植物組織中碳水化合物含量的測定Somogyi法

1、測定植物碳水化合物的含量，通常用 80梍85%的酒精抽提，在此濃度的 酒精溶液中，還原糖和蔗糖溶解而淀粉沉淀。過濾后在溶液中測定可溶性 糖（包括還原糖和蔗糖），在殘?jiān)袦y定淀粉。還原糖可根據(jù)其還原能力 大小直接測定其含量。蔗糖和淀粉經(jīng)水解后生成還原糖， 測得其含量，然 后換算成蔗糖和淀粉。纖維素用稱重法，測得經(jīng)酸、堿和有機(jī)溶劑處理過 的樣品。I 還原糖含量的測定原理重要反應(yīng)如下；1 還原糖（如葡萄糖）在堿性溶液中能將 CU2+還原為CU,產(chǎn)生CuO 沉淀。CHO1z O-CH-COONa(CHOH)4 + :J Cu<+O.CH.COOKCH2OhCOOH1HO- CHCOONa一 (C

2、HOh)4+ 21+ Cu20HO.UHCOOK酒石酸鉀鈉2加酸使KI與KIQ作用，放出丨2來。5KI+KIQ+3HSA312+3KSO+3HO3. 放出的丨2立即與CuO作用。CuO+HSO CuSO+HOCuSG+l 2+KSO2CuS(4+2KI4 .多余的12用Na9O滴定2NaSO+l2 2NI+NSO將結(jié)果與空白滴定相比較，即知消耗12量，可間接推算出測定液中還 原糖含量。儀器藥品分析天平臺(tái)天平烘箱水浴鍋電動(dòng)粉碎機(jī)容量瓶移液管燒杯三角燒瓶漏斗酒精5%硫酸鋅1%酚酞溶液：1g酚酞溶解在100ml95%酉精溶液中。飽和氫氧化鋇溶液： 將蒸餾水煮沸， 除去水中二氧化碳， 冷卻后加入 固體

3、 Ba(OH)2 蓋好，過液，次日過濾。銅碘試劑：溶液A:取硫酸銅6.5g溶于100ml水中溶液B:取酒石酸鉀鈉12g,無水碳酸鈉20g,碳酸氫鈉25g溶于500ml 水中。溶液C:取碘酸鉀0.8g，碘化鉀10g,草酸鉀18g溶于200梍300ml 水中。用時(shí)將溶液B倒入溶液A中，再倒入溶液C中，混合后稀釋至 1000ml，混勻。2.5mol/L H 2SQ:濃硫酸143ml加入水中，稀釋成1000ml。淀粉指示劑：1g淀粉溶解在100ml水中，加熱使之溶解即可。0.005mol/L 硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：參照實(shí)驗(yàn) 39。操作步驟1 抽提將采回的植物樣品，分開部位，迅速放在 60C烘箱中烘干至恒

4、重。 剪碎后，放入電動(dòng)粉碎機(jī)中粉碎。用電動(dòng)分析天平分別稱取樣品1g，放入250ml三角燒瓶中，加入80%酉精50ml，放在70C水浴鍋中抽提3小 時(shí)，將上清液過濾(瓶內(nèi)殘?jiān)灰^濾出來)，再往殘?jiān)鼉?nèi)倒入80%酒精20ml，繼續(xù)抽提3小時(shí)，過濾。如此提取35次，合并所有濾液，定容 至500ml。最后將殘?jiān)娓?，留作分析淀粉用?澄清(1) 吸取酒精提取液25ml，在水浴鍋上蒸干。若溶液有酸性，可先用 固體碳酸鈉中和，以免酸對蔗糖的分解。(2) 蒸干后加入少量水，邊攪邊加入 Ba(0H)2 10ml (用量根據(jù)不同 樣品而定，如葉含色素多需用 7 8ml，含色素少的可用67ml)。(3) 沉淀完全

5、后，加入1滴酚酞指示劑，邊攪邊滴入ZnSO溶液，以沉 淀鋇鹽，滴至紅色褪去，再滴 Ba(OH)溶液，恢復(fù)淡紅色為終點(diǎn)。(4) 過濾并用蒸餾水洗滌沉淀，將濾液放入 50ml容量瓶中釋至刻度， 使可測定還原糖和蔗糖含量。3 測定(1) 吸取糖液5ml (含糖在0.3 2.0mg)，若糖液太濃可少吸些樣品， 用水補(bǔ)足5ml，放入大試管或小燒杯中。(2) 加入銅碘試劑5ml，用量必須十分準(zhǔn)確。(3) 蓋以表面皿，置沸水中保持100C 15分鐘。(4) 取出放入30T水浴中，杯內(nèi)溫度與水浴溫度相一致時(shí)為止。加入 2.5mol/L H 2S01ml蓋好，放置2分鐘，使沉淀物完全溶解，用水將蓋上 的碘沖洗下

