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文檔簡介

1、高三生物復(fù)習(xí)提綱選修三 基因工程識(shí)記要點(diǎn)1、限制酶主要是從 原核 生物中分離純化,其作用部位是雙鏈dna每一條鏈中特定部位的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的 磷酸二酯 鍵;解旋酶的作用部位為 氫 鍵;dna連接酶的作用部位為 磷酸二酯 鍵;dna聚合酶的作用部位為 磷酸二酯 鍵;上述四種酶中 dna聚合酶 作用于單鏈。2、經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的dna片段末端有兩種形式 黏性末端 和 平末端 。ecori酶切割后產(chǎn)生黏性末端,其識(shí)別序列為 gaattc 。e·coli dna連接酶可以連接 黏性 末端,t4dna連接酶可以連接 黏性末端和平 末端。3、載體必須具備哪些基本條件?能 在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定保存

2、并大量復(fù)制 ;有一至多個(gè) 限制酶切割位點(diǎn) ,供 外源基因 (或外源dna片段) 插入其中;有特殊的 遺傳標(biāo)記基因 ,供 重組dna的鑒定和選擇 。4、基因工程中使用的載體為 質(zhì)粒 、 入噬菌體的衍生物 和 動(dòng)植物病毒 等。5、基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟: 目的基因的獲取 、 基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 、 目的基因的檢測與鑒定 ,其中,第 2 步為基因工程的核心步驟。6、目前常用的獲取目的基因的方法為: 從基因父庫中獲取目的基因 ; 利用pcr技術(shù)擴(kuò)增目的基因 ;如果基因比較 小 ,核苷酸序列 已知 ,也可以用 化學(xué)合成 法。7、基因文庫分為兩類 基因組文庫 和 部分

3、基因文庫 。cdna如何獲得?通過 反轉(zhuǎn)錄(或逆轉(zhuǎn)錄)方法獲得。8、(1)pcr的全稱為 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) ,原理為 dna雙鏈復(fù)制 ,利用pcr技術(shù)獲取目的基因的前提是:要有一段 已知目的基因的核苷酸 序列,以便根據(jù)這一序列合成 引物 。(2)pcr中需要一種特殊的 熱穩(wěn)定dna聚合(或耐熱的dna聚合酶或taq酶) 酶。(3)pcr分為哪三步,分別是什么溫度? 變性 ,溫度 900-950c(940c) ; 復(fù)性 ,溫度55-600c(550c) ; 延伸 ,溫度 70-750c(720c) 。9、構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時(shí),使目的基

4、因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用 ,一個(gè)基因表達(dá)載體的組成必須包括 目的基因 、 啟動(dòng)子 、 終止子 和 標(biāo)記基因 等。10、標(biāo)記基因的作用是 鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來 。11、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞最常采用的方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 ,在此方法中,目的基因應(yīng)插入到 ti質(zhì)粒的t-dna 上。單子葉植物常用的基因轉(zhuǎn)化方法為 基因槍法 ,我國科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法是 花粉管通道法 。12、將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最常用、最有效的方法是 顯微注射技術(shù) 。該方法的基本操作程序是:首先將含有目的基因的表達(dá)載體 提純 ;最終要將注射了目的基因的 受精卵 經(jīng) 胚胎

5、的早期培養(yǎng) 后,再移植到雌性動(dòng)物的 輸卵管或子宮 內(nèi),使其發(fā)育成為具有新性狀的動(dòng)物。13、早期的基因工程操作為什么都用原核生物作受體細(xì)胞?因?yàn)樵松?繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少 。大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是:首先用 ca2+ 處理細(xì)胞,使細(xì)胞成為 感受態(tài)細(xì)胞 。第二步是在一定的溫度下將重組表達(dá)載體與上述細(xì)胞溶于 緩沖液 (溶液)中完成轉(zhuǎn)化過程。也常利用酶母菌作基因工程的受體細(xì)胞,是因?yàn)榻湍妇?易培養(yǎng)、繁殖快 等特點(diǎn)。14、什么叫轉(zhuǎn)化?是指目的基因進(jìn)入受體的細(xì)胞,并且在受體細(xì)胞內(nèi) 維持穩(wěn)定和表達(dá) 的過程。15、動(dòng)物基因工程常用 受精卵或胚胎干細(xì)胞 作受體細(xì)胞,原因是上述細(xì)胞具有

6、 全能性 ,能直接發(fā)育形成新個(gè)體,還能使目的基因在 特定(或相應(yīng)) 部位表達(dá)。16、目的基因能否在真核生物中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是 轉(zhuǎn)基因生物染色體的dna上是否插入了目的基因 ,其檢測方法是采用 dna分子雜交技術(shù) 。在此技術(shù)中,探針應(yīng)如何制備? 將含目的基因的dna片段用放射性同位素等作標(biāo)記(用放射性同位素標(biāo)記的目的基因片段作探針) 。17、目的基因的檢測通常要檢測三個(gè)方面,檢測轉(zhuǎn)基因生物 染色體dna上是否插入目的基因 ,檢測方法為 dna分子雜交 技術(shù);檢測 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mrna ,檢測方法 分子雜交 技術(shù);檢測目的基因是否 翻譯成蛋白質(zhì) ,檢測方法為用 相應(yīng)的抗體 進(jìn)行 抗原-抗體雜

