胃蛋白酶原PG臨床推廣-—PPT課件

1、 胃蛋白酶原胃蛋白酶原I/II （PG I/II）分泌部位）分泌部位 PG是胃底腺的主細(xì)胞和頸粘液細(xì)胞分泌是胃底腺的主細(xì)胞和頸粘液細(xì)胞分泌; PG除主細(xì)胞和頸粘液細(xì)胞分泌外，幽門腺和十二指腸除主細(xì)胞和頸粘液細(xì)胞分泌外，幽門腺和十二指腸 腺亦可產(chǎn)生腺亦可產(chǎn)生. PGI&PGII 胃蛋白酶原胃蛋白酶原I/II( PG I/II) 介紹內(nèi)容介紹內(nèi)容 檢測方法 n放射免疫測定法放射免疫測定法(RIA)(RIA)：有放射性有放射性 n酶免疫測定法酶免疫測定法( EIA)( EIA)： 需樣少需樣少, , 較較低低特異性和靈特異性和靈 敏度敏度 n時間分辨熒光免疫分析法時間分辨熒光免疫分析法( TRFIA

2、)( TRFIA)：靈敏、簡便靈敏、簡便, , 較高特異性較高特異性、靈敏度靈敏度較低、易受干擾。較低、易受干擾。 n乳膠增強免疫比濁法：乳膠增強免疫比濁法：較較低低靈敏度及特異靈敏度及特異性性, ,方便方便 , ,適合大規(guī)模篩查適合大規(guī)模篩查，易受干擾，易受干擾。 五五、胃蛋白酶原檢測、胃蛋白酶原檢測 五五、胃蛋白酶原檢測、胃蛋白酶原檢測 酶標(biāo)板酶標(biāo)板 反應(yīng)底物反應(yīng)底物 包被抗體包被抗體 檢測抗原檢測抗原 酶標(biāo)抗體酶標(biāo)抗體 酶標(biāo)抗體酶標(biāo)抗體反應(yīng)產(chǎn)物反應(yīng)產(chǎn)物 酶免疫測定法酶免疫測定法 乳膠免疫測定法（乳膠免疫測定法（LIALIA法）法） n以血清或血漿為樣本，利用全自動生化分析儀對以血清或血漿

3、為樣本，利用全自動生化分析儀對 樣本的乳膠凝集反應(yīng)所導(dǎo)致的吸光度變化進行檢樣本的乳膠凝集反應(yīng)所導(dǎo)致的吸光度變化進行檢 測。測。 n將抗將抗PG IPG I（IIII）抗體與乳膠顆粒表面結(jié)合制成乳）抗體與乳膠顆粒表面結(jié)合制成乳 膠試劑，與試驗樣本中的膠試劑，與試驗樣本中的PG IPG I（IIII）反應(yīng)，使乳）反應(yīng)，使乳 膠顆粒產(chǎn)生凝集。在確定的波長下測定該反應(yīng)的膠顆粒產(chǎn)生凝集。在確定的波長下測定該反應(yīng)的 濁度變化，其變化量會隨著檢測樣本中濁度變化，其變化量會隨著檢測樣本中PG IPG I（IIII ）的濃度而成比例增加。根據(jù)已知濃度的）的濃度而成比例增加。根據(jù)已知濃度的PG IPG I（ II

4、II）標(biāo)準(zhǔn)液制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出樣本中）標(biāo)準(zhǔn)液制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出樣本中PGIPGI（IIII） 的濃度。的濃度。 + 乳膠顆粒 抗體 抗原 乳膠免疫測定法（乳膠免疫測定法（LIALIA法）法） 凝集產(chǎn)生濁度 化學(xué)發(fā)光（化學(xué)發(fā)光（chemiluminescencechemiluminescence）是指伴隨化學(xué)）是指伴隨化學(xué) 反應(yīng)過程所產(chǎn)生的光的發(fā)射現(xiàn)象。反應(yīng)過程所產(chǎn)生的光的發(fā)射現(xiàn)象。 某些物質(zhì)某些物質(zhì)( (發(fā)光劑發(fā)光劑) )在化學(xué)反應(yīng)時，吸收了在化學(xué)反應(yīng)時，吸收了 反應(yīng)過程中所產(chǎn)生的化學(xué)能，使反應(yīng)的產(chǎn)物分反應(yīng)過程中所產(chǎn)生的化學(xué)能，使反應(yīng)的產(chǎn)物分 子或反應(yīng)的中間態(tài)分子中的電子躍遷到激發(fā)態(tài)，子或反應(yīng)

