復(fù)方甲磺酸帕珠沙星滴眼液的制備及質(zhì)量控制

1、復(fù)方甲磺酸帕珠沙星滴眼液的制備及質(zhì)量控制Preparation and quality control of compound pazufloxacin mesilate eye dropsZHAN Feng,LI Jin-wei, HE Xi-kui,et al. ZhengzhouHospital of Traditional Chinese Medicine ， Zhengzhou City ， Henan450007,China?【】 Objective To prepare compound pazufloxacinmesilate eye drops and a to establ

2、ish a method of it s qualit control. Methods Compoundpazufloxacin mesilate eye drops were parepared with pazufloxacin mesilate , sodium chloride , dexamethasone sodium phosphate , and ethylparaben . The content of moxifloxacin h drochloride was d etermined by HPLC. Results A linear calibration curve

3、 for assay of Pazufloxacin mesilate was obtained in therange of 20.080.0 卩 g/ml(r=0.999 9) and the average recoveries were 97.7% (RSD=1.96% n=6). ConclusionFormation technique is simple and quality can be controled ， thus deserving to be popularized.?甲磺酸帕珠沙星 (pazufloxacin mesilate) 是日本富山化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社研究開發(fā)

4、的新一代氟喹諾酮類抗菌藥,于 2002年 4月在日本首次上市 1 。該藥在化學(xué)結(jié)構(gòu)上作了重要的改變，將 C10上傳統(tǒng)的C-N鍵改變成C-C鍵，臨床表現(xiàn)出很高的安全性， 體內(nèi)外試驗(yàn)表明 , 甲磺酸帕珠沙星對(duì)革蘭陰性菌的活性同其他氟 喹諾酮類藥物相當(dāng) , 而對(duì)革蘭陽(yáng)性菌的活行明顯增強(qiáng) , 尤其是對(duì) 厭氧菌有較強(qiáng)的抗菌活性 , 且抗生素后效應(yīng)時(shí)間長(zhǎng) 2-3 ?，F(xiàn)開發(fā) 有甲磺酸帕珠沙星注射液和粒劑， 尚未見其他劑型。 為拓寬其使 用范圍, 筆者研制復(fù)方甲磺酸帕珠沙星滴眼液，并建立質(zhì)量控制 方法。 ?1 材料與方法 ?1.1儀器 島津LC-1OAD型高效液相色譜儀，SPD-1OA型紫外檢測(cè)器，SCL-1

5、0A型控制器，C-RTA型色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)。？1.2試藥 甲磺酸帕珠沙星原料（浙江司太立制藥XX公司，批號(hào)： 20061106），甲磺酸帕珠沙星對(duì)照品（含量 99.9%，江蘇 亞邦醫(yī)藥XX公司提供）。地塞米松磷酸鈉（天津藥業(yè)XX公司， 批號(hào)：011006）。氯化鈉 （ 江蘇南通勤奮制藥廠， 批號(hào)：20030312） 。 羥苯乙酯（廣州氣體廠XX公司，批號(hào)：20031001）。乙腈為色譜 純，其余均為分析純。 ？1.3 處方 甲磺酸帕珠沙星 3.0 g 氯化鈉 8.5 g 地塞米松磷 酸鈉 0.15 g 羥苯乙酯 0.3 g 注射用水加到 1000 ml 。 ？1.4 制備 取羥苯乙酯溶解于適量熱

6、注射用水中，依次加入 氯化鈉、地塞米松磷酸鈉攪拌使溶解。添加適量注射用水，再加入甲磺酸帕珠沙星，攪拌使溶解。過濾，自濾器添加注射用水到1000 ml,混勻，100C流通蒸汽滅菌 30 min，放冷至室溫，無菌 分裝即可。 ?1.5 質(zhì)量控制 ?1.5.1 性狀 本品為微黃色澄明液體。 ?1.5.2 鑒別 本品顯有機(jī)氟化物的鑒別反應(yīng) 4 。取本品含量 測(cè)定項(xiàng)下溶液，在335 nm與249 nm波長(zhǎng)處有最大吸收。？1.5.3地塞米松磷酸鈉4取本品1 ml，蒸干，加硫酸3 ml，振搖溶解，5 min內(nèi)顯淡紅棕色，加水10 ml混勻，顏色消失。？1.5.4 檢查 取本品，檢測(cè)其 pH值應(yīng)為5.07.0

7、。其他應(yīng) 符合 2005 年版中國(guó)藥典(二部)附錄眼用制劑項(xiàng)下的有關(guān) 規(guī)定。 ？2 結(jié)果 ？2.1 含量測(cè)定 ？2.1.1 色譜條件 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-10%甲磺酸溶液 -1.0 mol/L磷酸氫二鉀溶液 -水(10 : 7 : 153)(用三乙胺調(diào)節(jié) pH值至3.0 )( 30 : 170)為 流動(dòng)相，流速2.0 ml/min，溫度20 C25C,進(jìn)樣量為20 l , 測(cè)定波長(zhǎng)范圍200500 nm,檢測(cè)波長(zhǎng)為249 nm。？2.1.2 溶液的制備 對(duì)照品溶液 : 取干燥至恒重的甲磺酸 帕珠沙星對(duì)照品，用流動(dòng)相制成每毫升中含約 40卩g的溶液， 作為對(duì)照品溶液； 供試品

