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文檔簡介

1、緒論主要內(nèi)容:1. 微生物(microorganism): 是一群個(gè)體微小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼看不到必須借助顯微鏡才能觀察到的微小生物的總稱。 微生物按其大小、結(jié)構(gòu)和組成的不同可分為非細(xì)胞型微生物(病毒)、原核細(xì)胞型微生物(細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體、放線菌)和真核細(xì)胞型微生物(真菌)。2. 微生物學(xué)發(fā)展的三個(gè)時(shí)期: 經(jīng)驗(yàn)微生物學(xué)時(shí)期,實(shí)驗(yàn)微生物學(xué)時(shí)期,現(xiàn)代微生物學(xué)時(shí)期。 微生物學(xué)的兩個(gè)奠基人: 巴斯德(Louis Pasteur):推翻“自然發(fā)生說”、巴氏消毒法、制備疫苗。 郭霍(Robert Koch):固體培養(yǎng)基、染色法、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感染及郭霍法則。3. 醫(yī)學(xué)微生物學(xué)(medical

2、 microbiology)是研究與醫(yī)學(xué)有關(guān)的微生物的生物學(xué)性狀、致病性與免疫、診斷及預(yù)防的一門基礎(chǔ)和應(yīng)用學(xué)科。思考題1.定義:微生物、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)2.微生物分哪3類,有什么區(qū)別?并舉例說明。3.微生物的主要兩位奠基人是誰?4.近年醫(yī)學(xué)微生物學(xué)得到了迅速地發(fā)展,主要表現(xiàn)在哪些方面?5.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)未來發(fā)展方向是什么? 第一篇:細(xì)菌學(xué) 第1章:細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)主要內(nèi)容:1. 定義:細(xì)菌 L 型又稱細(xì)胞壁缺陷型,是細(xì)胞壁中的肽聚糖受到理化或生物因素的破壞或抑制,致使細(xì)胞壁發(fā)生缺陷而在高滲環(huán)境下仍能存活生長的一類細(xì)菌。革蘭陽性菌L型稱原生質(zhì)體,革蘭陰性菌L型稱原生質(zhì)球。某些細(xì)菌 L 型仍可有致病力,

3、在臨床癥狀明顯而常規(guī)的培養(yǎng)陰性時(shí)應(yīng)考慮之。 質(zhì)粒 (Plasmid): 存在于細(xì)菌胞質(zhì)中的染色體外的遺傳物質(zhì),為雙股環(huán)狀 DNA,決定細(xì)菌的某些遺傳性狀,如有無菌毛、細(xì)菌素、毒素和耐藥性。 莢膜 (capsule):由細(xì)菌所分泌的包繞在菌體外的一層粘液性物質(zhì),具有抗吞噬及粘附作用,與細(xì)菌的致病性有關(guān)。 鞭毛(flagellum):由菌體伸出的細(xì)長呈波狀彎曲的絲狀物,是細(xì)菌運(yùn)動(dòng)器官。 菌毛(pilus):某些菌體表面存在的纖細(xì)短直的絲狀物,分為普通菌毛和性菌毛。普通菌毛是細(xì)菌的粘附器官,與細(xì)菌的致病性有關(guān)。性菌毛由F質(zhì)粒編碼,參與遺傳物質(zhì)的傳遞。 芽胞(Spore):某些細(xì)菌在一定環(huán)境條件下,胞

4、質(zhì)脫水濃縮,在菌體內(nèi)部形成的圓形小體,可用于細(xì)菌的鑒別,因其抵抗力較一般細(xì)菌繁殖體強(qiáng),是判斷滅菌效果的指標(biāo)。異染顆粒:胞質(zhì)顆 粒的一種,多由 RNA 和多偏磷酸鹽組成,嗜堿性強(qiáng),用亞甲蘭染色著色較深。可用于細(xì)菌的鑒別。(白喉?xiàng)U菌、鼠疫桿菌)外膜蛋白(OMP):革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁外膜脂質(zhì)雙層中鑲嵌的蛋白質(zhì),參與物質(zhì)擴(kuò)散或?yàn)槭删w、性菌毛或細(xì)菌素的受體。菌運(yùn)2. 細(xì)菌的基本測量單位是微米(m)。基本形態(tài):球菌、桿菌、螺形菌?;窘Y(jié)構(gòu):細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)。特殊結(jié)構(gòu):莢膜、芽胞、菌毛、鞭毛。3. 細(xì)胞壁的主要成分是肽聚糖。革蘭氏陽性菌的肽聚糖由聚糖骨架和四肽側(cè)鏈、五肽交聯(lián)橋組成。革蘭氏陰性菌

