高中生物單克隆抗體知識(shí)點(diǎn)_第1頁
高中生物單克隆抗體知識(shí)點(diǎn)_第2頁
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文檔簡介

1、高中生物單克隆抗體知識(shí)點(diǎn)高中生物單克隆抗體基礎(chǔ)知識(shí)點(diǎn)一、區(qū)別單克隆抗體和多克隆抗體 多克隆抗體:抗原刺激機(jī)體,產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機(jī)體 的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球 蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的 免疫球蛋白就是抗體。當(dāng)病原體入侵人體,能夠刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生大量的 多種抗體,那么這一堆抗體就是多克隆的。單克隆抗體(MAb):是針專一的抗原決定簇產(chǎn)生的抗體,單克隆技術(shù)又名雜交瘤技術(shù),起源于 1975 年,由 G.KÖhler 和 Milstein 創(chuàng)立。主要原理是利用產(chǎn)生抗體 的 B 細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞雜交融合成雜交瘤細(xì)胞,生產(chǎn)抗體。此類

2、抗體是專一的,或者說是同一種蛋白質(zhì),因此是單 克隆的。二、雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的主要步驟(1) 抗原制備 ;(2) 免疫動(dòng)物 ;(3) 免疫脾細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的制備 ;(4) 細(xì)胞融合 ;(5) 雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng) ;(6) 雜交瘤細(xì)胞的篩選 ;(7) 雜交瘤細(xì)胞的克隆化 ;(8) 單克隆抗體的檢定 ;(9) 分泌單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞系的建立 ;(10) 單克隆抗體的大量制備。三、雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的具體過程1、免疫動(dòng)物 免疫動(dòng)物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠 產(chǎn)生致敏 B 淋巴細(xì)胞的 過程。 一般選用 6-8 周齡雌性 Balb/c 小鼠,按照預(yù)先制定的免疫方案進(jìn)行免疫注射??乖?/p>

3、過血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進(jìn)入外周免疫器官,刺激相應(yīng)B淋巴細(xì)胞克隆,使其活化、增殖,并分化成為致敏B 淋巴細(xì)胞。2、細(xì)胞融合 采用眼球摘除放血法處死小鼠,無菌操作 取出脾臟,在平皿內(nèi)擠壓研磨,制備脾細(xì)胞懸液。 將準(zhǔn)備 好的同系骨髓瘤細(xì)胞與小鼠脾細(xì)胞按一定比例混合,并加入 促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各種淋巴細(xì)胞可與 骨髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合,形成雜交瘤細(xì)胞。3、選擇性培養(yǎng) 選擇性培養(yǎng)的目的是篩選融合的雜交瘤 細(xì)胞,一般采用 HAT選擇性培養(yǎng)基。在 HAT培養(yǎng)基中,未融 合的骨髓瘤細(xì)胞因缺乏次黃嘌呤-鳥嘌呤 -磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,不能利用補(bǔ)救途徑合成 DNA而死亡。 未融合的淋巴細(xì)胞雖 具有次黃嘌呤 -

4、鳥嘌呤 -磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,但其本身不能在體 外長期存活也逐漸死亡。 只有融合的雜交瘤細(xì)胞由于從脾 細(xì)胞獲得了次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,并具有骨髓瘤 細(xì)胞能無限增殖的特性,因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖。高中生物易錯(cuò)知識(shí)點(diǎn) 使能量持續(xù)高效的流向?qū)θ祟愖钣幸饬x的部分 能量在 2 個(gè)營養(yǎng)級(jí)上傳遞效率在 10% 20% 單向流動(dòng)逐級(jí)遞減真菌 PH5.06.0 細(xì)菌 PH6.57.5 放線菌 PH7.58.5 物質(zhì)作為能量的載體使能量沿食物鏈?zhǔn)澄锞W(wǎng)流動(dòng) 物質(zhì)可以循環(huán),能量不可以循環(huán)河流受污染后,能夠通過物理沉降化學(xué)分解 微生物 分解,很快消除污染生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu):生態(tài)系統(tǒng)的成分 +食物鏈?zhǔn)澄锞W(wǎng) 淋巴

5、因子的成分是糖蛋白、病毒衣殼的是16 多肽分子個(gè)、原核細(xì)胞的細(xì)胞壁:肽聚糖過敏:抗體吸附在皮膚,黏膜,血液中的某些細(xì)胞表 面,再次進(jìn)入人體后使細(xì)胞釋放組織胺等物質(zhì) .生產(chǎn)者所固定的太陽能總量為流入該食物鏈的總能 量效應(yīng) B 細(xì)胞沒有識(shí)別功能 萌發(fā)時(shí)吸水多少看蛋白質(zhì)多少、大豆油根瘤菌不用氮 肥、脫氨基主要在肝臟但也可以在其他細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行水腫:組織液濃度高于血液尿素是有機(jī)物,氨基酸完全氧化分解時(shí)產(chǎn)生有機(jī)物是否需要轉(zhuǎn)氨基是看身體需不需要 藍(lán)藻:原核生物,無質(zhì)粒、酵母菌:真核生物,有質(zhì) 粒、高爾基體合成纖維素等生物導(dǎo)彈是單克隆抗體是蛋白質(zhì)淋巴因子:白細(xì)胞介素原腸胚的形成與囊胚的分裂和分化有關(guān)受精卵 (

