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1、.1課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增DNA片段.2溫故知新1 組成DNA分子的基本單位是什么? 這些基本單位是如何連接成DNA分子的? DNA分子結(jié)構(gòu)有什么特點(diǎn)?.3.412345.5堿基堿基OHOOPOHOOHOOPOHO堿基堿基OHOH.6OOPOHO堿基堿基OOHOOPOHOOH堿基堿基53.75533.8DNADNA分子的復(fù)制需要哪些條件?分子的復(fù)制需要哪些條件?DNADNA分子的復(fù)制過(guò)程是怎樣的?分子的復(fù)制過(guò)程是怎樣的?溫故知新2.9DNA母鏈:提供復(fù)制的模板解旋酶:打開(kāi)DNA雙鏈4種脫氧核苷酸:合成子鏈的原料DNA聚合酶:催化合成DNA子鏈ATP:為復(fù)制過(guò)程提供能量引物:使DNA
2、聚合酶從引物的3 端開(kāi)始連接脫氧核苷酸.10.11一、PCR原理: PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù),它能以極少量的DNA為模板,在幾小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝。利用了DNA的熱變性原理,通過(guò)控制溫度來(lái)控制雙鏈的解聚與結(jié)合。.12DNA母鏈:提供復(fù)制的模板解旋酶: 打開(kāi)DNA雙鏈4種脫氧核苷酸:合成子鏈的原料DNA聚合酶: 催化合成DNA子鏈ATP:為復(fù)制過(guò)程提供能量引物:使DNA聚合酶從引物的3 端開(kāi)始連接脫氧核苷酸8010080100耐熱的耐熱的DNADNA聚合酶聚合酶緩沖溶液:緩沖溶液:維持反應(yīng)的維持反應(yīng)的pHpH值不變值不變.13 溫度上升到溫度上升到9090以上以上時(shí)時(shí), ,雙鏈雙鏈DNADNA解聚解聚成為單鏈。成為單鏈。 溫度下降到溫度下降到5050左右左右, ,引引物與模板物與模板DNADNA單鏈單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合結(jié)合。 溫度上升到溫度上升到7272左右左右, ,溶液中溶液中的的4 4種脫氧核苷酸在種脫氧核苷酸在Taq Taq DNADNA聚合酶聚合酶的的作用下作用下, ,根據(jù)
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