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1、第二章第二章 細(xì)菌生理細(xì)菌生理 細(xì)菌的化學(xué)組成 細(xì)菌的物理性狀 細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng) 細(xì)菌的新陳代謝 細(xì)菌的生長(zhǎng)繁衍第一節(jié)細(xì)菌的化學(xué)組成第一節(jié)細(xì)菌的化學(xué)組成 結(jié)合水 水 份 75-85% 自在水 無(wú)機(jī)物 干物質(zhì) 15-25% 有機(jī)物第二節(jié)細(xì)菌的物理特性第二節(jié)細(xì)菌的物理特性 比面積大比面積大 光學(xué)性質(zhì)光學(xué)性質(zhì) 多相膠體性質(zhì)多相膠體性質(zhì) 浸透壓浸透壓 帶電景象帶電景象 布朗氏運(yùn)動(dòng)布朗氏運(yùn)動(dòng) 自動(dòng)運(yùn)輸:物質(zhì)由低濃度向高濃度自動(dòng)運(yùn)輸:物質(zhì)由低濃度向高濃度方向的運(yùn)輸方式。它需求酶的作用,方向的運(yùn)輸方式。它需求酶的作用,如浸透酶各周?chē)g隙蛋白,在運(yùn)輸大如浸透酶各周?chē)g隙蛋白,在運(yùn)輸大分子物質(zhì)糖、氨基酸、無(wú)機(jī)離子分子
2、物質(zhì)糖、氨基酸、無(wú)機(jī)離子中起著重要作用。中起著重要作用。運(yùn)輸表示圖為:運(yùn)輸表示圖為: 主支運(yùn)輸轉(zhuǎn)動(dòng)方式 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 釋放營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 滲 透 酶 載體 復(fù)合物 細(xì)胞內(nèi) 周?chē)g隙蛋白 載體回位l礦物質(zhì)礦物質(zhì)在細(xì)菌代謝中起著酶激活物在細(xì)菌代謝中起著酶激活物的作用,用來(lái)構(gòu)成酶的輔基,對(duì)于維的作用,用來(lái)構(gòu)成酶的輔基,對(duì)于維持原生質(zhì)膠體形狀和細(xì)胞浸透性具有持原生質(zhì)膠體形狀和細(xì)胞浸透性具有較大作用。較大作用。lVit在代謝中起重要作用如在代謝中起重要作用如B簇簇Vit起著輔酶或輔基的作用。起著輔酶或輔基的作用。三、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型三、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型 自養(yǎng)型自養(yǎng)型 這類(lèi)細(xì)菌酶系統(tǒng)完善,能利用這類(lèi)細(xì)菌酶系統(tǒng)完善,能利
3、用無(wú)機(jī)碳無(wú)機(jī)碳CO2、C、H2CO3合成菌體有合成菌體有機(jī)碳。機(jī)碳。 分為光能和化能自養(yǎng)型兩類(lèi)。分為光能和化能自養(yǎng)型兩類(lèi)。 異養(yǎng)型異養(yǎng)型 這類(lèi)細(xì)菌酶系統(tǒng)不完善,只能利這類(lèi)細(xì)菌酶系統(tǒng)不完善,只能利用有機(jī)碳作為養(yǎng)料。分為光能異養(yǎng)菌和化用有機(jī)碳作為養(yǎng)料。分為光能異養(yǎng)菌和化能異養(yǎng)菌兩大類(lèi)。絕大多數(shù)病原菌都屬于能異養(yǎng)菌兩大類(lèi)。絕大多數(shù)病原菌都屬于化能異養(yǎng)菌?;墚愷B(yǎng)菌。 二、細(xì)菌的呼吸1、細(xì)菌呼吸的概念:、細(xì)菌呼吸的概念: 細(xì)菌借助于體內(nèi)的酶類(lèi),從物細(xì)菌借助于體內(nèi)的酶類(lèi),從物質(zhì)的氧化復(fù)原過(guò)程中獲得它所需求質(zhì)的氧化復(fù)原過(guò)程中獲得它所需求的能量的過(guò)程,稱(chēng)細(xì)菌的呼吸。的能量的過(guò)程,稱(chēng)細(xì)菌的呼吸。2、細(xì)菌呼吸類(lèi)
