抗甲狀腺過氧化物酶抗體

1、Anti-thyroid peroxidase antibody Elecsys ? Systems 1010/2010/MODULARANALYTICSE170 | Roche Diagnostics GmbH, D-68298 Mannheim l 抗甲狀腺過氧化物酶抗體 用途： 用免疫學(xué)方法定量測定人血清或血漿中抗甲狀腺過氧化物酶抗體。電化學(xué)發(fā)光免疫測定試劑，適用于羅氏Elecsys1010 、 2010和 E170（ Elecsys 模塊）免疫測定分析儀。測定抗甲狀腺特異性過氧化物酶抗體（anti thyroid peroxidase,anti TPQ 有助于診斷自身免疫性甲 狀腺病。

2、概述 :甲狀腺過氧化物酶（TPO存在于甲狀腺細(xì)胞的微粒體中，并表達(dá)在細(xì)胞的表面。該酶與甲 狀腺球蛋白（Tg）協(xié)同作用將L-酪氨酸碘化，并將一碘酪氨酸和二碘酪氨酸聯(lián)接成為甲狀腺 激素T4、T3和rT3。TPG1一潛在的自身抗原。自身免疫性疾病引起的數(shù)種甲狀腺炎常伴有 血中TPOC體滴度升高。目前仍可經(jīng)常見到的"抗微粒體抗體”這一名詞，從臨床角度看，可認(rèn)為是抗TPOC體的同義詞，因為TPOC原發(fā)現(xiàn)較晚。但是檢測方法不同，兩者還是有區(qū)別的。 盡管兩種方法在臨床診斷敏感性上可以相比較，但由于抗TPOC體試驗采用純化的過氧化物酶作為抗原，所以在批間的重復(fù)性、臨床特異性方面均優(yōu)于抗"

3、微粒體抗體" 試驗?？筎PO抗體滴度升高可見于90%的慢性橋本甲狀腺炎以及70%的突眼性甲狀腺腫患者。本試驗與其他抗甲狀腺抗體測定方法，如抗-TG、抗TSHI體抗體同時測定可提高敏感性，但陰性不能排除自身免疫病的可能性。高滴度抗體與疾病的程度無關(guān)系。隨著病程的延長或是緩解期，抗體滴度可轉(zhuǎn)陰。如在疾病的緩解期再度出現(xiàn)抗體，即有惡化的可能。 原理：采用競爭法原理，整個過程18分鐘完成。 第1步：20履 標(biāo)本與釘（Ru）標(biāo)記的抗TPOC體混勻。 第2步：加入生物素化的TPG口鏈霉親和素包被的彳粒，標(biāo)本中的抗 TPOC體與釘（Ru）標(biāo) 記的抗TP航體競爭生物素化的TPOt原上的結(jié)合部位。形成

4、的復(fù)合物通過生物素、鏈酶親和 素之間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。 第3步：反應(yīng)混和液吸到測量池中，微粒通過磁鐵吸附到電極上，未結(jié)合的物質(zhì)被清洗液 洗去，電極加電壓后產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，通過光電倍增管進(jìn)行測定。 檢測結(jié)果由機(jī)器自動從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出。此曲線由儀器通過2點定標(biāo)校正，由從試劑條形碼掃描入儀器的原版標(biāo)準(zhǔn)曲線而得。 試劑：M鏈霉親和素包被的微粒（透明瓶蓋），1瓶，6.5ml。粒子濃度0.72g/ml ,生物素結(jié)合能力：470ng生物素/mg粒子。含防腐劑。R1: Ru（bpy）3 2+標(biāo)記的羊抗 TPOt體（灰蓋），1 瓶，10ml。濃度 1.0mg/l , TRIS緩沖液 0.1mol/l , pH7

5、.2o含防腐劑。R2：生物素化的TPOt組抗原（黑蓋），1瓶，10ml。濃度0.15mg/l , TRIS緩沖液0.03mol/l , pH7.0o含防腐劑。Cal1 :羊抗TPOt標(biāo)液1（白蓋）,1瓶,1.3ml。濃度約35 IU/ml ,人血清基質(zhì)。含防腐劑。 Cal2：羊抗TPOt標(biāo)液2（白蓋）,1瓶,1.3ml。濃度約350IU/ml ,人血清基質(zhì)。含防腐劑。PC ATPO1 PreciControl人抗 TPCM控品 1,（黑蓋），1瓶，1.0ml。濃度約 20IU/ml ,人血清基質(zhì)。含防腐劑。PCATPO2PreciControl人抗 TP頃控品 2,（黑蓋），1 瓶，1.0ml

