小鼠腫瘤模型的建立方法及評價手段

1、小鼠腫瘤模型的建立方法及評價手段 【摘要】動物模型的建立是進行醫(yī)學科研工作的重要研究手段之一。腫瘤是機體自身與外界施加因素之間對立平衡，外界因素的干擾逐漸被機體所轉(zhuǎn)化和接納，從而形成腫瘤。因此，任何影響正常機體內(nèi)外環(huán)境和施加因素的條件均可改變腫瘤形成的起始、進展和結(jié)局。本文就幾種腫瘤動物模型的建立過程，對不同模型特點和選擇進行評價。 【關(guān)鍵詞】 腫瘤；動物模型；評價方法 【中圖分類號】r392.11 【文獻標識碼】b【文章編號】1004-4949（2014）03-0459-02 人類疾病的發(fā)展過程十分復(fù)雜，為深入探討疾病的發(fā)生機制以人體作為實驗對象存在很多的局限性，而且很多的實驗方法在道義上也

2、受到限制。人類疾病動物模型是在醫(yī)學科學研究中建立的具有人類疾病模擬性表現(xiàn)的動物疾病材料。借助于動物模型來間接研究一些疾病的發(fā)病全過程，從而更方便、更有效、更全面的認識人類疾病的發(fā)生發(fā)展規(guī)律，同時也避免了人體實驗造成的傷害。目前已展現(xiàn)出大量建立腫瘤動物模型的方法，本文做一綜述。 1 小鼠腫瘤動物模型的類型及建立方法 1.1 自發(fā)性小鼠腫瘤模型 自發(fā)性腫瘤是指實驗動物在自然情況下，未經(jīng)任何有意識的人工處理而發(fā)生的腫瘤。其發(fā)病特征和人類腫瘤很相似，所以對人類腫瘤的研究有很高的價值，而且，自發(fā)腫瘤的產(chǎn)生可提供前瞻性和回顧性研究。若自發(fā)性腫瘤沒有人為因素的干擾，則更接近于人體腫瘤的真實狀態(tài)。然而，與人類

3、疾病完全相同的動物自發(fā)性疾病模型并不多，且樣本數(shù)量有限，而且，在自然狀態(tài)下，細胞癌變的概率較低，故很難得到條件滿足、數(shù)量足夠的動物模型，所以該法在研究中很少使用。 1.2 誘發(fā)性小鼠腫瘤模型 人為地運用各種致癌因素作用于實驗動物的特定組織或器官，從而產(chǎn)生相應(yīng)腫瘤，這就是誘發(fā)性動物腫瘤模型。給藥途徑和誘導(dǎo)劑的不同，導(dǎo)致最后生成的腫瘤的類型有差異，其成瘤率也不一樣。化學誘導(dǎo)的腫瘤屬實驗動物的原發(fā)腫瘤，其發(fā)病機制及腫瘤生長環(huán)境接近于人體原發(fā)腫瘤，建立方法相對簡單，實驗重復(fù)性好，因此目前運用較為廣泛。但該方法誘導(dǎo)周期仍較長，成瘤率與移植法相比也有一定差距1-2。1941年，loreny和stewart

4、用二甲蒽喂養(yǎng)小鼠，成功誘發(fā)小腸腫瘤。此后，人們又陸續(xù)發(fā)現(xiàn)許多化合物，如多環(huán)芳烴類、亞硝胺類和偶氮染料均具有致癌性3，常見的為二甲胺肼（dmh）、黃曲霉素等。 1.3 移植性小鼠腫瘤模型 將外源性腫瘤移植到小鼠體內(nèi)而形成腫瘤，這種方法建立的模型稱之為移植性小鼠腫瘤模型。此模型與人類腫瘤有著類似的生物學特性，因此應(yīng)用的較多。按移植部位的不同，可分為皮下移植和原位移植等。原位移植模型是將人體的腫瘤細胞株或組織移植到實驗動物的相應(yīng)部位，其生長環(huán)境與原發(fā)腫瘤接近，較好的反應(yīng)腫瘤的生物學特性。皮下移植瘤是指將外來的組織或腫瘤細胞接種在試驗動物的皮下，使動物皮下形成瘤組織，常用的有細胞懸液皮下注射和組織塊皮