4、型:、細(xì)菌呼吸類(lèi)型: 專(zhuān)性需氧菌專(zhuān)性需氧菌 微需氧菌微需氧菌 兼性厭氧菌兼性厭氧菌 厭氧菌厭氧菌 專(zhuān)性厭氧菌專(zhuān)性厭氧菌各型細(xì)菌呼吸特點(diǎn) 專(zhuān)性需氧菌:需充足專(zhuān)性需氧菌:需充足O2,生長(zhǎng)于外表生長(zhǎng)于外表.。 微需氧菌:需低濃度微需氧菌:需低濃度O2,生長(zhǎng)于外表以下數(shù)生長(zhǎng)于外表以下數(shù)mm處。處。 兼性厭氧菌:生長(zhǎng)于整兼性厭氧菌:生長(zhǎng)于整個(gè)培育基中。個(gè)培育基中。 厭氧菌和專(zhuān)性厭氧菌:厭氧菌和專(zhuān)性厭氧菌:生長(zhǎng)于培育基底部。生長(zhǎng)于培育基底部。3、厭氧菌培育的原理、厭氧菌培育的原理1、厭氧菌缺乏細(xì)胞色素和細(xì)胞色素氧化酶、厭氧菌缺乏細(xì)胞色素和細(xì)胞色素氧化酶 二者具有較高的氧化復(fù)原電勢(shì),能氧化高二者具有較高的氧
5、化復(fù)原電勢(shì),能氧化高電勢(shì)的化合物產(chǎn)生能量。在有氧環(huán)境中,電勢(shì)的化合物產(chǎn)生能量。在有氧環(huán)境中,培育基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)多為氧化型形狀,培育基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)多為氧化型形狀,氧化復(fù)原電勢(shì)隨之升高。故厭氧菌不能氧化復(fù)原電勢(shì)隨之升高。故厭氧菌不能利用這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),呵斥能量缺乏而不利用這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),呵斥能量缺乏而不能生長(zhǎng)。能生長(zhǎng)。2、缺乏過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化物酶、缺乏過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化物酶 細(xì)菌在細(xì)菌在有氧環(huán)境的代謝中常產(chǎn)生有氧環(huán)境的代謝中常產(chǎn)生H2O2,這是一,這是一種氧化劑,有殺菌作用,缺乏二酶,故種氧化劑,有殺菌作用,缺乏二酶,故厭氧菌不能分解厭氧菌不能分解H2O2,而不能生長(zhǎng)。,而不能生長(zhǎng)。3、有氧環(huán)境中、
6、有氧環(huán)境中SH被氧化被氧化 SH是菌體是菌體許多酶類(lèi)的輔酶如許多酶類(lèi)的輔酶如CoA、琥珀酸脫氫、琥珀酸脫氫酶、氨基酸轉(zhuǎn)移酶等,故厭氧菌不能酶、氨基酸轉(zhuǎn)移酶等,故厭氧菌不能生長(zhǎng)。生長(zhǎng)。三、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物三、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物一分解產(chǎn)物的檢測(cè)一分解產(chǎn)物的檢測(cè)1糖代謝測(cè)定糖代謝測(cè)定糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn):糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn): 多糖經(jīng)胞外酶分解為雙糖單糖再經(jīng)胞內(nèi)多糖經(jīng)胞外酶分解為雙糖單糖再經(jīng)胞內(nèi)酶分解為有機(jī)酸、醇、酶分解為有機(jī)酸、醇、CO2和和H2O。細(xì)。細(xì)菌分解糖的才干是不同的。菌分解糖的才干是不同的。 產(chǎn)酸不產(chǎn)產(chǎn)酸不產(chǎn)氣氣 產(chǎn)酸產(chǎn)氣產(chǎn)酸產(chǎn)氣 陰性陰性VP實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn):n大腸桿菌與產(chǎn)氣桿菌均分解葡萄糖大腸桿菌與產(chǎn)氣桿菌均分解