7、交 。除上述 分子 (水平)檢測外,有時(shí)還需進(jìn)行 個(gè)體 生物學(xué)水平的鑒定。如轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否抗蟲,應(yīng)如何檢測? 做抗蟲的接種實(shí)驗(yàn)(將抗蟲棉接種到轉(zhuǎn)基因棉花植株上,看其是否抗蟲) ,鑒定過程是: 做抗蟲的接種實(shí)驗(yàn),讓害蟲吞食轉(zhuǎn)基因棉花的葉子,觀察害蟲的存活(或發(fā)育)情況,以確定抗蟲棉是否具有抗蟲性狀。18、轉(zhuǎn)基因抗蟲棉轉(zhuǎn)入的是 bt毒蛋白 基因,此基因的來源是來自 蘇云金芽孢桿菌 。此抗蟲基因編碼的蛋白質(zhì)進(jìn)入害蟲的腸道后經(jīng)消化后產(chǎn)生有毒的 多肽 ,最終導(dǎo)致害蟲死亡。19、抗病轉(zhuǎn)基因植物使用最多的是病毒 外殼蛋白 基因和病毒的 復(fù)制酶 基因,抗真菌轉(zhuǎn)基因植物可以使用的基因有 幾丁質(zhì)酶 基因和 抗毒

8、素合成 基因。20、抗鹽堿和抗干旱轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物是利用一些可以調(diào)節(jié)細(xì)胞 滲透壓 的基因;提高作物的耐寒能力可以利用魚的 抗凍蛋白 基因。21、如何提高植物體內(nèi)氨基酸的含量?(如提高玉米中的賴氨酸含量)方法一:利用 基因工程(或轉(zhuǎn)基因) (技術(shù)),將 必需氨基酸含量多的蛋白質(zhì)編碼 基因?qū)胫参?,但這種方法氨基酸含量提高的程度沒有第二種方法高。方法二:利用 蛋白質(zhì)工程 改變相應(yīng)的氨基酸合成途徑中某種 關(guān)鍵酶 的活性,這種方法氨基酸含量可能成倍地增加。22、將 外源生長激素 基因引入動(dòng)物體內(nèi)可以提高轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的生長速率。23、如何使牛奶中的乳糖含量大大降低,可以將 腸乳糖酶 基因?qū)肽膛5幕蚪M。24

9、、如何利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物分泌的乳汁來大量生產(chǎn)藥物?首先應(yīng)將 藥用蛋白 基因與 乳腺蛋白 基因的啟動(dòng)子等重組在一起,通過 顯微注射 技術(shù)導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的 受精卵 中,最終使其發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。上述轉(zhuǎn)基因哺乳動(dòng)物的性別是 雌性 。25、(1)為什么可以用豬的器官來解決人類器官的來源問題?因?yàn)樨i的 內(nèi)臟構(gòu)造、大小、血管分布與人極為相似;豬體內(nèi)隱藏的、可導(dǎo)致人類疾病的 病毒 要遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于 靈長類 動(dòng)物。(2)為什么常選用“小型豬”,因?yàn)椤靶⌒拓i” 成年器官的大小 與人類相似。(3)如何培育出沒有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官?方法有兩種:將器官供體基因組導(dǎo)入 某種調(diào)節(jié)因子 ,目的是 抑制抗原決定基因的表達(dá) ;

10、設(shè)法 除去抗原決定基因 ,再結(jié)合 克隆 技術(shù)加以培育。26、基因工程中常用哪兩種方法生產(chǎn)藥物?利用 乳腺生物反應(yīng)器 生產(chǎn);利用 轉(zhuǎn)基因工程菌 生產(chǎn)。細(xì)胞工程中可以利用 植物組織培養(yǎng) 和 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) (技術(shù))大規(guī)模地生產(chǎn)一些藥物。27、治療遺傳病尤其是單基因遺傳病最有效的手段是 基因治療 ,此方法分為兩類: 體外基因治療 和 體內(nèi)基因治療 ,寫出一種方法的優(yōu)缺點(diǎn) 前者操作復(fù)雜,但效果較為可靠 。28、蛋白質(zhì)工程的原理 中心法則的逆推 。其目標(biāo)是根據(jù)人們對蛋白質(zhì) 功能 的特定需求,對蛋白質(zhì)的 結(jié)構(gòu) 進(jìn)行 分子設(shè)計(jì) 。29、蛋白質(zhì)工程通過 基因修飾 或 基因合成 ,對現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行 改造 ,或

11、制造一種新的蛋白質(zhì) ,以滿足人類的需求。30、為什么蛋白質(zhì)工程直接改造基因,而不直接改造蛋白質(zhì)? (1)基因控制蛋白質(zhì)的合成,改造基因即改造了蛋白質(zhì);(2)改造的基因可以遺傳,直接改造的蛋白質(zhì)不能遺傳;(3)目前對大多數(shù)蛋白質(zhì)復(fù)雜的高級結(jié)構(gòu)還不清楚,所以改造基因比直接改造蛋白質(zhì)容易。 31、導(dǎo)入的目的基因整合到轉(zhuǎn)基因植物染色體的dna上,則該轉(zhuǎn)基因植物可能會(huì)通過 花粉 將該目的基因傳播給其他植物而造成基因污染。原因是: 導(dǎo)入的目的基因位于染色體上,轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)生的花粉細(xì)胞中可能含有該基因,通過花粉會(huì)污染其他植物。 請?zhí)岢鲆粋€(gè)上述轉(zhuǎn)基因工程的改良方案以防止這樣的基因污染發(fā)生,方法是 將該目的基因