6、來。(5) 用0.005mol/L Na9O滴定，邊滴定邊攪拌，滴至淡黃色時(shí)，加淀 粉指示劑1ml，再滴至淡藍(lán)色時(shí)為終點(diǎn)。(6) 另取蒸餾水及銅碘試劑各5ml，做空白滴定，二者之差，即可由 附表11中查得5ml糖液中的含糖量。假若用20g樣品，稀釋成500ml， 吸取25ml，澄清后定容至50ml，最后吸取5ml滴定時(shí)，查得含糖量需乘 因數(shù)1。500 v 50即x 100 = 12 X 1000若用烘干樣品則查得含糖量需乘因數(shù)10。500 y 50三工X 100 - 102X1000型天豈X蘭251020X 1000U蔗糖含量的測定原理由于植物體中有還原糖和非還原糖 （主要是蔗糖，因此要測定蔗

7、糖時(shí)， 需先經(jīng)鹽酸水解后， 測定其還原糖含量。 從總可溶性糖含量減去還原糖含 量即為蔗糖含量。藥品5mol/L NaOH比重1.103的HCI :取濃鹽酸528ml，加水稀釋成1000ml操作步驟吸取清潔后的可溶性糖液10ml，放入25ml容量瓶中，加入比重 1.103HCI2mI，煮沸5分鐘，使之轉(zhuǎn)化成還原糖后用 5mol/L NaOH溶液中 和，用酚酞為指示劑加至淡紅色為止。中和后用水稀釋至刻度，吸取 5ml 測定其總可溶性糖含量。蔗糖量 =于蔗糖水解時(shí)吸收了 1 分子水0.95式中系數(shù) 0.95是由所以由附表 11 查得含糖量乘以 2.5 即得總可溶性糖含量。若用烘干 樣品2g，則因素為

8、25。川淀粉含量的測定原理淀粉用酸水解轉(zhuǎn)化成葡萄糖后， 測定其葡萄糖含量。 根據(jù)葡萄糖含量 換算成淀粉含量。(CeH。) n+nn(C6Hi2O)藥品2%HC溶液5mol/L NaO H 溶液操作步驟取酒精抽提后的殘?jiān)?.5g，放入三角燒瓶中，加2%HCI25mJ蓋上, 在沸水浴鍋中沸騰3.5小時(shí)，用5mol/L NaOF中和，再依照測定還原糖的 方法加入清潔劑，過濾，稀釋至 250ml。吸取5ml測量定其還原糖含量。葡萄糖含量x 0.9=粗淀粉含量式中系數(shù)0.9是由于淀粉（C6HoO） n水解時(shí)吸收了 n個(gè)分子水。W粗纖維含量的測定原理測定粗纖維是用硫酸、 堿、乙醇和乙醚相繼處理樣品。 硫酸

9、水解某些 不溶解的碳水化合物 （如淀粉和部分半纖維素） 成為單糖。 堿能使蛋白質(zhì) 轉(zhuǎn)變成可溶態(tài)并除去脂肪及溶解不能被酸溶解的半纖維素和某些木素。 酒 精和乙醚能抽出樹脂、單寧和色素及剩余的脂肪與部分蛋白質(zhì)。藥品70 85%乙醚1.25%硫酸溶液：取比重 1.84 的濃硫酸 13ml 加水稀釋至 1L。1.25%氫氧化鈉：15g氫氧化鈉溶解在1L蒸餾水中，然后用標(biāo)定其準(zhǔn) 確濃度，計(jì)算再應(yīng)加蒸餾水量，使其濃度準(zhǔn)確為 1.25%。操作步驟1. 將磨碎的樣品1 3g,裝入已知重量的稱量瓶中，在分析天平上 準(zhǔn)確稱重， 無損失地倒入三角燒瓶里。 如為新鮮樣品， 須取同樣的樣品測 定水分。此外，再于已知重量

10、的稱量瓶中烘干濾紙。注意溫度不要過高， 一般在8090C,防止濾紙烘焦影響重量。2. 在燒瓶外壁上， 相當(dāng) 200ml 溶量處， 用玻璃鉛筆或紙條作一記號， 然后將200ml1.25%的硫酸倒入瓶中，加熱至沸騰時(shí)再繼續(xù) 30分鐘，加熱 時(shí)防止激烈沸騰， 應(yīng)經(jīng)常攪拌。 每 5 分鐘要向瓶內(nèi)倒入沸水， 使其內(nèi)容物 達(dá)到記號，以保持酸的濃度不變。3. 煮沸之后，用帶有已知重量的濾紙漏斗過濾，并用熱蒸餾水沖洗 燒杯及漏斗 34 次，直至濾液用石蕊試紙?jiān)囼?yàn)呈中性反應(yīng)為止。4. 用 1.25%氫氧化鈉溶液將濾紙上的沉淀物完全洗入瓶內(nèi)，將其加 熱至沸騰再繼續(xù) 30分鐘（操作同上）。5. 煮沸后冷卻，用原來所用已知重量的濾紙過濾，用蒸餾水