7、葡萄糖 ,為區(qū)分,為區(qū)分兩菌可采用兩菌可采用VP實(shí)驗(yàn)及甲基紅實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)氣桿菌實(shí)驗(yàn)及甲基紅實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)氣桿菌能使丙酮酸脫羧、氧化在堿性溶液中生成能使丙酮酸脫羧、氧化在堿性溶液中生成二乙酰,后者可與含胍基的化合物反響,生成二乙酰,后者可與含胍基的化合物反響,生成紅色化合物,稱(chēng)紅色化合物,稱(chēng)VP陽(yáng)性。陽(yáng)性。甲基紅實(shí)驗(yàn):甲基紅實(shí)驗(yàn):n產(chǎn)氣桿菌使丙酮酸脫羧后構(gòu)成中性產(chǎn)物,培育產(chǎn)氣桿菌使丙酮酸脫羧后構(gòu)成中性產(chǎn)物,培育液液pH5.4,甲基紅指示劑呈桔黃色,為甲基,甲基紅指示劑呈桔黃色,為甲基紅實(shí)驗(yàn)陰性,大腸桿菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸,紅實(shí)驗(yàn)陰性,大腸桿菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸,培育液呈酸性培育液呈酸性pH5.4,指示
8、劑甲基紅呈紅色,指示劑甲基紅呈紅色,稱(chēng)甲基紅實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性。稱(chēng)甲基紅實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性。枸櫞酸鹽利用實(shí)驗(yàn):枸櫞酸鹽利用實(shí)驗(yàn):n能利用枸櫞酸鹽作為獨(dú)一碳源的細(xì)能利用枸櫞酸鹽作為獨(dú)一碳源的細(xì)菌如產(chǎn)氣桿菌,分解枸櫞酸鹽生成菌如產(chǎn)氣桿菌,分解枸櫞酸鹽生成碳酸鹽,同時(shí)分解培育基的銨鹽生碳酸鹽,同時(shí)分解培育基的銨鹽生成氨,由此使培育基變?yōu)閴A性,使成氨,由此使培育基變?yōu)閴A性,使指示劑溴麝香草酚藍(lán)指示劑溴麝香草酚藍(lán)BTB由淡由淡綠轉(zhuǎn)為深藍(lán),此為枸櫞酸鹽利用實(shí)綠轉(zhuǎn)為深藍(lán),此為枸櫞酸鹽利用實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性。驗(yàn)陽(yáng)性。2 2、蛋白質(zhì)代謝測(cè)定、蛋白質(zhì)代謝測(cè)定 H2S實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn): 含含S氨基酸氨基酸 菌菌 產(chǎn)生產(chǎn)生H2S 與基中醋酸鉛與基中醋酸
9、鉛 PbS黑黑 色沉淀物。色沉淀物。 吲哚實(shí)驗(yàn):吲哚實(shí)驗(yàn): 色氨酸色氨酸 菌菌 吲吲哚哚 明膠實(shí)驗(yàn):明膠實(shí)驗(yàn): 明膠明膠 菌菌 液化液化 紫乳實(shí)驗(yàn):紫乳實(shí)驗(yàn): 酪蛋白酪蛋白 菌菌 胨胨化化第五節(jié)細(xì)菌的生長(zhǎng)繁衍第五節(jié)細(xì)菌的生長(zhǎng)繁衍一、細(xì)菌生長(zhǎng)繁衍的條件一、細(xì)菌生長(zhǎng)繁衍的條件1、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 供應(yīng)細(xì)菌適量的供應(yīng)細(xì)菌適量的H2O、糖類(lèi)、糖類(lèi)、蛋白質(zhì)或氨基酸、無(wú)機(jī)鹽及蛋白質(zhì)或氨基酸、無(wú)機(jī)鹽及Vit等。等。2、溫度、溫度 細(xì)菌生長(zhǎng)的最適溫度隨菌種細(xì)菌生長(zhǎng)的最適溫度隨菌種不同而不同而異,普通病原菌要求與體溫一樣,如異,普通病原菌要求與體溫一樣,如牛羊病原菌牛羊病原菌需需37,魚(yú)類(lèi)病原菌那么要求,魚(yú)類(lèi)