12、導(dǎo)入到植物細(xì)胞的線粒體或葉綠體中。 32、pcr技術(shù)的關(guān)鍵是要制備得到 耐高溫的dna聚合 酶,該酶的功能是 催化脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵(或催化合成dna子鏈) 。pcr中加入的引物的基本組成單位是 脫氧核苷酸(或核糖核苷酸) ,引物的作用是 作為dna復(fù)制的起點(diǎn) 。細(xì)胞工程識(shí)記要點(diǎn)1、細(xì)胞工程的操作水平 細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平 ,植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有 植物組織培養(yǎng) 、植物體細(xì)胞雜交 ;動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 、 動(dòng)物細(xì)胞核移植 、 動(dòng)物細(xì)胞融合 、 生產(chǎn)單克隆抗體(雜交瘤技術(shù)) 。2、植物組織培養(yǎng)的原理是 植物細(xì)胞的全能性 ,即具有某種生物 全部遺傳信息 的任

13、何一個(gè)細(xì)胞,都具有發(fā)育成完整生物體的 潛能 。3、植物組織培養(yǎng)就是在 無菌 和人工控制條件下,將 離體 的植物的 器官、組織、細(xì)胞 ,培養(yǎng)在人工配制的 固體 (填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)產(chǎn)生 愈傷組織 、叢芽 ,最終形成完整的植株。4、植物組織培養(yǎng)的過程: 離體 的植物 器官、組織、細(xì)胞 形成 愈傷組織 形成 胚狀體 或 叢芽植物體。愈傷組織細(xì)胞的特點(diǎn):細(xì)胞排列 疏松而無規(guī)則 , 沒有 (填“有”或者“沒有”)發(fā)生分化,是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的 薄壁 細(xì)胞。5、接種后的植物組織應(yīng)先放在 無光 (“有光”或“無光”)條件下恒溫培養(yǎng),一段時(shí)間后再將生長良好的愈

14、傷組織轉(zhuǎn)接到 分化 培養(yǎng)基上并在 有光 (“有光”或“無光”)條件下培養(yǎng)。6、進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)應(yīng)注意:(1)所有的實(shí)驗(yàn)用具應(yīng)嚴(yán)格 滅菌 ;(2)接種過程應(yīng)嚴(yán)格地 無菌 操作;(3)培養(yǎng)基中除了添加必需的營養(yǎng)物質(zhì)外,還應(yīng)添加一定的 植物激素 。7、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的原理是 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 和 植物細(xì)胞的全能性 。8、植物細(xì)胞融合成功的標(biāo)志是 雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁 ,植物體細(xì)胞雜交成功的標(biāo)志是 產(chǎn)生雜種植株 ,動(dòng)物細(xì)胞融合成功的標(biāo)志是 細(xì)胞核融合,產(chǎn)生單核細(xì)胞 。9、植物體細(xì)胞雜交的過程是:(1)植物細(xì)胞融合:用 纖維素酶和果膠 酶 去除細(xì)胞壁 ; 原生質(zhì)體 融合;雜種細(xì)胞 再生出細(xì)胞壁 ;(

15、2)植物 組織培養(yǎng) : 脫分化 ; 再分化 ,最終培育出 雜種 植株。10、人工誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法是 物理 法和 化學(xué) 法,前者通常包括 離心 、 振動(dòng) 和 電激 等方法,后者一般是用 聚乙二醇 作為誘導(dǎo)劑。誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合還可以用 滅活的病毒 作誘導(dǎo)因素。11、利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育作物新品種的意義是 克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 。12、植物細(xì)胞工程主要應(yīng)用于三個(gè)方面: 植物繁殖 的新途徑(微型繁殖、作物脫毒、人工種子); 作物新品種 的培育(單倍體育種、突變體的利用);細(xì)胞產(chǎn)物的 工廠化生產(chǎn) (生產(chǎn)蛋白質(zhì),脂肪,糖類,藥物,香料,生物堿等) 。13、植物的微型繁殖技術(shù)的特點(diǎn)/優(yōu)點(diǎn)

16、是:保持優(yōu)良品種的遺傳特性;高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖(即高效性)。14、目前,常采用 植物組織培養(yǎng) 技術(shù)來培育脫毒苗,原因是植物的 分生區(qū) 附近 病毒極少,甚至無病毒 。15、人工種子的結(jié)構(gòu): 人工薄膜 + 胚狀體 或不定芽或頂芽或腋芽。人工種子的優(yōu)點(diǎn)是:可以保持優(yōu)良品種的 遺傳特性 ,后代不發(fā)生 性狀分離 ;生產(chǎn)上不受 季節(jié) 、 氣候 和 地域 的限制;人工種子的外層有起保護(hù)作用的薄膜,使人工種子可以很方便地 貯藏 和 運(yùn)輸 。16、人工種皮中應(yīng)該具有下列有效成分:適量的養(yǎng)分、無機(jī)鹽、有機(jī)碳源以及 農(nóng)藥 、 抗生素 、 有益菌 (如固氮菌)等,為了 促進(jìn)胚狀體的生長發(fā)育 ,還可以向人工種

17、皮中加入一些 植物生長調(diào)節(jié)劑 。17、單倍體育種的基本步驟是:先 花藥離體培養(yǎng) ,獲得 單倍體植株 ;用 秋水仙素處理單倍體幼苗 ,獲得 能穩(wěn)定遺傳的正常植株 。與雜交育種相比,單倍體育種最突出的優(yōu)點(diǎn)是 明顯縮短了育種年限 。18、在植物組織培養(yǎng)的過程中,培養(yǎng)的細(xì)胞為什么容易突變?由于培養(yǎng)的細(xì)胞 一直處于不斷的分生狀態(tài) ,因此容易受到 培養(yǎng)條件 和 外界壓力 的影響而產(chǎn)生突變。19、利用 植物組織培養(yǎng) 技術(shù)可以大量地生產(chǎn)人參皂甙干粉,在該方法中人們是從大量培養(yǎng)的 愈傷組織 中提取藥物。20、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的步驟:第一步是先將組織中的細(xì)胞 分散 成 單個(gè)細(xì)胞 ,方法是先將從健康動(dòng)物體內(nèi)取出的組織塊

