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1、1江西科苑生物藥業(yè)有限公司 2014年6月高效液相色譜儀高效液相色譜儀(HPLC)(HPLC)的保養(yǎng)的保養(yǎng)2HPLC的環(huán)境設(shè)置: HPLC的日常操作條件:溫度:1030;相對(duì)濕度80; 最好是恒溫、恒濕,遠(yuǎn)離高電磁干擾、高振動(dòng)設(shè)備,有良好的通風(fēng)設(shè)施。3HPLC用水可以通過以下幾個(gè)方面來得到:1 專門的純水機(jī)或超純水機(jī);2 去離子水重蒸;3 二次或三次重蒸水;4 采用類似家用的純水機(jī);5 市場(chǎng)上瓶裝的純凈水或蒸餾水;6 其它途徑;4 不管采用何種途徑,配制流動(dòng)相應(yīng)用新鮮水,水質(zhì)越高放置時(shí)間越短。 理想的HPLC用水應(yīng)為18.2的超純水,并通過0.22um的濾膜,除去熱源、有機(jī)物、無機(jī)離子及空氣等
2、。5HPLCHPLC六通閥進(jìn)樣器的使用及保養(yǎng)六通閥進(jìn)樣器的使用及保養(yǎng) 六通閥進(jìn)樣器是高效液相色譜系統(tǒng)中最理想的進(jìn)樣器,它是由圓形密封墊(轉(zhuǎn)子)和固定底座(定子)組成。美國(guó)Rheodyne公司的六通閥進(jìn)樣器最為通用,各大HPLC儀器制造商均以此產(chǎn)品作為儀器的進(jìn)樣器。6 工作原理工作原理 手柄位進(jìn)樣(Load)位置時(shí),樣品經(jīng)微量進(jìn)樣針從進(jìn)樣孔注射進(jìn)定量環(huán),定量環(huán)充滿后,多余樣品從放空孔排出; 將手柄轉(zhuǎn)動(dòng)至進(jìn)樣(Inject)位置時(shí),閥與液相流路接通,由泵輸送的流動(dòng)相沖洗定量環(huán),推動(dòng)樣品進(jìn)入液相分析柱進(jìn)行分析。7 雖然六通閥進(jìn)樣器具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、使用方便、壽命長(zhǎng)、日常無需維修等特點(diǎn),但正確的使用和維護(hù)
3、將能增加使用壽命,保護(hù)周邊設(shè)備,同時(shí)增加分析準(zhǔn)確度。如使用得當(dāng)?shù)脑?,六通閥進(jìn)樣器一般可連續(xù)進(jìn)樣3萬次而無需維修。8 手柄處于Load和Inject之間時(shí),由于暫時(shí)堵住了流路,流路中壓力驟增,再轉(zhuǎn)到進(jìn)樣位,過高的壓力在柱頭上引起損壞,所以應(yīng)盡快轉(zhuǎn)動(dòng)閥,不能停留在中途。在HPLC系統(tǒng)中使用的注射器針頭有別于氣相色譜,是平頭注射器。一方面,針頭外側(cè)緊貼進(jìn)樣器密封管內(nèi)側(cè),密封性能好,不漏液,不引入空氣;另一方面,也防止了針頭刺壞密封組件及定子。9 六通閥進(jìn)樣器的進(jìn)樣方式有部分裝液法和完全裝液法兩種。使用部分裝液法進(jìn)樣時(shí),進(jìn)樣量最多為定量環(huán)體積的75,如20l的定量環(huán)最多進(jìn)樣15l的樣品,并且要求每次進(jìn)
4、樣體積準(zhǔn)確、相同;使用完全裝液法進(jìn)樣時(shí),進(jìn)樣量最少為定量環(huán)體積的3至5倍,即20l的定量環(huán)最少進(jìn)樣60至100l的樣品,這樣才能完全置換樣品定量環(huán)內(nèi)殘留的溶液,達(dá)到所要求的精密度及重現(xiàn)性。推薦采用100ul的平頭進(jìn)樣針配合20ul滿環(huán)進(jìn)樣。10 可根據(jù)進(jìn)樣體積的需要自已制作定量環(huán),一般不要求精確計(jì)算定量環(huán)的體積,譬如,一根名義上10l的定量環(huán),實(shí)際是9l還是1ll并不重要,因?yàn)楸粶y(cè)樣品和校正樣品的進(jìn)樣體積保持一致,在計(jì)算結(jié)果時(shí)誤差都被抵消了。11 進(jìn)樣樣品要求無微粒和能阻死針頭及進(jìn)樣閥的物質(zhì),樣品溶液均要用045m的濾膜過濾。防止微粒阻塞進(jìn)樣閥和減少對(duì)進(jìn)樣閥的磨損。為防止緩沖鹽和其它殘留物質(zhì)留
5、在進(jìn)樣系統(tǒng)中,每次結(jié)束后應(yīng)沖洗進(jìn)樣器,通常用不含鹽的稀釋劑、水或不含鹽的流動(dòng)相沖洗,在進(jìn)樣閥的Load和Inject位置反復(fù)沖洗,再用無纖維紙擦凈注射器針頭的外側(cè)。12泵的保養(yǎng):使用流動(dòng)相盡量要清潔;進(jìn)液處的砂芯過濾頭要經(jīng)常清洗;流動(dòng)相交換時(shí)要防止沉淀; 避免泵內(nèi)堵塞或有氣泡;每次分析結(jié)束后,要反復(fù)沖洗進(jìn)樣口,防止樣品的交叉污染;13柱子在任何情況下不能碰撞、彎曲或強(qiáng)烈震動(dòng);當(dāng)柱子和色譜儀聯(lián)結(jié)時(shí),閥件或管路一定要清洗干凈;要注意流動(dòng)相的脫氣;避免使用高粘度的溶劑作為流動(dòng)相;進(jìn)樣樣品要提純;嚴(yán)格控制進(jìn)樣量;每天分析工作結(jié)束后,要清洗進(jìn)樣閥中殘留的樣品;每天分析測(cè)定結(jié)束后,都要用適當(dāng)?shù)娜軇﹣砬逑粗蝗?/p>
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