cancercell雜志CD19和CD1d雙重靶向增強(qiáng)CAR19-iNKT細(xì)胞的抗淋巴瘤活性

1、cancer cell 雜志 CD19 和 CD1d 雙重靶向增強(qiáng)CAR19-iNKT 細(xì)胞的抗淋巴瘤活性展開全文Cancer cell 雜志CD19 和 CD1d 雙重靶向增強(qiáng) CAR19-iNKT 細(xì)胞的抗淋巴瘤活性倫敦帝國理工學(xué)院醫(yī)學(xué)系血液學(xué)中心亮點(diǎn)：v 在增殖能力及對(duì) CD19+CD1d+ 靶的殺傷作用方面 ，CAR19-iNKT 高于 CAR19-T 細(xì)胞vaGalCer 和 ATRA 增強(qiáng) CAR19-iNKT 細(xì)胞的反應(yīng)性，延長CAR19-iNKT 細(xì)胞治療后小鼠的存活和腦淋巴瘤的根除Rotolo 等人證明， 抗 CD19 基因工程 （CAR-19） 的 cd1d 限制性 NKT

2、 細(xì)胞 （iNKT） 比 CAR19-T 細(xì)胞治療 cd1d 陽性的淋巴瘤 （包括腦淋巴瘤）更有效。去抑制CD1d 分子進(jìn)一步增強(qiáng)CAR19-iNKT 的抗腫瘤效應(yīng)。基 CAR19-T 細(xì)胞免疫治療引起的 CD19 + B 細(xì)胞淋巴瘤的臨床緩解往往是短暫的。我們測試了 CAR19 基因工程化的CD1d 限制性自然殺傷iNKT 細(xì)胞是否能增強(qiáng)抗淋巴瘤活性。 在體內(nèi)外，依賴于 CD1d 和 CAR19-CD19 的相互作用激活的 CAR19-iNKT 細(xì)胞比依賴于 CD1d 的 CAR19-T 細(xì)胞更有效地抑制CD1d + 的淋巴瘤。CAR19-iNKT 細(xì)胞在體內(nèi)更快的產(chǎn)生抗淋巴細(xì)胞活性，并且清

3、除腦淋巴瘤的能力增強(qiáng)，提高了小鼠無腫瘤生存期和總體生存率。結(jié)果進(jìn)一步增強(qiáng)了 CAR19-iNKT 細(xì)胞對(duì) CD19 + B 淋巴瘤細(xì)胞的毒性，因此， iNKT 細(xì)胞是一個(gè)高效的基于 CAR 的免疫治療淋巴瘤的一種有潛力的技術(shù)， 在其他可能表達(dá)CD1d 分子的癌癥方面也具有一定的研究價(jià)值。不變性自然殺傷T（ iNKT ） 細(xì)胞是一種罕見但功能強(qiáng)大的免疫調(diào)節(jié)和效應(yīng) T 細(xì)胞，具有重要的抗腫瘤作用。我們和其他人已經(jīng)證明了供者的iNKT 細(xì)胞在異基因干細(xì)胞移植的背景下對(duì)實(shí)驗(yàn)性和臨床性aGVHD 的保護(hù)能力。我們以前也發(fā)現(xiàn)CD19 和 CD1d 在許多細(xì)胞淋巴瘤亞型中共同表達(dá)，包括不可治愈邊緣區(qū)淋巴瘤（

4、 MZL ）和套細(xì)胞淋巴瘤（ MCL ）Kotsianidis 等人， 2011） ， 而在 B 細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞白血?。–LL ） ，最常見的血液學(xué)惡性腫瘤， CD1d 表達(dá)低于正常B細(xì)胞或缺失。重要的是，可以確定iNKT細(xì)胞中CD4-的細(xì)胞，與 CD4+細(xì)胞相比， iNKT 細(xì)胞具有更極化的 Th1 細(xì)胞因子譜并表達(dá)更高水平的細(xì)胞毒性顆粒。事實(shí)上，我們發(fā)現(xiàn)靜息的 CD4-CAR19iNKT 細(xì)胞表達(dá)顯著更高水平的穿孔素和顆粒酶B ，并且在活化后，比CD4+亞群分泌更多的顆粒酶B和干擾素-y（IFN-力但更少的IL-4。與CAR19-T細(xì)胞相比，CAR19 iNKT細(xì)胞表達(dá)更高比例的IFN-

5、 丫，穿孔素和顆粒酶三種分子，比例上有著顯著的差異（ 40%對(duì) <5% ， p<0.01 ） 。值得注意的是，雖然>20% 的 CAR19-T 細(xì)胞不分泌上述三種分子，但 CAR19-iNKT 細(xì)胞的相應(yīng)比例 <3% 。此外，在8 小時(shí)的激活期間， CAR19 iNKT 細(xì)胞比 CAR19-T 細(xì)胞分泌更高水平的 Th1/2 細(xì)胞因子。實(shí)際上， 效應(yīng)細(xì)胞與靶細(xì)胞（E/T） 比例為 1:1 的 CAR19 iNKT細(xì)胞的細(xì)胞毒性和增殖活性與E/T 比例為 10:1 的 CAR19-T細(xì)胞的細(xì)胞毒性和增殖活性相似， 表明功能等同性的 CAR1

6、9iNKT 細(xì)胞是 CAR19-T 細(xì)胞的 10 倍。CAR19-iNKT 細(xì)胞平均擴(kuò)增 >3000倍，從2X105個(gè)純化的 iNKT細(xì)胞開始擴(kuò)增，將產(chǎn)生超過 5X108個(gè)CAR19- iNKT 細(xì)胞。CAR19 iNKT 細(xì) 胞 根 除 顱 內(nèi) 和 復(fù) 發(fā) 性 疾 病 ， 增 強(qiáng)CAR19-iNKT 細(xì)胞體內(nèi)抗腫瘤活性的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)布局。 熒光素酶表達(dá)的 c1r-cd1d 細(xì)胞經(jīng)靜脈注射轉(zhuǎn)移至 NSG 小鼠。采用生物發(fā)光法監(jiān)測腫瘤生長。 在連續(xù)兩次相隔至少72 小時(shí)的 bli 掃描中，通過增加光子活性確認(rèn)植入后，輸注 107個(gè)效應(yīng)細(xì)胞 （或同體積的 PBS 對(duì)照 ） 。與 CAR19-T 細(xì)胞相比，CAR19-iNKT 細(xì)胞在