18、 剪碎 ,然后再用 胰蛋白 酶或 膠原蛋白 酶處理一段時(shí)間。第二步是用培養(yǎng)液將前面獲得的細(xì)胞稀釋制成 細(xì)胞懸液 ,并放入培養(yǎng)瓶內(nèi)置于適宜的環(huán)境中培養(yǎng)。這種動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為 原代培養(yǎng) 。第三步是,當(dāng)出現(xiàn) 細(xì)胞的接觸抑制 現(xiàn)象時(shí),再用 胰蛋白酶 處理細(xì)胞,分瓶繼續(xù)培養(yǎng),這樣的培養(yǎng)過程叫 傳代培養(yǎng) 。21、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是 細(xì)胞的增殖 ,目的是獲得 細(xì)胞株或細(xì)胞系 。22、細(xì)胞株是指 1050 代的 傳代 細(xì)胞;細(xì)胞系是指 50 代以后的 傳代 細(xì)胞。23、目前使用的或冷凍保存的正常的動(dòng)物細(xì)胞通常為培養(yǎng) 10 代以內(nèi)的細(xì)胞,其目的是 保持細(xì)胞正常的二倍體核型 ,例如動(dòng)物體細(xì)胞核移植過

19、程中的 供體 細(xì)胞,體外基因治療中的 受體 細(xì)胞。24、為什么通常取動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。因?yàn)檫@些組織或器官的細(xì)胞 (生命力旺盛),分裂能力強(qiáng) 。25、(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)滿足哪些條件? 無菌、無毒的環(huán)境 ; 充足的營養(yǎng)供給 ;適且的溫度 和 ph ; 氣體環(huán)境 。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中通常要添加一定量的抗生素,目的是 防止培養(yǎng)過程中的污染 ;培養(yǎng)過程中還應(yīng)該定期更換培養(yǎng)液,目的是 以便清除代謝產(chǎn)物,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害 。(3)培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)若按種類和數(shù)量嚴(yán)格配制,則這種培養(yǎng)基叫 合成培養(yǎng)基 。(4)哺乳動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度為

20、36.50.50c ,適宜ph為 7.2-7.4 。(5)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的氣體主要有 o2 和 co2 ,其主要作用是:前者 o2是細(xì)胞代謝所必需的 ,后者 co2的主要作用是維持培養(yǎng)液的ph 。(6)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常用 培養(yǎng)皿 或 松蓋培養(yǎng)瓶 培養(yǎng),并將其置于含 95%空氣加5%co2的混合氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。26、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:(1)生產(chǎn)有重要價(jià)值的生物制品,如 病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等;(2)為基因工程培養(yǎng) 受體細(xì)胞 ;(3)培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞還可以用于 檢測有毒物質(zhì) ;(4)培養(yǎng) 正?;蚋鞣N病變的細(xì)胞 ,可以用于 生理、藥理、病理 等方面的研究,如用于 篩選抗癌藥

21、物 。27、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的原理是 動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性 。28、為什么動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植?因?yàn)?動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)其全能性相對容易,而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)其全能性十分困難 。29、體細(xì)胞核移植技術(shù)中應(yīng)將 供體細(xì)胞 注入培養(yǎng)到 減數(shù)第二次分裂中期 (時(shí)期)的 去核的次級卵母 細(xì)胞中,然后通過 電刺激 使兩細(xì)胞融合,供體的 細(xì)胞核 進(jìn)入受體細(xì)胞,再用 物理 或 化學(xué) 方法激活受體細(xì)胞,使其完成 細(xì)胞分裂 和 發(fā)育 進(jìn)程。30、核移植技術(shù)中用卵母細(xì)胞作受體細(xì)胞的原因是 因?yàn)槁涯讣?xì)胞(1)體積大,易操作;(2)卵黃多,營養(yǎng)物質(zhì)豐富;(3)易激發(fā)細(xì)

22、胞核全能性的表達(dá) 。核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是 顯微操作去核法 。31、體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景:加速家畜 遺傳改良 進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育;保護(hù)瀕危物種;轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物可以作為 生物反應(yīng)器 ,生產(chǎn)許多珍貴的醫(yī)用蛋白;轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物可以作為 異種移植的供體 ,為人類提供細(xì)胞、組織或器官;32、動(dòng)物細(xì)胞融合也稱 細(xì)胞雜交 ,是指 兩個(gè)或多個(gè) 動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè) 單核 細(xì)胞的過程。其意義是:克服了 遠(yuǎn)緣雜交 的不親和性,應(yīng)用:是研究 細(xì)胞遺傳 、 細(xì)胞免疫 、 腫瘤 和 生物新品種培育 等的重要手段,并為制造 單克隆抗體 ,開辟了新途徑。33、傳統(tǒng)的血清抗體的缺點(diǎn) 產(chǎn)量低、純度低,制備的

