脫漿收縮,溶血,wbc diff 分類通道原理,步驟1: 吸入 從 srv吸入血液和試劑 步驟2: 溶血 stromatolyser-4dl 溶解rbc - wbc膜被輕微損傷,打孔 (acid, hypotonic solution) 步驟3: 染色(rna and dna) stromatolyser-4ds 染色 染液: 熒光染料 ( polymethine dye) 步驟3: 分析 分析前向散射光和熒光的散點圖,溶血 (wbc membrane is we
6、akly damaged,染色 rna dna,diff 試劑系統(tǒng),blast原核細(xì)胞, ig.未成熟粒細(xì)胞,異常淋巴細(xì)胞 等,高熒光濃度,低熒光濃度,高熒光濃度,正常細(xì)胞,wbc分類-散點圖(正常標(biāo)本,淋巴,單核,中性,嗜酸,側(cè)向熒光(rna ,dna,紅細(xì)胞碎片,側(cè)向散射光(內(nèi)部結(jié)構(gòu),分類-散點圖(異常標(biāo)本,淋巴,單核,中性,嗜酸,側(cè)向熒光(rna ,dna,紅細(xì)胞碎片,側(cè)向散射光(內(nèi)部結(jié)構(gòu),異型淋巴,ig,核左移,出現(xiàn)幼稚粒細(xì)胞的病例,該病例為兒童急性粒細(xì)胞白血?。╝ml-m2),患兒因突發(fā)高熱而前來就診,首次血常規(guī)檢查發(fā)現(xiàn),外周血原始細(xì)胞占71%,幼稚紅細(xì)胞占2%。,出現(xiàn)幼稚淋巴細(xì)胞的
7、病例,急淋(all)-l1,急淋(all)l1,紅細(xì)胞系統(tǒng)參數(shù),直方圖 :紅細(xì)胞總數(shù) :血紅蛋白濃度 :紅細(xì)胞壓積 :平均紅細(xì)胞體積 :平均血紅蛋白量 :平均血紅蛋白濃度 :紅細(xì)胞體積分布寬度,三種直方圖的典型變化- 缺鐵性貧血的直方圖,特點: 曲線波峰左移,峰底變寬, 顯示小細(xì)胞不均一性,三種直方圖的典型變化- 巨幼紅細(xì)胞貧血治療前的直方圖,特點: 曲線波峰右移,波底增寬, 顯示明顯的大細(xì)胞不均一 性,三種直方圖的典型變化- 輕型-海洋性貧血的直方圖,特點: 小峰左移,峰底變窄, 典型的小細(xì)胞均一性貧血,紅細(xì)胞體積分布寬度的臨床意義,一、定義: 紅細(xì)胞體積分布寬度(red blood cel
8、ls volume distribution width)是反映周圍血紅細(xì)胞體積異質(zhì)性的參數(shù),用所測單個紅細(xì)胞體積的變異系數(shù)來表示(cv=sd/x也可用sd表示)。 rdw-sd指把直方圖頂點的高度定為100%,自下而上高度為20%時的紅細(xì)胞分布寬度;rdw-cv指假定紅細(xì)胞直方圖分布曲線為正規(guī)分布曲線時,把標(biāo)準(zhǔn)偏差除以mcv,再乘以100所得出的數(shù)值,紅細(xì)胞體積分布寬度rdw的臨床意義,缺鐵性貧血與輕型地中海的鑒別診斷 有關(guān)缺鐵性貧血的早期診斷與治療 用于貧血的形態(tài)學(xué)分類(mcv/rdw,缺鐵性貧血與輕型地中海貧血的鑒別,rdw是兩者鑒別的參考指標(biāo): 1、ida患者rdw100%升高; 2、
9、輕型地中海貧血患者基本正常,缺鐵性貧血的早期診斷,uchida對1648例學(xué)生進(jìn)行了各項指標(biāo)的觀察, 結(jié)果顯示: mcv rdw 正常人 (894fl)(12.7 0.7)% 隱性缺鐵前期(894fl)(13.7 0.7)% 隱性缺鐵期 (866fl)(14.0 1.5)% ida患者 79fl (15.6 1.7),缺鐵性貧血的治療過程,貧血的形態(tài)學(xué)分類(mcv/rdw,ret 檢測參數(shù),dna/rna核酸熒光染色 參 數(shù):ret, irf, lfr, mfr, hfr, plt-o,內(nèi)置全自動ret分析及成熟度分類 激光染色法檢測plt,ret 試劑系統(tǒng),staining: ploymet