5、的肽聚糖由聚糖骨架和四肽側(cè)鏈組成。細(xì)胞壁能維持細(xì)菌外形,抗低滲。革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁特有的結(jié)構(gòu)是磷壁酸,革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁特有的結(jié)構(gòu)是外膜。外膜由脂質(zhì)雙層、脂蛋白和脂多糖(LPS)組成,脂多糖即革蘭氏陰性菌的內(nèi)毒素,毒性主要成分在脂質(zhì)A。4. 由于細(xì)菌細(xì)胞壁成分及等電點(diǎn)的差異,革蘭染色后被分成兩大類:革蘭氏陽性細(xì)菌(紫色 ) 和革蘭氏陰性細(xì)菌 (紅色)。革蘭染色法的步驟: 結(jié)晶紫初染 碘液媒染 95% 乙醇脫色 稀釋石炭酸復(fù)紅復(fù)染。革蘭染色法的意義: 鑒別細(xì)菌 選擇抗菌藥物 與致病性有關(guān)。5.細(xì)胞膜上有中介體,與細(xì)菌的分裂和呼吸有關(guān)。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)核糖體是合成蛋白質(zhì)的場 所,沉降系數(shù)為 70 S,由

6、50S 和 30S兩個(gè)亞基組成。思考題1.細(xì)菌有哪3種形態(tài)? 2.細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)和特殊結(jié)構(gòu)有哪些?特殊結(jié)構(gòu)各有何作用?3.G+菌和G-菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)由哪幾部分組成?4.青霉素和溶菌酶為什么不能殺滅革蘭陰性菌?5.簡述革蘭染色法操作步驟 第02章 細(xì)菌的生理 主要內(nèi)容:1. 細(xì)菌生長繁殖的四個(gè)基本條件: 充足的營養(yǎng) 必要的氣體環(huán)境(據(jù)此可分為專性需氧菌、微需氧菌、兼性厭氧菌、專性厭氧菌)。 適宜的溫度(病原菌大多為37)。 合適的 PH 值:大多為 7.27.6,但結(jié)核分枝桿菌和霍亂弧菌等例外。細(xì)菌以無性二分裂方式繁殖。滲透壓。2. 細(xì)菌的分解性代謝產(chǎn)物可用生化反應(yīng)鑒定:糖發(fā)酵試驗(yàn)、VP 試驗(yàn)、

7、甲基紅試驗(yàn)、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)、硫化氫試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn)。其中吲哚(I)甲基紅(M)、VP(Vi),枸櫞酸鹽利用(C)四種試驗(yàn)常用于鑒定腸道桿菌,合稱IMViC試驗(yàn)。大腸桿菌對這四種試驗(yàn)的結(jié)果是十十一一,而產(chǎn)氣桿菌是一一十十。醫(yī)學(xué)上有重要意義的細(xì)菌的合成性代謝產(chǎn)物:熱原質(zhì)、侵襲性酶與毒素、色素、抗生素、細(xì)菌素、維生素。3. 細(xì)菌的生長曲線描述的是培養(yǎng)時(shí)間與培養(yǎng)物中活菌數(shù)之間的關(guān)系,分四期: 遲緩期 對數(shù)期(形態(tài)染色、生化反應(yīng)典型,常用于醫(yī)學(xué)研究) 穩(wěn)定期(毒素、抗生素、芽胞產(chǎn)生期) 衰亡期。4. 培養(yǎng)基(culture medium):是由適合于細(xì)菌生長繁殖需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)混合配制而成

8、的基質(zhì)。按用途分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、厭氧培養(yǎng)基。按物理性狀分為固體、液體、半固體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基主要用于增菌,有沉淀、渾濁、膜 狀生長三種生長狀態(tài)。固體培養(yǎng)基主要用于雜菌的分離和培養(yǎng),有光滑型(S 型),粗糙型(R 型),粘液型(M 型)三種菌落。半固體培養(yǎng)基主要用于觀察細(xì)菌的動(dòng)力及短期保種,有沿穿刺線線狀生長和擴(kuò)散生長兩種生長狀態(tài)。 菌落(colony):細(xì)菌劃線接種在固體培養(yǎng)基表面時(shí),因劃線的分散作用,單個(gè)細(xì)菌繁殖后堆積成肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán) 純培養(yǎng)(pure culture ):從固體培養(yǎng)基上挑出一個(gè)菌落移種到另一培養(yǎng)基中,生長出來的細(xì)菌均為純種,稱為純培養(yǎng)