23、抗體特異性差 ,單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn) 特異性強(qiáng),靈敏度高,并可能大量制備 ,單克隆抗體在診斷的應(yīng)用上的優(yōu)點(diǎn)是準(zhǔn)確、高效、簡易、快速,雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體。34、單克隆抗體的制備過程:(1)獲得欲融合的兩種細(xì)胞:給小鼠注射特定的抗原(蛋白),從小鼠的 脾(臟)細(xì)胞中分離相應(yīng)的b淋巴細(xì)胞;從小鼠的骨髓中獲取骨髓瘤細(xì)胞并培養(yǎng)。(2)動(dòng)物細(xì)胞融合:將小鼠的 b淋巴 細(xì)胞和 骨髓瘤 細(xì)胞用 滅活的病毒 誘導(dǎo),使之融合。(3)篩選:用特定的 選擇性培養(yǎng)基 進(jìn)行篩選,獲得 融合的雜交瘤 細(xì)胞;進(jìn)行 克隆化 培養(yǎng)和 抗體 檢測,獲得 足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤 細(xì)胞。(4)

24、培養(yǎng):將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做 大規(guī)模 培養(yǎng),或 注射 到小鼠的 腹腔 內(nèi)增殖。(5)提取單克隆抗體:從 細(xì)胞培養(yǎng)液 或 小鼠腹水 提取。35、單克隆抗體最廣泛的用途是用作 體外診斷試劑 ,還可以用于 治療疾病和運(yùn)載藥物 。單克隆抗體主要用于 癌癥 治療。36、如何制成“生物導(dǎo)彈”?把抗癌細(xì)胞的單克隆抗體和 放射性同位素 、 化學(xué)藥物 或 細(xì)胞毒素 相結(jié)合,其優(yōu)點(diǎn)是 療效高,毒副作用小 。胚胎工程識(shí)記要點(diǎn)1、(1)卵原細(xì)胞形成初級卵母細(xì)胞的時(shí)期是 胎兒期(性別分化以后) ,分裂方式是 有絲分裂 ,場所是 (雌性胎兒的)卵巢 。(2)初級卵母細(xì)胞在雌性動(dòng)物進(jìn)入 初情期 后才開始繼續(xù)發(fā)育。初級卵

25、母細(xì)胞通過 減數(shù)第一次分裂 形成次級卵母細(xì)胞和第一極體,此過程是在雌性動(dòng)物 排卵前后 (時(shí)間)完成的,產(chǎn)生的細(xì)胞進(jìn)入 輸卵管 。(3)次級卵母細(xì)胞的減數(shù)第二次分裂是在 受精作用(精子和卵子結(jié)合的) 過程中完成的,場所為 輸卵管 。2、哺乳動(dòng)物精子的發(fā)生是在 睪丸 內(nèi)完成;哺乳動(dòng)物卵子的發(fā)生是在 卵巢 內(nèi)完成;卵泡的形成場所 卵巢 ;卵子成熟的場所: 輸卵管 ;自然條件下受精的場所 (雌性的)輸卵管 ;精子獲能的場所 雌性動(dòng)物的生殖道 。3、精子的發(fā)生時(shí)期:從 初情期 到 生殖機(jī)能衰退 。精子發(fā)生的過程分為三個(gè)階段: 有絲 分裂, 初級精母 細(xì)胞的形成; 減數(shù) 分裂, 精子細(xì)胞 的形成; 變形

26、, 精子 的形成。4、受精包括兩個(gè)階段: 準(zhǔn)備 階段和 受精 階段。防止多精入卵受精的兩道屏障分別是 透明帶反應(yīng) 和 卵黃膜封閉作用 。獲能后的精子與卵子相遇時(shí),首先發(fā)生 頂體反應(yīng) 。5、判斷卵子是否受精的重要標(biāo)志是: 在卵黃膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個(gè)極體 ;受精作用完成的標(biāo)志是 雌雄原核的融合 。6、卵裂期的特點(diǎn):細(xì)胞分裂方式為 有絲分裂 ,細(xì)胞的數(shù)量 不斷增加 ,胚胎的總體積 并不增加 ,或略有縮小 。7、早期發(fā)育的胚胎分為哪幾個(gè)階段:受精卵( 卵裂 ) 桑椹胚 囊胚 原腸胚 。8、 桑椹胚 階段及這一階段前的每一個(gè)細(xì)胞都屬于全能細(xì)胞,都具有 發(fā)育成完整胚胎 潛能。9、 囊胚 階段開始

27、出現(xiàn)細(xì)胞分化, 內(nèi)細(xì)胞團(tuán) 將來發(fā)育成胎兒的各種組織,滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成脂膜和胎盤 。透明帶破裂發(fā)生在 囊胚 時(shí)期,透明帶的破裂標(biāo)志著 卵裂 期的結(jié)束。10、哺乳動(dòng)物的體外受精主要包括 卵母細(xì)胞的采集(和培養(yǎng))、精子的獲取(精子的采集和獲能) 和 受精 等幾個(gè)主要步驟。11、卵母細(xì)胞的采集方法有兩種:對于鼠、兔、豬、羊,從 輸卵管 中沖取卵子,對于牛,從卵巢 中采集卵母細(xì)胞;方法 需要先用促性腺激素處理雌性動(dòng)物,方法 卵母細(xì)胞需要體外培養(yǎng)至成熟。12、精子體外獲能的方法:對于鼠、兔、豬,一般采用 培養(yǎng) 法,用人工配制的 獲能液 進(jìn)行處理;對子牛、羊常采用 化學(xué)誘導(dǎo) 法。體外受精可以在 獲能溶液