8、溶液及空白溶液： 精密量取甲磺酸帕珠沙星凝膠適量用流動(dòng)相制成每毫升中含約40卩g的溶液，作為供試品溶液。同法制備不含甲磺酸帕珠沙星的空白溶液。 ?2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線 精密取干燥至恒重的甲磺酸帕珠沙星對(duì)照品適量，用流動(dòng)相稀釋至 20.0、30.0、40.0、50.0、80.0卩g/ml , 分別量取20卩l(xiāng)注入色譜儀記錄色譜圖，以濃度C為橫坐標(biāo)，峰面積X為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程X=50691C-5 707, r=0.999 9，結(jié)果顯示本品在 20.080.0卩g/ml濃度范圍內(nèi)， 線性關(guān)系良好。 ?2.3 檢測(cè)波長(zhǎng) 取對(duì)照品溶液，同時(shí)取按照處方量配制不含甲磺酸帕珠沙星（含地塞米松磷酸鈉

9、、氯化鈉、羥苯乙酯）的空 白溶液，在200500 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，甲磺酸帕珠沙星溶液 在 249 、 335 nm 波長(zhǎng)處有最大吸收 , 因在 249 nm 處吸收系數(shù) 相對(duì)較大，而空白溶液在此波長(zhǎng)處無吸收。在249 nm波長(zhǎng)處，處方中的各組分對(duì)測(cè)定無干擾，故選定249 nm作為甲磺酸帕珠沙星溶液的檢測(cè)波長(zhǎng)。 ?2.4 精密度試驗(yàn) 取2.1.2 項(xiàng)下對(duì)照品溶液 1 d 內(nèi) 0、 4、 8、12、 16 h 在 2.2.1 色譜條件下分別進(jìn)樣 5次，結(jié)果日內(nèi) RSD=0.63%。 ?2.5 溶液穩(wěn)定型試驗(yàn) 取于室溫條件下放置的對(duì)照品溶液， 連續(xù)5 d進(jìn)樣檢測(cè)，結(jié)果日間峰面積 RSD=1.91

10、%未發(fā)現(xiàn)雜質(zhì)峰。 結(jié)果表明，甲磺酸帕珠沙星溶液在考察時(shí)間范圍內(nèi)基本穩(wěn)定。 ?2.6 回收率試驗(yàn) 精密稱取甲磺酸帕珠沙星對(duì) 照品適量 （30.5 、29.3、39.7、41.1、50.6、51.3 mg） ,置 50 ml 容量瓶中，按處方比例加入空白全輔料 , 加流動(dòng)相溶解、 定容, 搖 勻后吸取 5 ml 置于 100 ml 容量瓶中 , 加流動(dòng)相溶解、定容。精 密量取續(xù)濾液20卩I進(jìn)樣，測(cè)定含量，得平均回收率為98.53%, RSD=1.77%（n=6）, 詳見表 1。 ?2.7 重現(xiàn)性試驗(yàn) 按樣品含量測(cè)定方法， 測(cè)定同一批樣品 （批 號(hào) 060418），結(jié)果含量平均值為 96.9%， R

11、SD=2 . 01%（n=6）。 ?2.8樣品含量測(cè)定 精密稱取甲磺酸帕珠沙星滴眼液1 ml置于 100 mI 容量瓶中，加流動(dòng)相溶解、定容 , 搖勻，精密量取續(xù)濾 液20卩I注入色譜儀測(cè)定含量，經(jīng)測(cè)定批號(hào)為051205、060129、 0600312的樣品，含量分別為標(biāo)示量的 97.1%、99.5%、96.7%。?2.9 穩(wěn)定型試驗(yàn) 取本品包裝完好，于室溫避光條件下放置12mo的樣品（批號(hào)為051205），觀察其外觀顏色無變化；參照 含量測(cè)定項(xiàng)下，測(cè)定含量為標(biāo)示量的96.8%。結(jié)果表明本品性質(zhì)穩(wěn)定。 ?2.10刺激性試驗(yàn) 取體質(zhì)量在2.03.0 kg健康家兔5只，2次/d分別于每只家兔一側(cè)眼

12、內(nèi)滴入本品，另一側(cè)同時(shí)滴入生理鹽水做對(duì)照。記錄給藥后 1、 6、 24、 48、 72 h 和連續(xù) 7 d 的兔 眼局部反應(yīng)情況， 無發(fā)紅、充血現(xiàn)象。 結(jié)果表明本制劑無刺激性， 眼用安全。 ?3 討論 ?甲磺酸帕珠沙星屬第四代喹諾酮類抗菌藥 , 其作用機(jī)制為DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑，使細(xì)菌的 DNA無法形成超螺旋結(jié)構(gòu)，導(dǎo) 致細(xì)菌無法分裂和增值而死亡 5 。體內(nèi)、體外試驗(yàn)表明該藥具 有廣譜抗菌性 , 對(duì)革蘭陽(yáng)性菌、革蘭陰性菌均有效。對(duì)多種感染 癥狀均有很高的療效 , 尤其對(duì)呼吸道感染、外科手術(shù)感染如膽道 感染、尿路感染和眼內(nèi)感染療效更佳 , 而在中樞神經(jīng)系統(tǒng)方面的 副作用較弱 , 本品的不良反應(yīng)發(fā)生率與注射用頭孢菌素類藥物大 致相同,因此在使用這些藥物無效情況下 ,有望使用本品進(jìn)行治 療6 。本制劑使用的是帕珠沙星的甲磺酸鹽，