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文檔簡介
1、尿素氮測定版本號:頁碼:第頁共頁1檢測原理尿素酶能特異性地水解尿素為氨和二氧化碳。所生成的氨被谷氨酸脫氫酶(gldh)利用以使酮戊 二酸(a-kg)發(fā)生還原性氨化,同吋使煙堿-腺卩票吟二核昔酸(nadh)氧化。由于nadh的消失而發(fā)生 的在340nm波長上吸光率的變化與樣本屮的bun濃度成止比。尿素+ h20 尿素酶 2mh3 + c02anib + a -kg + nadh gldh l-谷氨酸鹽 + nad>2標(biāo)本采集與處理2. 1采血方法空腹采不抗凝靜脈血23ml。2. 2標(biāo)本保存室溫保存,及時送檢。尿素易于被細(xì)菌降解,血清和尿液樣品在分析前放置在48°c。2. 3注意事
2、項(xiàng)推薦選用血清。在測定過程中,各種器材和蒸館水應(yīng)無氨離子污染,否則結(jié)果偏高。標(biāo)本不能使 用氟化物和肝素錢抗凝劑,因氟化物有抑制腺酶的作用。標(biāo)本應(yīng)避免乳糜、脂血、溶血、黃疸。3試劑和設(shè)備3.1試劑采用西門子醫(yī)學(xué)診斷產(chǎn)品(上海)有限公司提供的試劑盒。3. 1. 1試劑組成試劑船13孔為a -kg4. 69mmol/l, nadh0.34 mmol/l,尿素酶6. 8u/ml,激活劑,穩(wěn)定劑,片劑; 46孔為gldh2. 0 u/ml,穩(wěn)定劑,液體。3. 1.2試劑準(zhǔn)備直接使用。3. 1.3試劑保存試劑2-8°c保存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。3. 2質(zhì)控品美國biorad液體多項(xiàng)質(zhì)控品。3.3校準(zhǔn)品
3、西門子校準(zhǔn)品。3.4儀器尿素氮測定版本號:頁碼:第頁共頁siemens dimension xpand plus/rxl max 全自動生化分析系統(tǒng)。4操作程序4.1檢測過程流程簽收樣品一離心一上機(jī)檢測一審核報(bào)告一簽發(fā)報(bào)告一標(biāo)本保存。4. 2樣品簽收嚴(yán)格按照標(biāo)本接收程序簽收標(biāo)本。4. 3標(biāo)本處理以2500-3000r/min,離心6lomin,分離血清上機(jī)測定。如不能及時檢測,分離血清于2-8°c保存。4.4標(biāo)本檢測4. 4. 1手工編排測試項(xiàng)目:樣品按編號裝入樣品架,主屏幕按fkenter data,在position處輸入樣 品所在樣品架字母及所在位置號,按enter,在pati
4、ent name處選擇性輸入病人名字,按enter,在sample no處輸入樣品號,按enter,在tests處使用檢驗(yàn)鍵或檢驗(yàn)組合鍵選擇相應(yīng)項(xiàng)目,根據(jù)需要選擇相應(yīng)的 按鍵改變mode (按f7:mext mode選擇樣品管類型)、priority (按f4:next priority選擇樣品的 處理模式)、fluid (按f8:next fluid選擇標(biāo)木類型)。4. 4. 2雙向條形碼標(biāo)本分離血清后直接運(yùn)行儀器。4. 4.3運(yùn)行:輸入完畢后按f3:load list,確認(rèn)樣品已經(jīng)裝載在樣本盤上,按run鍵,儀器開始進(jìn)行 樣品檢測。4. 4. 4檢驗(yàn)后標(biāo)本保存標(biāo)本檢驗(yàn)完成后用釆血管原蓋蓋緊
5、,保存于標(biāo)本冷藏庫內(nèi),按日期放好,保存期為7天。5校準(zhǔn)程序5. 1校準(zhǔn)品準(zhǔn)備和儲存每瓶加2.0ml蒸懈水復(fù)融,輕輕旋轉(zhuǎn)搖勻,室溫放置30min,即可使用。5. 2校準(zhǔn)條件在室內(nèi)質(zhì)控失控、更換試劑批號、更換儀器主要配件或進(jìn)行大保養(yǎng)后均需校準(zhǔn)。無特殊情況校準(zhǔn) 周期為3個月。5. 3校準(zhǔn)程序主屏幕按 f5: process ctrl-f1: calibration,按 enter-f2: set-up & run,按項(xiàng)目鍵選擇所需要 校準(zhǔn)的項(xiàng)目名稱method,選中相應(yīng)試劑批號lot,輸入操作者姓名operator.校準(zhǔn)液貨號calibrator product和批號lot,以及最低值校準(zhǔn)液
6、在樣品架上的位置start at position,最后把校準(zhǔn)液各個水 平的值按照由低到高的順序輸?shù)綄?yīng)位置,按f4: assign cups指定樣品杯,校準(zhǔn)液按順序排列在樣 品架上,按f7: load/run-f4: run或“run”運(yùn)行鍵運(yùn)行校準(zhǔn)程序。6質(zhì)量控制程序尿素氮測定版本號:頁碼:第頁共頁6. 1質(zhì)控品準(zhǔn)備和儲存質(zhì)控品為液體,可以直接使用。原包裝質(zhì)控品-1070°c可保存到瓶身有效期,未開啟2-8°c可保 存90d,開啟后28°c可保存30d。6. 2質(zhì)控水平和分析批長度每24小至少進(jìn)行-批,每批2個濃度水平。6. 3質(zhì)控操作程序與4.4標(biāo)本檢測步驟
7、相同,只需要按f4:next priority將routine修改成qc狀態(tài)。7性能參數(shù)本法線性范圉為053.5mmol/l,對于超過測定線性范圍的結(jié)果,用凈化水對標(biāo)本進(jìn)行稀釋,輸入 稀釋因子后再重新檢測。8生物參考區(qū)間血清:2. 5 6.4mmol/l尿液:249-714 mmol/24 小時。9臨床意義血清尿素氮增高:見于腎前性氮質(zhì)血癥,rh于腎血流量灌注減少或者尿素生成過多引起。后者 見于高蛋白飲食、饑餓、發(fā)熱、膿毒血癥所致的蛋白質(zhì)分解代謝增加以及胃腸道出血后血液蛋白吸 收等。脫水、休克、心衰引起的腎供血不足,亦可使血液尿素氮升高。腎前性氮質(zhì)血癥,肌酹濃度 往往不伴隨升高。腎性氮質(zhì)血癥,由于急性與慢性腎功能衰竭、腎小腎炎、腎盂腎炎和腎病等引 起。腎結(jié)核、腎積水的血液尿素氮增高,與腎組織破壞程度相關(guān)。腎后性氮質(zhì)血癥,經(jīng)輸尿管、 膀胱、尿道的尿流受阻而引起的血液尿素氮升高。例如膀胱結(jié)石、泌尿生殖腫瘤、前列腺肥大、阻 塞造成的腎小管內(nèi)壓烽升高,使管內(nèi)尿素倒擴(kuò)散入血液。血液尿素氮濃度降低:較為少見,常表示嚴(yán)重
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