28、 或 專用的受精 溶液中完成。體外受精后,應(yīng)將受精卵移入 發(fā)育培養(yǎng)液 繼續(xù)培養(yǎng),目的是 檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力 。13、哺乳動(dòng)物胚胎培養(yǎng)液的成分:除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外,還需添加 維生素、激素、氨基酸、核苷酸 等營養(yǎng)成分,以及 (動(dòng)物)血清 等物質(zhì)。14、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)通常需加 糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)菌、微量元素 等營養(yǎng)物質(zhì),通常還需加入 血清、血漿 等一些天然成分;為了防止培養(yǎng)過程中的污染,通常還要添加一定量的 抗生素 。15、進(jìn)行胚胎移植的優(yōu)勢 充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力 ;供體的主要職能是 只產(chǎn)生具有優(yōu)良遺傳特性的胚胎 ;受體的主要職能 妊娠和育仔 。16、胚胎工程其他

29、技術(shù)的最后一道“工序”是 胚胎移植 。17、胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ):哺乳動(dòng)物 發(fā)情排卵 后,不管是否妊娠,在一段時(shí)間內(nèi),同種動(dòng)物供、受體生殖器官的 生理變化 是相同的,這就為 供體的胚胎移入受體 提供了 相同的生理環(huán)境 。哺乳動(dòng)物的早期胚胎形成后,在一定時(shí)間內(nèi)不會(huì)與母體子宮建立 組織上的聯(lián)系 ,而是處于游離狀態(tài),這就為 胚胎的收集 提供了可能。受體對移入子宮的外來胚胎 基本上不發(fā)生 免疫排斥反應(yīng),這為 胚胎在受體內(nèi)的存活 提供了可能。供體胚胎 可以 (填“可以”或“不可以”)與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系,但移入受體內(nèi)的供體胚胎的 遺傳特性 ,在孕育過程中不受任何影響。18、胚胎分割時(shí),應(yīng)選

30、擇 發(fā)育良好、形態(tài)正常 的 桑椹胚或囊胚 (胚胎)。19、對囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí),要注意將 內(nèi)細(xì)胞團(tuán) 均等分割,否則會(huì) 影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育 。20、通常從 早期胚胎 (即囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞)或 原始性腺 中分離胚胎干細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞簡稱es 或 ek 細(xì)胞,其特性是:形態(tài)上 體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯 ;功能上 具有發(fā)育的全能性 ,另外,在體外培養(yǎng)的條件下,可以 增殖而不發(fā)生分化 。21、胚胎工程中常用的4種技術(shù)名稱分別是 胚胎移植 、 體外受精 、胚胎分割 、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)。22、(1)試管牛的培育中對供、受體母牛應(yīng)如何選擇?應(yīng)選擇 遺傳性能和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的個(gè)體 作供體牛,

31、選擇 有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的個(gè)體 作受體。提供精子的公牛應(yīng)選擇 同種優(yōu)秀的個(gè)體。(2)供、受體母牛選擇好后,應(yīng)先用 激素 進(jìn)行 同期發(fā)情 處理,再 注射促性腺激素 對供體母牛做 超數(shù)排卵 處理。(3)沖卵是把供體母牛 子宮 內(nèi)的 胚胎 沖洗出來。沖卵后,對胚胎應(yīng)進(jìn)行 質(zhì)量檢查 ,這時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到 桑椹胚或囊胚 階段。(4)胚胎移植的方法: 手術(shù)法 和 非手術(shù)法 。胚胎移植后,應(yīng)對受體母牛進(jìn)行 是否妊娠 的檢查。23、哺乳動(dòng)物的性別控制技術(shù)有: x精子和y精子 的分離技術(shù)和 sry-pcr 胚胎的性別鑒定技術(shù),在后一種方法中,首先應(yīng)取被測胚胎的幾個(gè)細(xì)胞,提取dna,利用 dna分子雜交

32、技術(shù)進(jìn)行檢測。取胚胎細(xì)胞時(shí)應(yīng)將胚胎培養(yǎng)到 囊胚 階段用分割針取少量 滋養(yǎng)層 細(xì)胞。生物技術(shù)的安全性和倫理問題識(shí)記要點(diǎn)1、對轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭論主要發(fā)生在哪三個(gè)方面? 食物安全 、 生物安全 和 環(huán)境安全 。引發(fā)爭論的主要原因是:目前科學(xué)家對 基因 的結(jié)構(gòu),基因間的 相互作用 以及基因的 調(diào)控 機(jī)制等了解得相當(dāng)有限;轉(zhuǎn)移的基因很多都是 異種 生物的基因;外源基因插入宿主基因組的部位往往是 隨機(jī)的 ,因此,在轉(zhuǎn)基因生物中,有時(shí)會(huì)出現(xiàn)一些人們意想不到的后果。2、一部分公眾認(rèn)為轉(zhuǎn)基因食物不安全,他們的理由是什么?請舉3個(gè)例子。 擔(dān)心出現(xiàn)滯后效應(yīng),擔(dān)心出現(xiàn)新的過敏原;擔(dān)心營養(yǎng)成分改變;(反對“實(shí)質(zhì)性等

33、同”) 。3、在辯論中,一方認(rèn)為轉(zhuǎn)基因植物的抗除草劑基因有可能通過 花粉 傳播而進(jìn)入雜草中,使雜草成為用除草劑除不掉的“超級雜草”。你作為另一方,應(yīng)提出哪些相應(yīng)的觀點(diǎn)?(至少寫2點(diǎn)理由) (1)由于存在生殖隔離,轉(zhuǎn)基因植物很難與其他植物雜交;(2)許多植物花粉傳播的距離有限;(3)植物花粉存活時(shí)間有限 。以上的辯論屬于 生物安全 方面的爭論。4、在環(huán)境安全方面,部分公眾擔(dān)心轉(zhuǎn)基因生物會(huì)打破 自然物種的原有界限 ,改變生態(tài)系統(tǒng)中的 能量流動(dòng) 和 物質(zhì)循環(huán) ,從而使某些地區(qū)的生態(tài)系統(tǒng)的 穩(wěn)定性 遭到破壞;還有人擔(dān)心在轉(zhuǎn)基因植物的花粉中含有 有毒 蛋白或 過敏 蛋白,通過蜜蜂的采集,很可能會(huì)進(jìn)入蜂蜜