10、病原菌那么要求22。 3、酸堿度、酸堿度PH PH對(duì)細(xì)菌發(fā)育影響對(duì)細(xì)菌發(fā)育影響很大,大多數(shù)病原菌最適酸堿度為很大,大多數(shù)病原菌最適酸堿度為PH7.2-7.6,少數(shù)細(xì)菌可在特殊,少數(shù)細(xì)菌可在特殊PH條件條件下生長(zhǎng),如霍亂弧菌在下生長(zhǎng),如霍亂弧菌在PH6.4-9.6 時(shí)均時(shí)均能生長(zhǎng)最適為能生長(zhǎng)最適為7.8-8.0,乳酸桿菌在,乳酸桿菌在PH 3.4-4.5時(shí)可生長(zhǎng),霉菌那么在時(shí)可生長(zhǎng),霉菌那么在PH 3.0-6,0生長(zhǎng)良好。生長(zhǎng)良好。 4、浸透壓、浸透壓 細(xì)菌只需在等滲環(huán)境中才細(xì)菌只需在等滲環(huán)境中才干生存。假設(shè)環(huán)境浸透壓過(guò)高,那么菌干生存。假設(shè)環(huán)境浸透壓過(guò)高,那么菌體被脫水呵斥質(zhì)壁分別;假設(shè)環(huán)境浸
11、透體被脫水呵斥質(zhì)壁分別;假設(shè)環(huán)境浸透壓過(guò)低,那么細(xì)菌臌脹破裂。壓過(guò)低,那么細(xì)菌臌脹破裂。 5、氣體、氣體 O2、CO2、N二、細(xì)菌的繁衍方式和速度二、細(xì)菌的繁衍方式和速度 多數(shù)細(xì)菌為橫分裂式繁衍多數(shù)細(xì)菌為橫分裂式繁衍 12222。少數(shù)細(xì)菌如酵母進(jìn)展出芽少數(shù)細(xì)菌如酵母進(jìn)展出芽繁衍繁衍 。近年來(lái),電子顯微。近年來(lái),電子顯微鏡察看可見(jiàn),某些細(xì)菌也鏡察看可見(jiàn),某些細(xì)菌也存在有性結(jié)合。存在有性結(jié)合。 絕大多數(shù)細(xì)菌繁衍速度為絕大多數(shù)細(xì)菌繁衍速度為15-30min一代。但菌種不一代。但菌種不同其繁衍速度亦不同,如同其繁衍速度亦不同,如大腸桿菌大腸桿菌20min繁衍一代,繁衍一代,結(jié)核桿菌較慢,需結(jié)核桿菌較慢
12、,需0.5-18h才干繁衍一代。才干繁衍一代。三、細(xì)菌群體的人工培育三、細(xì)菌群體的人工培育 用人工的方法,將細(xì)菌從自然界、動(dòng)物體用人工的方法,將細(xì)菌從自然界、動(dòng)物體或病料中分別出來(lái),其目的是為了研討細(xì)或病料中分別出來(lái),其目的是為了研討細(xì)菌的形狀、生理特性、生物學(xué)特性或制取菌的形狀、生理特性、生物學(xué)特性或制取細(xì)菌的某種代謝產(chǎn)物等。這對(duì)于傳染病的細(xì)菌的某種代謝產(chǎn)物等。這對(duì)于傳染病的診斷、流行病學(xué)調(diào)查、菌苗制備、微生物診斷、流行病學(xué)調(diào)查、菌苗制備、微生物的工業(yè)消費(fèi)都具有重要意義。為此,了解的工業(yè)消費(fèi)都具有重要意義。為此,了解和掌握細(xì)菌分別培育的有關(guān)根底知識(shí)是非和掌握細(xì)菌分別培育的有關(guān)根底知識(shí)是非常必
13、要的。常必要的。一培育基的種類(lèi)和常用培育基一培育基的種類(lèi)和常用培育基 培育基的概念:培育基的概念: 將細(xì)菌所需的將細(xì)菌所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按一定各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按一定比例混合在一同,并比例混合在一同,并調(diào)理到適宜的調(diào)理到適宜的PHPH,這,這種人工配制的適宜細(xì)種人工配制的適宜細(xì)菌生長(zhǎng)繁衍的細(xì)菌營(yíng)菌生長(zhǎng)繁衍的細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)物,稱(chēng)為培育基。養(yǎng)物,稱(chēng)為培育基。 培育基必需符合以培育基必需符合以下條件:下條件: 營(yíng)養(yǎng)物營(yíng)養(yǎng)物 適宜的適宜的PHPH環(huán)境環(huán)境 溫度和浸透壓溫度和浸透壓 無(wú)菌無(wú)菌培育基種類(lèi)培育基種類(lèi) 1 1、根底培育基、根底培育基 含有培育普通細(xì)菌的最根本成分。又分為:含有培育普通細(xì)菌的最根本成分。又分