9、。5. 人工培養(yǎng)細(xì)菌的用途:病原診斷及預(yù)防感染、鑒定與研究細(xì)菌、制備生物制品、基因工程。6.細(xì)菌的分類有種系分類和人工分類兩種。 細(xì)菌的分類層次為界、門、綱、目、科、屬、種。 標(biāo)準(zhǔn)菌珠(type strain):具有某種細(xì)菌典型特征的菌株 命名法:拉丁文雙命名。原則:菌名=屬(大寫拉丁文名詞源于細(xì)菌形態(tài)或首發(fā)現(xiàn)者或巨大貢獻(xiàn)者)+種(小寫拉丁文形容詞源于細(xì)菌的重要生物學(xué)特征、定植部位或所致疾)。思考題1.細(xì)菌的生長繁殖條件是什么?2.什么是細(xì)菌生長曲線?細(xì)菌生長曲線分哪4個(gè)階段?3.細(xì)菌根據(jù)對氧的需要程度分為哪幾種類型?4.細(xì)菌合成代謝產(chǎn)物有哪幾種?5.什么是培養(yǎng)基及分離培養(yǎng),簡述細(xì)菌在培養(yǎng)基上

10、的生長狀態(tài)。 第03章 消毒與滅菌主要內(nèi)容:1. 消毒(disinfection):殺死物體上病原微生物的方法,并不一定能殺死含芽胞的細(xì)菌或非病原微生物。 滅菌(sterilization):殺死物體上所有微生物的方法,包括病原微生物、非病原微生物及芽胞。抑菌 (bacteriostasis):抑止體內(nèi)或體外細(xì)菌的生長繁殖。常用抑菌劑為抗生素。 防腐(antisepsis):阻止或抑制細(xì)菌生長繁殖的方法,細(xì)菌一般不死亡。無菌(asepsis):不含活菌。無菌操作:防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其它物品的操作技術(shù)。2. 消毒與滅菌分為 物理學(xué)方法及化學(xué)方法: 物理學(xué)方法:熱力滅菌法:干烤箱: 160170

11、2 小時(shí)可達(dá)到滅菌效果,主要用于高溫下不變質(zhì)、不損壞、不蒸發(fā)物品的滅菌;巴氏消毒滅菌法: 62 半小時(shí)或 71.7 1530 秒主要用于牛奶、酒類等消毒;高壓蒸氣滅菌法: 是最有效的滅菌方法,121.3 ,1.05Kg/cm2 1520分鐘,用于耐高溫、耐濕物品的滅菌。 電磁波輻射法:紅外線主要通過高熱滅菌;紫外線 265266nm殺菌效果最好,作用于細(xì)菌DNA,主要用于室內(nèi)空氣及不耐熱物體表面消毒;電離輻射產(chǎn)生游離基破壞細(xì)菌 DNA,用于塑料制品、食品等消毒。微波常用2450MHZ與915MHZ,用于非金屬物品、食品用具 濾過法:物理阻留除去液、氣體中的細(xì)菌,用于除去一些不耐高溫的血清、毒素

12、、細(xì)胞培養(yǎng)基中的細(xì)菌. 超聲波:空腔化作用裂解細(xì)菌,主要用于粉碎菌細(xì)胞,提取細(xì)胞組分。干燥與低溫:干燥使細(xì)菌脫水,用于保存食品, 低溫中冷凍真空干燥法是保存菌種最好的方法?;瘜W(xué)方法 菌體蛋白變性劑:酚、醇、重金屬鹽、酸類、醛類; 干擾細(xì)菌代謝:氧化劑、重金屬鹽等 破壞細(xì)胞膜:表面活性劑等。3. 影響消毒滅菌效果的因素 消毒 劑性質(zhì)、濃度、作用時(shí)間 微生物的種類和數(shù)量 溫度 PH 值 有機(jī)物思考題1.名詞解釋:消毒、滅菌、無菌、防腐、無菌操作、生物安全2.簡述紫外線殺菌的作用機(jī)制和注意事項(xiàng)3.濕熱滅菌有哪些方法? 各有何用途?4.在溫度和時(shí)間相同的情況下,為什么濕熱滅菌法的效果比干熱法好? 5.