5、下種植。其建立的模型成瘤率高，容易建立和觀察，也能較好地反應(yīng)腫瘤的生物學特性。 1.4 轉(zhuǎn)基因小鼠腫瘤模型 應(yīng)用分子生物學方法對實驗動物相應(yīng)的基因進行改造或修飾，培育出相應(yīng)腫瘤的動物模型稱之為轉(zhuǎn)基因動物腫瘤模型。建立轉(zhuǎn)基因腫瘤動物模型的方法有兩種：外源癌基因?qū)?，基因敲除。人們將可誘導(dǎo)表達系統(tǒng)用于調(diào)控基因的時相表達，如反式因子vtta與四環(huán)素類似物強力霉素結(jié)合后可激活四環(huán)素操縱子的表達，而tta與強力霉素結(jié)合則抑制四環(huán)素操縱子的表達4，誘導(dǎo)性的hras-g12v小鼠黑色素瘤5、c-myc誘導(dǎo)性表達的t細胞淋巴瘤6及bar-abl誘導(dǎo)性表達的急性髓系白血病等腫瘤模型。轉(zhuǎn)基因動物模型在理論上可能與

6、原發(fā)腫瘤一致，但目前對癌基因及抑癌基因的研究還有待深入，只能作為一種發(fā)展方向，短期內(nèi)較難普及。隨著腫瘤發(fā)病機制的深入研究及轉(zhuǎn)基因技術(shù)的普及，本法將漸趨成熟7。 2小鼠腫瘤模型的評價手段 2.1 剖取腫瘤探查 動物模型建立后需對該建模方法進行評價，評價方法一般是待腫瘤形成后仔細觀察腫瘤的生長情況，每隔一段時間處死一批動物，取出瘤組織測量其大小、觀察組織形態(tài)及周圍組織改變、腫瘤的轉(zhuǎn)移情況，并做腫瘤細胞生物學觀察，進行腫瘤標志物檢測等。但剖腹探查必須定時處死動物，樣本量越來越少，觀察的情況和信息收集也十分有限。 2.2 mri 顯像技術(shù) mri 顯像技術(shù)是臨床腫瘤診斷中十分重要的手段，其組織分辨率高

7、，無創(chuàng)傷，在動態(tài)監(jiān)測活體腫瘤生長情況及腫瘤與周圍組織的相互作用的同時還可獲得檢測部位的解剖與生理信息，但該技術(shù)需特殊設(shè)備，需專業(yè)技術(shù)人員操作完成，且一般實驗室無專門用于活體動物觀察的磁共振儀，不適合對大量實驗動物進行連續(xù)觀察8。 2.3 活體熒光成像技術(shù) 活體生物熒光成像技術(shù)是近年來發(fā)展起來的一種分子生物學檢測技術(shù)。運用該方法，能夠直接監(jiān)控生物體內(nèi)腫瘤的生長及轉(zhuǎn)移，動態(tài)觀測腫瘤細胞的運動，甚至能夠觀察到小的轉(zhuǎn)移灶，所得的數(shù)據(jù)真實可信。活體成像技術(shù)是目前發(fā)展較快的技術(shù)，是一種較理想的動態(tài)監(jiān)測腫瘤生長情況的方法，隨著腫瘤分子生物學研究的深入和腫瘤特異性蛋白的發(fā)現(xiàn)，其運用將更廣泛10。 3展望 建立

8、動物疾病模型是促進醫(yī)學科學發(fā)展的重要途徑之一，無論在疾病的發(fā)生機制的探討上或預(yù)防與治療上，都起著不容忽視的作用。欲研究腫瘤的整個生理過程和機體對腫瘤的免疫作用等，尚待建立起更好的原發(fā)腫瘤模型。隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展和腫瘤發(fā)病機制研究的不斷深入，更成熟的轉(zhuǎn)基因腫瘤動物模型將逐步建立，并運用于科學及臨床研究。 參考文獻 1倪艷艷，范躍祖.結(jié)腸癌動物模型的研究進展j.同濟大學學報（醫(yī)學版），2010，31（2）：1-10. 2李宇華，等.一種結(jié)腸炎相關(guān)的結(jié)腸癌模型的復(fù)制j.世界華人消化雜志，2007，15（3）：234-239. 3梁朝霞，等.小鼠腫瘤模型的研究進展j. 國外醫(yī)學： 衛(wèi)生學分冊， 20

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