10、hine: rna oxazine: dna,ret,wbc,rbc,high level fluorescence,low level fluorescence,very high level fluorescence,reagent: retsearch ii (diluent + dye,fluorescence(rna,ret-散點圖,forward scatter(volume,mfr,hfr,lfr,plt,rbc-o,ret,wbc,irf,網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測的臨床意義 ret,irf(mfr+hfr,ret是一個獨立的監(jiān)測骨髓造血功能恢復(fù)的參數(shù) irf是評估造血功能恢復(fù)的可靠依據(jù)
11、irf是評估造血功能恢復(fù)比ret更敏感的指標(biāo) ret增高:表示骨髓造血功能旺盛。急性溶血性貧血,急性失血等明顯增高。增生性貧血,骨轉(zhuǎn)移等輕度升高。 ret減少:腎臟,內(nèi)分泌疾病,溶貧再生危象,再生障礙性貧血,放化療后等,plt-i,報告,plt-o 用于明顯的病理性標(biāo)本,plt-o,xt-2000i以電阻抗法plt-i為準(zhǔn) 當(dāng)出現(xiàn)異常標(biāo)本時, xt-2000i會轉(zhuǎn)換用光學(xué)法plt-o檢測,plt-i/o 散射圖,直方圖(直流阻抗法,散射圖(光學(xué)法,plt-i/plt-o 兩種檢測方法,plt-i: rbc/plt通道 電阻抗每次檢測20-25萬個細(xì)胞,而ret通道內(nèi)激光法每次只能檢測60000
12、個細(xì)胞,其中plt3000個 電阻抗法的plt數(shù)目的準(zhǔn)確性與重復(fù)性比較好 plt-o: ret/plt-o通道 激光法對plt的形態(tài)鑒別能力強 異常標(biāo)本中的小rbc、wbc碎片、或plt數(shù)目較少時,激光法能更準(zhǔn)確地將plt鑒別出來,plt-i和plt-o轉(zhuǎn)換的標(biāo)準(zhǔn),紅細(xì)胞低鑒別線rl(%)10% 血小板低鑒別線pl(%)9% 血小板高鑒別線pu(%)39% 血小板高鑒別線pu(%)23fl 和pu20% 存在細(xì)胞碎片 存在紅細(xì)胞凝集 血小板高鑒別線pu%13%和plt35fl45% 和 plt-i#80 x109/l plt-i115,血小板系統(tǒng)參數(shù),直方圖 :血小板計數(shù) :血小板體積分布寬度
13、 :平均血小板體積 p c t:血小板壓積 :大血小板比例,血小板直方圖的臨床意義,在多種疾病中plt直方圖均可發(fā)生改變,如:特發(fā)性血小板減少性紫癲,特點是血小板數(shù)量減少,巨大血小板增多,直方圖表現(xiàn)為曲線峰右移,而窄峰圖則常因plt減少所致。 影響因素: 曲線峰左移,可能存在細(xì)胞漿碎片; 曲線峰右移,常表示存在異常紅細(xì)胞 (裂細(xì)胞或極端小的紅細(xì)胞,p-lcr,參考值:0.13-0.43 體積超過12fl的plt占總plt的比率 對檢測血小板凝集、與紅細(xì)胞的重疊以及監(jiān)視血小板造血功能等有意義,mpv,參考值:9.4-12.5 fl 是反映骨髓造血功能是否良好的指標(biāo)。 用于病情觀察:白血病化療時,mpv增加是骨髓恢復(fù)的第一個征兆,mpv與plt聯(lián)合檢測的臨床意義,標(biāo)本采集要求,最佳血液標(biāo)本靜脈血,靜脈血和末梢血因采血方式和部位的不同而 存在較大差別: 血小板plt:靜脈血末梢血 白細(xì)胞wbc:靜脈血末梢血 紅細(xì)胞rbc:靜脈血略末梢血 針刺采血: 皮膚刺破后,導(dǎo)致血小板形成紅色血栓 活化血小板,使血小板聚集 同時在血管中間形成一運動迅速,成分含量高的液流,五分類血液分析儀標(biāo)本采集要求,1、最好一次穿刺采血成功 2、使用封閉式真空注射器和廠家生產(chǎn)的 edta-k2抗凝管 3、采血后應(yīng)立即顛倒混勻數(shù)次,使血液與抗 凝劑充分混合,防止血
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