5、的中間態(tài)分子中的電子躍遷到激發(fā)態(tài)， 當(dāng)電子從激發(fā)態(tài)回復(fù)到基態(tài)時，以發(fā)射光子的當(dāng)電子從激發(fā)態(tài)回復(fù)到基態(tài)時，以發(fā)射光子的 形式釋放出能量，這一現(xiàn)象稱為化學(xué)發(fā)光。形式釋放出能量，這一現(xiàn)象稱為化學(xué)發(fā)光。 化學(xué)發(fā)光法原理化學(xué)發(fā)光法原理 底物底物A A底物底物B B發(fā)光反應(yīng)發(fā)光反應(yīng) 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法（化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法（CLEIACLEIA） 胃蛋白酶原胃蛋白酶原I/II I/II （PGI/PGIIPGI/PGII） 試劑盒性能指標(biāo)試劑盒性能指標(biāo) BSBE 最低檢測限為最低檢測限為PGI:PGI:1 1ng/ml,PGII:ng/ml,PGII:1 1ng/mlng/ml 線性范圍線性范圍,PGI

6、:,PGI:200200ng/mLng/mL，PGII:PGII:100100ng/mLng/mL 抗干擾性：抗干擾性：0.1g/l0.1g/l的膽紅素、的膽紅素、18g/l18g/l的甘油三酯和的甘油三酯和2.5g/l2.5g/l 的血紅蛋白的血紅蛋白, RF, RF為為520IU/ml520IU/ml， 小于上述濃度的物質(zhì)不會小于上述濃度的物質(zhì)不會 對該試驗產(chǎn)生干擾對該試驗產(chǎn)生干擾 穩(wěn)定性：開蓋放在試劑倉中穩(wěn)定性：開蓋放在試劑倉中1414天，空白無變化，質(zhì)控結(jié)果天，空白無變化，質(zhì)控結(jié)果 基本無變化，基本無變化，可兩點可兩點定標(biāo)定標(biāo) 采血要求采血要求 n靜脈采血靜脈采血2-3mL2-3mL于

7、普通管中（不能使用含于普通管中（不能使用含 EDTAEDTA、枸櫞鹽酸試管），離心分離出血清、枸櫞鹽酸試管），離心分離出血清 。 n2-82-8條件下，樣本可保存條件下，樣本可保存7 7天，天，-20-20可長可長 期保存。避免樣本反復(fù)凍融。期保存。避免樣本反復(fù)凍融。 五五、胃蛋白酶原檢測、胃蛋白酶原檢測 檢驗方法檢驗方法 實驗前準(zhǔn)備：實驗前準(zhǔn)備： 1. 將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出，放置室溫（1825）平 衡至少30分鐘。 2. 將恒溫箱或恒溫水浴鍋溫度調(diào)到37，待溫度穩(wěn)定后使 用。 3. 取1包固體洗液用500mL純化水溶解后備用。 實驗步驟：實驗步驟： 較準(zhǔn)品較準(zhǔn)品 或血清或血清 酶結(jié)酶結(jié) 合物合物 室溫室溫 振蕩振蕩 洗板洗板 拍干拍干 發(fā)光底發(fā)光底 物物A A、B B 發(fā)光發(fā)光 儀檢測儀檢測 包被板包被板 3737溫育溫育 60min60min 河南美凱生物其他二類產(chǎn)品河南美凱生物其他二類產(chǎn)品 A A：化學(xué)發(fā)光定量檢測系列產(chǎn)品：化學(xué)發(fā)光定量檢測系列產(chǎn)品 1）性激素系列 LH、FSH、PRL、T、P、E2、fE3 2）甲功系列 T3、fT3、T4、fT4、TSH、Anti-TG、Anti-TPO 3）糖尿病系列 C-P、INS B B：膠體金快速檢測系列產(chǎn)品：膠體金快速檢測系列產(chǎn)品 LH、HCG C C：微生物類系列產(chǎn)品：微生物類系列產(chǎn)品 BV診斷（唾液