14、為:液體培育基、固體培育基和半固體培育基三液體培育基、固體培育基和半固體培育基三種。在液體肉湯培育基中,參與種。在液體肉湯培育基中,參與2-3%2-3%瓊瓊脂即為固體培育基,參與脂即為固體培育基,參與0.2- 0.5%0.2- 0.5%瓊脂即為瓊脂即為半固體培育基。半固體培育基。2、營(yíng)養(yǎng)培育基、營(yíng)養(yǎng)培育基l于根底培育基中參與高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如葡萄于根底培育基中參與高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如葡萄l糖、血液、血清、腹水、生長(zhǎng)因子等,以糖、血液、血清、腹水、生長(zhǎng)因子等,以l滿(mǎn)足營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌生長(zhǎng)需求。有的滿(mǎn)足營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌生長(zhǎng)需求。有的l細(xì)菌還需參與特殊物質(zhì),如結(jié)核桿菌需加細(xì)菌還需參與特殊物質(zhì),如結(jié)核桿菌需加l
15、入雞蛋清、馬鈴薯、甘油等才干良好生長(zhǎng)入雞蛋清、馬鈴薯、甘油等才干良好生長(zhǎng)3、選擇培育基、選擇培育基 利用細(xì)菌對(duì)某種物質(zhì)敏感程度的不同,可利用細(xì)菌對(duì)某種物質(zhì)敏感程度的不同,可在培育基中參與抑制某些細(xì)菌生長(zhǎng)的藥物,在培育基中參與抑制某些細(xì)菌生長(zhǎng)的藥物,而選擇性地讓欲分別的細(xì)菌旺盛生長(zhǎng)的培育而選擇性地讓欲分別的細(xì)菌旺盛生長(zhǎng)的培育基如膽鹽和薔薇色酸可以選擇性地抑制基如膽鹽和薔薇色酸可以選擇性地抑制G+菌菌的生長(zhǎng),而不影響的生長(zhǎng),而不影響G菌的生長(zhǎng)。在培育基菌的生長(zhǎng)。在培育基中參與二藥后可選擇性地分別出腸道桿菌。中參與二藥后可選擇性地分別出腸道桿菌。 4、鑒別培育基、鑒別培育基 利用細(xì)菌分解底物及其代謝
16、產(chǎn)物利用細(xì)菌分解底物及其代謝產(chǎn)物的不同,可在培育基中參與某種物的不同,可在培育基中參與某種物質(zhì)和指示劑,即制為鑒別培育基,質(zhì)和指示劑,即制為鑒別培育基,以測(cè)定不同細(xì)菌的生化反響。以測(cè)定不同細(xì)菌的生化反響。5、厭氣培育基、厭氣培育基 將培育基與空氣及氧隔離,或降將培育基與空氣及氧隔離,或降低培育基中的氧化復(fù)原電勢(shì),供厭低培育基中的氧化復(fù)原電勢(shì),供厭氧菌生長(zhǎng)。氧菌生長(zhǎng)。 除去培育基中氧的方法:除去培育基中氧的方法:a、降低培育基中氧化復(fù)原電勢(shì):、降低培育基中氧化復(fù)原電勢(shì): 如肝湯或參與如肝湯或參與谷胱甘肽、硫基醋酸鹽等。谷胱甘肽、硫基醋酸鹽等。 b、化合去氧法:如焦性沒(méi)石子酸、化合去氧法:如焦性沒(méi)石子酸、 好氧厭氧菌混合、種子發(fā)芽等。好氧厭氧菌混合、種子發(fā)芽等。 c、隔絕阻氧法:如液體石臘等。、隔絕阻氧法:如液體石臘等。 劃線(xiàn)接種 分點(diǎn)接種 涂抹接種 液體接種 穿剌接種 傾注接種 注射接種 活體接種1、細(xì)菌在固體培育基上的生長(zhǎng)景象:、細(xì)菌在固體培育基上的生長(zhǎng)景象: 察看細(xì)菌在平板上的菌落特征:察看細(xì)菌在平板上的菌落特征:形狀、大小、邊緣、外表構(gòu)造潮濕度和形狀、大小、邊
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