34、中,再經(jīng)過 食物鏈 的傳遞,最后有可能進(jìn)入其他動(dòng)物和人體內(nèi)。5、面對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊,正確的做法是 趨利避害,而不能因噎廢食 。6、在轉(zhuǎn)基因生物或其產(chǎn)品的研究過程中,絕大多數(shù)科學(xué)家都能自覺遵守 科學(xué)研究道德 。例如,把重組dna的轉(zhuǎn)移限制在 遺傳上具有特定缺陷的 生物上,對用大腸桿菌作為轉(zhuǎn)基因受體的菌株,限定必須使用在 37 0c下便會(huì)死去的菌株;對外源dna進(jìn)行認(rèn)真選擇,避免產(chǎn)生對人體 有毒害的 或 過敏 的蛋白質(zhì);一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題,要求馬上 停止 實(shí)驗(yàn),并 銷毀 重組生物。7、治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的 細(xì)胞、組織和器官 用于治療性移植;而生殖性克隆是指將克隆技

35、術(shù)用于 生育 目的,即用于產(chǎn)生 人類個(gè)體 。8、大多數(shù)人對克隆人的研究持否定態(tài)度,他們的觀點(diǎn)是:(1)倫理學(xué)家認(rèn)為: 克隆人嚴(yán)重違反了人類倫理道德,是克隆技術(shù)的濫用 ; 克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻、家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念 ; 克隆人是在人為地制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人 ;(2)生物學(xué)家認(rèn)為 由于克隆技術(shù)尚不成熟,現(xiàn)在就做克隆人很有可能孕育出有嚴(yán)重生理缺陷的孩子 。堅(jiān)持做克隆人的科學(xué)家則認(rèn)為,這些技術(shù)性問題可以通過 胚胎分級 、 基因診斷 和 染色體檢查 等方法得到解決,而不成熟的技術(shù)也只有通過 實(shí)踐 才能使之成熟。9、中國政府在對待克隆人問題上的態(tài)度是: 禁止生殖性克隆,不反

36、對治療性克隆 ,一再重申四不原則:不 贊成 、不 允許 、不 支持 、不 接受 任何生殖性克隆人的實(shí)驗(yàn)。10、設(shè)計(jì)試管嬰兒是指 體外受精 形成的胚胎在植入母體孕育 之前 ,根據(jù)人們的需要,將胚胎的一個(gè)(或少量)細(xì)胞取出進(jìn)行某些 遺傳學(xué)診斷 。當(dāng)檢測結(jié)果符合人們的需要時(shí),再把胚胎植入母體孕育。“試管嬰兒”和“設(shè)計(jì)試管嬰兒”這兩種技術(shù)在對人類作用上的區(qū)別是:前者主要用于 治療不孕夫婦的不孕癥 ,后者可以用于 治療需要造血干細(xì)胞移植(或骨髓移植)的疾病 。11、設(shè)計(jì)試管嬰兒引發(fā)的倫理問題(1)反對者觀點(diǎn): 把試管嬰兒當(dāng)作人體 零配件工廠 ,是對生命的不尊重;早期生命也有活下去的權(quán)利,拋棄或殺死多余胚

37、胎,無異于“謀殺”;有人濫用設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù),如設(shè)計(jì) 嬰兒性別 。(2)支持者觀點(diǎn) :設(shè)計(jì)試管嬰兒是為了救人,是救治患者的 最好 、 最快捷 的辦法之一;提供骨髓中 造血干細(xì)胞 并不會(huì)對試管嬰兒造成損傷,不違背倫理道德;臍帶血為“身外之物”,利用其中的 造血干細(xì)胞 是更符合倫理道德的。12、基因檢測引發(fā)的倫理問題(1)反對基因檢測的理由:目前人類對 基因結(jié)構(gòu) 及 基因間相互作用 尚缺乏足夠的認(rèn)識(shí),通過 基因檢測 達(dá)到預(yù)防疾病的目的是很困難的;人類的多基因遺傳病,既與 基因 有關(guān),又與 環(huán)境 和 生活習(xí)慣 有關(guān)。有某種基因的人不見得就會(huì)患病,基因正常也不一定不患病,可能因基因表達(dá)的蛋白質(zhì),在 加

38、工或修飾 過程中出現(xiàn)錯(cuò)誤,才表現(xiàn)出癥狀;基因檢測結(jié)果會(huì)給受檢者帶來巨大的 心理 壓力;造成基因 歧視 ,如個(gè)人婚姻困難、人際關(guān)系疏遠(yuǎn),更明顯的是造成一支 遺傳性 的失業(yè)大軍。(2)支持基因檢測的理由:有些遺傳性疾病在后代中復(fù)現(xiàn)率很高,通過基因檢測可及早采取 預(yù)防措施 ,適時(shí)進(jìn)行治療,達(dá)到 挽救患者生命 的目的;對于基因歧視現(xiàn)象,可以通過正確的 科學(xué)知識(shí) 傳播、 倫理道德 教育和 立法 得以解決。13、生物武器的種類包括 致病菌 、 病毒 、 生化毒劑 以及經(jīng)過 基因重組 的致病菌。能充當(dāng)生物武器的病原體舉例 天花病毒 、 炭疽桿菌 、 波特淋菌 、 霍亂弧菌 等。14、肉毒桿菌毒素分子可以阻滯

