動物細胞融合與單克隆抗體(講課)

1、2.2動物細胞工程.2.2動物細胞融合與單克隆抗體分化發(fā)育番茄一馬鈴薯（理想圖）雜種植株材料1: 1970年，有兩位科學(xué)家做了一個人一鼠細胞融合的實驗，以證 明細胞膜的流動性。那么，如何實現(xiàn)人一鼠細胞的融合，動物細胞融合 后還有什么用途呢？動物細胞融合1 概念:動物細胞融合(cell fusion)也成細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細 胞的過程。融合和形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳物質(zhì)的單核細胞，稱為雜交細胞。2、原理：細胞膜的流動性3融合過程:誘導(dǎo)融合的方法?齊他1沁Ag物理方法:電激等 誘導(dǎo)方法#化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）生物法：滅活的病毒3 融合過程:為什么滅活的 病玉能

2、作誘導(dǎo)劑?植物細胞雜交與動物細胞融合的比校比較項目原理植物體細胞雜交細胞膜的流動性 細胞的全能性動物細胞融合細胞膜的流動性融合前處理去除細胞壁后誘 導(dǎo)原生質(zhì)體融合使用的酶誘導(dǎo)方法纖維素酶.果膠酶物理方法（離心.振蕩、電激）化學(xué)方法（PEG）使細胞分散后誘導(dǎo)細胞融合胰蛋白酶物理.化學(xué)方法 滅活的病毒主要用途獲得雜種植株制備單克隆抗體4 意義:突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交（種間、屬間、科間、動植物之間）成為可能。5 應(yīng)用:最重要的用途是 制備單克隆抗體動物細胞融合原理：細胞膜的流動性 過程：誘導(dǎo)融合的方法炬連搖動、植物細胞融合的主要區(qū)別用途:1重要的用途是制備單克隆抗體mKlMO 庁攻錄忡

3、EH物理法：離心、震動、電激 化學(xué)法：聚乙二醇(PEG) 、生物法：滅活的病毒（三）單克隆抗體 /思考1. 抗體由何種細胞產(chǎn)生？如何產(chǎn)生？C2. 抗體的化學(xué)本質(zhì)是什么？與抗原作用的特點？主要分布在哪里？用傳統(tǒng)的方法如何獲得抗體?衽0申flU e（三）單克隆抗體 /思考1. 抗體由何種細胞產(chǎn)生？如何產(chǎn)生？C2. 抗體的化學(xué)本質(zhì)是什么？與抗原作用的特點？主要分布在哪里？用傳統(tǒng)的方法如何獲得抗體?抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法抗一 原傳統(tǒng)抗血清抗原免疫多物效一種體應(yīng)B從血清中分離抗體該法制備抗體的特點：產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差靈敏度低。單克蹴體的制備單克隆抗體:單個細胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性 質(zhì)單一特異性強的

4、抗體設(shè)計方案：利用效應(yīng)B細胞產(chǎn)生抗體的功能利用腫瘤細胞無限增殖的特性利用細胞融合的技術(shù)將兩種細胞融合獲得雜 交瘤細胞利用動物細胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細胞1、過程叫已免疫的b骨髓瘤細胞 注射抗原淋巴細胞細胞融合、篩選丿細胞培養(yǎng)!篩選，繼續(xù)培養(yǎng) 足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生 特定抗體的細胞群二體外培養(yǎng)，、注射到小鼠腹腔單克隆抗體單市隆捕體的制冬單克隆抗飾制備過程上一步下一步免疫小鼠淋巴細胞骨髓瘤細胞圖0雜交細胞贋選r 、啊|選（抗體樋I）體內(nèi)培粹/敏皺、崢培養(yǎng)A單克隆抗體 人一胡蘿卜等細胞的融合 :想了解更多信息，可通過網(wǎng)絡(luò)、電視、雜志等途徑關(guān)注 細胞融合和單克隆抗體的最新信息。MWt習(xí)1、科學(xué)家用小鼠骨

5、髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞, 經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是( A )A. 經(jīng)過免疫的B淋巴細胞 C.經(jīng)過免疫的T淋巴細胞B. 沒經(jīng)過免疫的T淋巴細胞D.沒經(jīng)過免疫的B淋巴細胞2動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較中，正確的是D)A.誘導(dǎo)融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段基本相同C. 操作步驟基本相同D.都能形成雜種細胞3單克隆抗體制備過程中培育的雜交細胞是（D ）A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與肝細胞融合B由小鼠一個B淋巴細胞誘導(dǎo)融合而成C由小鼠一個B淋巴細胞與肌瘤細胞誘導(dǎo)融合而成D由小鼠一個B淋巴細胞與骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合而成4只能使動物細胞融合的常用誘導(dǎo)方法

6、是（B ）A. PEGB.滅活的病毒 C電刺激 D.離心5.單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導(dǎo)融合后, 養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是（C ）淋巴細胞小鼠骨髓瘤細胞 B淋巴細胞自身融合細胞小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞雜交瘤細胞A.C.B.D.6. “生物導(dǎo)彈”是指A. 單克隆抗體B. 雜交瘤細胞（D ）C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞D在單克隆抗體上連接抗癌藥物練一練細胞為動物細胞，請據(jù)圖回答問題:A.TI(1)若A細胞為骨髓瘤細胞B細胞為淋巴細胞那么D細胞 稱為 41_細胞.D細胞具有兩個親本細胞的特征.一方面因具有骨髓瘤細胞的 方式產(chǎn)生大 能分滋粗矚抗體，我們把該過程分泌的抗體 稱單克隆抗體們稱之為過程;另一方面(2) D細胞中產(chǎn)生的抗體其化學(xué)本質(zhì)是?成 該物質(zhì)的場所是翩齡1空制合成的合成過程包括轉(zhuǎn)術(shù)雖躋重要步驟.(3)D細胞中產(chǎn)生的抗體具有乍用與血清 抗體相比其優(yōu)越之處在于強特異性靈敏霽T|(4)若A