6、。濃度約 100IU/ml ,人血清基質(zhì)。含防腐劑。定標(biāo)液和質(zhì)控液的含量與濃度范圍隨批而定，具體值標(biāo)在定標(biāo)液和質(zhì)控血清瓶的條形碼中以Anti-thyroid peroxidase antibody Elecsys ? Systems 1010/2010/MODULARANALYTICSE170| Roche Diagnostics GmbH, D-68298 Mannheim l抗甲狀腺過氧化物酶抗體 及質(zhì)控卡的條形碼中。儲存和穩(wěn)定性：存放在2 8度，?切莫倒置。未開封，可穩(wěn)定至標(biāo)明的保質(zhì)期。開封后，28度，6周；放在Elecsys2010或E170上，2周；放在 Elecsys1010 上，

7、 1周（使用后放回2 8度，如置20 25度，累計約20小時）。Cal1, Cal2: 開封后，2 8度 6周；放在儀器上，5小時。PC ATPO 1, PC ATPO 2: 開封后，2 8度 6周；放在儀器上，5小時。注意：不要凍存定標(biāo)液和質(zhì)控液。標(biāo)本采集和準(zhǔn)備：血清：按標(biāo)準(zhǔn)常規(guī)方法采集。血漿：肝素、EDTA-K3、枸檬酸鈉、氟化鈉/草酸-K抗凝均可。標(biāo)本在2 8度可穩(wěn)定3天，-20度至少可穩(wěn)定1 個月。只能凍融一次。含沉淀的標(biāo)本使用前需離心。不要加熱滅活標(biāo)本。標(biāo)本和質(zhì)控液禁用疊氮鈉防腐。方法：按儀器操作說明進(jìn)行操作。檢查試劑與消耗品是否充足。使用前需混勻微粒。儀器通過掃描試劑盒條形碼自動輸

8、入測試所需的特異性參數(shù)，不需手工輸入。如果特殊情況下儀器無法閱讀條形碼，可以手工輸入15位數(shù)字。曰ecsys2010和E170：將冷藏試劑預(yù)溫到20度后放置于儀器的試劑盤上，避免產(chǎn)生泡沫。儀器自動控制試劑溫度和開/ 關(guān)試劑瓶蓋。Elecsys1010 ： 將冷藏試劑預(yù)溫到20-25 度后放置于儀器的樣品/試劑盤上（室溫 20-25 度） ，避免產(chǎn)生泡沫。使用前手工打開試劑瓶蓋，使用后手工關(guān)閉試劑瓶蓋并放回2 8度。將 Cal1 、 Cal2 放在儀器的標(biāo)本區(qū)。僅在定標(biāo)時打開蓋子。定標(biāo)液瓶上的條型碼含有定標(biāo)所需的信息，由儀器自動讀入。定標(biāo)后將Call , Cal2放回2-8度。將PC A-TPO

9、1, PCA-TPO嵌在儀器的標(biāo)本區(qū)。儀器能自動讀入質(zhì)控血清瓶條形碼所含有的信息。分析完成后放回2-8 度。定標(biāo)：每批抗-TPO試劑有一條形碼標(biāo)簽，含有該批試劑定標(biāo)所需的特殊信息。應(yīng)用Call , Cal2定標(biāo)液定標(biāo)。定標(biāo)頻率：每一試劑盒做一次重新定標(biāo)：每日定標(biāo)：使用同一試劑盒（Elecsys1010 的平衡溫度：20 32度）各分析儀均適用的情況：根據(jù)要求進(jìn)行標(biāo)定：如質(zhì)控結(jié)果超出范圍時。質(zhì)控：PreciControl抗-TPO1和抗-TPO”及其它合適的質(zhì)控品。各濃度區(qū)域的質(zhì)控至少每24工作時、 每個試劑盒或每一次定標(biāo)后測定一次。質(zhì)控間隔期應(yīng)適用于各實驗室的具體要求。檢測值應(yīng)落在確定的范圍內(nèi)

10、，如出現(xiàn)質(zhì)控值落在范圍以外，應(yīng)采取校正措施。計算：抗甲狀腺過氧化物酶抗體對每一個標(biāo)本，儀器會自動計算抗-TPg量。單位是IU/ml或KIU/l。干擾因素：該方法不受黃疸（膽紅素<66mg/dl ） 、 溶血 （血紅蛋白<1.5g/dl ） 、 脂血 （脂質(zhì) <2100mg/dl ）和生物素<60ng/ml等干擾。接受高劑量生物素（>5mg/天）治療的病人，至少要等最后一次攝入生物素8小時后才能采血。不受類風(fēng)濕因子干擾（1500U/ml ）。23種常用藥物經(jīng)試驗對本測定無干擾。偶爾會遇到抗鏈酶親和素抗體以及其它免疫反應(yīng)的干擾。檢測范圍：5 600 IU/ml 。稀釋：高于檢測范圍的標(biāo)本可用通用稀釋液稀釋。建議 1:5稀釋。稀釋后的標(biāo)本抗-TPO含量必須高于 200