6、未分裂) 卵裂囊胚 (以分裂 )原 腸胚高度分化的細(xì)胞一般不增殖。例如:腎細(xì)胞 ; 有分裂 能力并不斷增的: 干細(xì)胞、形成層細(xì)胞、生發(fā)層 ; 無分裂能 力的:紅細(xì)胞、篩管細(xì)胞 (無細(xì)胞核 ) 、神經(jīng)細(xì)胞、骨細(xì)胞高中生物學(xué)習(xí)方法 預(yù)習(xí)預(yù)習(xí)是在老師講課前, 先瀏覽一遍講課內(nèi)容, 在瀏覽時(shí), 應(yīng)用筆將自己認(rèn)為是重點(diǎn)的內(nèi)容劃出來,將自己看不懂的內(nèi) 容標(biāo)出來,將瀏覽后產(chǎn)生的問題記下來,有能力、有條件的 還可以自己做出預(yù)習(xí)筆記。通過這樣的預(yù)習(xí),為下一步聽講 奠定基礎(chǔ),使自己的聽講更加有的放矢,聽講時(shí)就可以對自 己已經(jīng)弄懂的或重點(diǎn)知識(shí)重新加深印象,并比較一下老師的 理解與自己的理解有什么差距,如果自己理解得

7、不深,則可 以進(jìn)一步加深理解。對于自己預(yù)習(xí)時(shí)還不懂的問題,則是聽 講的重要內(nèi)容,一定要當(dāng)堂弄清楚。對于在預(yù)習(xí)中產(chǎn)生的問 題,如果老師講到了,則要聽懂,如果老師沒有講到,一定 要向老師問清楚。預(yù)習(xí)也為將來的自學(xué)能力打下了良好的基 礎(chǔ). 聽講 很多優(yōu)秀學(xué)生的經(jīng)驗(yàn)都說明了一個(gè)共同點(diǎn),即學(xué)生的主 要功夫應(yīng)下在課堂上。我們的學(xué)習(xí)過程,實(shí)際上是解決一種 矛盾,即已知與未知的矛盾,通過學(xué)習(xí)把未知轉(zhuǎn)化為已知, 然后又有新的未知的出現(xiàn),我們再來完成這個(gè)轉(zhuǎn)化過程。而 由未知轉(zhuǎn)化為已知的過程是在課堂上,在老師的指導(dǎo)下完成 的,因此應(yīng)該是很順利的。有很多學(xué)生就是課上認(rèn)真聽講, 在 45 分鐘的時(shí)間里完成學(xué)習(xí)任務(wù)。但是

8、,總有些人,課堂 上不認(rèn)真完成由未知向已知的轉(zhuǎn)化,白白浪費(fèi)掉 45 分鐘, 反而在課下再花時(shí)間去完成轉(zhuǎn)化,此時(shí)已沒有老師的指導(dǎo), 只有課本上的內(nèi)容,顯然是不會(huì)有好效果的。如此花雙倍或 更多的時(shí)間,去完成效果不好的學(xué)習(xí)任務(wù),就是常說的事倍 功半。只要我們把主要功夫下在課上,那么,課下的負(fù)擔(dān)也 就會(huì)減輕,而且學(xué)習(xí)效果也會(huì)提高,時(shí)間上也會(huì)更加充裕, 這就是常說的事半功倍。 所以,聽講這一步驟是極為關(guān)鍵的。 復(fù)習(xí)和作業(yè) 每節(jié)課上,一般老師都要留一定量的作業(yè),這些作業(yè)的 內(nèi)容多是講課的重點(diǎn)內(nèi)容,是應(yīng)該認(rèn)真對待的。作業(yè)的過程 就是復(fù)習(xí)鞏固聽學(xué)知識(shí)的過程,但是,很多同學(xué)把作業(yè)僅僅 當(dāng)成是一種任務(wù),甚至當(dāng)成是

9、個(gè)負(fù)擔(dān)。因此,急急忙忙趕完 作業(yè),就認(rèn)為當(dāng)天的任務(wù)完成了,殊不知,這種做法對學(xué)習(xí) 的幫助是微小的。無論課上老師是否留有作業(yè),課下都應(yīng)該 先進(jìn)行復(fù)習(xí),及時(shí)將當(dāng)天老師所講的知識(shí)復(fù)習(xí)一遍,這可以 加強(qiáng)記憶,克服遺忘。心理學(xué)家對遺忘和記憶都進(jìn)行過實(shí)驗(yàn) 和研究,德國的心理學(xué)家艾賓浩斯的實(shí)驗(yàn)研究成果中,提出 了一個(gè)著名的“遺忘曲線”表明了遺忘發(fā)展的一條規(guī)律,即 遺忘的進(jìn)程是先快后慢,先多后少。就是說,剛剛學(xué)習(xí)完知 識(shí)后,遺忘很快就開始,而且一開始遺忘得較多,過一段時(shí) 間間隔之后,遺忘的發(fā)展越來越慢,遺忘得也就慢了。根據(jù) 這一遺忘規(guī)律,我們應(yīng)該進(jìn)行及時(shí)的復(fù)習(xí),不要等到遺忘得 差不多時(shí),再進(jìn)行復(fù)習(xí),那樣,學(xué)習(xí)效果是不會(huì)好的。由于 遺忘進(jìn)程是不均衡的,所以我們復(fù)習(xí)得越及時(shí)越好。每天的復(fù)習(xí)一定

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