39、神經(jīng)末梢釋放 乙酰膽堿 從而引起肌肉麻痹。在實(shí)驗(yàn)室里,有人將 生物毒素 分子的基因與 流感 病毒的基因拼接在一起,然后再用 基因 工程方法進(jìn)行批量生產(chǎn)。15、中美兩國元首在關(guān)于禁止生物武器公約議定書的聯(lián)合聲明中,重申了在任何情況下, 不發(fā)展,不生產(chǎn),不儲(chǔ)存 生物武器,并反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散。生態(tài)工程識(shí)記要點(diǎn)一、生態(tài)工程的基本概念:1、生態(tài)工程的概念:指人類應(yīng)用 生態(tài)學(xué)和系統(tǒng)學(xué) 等學(xué)科的基本原理和方法,通過 系統(tǒng)設(shè)計(jì) 、 調(diào)控 和 技術(shù)組裝 ,對已被 破壞 的生態(tài)環(huán)境進(jìn)行 修復(fù) 、 重建 ,對造成 環(huán)境污染 和 破壞 的傳統(tǒng)生產(chǎn)方式進(jìn)行 改善 ,并提高生態(tài)系統(tǒng)的 生產(chǎn)力 ,從而促進(jìn)

40、人類社會(huì)和自然環(huán)境 的和諧發(fā)展。2、生態(tài)工程建設(shè)目的:遵循自然界 物質(zhì)循環(huán) 的規(guī)律,充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力,防止 環(huán)境污染 ,達(dá)到 經(jīng)濟(jì)效益 和 生態(tài)效益 的同步發(fā)展。3、生態(tài)工程特點(diǎn):少 消耗 、多 效益 、可 持續(xù) 。4、生態(tài)經(jīng)濟(jì)的概念:主要是通過實(shí)行 “循環(huán)經(jīng)濟(jì)” 原則,使一個(gè)系統(tǒng)產(chǎn)出的污染物,能夠成為本系統(tǒng)或者另一個(gè)系統(tǒng)的 生產(chǎn)原料 ,從而實(shí)現(xiàn) 廢棄物的資源化 ,而實(shí)現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟(jì)最重要的手段之一就是 生態(tài)工程 。二、生態(tài)工程遵循的基本原理1、物質(zhì)循環(huán)再生原理 (1)含義:物質(zhì)在生態(tài)系統(tǒng)中,進(jìn)行 區(qū)域小循環(huán) 和 全球地質(zhì) 大循環(huán),循環(huán)往復(fù), 分層分級 利用,從而達(dá)到取之不盡、用之不竭的效果

41、。(2)實(shí)例: 無廢棄物 農(nóng)業(yè)。(3)意義:減少環(huán)境污染。2、物種多樣性原理(1)含義:物種繁多而復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)具有較高的 抵抗力 穩(wěn)定性,可以在有限的資源條件下,產(chǎn)生或容納更多的 生物量 ,提高系統(tǒng) 生產(chǎn)力 。生物多樣性程度高,可以為各類生物的生存提供多種機(jī)會(huì) 和 條件 。(2)實(shí)例: 反面:我國的“三北防護(hù)林”建設(shè)中的問題:如遼寧西部的章古臺(tái)地區(qū),單一種植樟子松,由于缺少昆蟲與其天敵相生相克的 食物鏈 ,而成為一片不毛之地。正面:由珊瑚蟲和某些藻類共生組成的 珊瑚礁區(qū) 物種繁多,系統(tǒng)穩(wěn)定。3、協(xié)調(diào)與平衡原理:(1)含義: 生物 與 環(huán)境 的協(xié)調(diào)與平衡,需要考慮 環(huán)境承載力 ,又稱環(huán)境容納量

42、,即環(huán)境所能養(yǎng)活的 生物種群 的數(shù)量。(2)實(shí)例:太湖的富營養(yǎng)化問題;西北地區(qū)防護(hù)林建設(shè)中的樹種選擇問題。4、整體性原理(1)含義:進(jìn)行生態(tài)工程建設(shè),不但要考慮 自然生態(tài)系統(tǒng) 的規(guī)律,更重要的是要考慮 經(jīng)濟(jì) 和 社會(huì) 等系統(tǒng)的影響力。(2)實(shí)例:在進(jìn)行林業(yè)工程建設(shè)時(shí),一方面要召開農(nóng)民種樹,另一方面要考慮貧困地區(qū)農(nóng)民的 生活 問題,如糧食、燒柴及收入等,否則會(huì)出現(xiàn) “前面造林,后面砍林” 現(xiàn)象。5、系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理(1)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理含義:生態(tài)工程需考慮系統(tǒng)內(nèi)部 不同組分 之間的結(jié)構(gòu),通過改變和優(yōu)化 結(jié)構(gòu) ,達(dá)到改善系統(tǒng)功能 的目的。 實(shí)例:我國南方水網(wǎng)地區(qū)的 桑基魚塘 。(2)系統(tǒng)整體性原理:含義:系統(tǒng)各組分之間要有適當(dāng)?shù)谋壤P(guān)系,才能順利完成能量、物質(zhì)、信息等的 轉(zhuǎn)換 和 流通 ,并且實(shí)現(xiàn) 總體功能大于各部分之和 的效果,即 “1+1>2” 。實(shí)例:珊瑚礁三、生態(tài)工程的實(shí)例 1、農(nóng)村綜合發(fā)展型生態(tài)工程(1)問題:存在 人多

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