13、常用消毒劑種類?簡述化學(xué)消毒劑的殺菌機(jī)制。6.簡述病原微生物的分類及病原微生物實(shí)驗(yàn)室的分級(jí)?7.當(dāng)從事病原生物學(xué)安全實(shí)驗(yàn)室工作時(shí),應(yīng)考慮哪些與生物安全相關(guān)的問題? 第4章 噬菌體主要內(nèi)容:1. 噬菌體的概念:噬菌體(phage):是感染細(xì)菌、真菌、放線菌、螺旋體等微生物的病毒。2. 噬菌體的形態(tài)與結(jié)構(gòu):最常見的為蝌蚪形,由核酸和蛋白質(zhì)組成。3. 根據(jù)進(jìn)入宿主菌后所致結(jié)果不同,噬菌體分為毒性噬菌體及溫和噬菌體。 毒性噬菌體(virulent phage):在宿主菌內(nèi)復(fù)制產(chǎn)生子代噬菌體并最終導(dǎo)致宿主菌裂解的噬菌體。毒性噬菌體只有溶菌性周期。 溫和噬菌體(temperate phage):基因組能與

14、宿主染色體整合,不產(chǎn)生子代噬菌體,不導(dǎo)致宿主菌裂 解的噬菌體。溫和噬菌體可有溶原性周期和溶菌性周期。 前噬菌體(prophage):整合在宿主菌染色體上的噬菌體基因組,可隨宿主菌染色體的復(fù)制而復(fù)制,并隨細(xì)菌的分裂而傳代。4. 噬菌體的應(yīng)用: 細(xì)菌的分型、鑒定 研究分子生物學(xué) 細(xì)菌感染的診斷與治療思考題1.噬菌體的概念及其特征。2.毒性噬菌體和溫和噬菌體、前噬菌體、溶原性細(xì)菌、溶原性轉(zhuǎn)換的概念及特征。3.溶菌性周期與溶原性周期的區(qū)別。 第八章 球菌思考題:1.名詞解釋 SPA、抗O試驗(yàn)、2.葡萄球菌的分類、主要致病物質(zhì)及所致疾病?3.鏈球菌的分類、主要致病物質(zhì)所致疾病?4.肺炎鏈球菌與甲性溶血性

15、鏈球菌的區(qū)別方法?5、淋球菌和腦膜炎球菌的致病物質(zhì)及所致的疾 第9章 腸道桿菌主要內(nèi)容:腸道桿菌 革蘭氏陰性、多數(shù)有鞭毛和菌毛普通培養(yǎng)基生長 生化反應(yīng)活潑,多數(shù)致病菌不分解乳糖,非致病菌分解 抗原構(gòu)造復(fù)雜,均有菌體 (O)抗原,多數(shù)有鞭毛(H)抗原,部分有表面(Vi 或 K)抗原。 抵抗力不強(qiáng)。易變異。思考題1.簡述腸道桿菌的共同特性2.大腸埃希菌腸最常見的道外感染有哪些?3.大腸埃希菌與人類的關(guān)系如何?4.歸納志賀菌致病的主要特點(diǎn)。5.采集細(xì)菌性痢疾病人糞便標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌分離時(shí)應(yīng)注意些什么?6.急性菌痢的典型癥狀有哪些?解釋其形成機(jī)制7.簡述腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌的致病機(jī)制.8.簡述人類感染傷寒沙

16、門菌的分離培養(yǎng)和鑒定程序9.簡述肥達(dá)反應(yīng)的原理和結(jié)果分析 第10章 弧菌屬霍亂弧菌主要內(nèi)容:1. 革蘭氏陰性逗點(diǎn)狀,運(yùn)動(dòng)活潑,堿性蛋白胨水或堿性瓊脂平板上生長良好,耐堿不耐酸。2. 致病物質(zhì):鞭毛、菌毛、 霍亂腸毒素(一個(gè)A亞單位,五個(gè)B亞單位構(gòu)成,已知毒性最強(qiáng)的腸毒素)、0139血清群有莢膜。3. 所致疾?。夯魜y。七次世界性大流行中,前六次由古典生物型引起,第七次由EITOr生物型引起。1992年發(fā)現(xiàn)新的流行株0139血清群。4. 檢查:取米泔水樣糞便懸滴檢查可見運(yùn)動(dòng)活潑的弧菌,革蘭氏染色陰性,用堿性蛋白胨水或 TCBS 瓊脂培養(yǎng)基礎(chǔ)分離培養(yǎng)后做血清學(xué)反應(yīng)及生化反應(yīng)鑒定。副溶血性弧菌主要內(nèi)容:1. 副溶血性弧菌是一種嗜鹽細(xì)菌,培養(yǎng)時(shí)需加一定濃度 NaCl。2. 副溶血性弧菌主要經(jīng)海產(chǎn)品或鹽腌漬食品傳播引起食物中毒。思考題1.霍亂是如何傳播的?其臨床表現(xiàn)和預(yù)后如何?2.霍亂弧菌的主要致病物質(zhì)是什么?簡述其作用機(jī)理。3.簡述霍亂弧菌的抗原結(jié)構(gòu),分型及與致病的關(guān)系。4.如何預(yù)防副溶血性弧菌所致的食物中毒? 第11章 厭氧性細(xì)菌思考題名詞解釋:洶涌發(fā)酵 簡答:1、

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