飼料防霉劑防霉效果評估方法的探討 - 陸沛瓊-

1、參考文獻(xiàn)1劉亞力.抗生素替代品的研究進(jìn)展J.中國飼料,1999(9:12-13.2劉輝.綠色飼料添加劑的研究與應(yīng)用J.飼料研究,2002(7:18-21.3謝仲權(quán),牛樹琦.天然物中草藥飼料添加劑大全M.北京:學(xué)苑出版社,1996.4黃一帆,導(dǎo)漢理,吳德峰.中草藥飼料添加劑對肉雞生長的影響J.福建農(nóng)學(xué)院學(xué)報,1992,21(1:93-96.5程伶.非營養(yǎng)性添加劑能改善飼料的適口性及采食量J.國外畜牧學(xué):飼料,1989(4:33-34.6武晉孝,王來發(fā),李淑琴.中草藥飼料添加劑調(diào)控肉仔雞體脂的研究J.中國飼料,2000(13:13-14.霉菌是菌絲體發(fā)達(dá)而又不形成較大子實體的一部分真菌的俗稱。霉菌

2、廣泛存在于自然界中,霉菌對糧食、飼料的污染隨處可見。據(jù)估計,全世界每年約有25%的糧食和飼料被霉菌污染,造成巨大的直接或間接經(jīng)濟損失1。如何預(yù)防和減少飼料的霉變,是目前飼料工業(yè)的一個亟待解決的問題。預(yù)防飼料霉變的方法很多,歸納起來主要有物理防霉法和化學(xué)防霉法兩大類。物理防霉法主要有:降低物料的水分和存放環(huán)境空氣相對濕度;填充惰性氣體;真空包裝;低溫冷藏等。采用物理防霉法保存飼料,操作繁雜且成本高,難以在飼料行業(yè)推廣應(yīng)用?；瘜W(xué)防霉法是通過在飼料中添加適量安全高效的化學(xué)抑菌物質(zhì)來抑制霉菌的生長和繁殖的方法。根據(jù)目前飼料生產(chǎn)的成本控制、包裝、貯存等實際情況,添加化學(xué)防霉劑是一種較經(jīng)濟、實用、有效的辦

3、法。目前市場上飼料防霉劑的品種很多,由于沒有飼料復(fù)合防霉劑的國家和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),給飼料企業(yè)評估防霉劑的質(zhì)量和效果造成了一定困難,本文旨在探討更準(zhǔn)確可行的評估防霉劑效果的方法。1飼料防霉劑的品種和現(xiàn)狀當(dāng)前市場上飼料防霉劑主要有三大類:第一類為純有機酸型,主要原料有丙酸、乙酸、苯甲酸等;第二類為純有機酸鹽型,如丙酸鹽、醋酸鹽、苯甲酸鈉等;第三類為有機酸及其鹽復(fù)配而成的復(fù)合防霉劑。曾批準(zhǔn)使用的富馬酸酯類防霉劑,由于存在安全性問題,2003年國家農(nóng)業(yè)部已將之排除在允許使用的添加劑品種目錄之外。允許使用的防霉劑原料有很多種,不同原料的抑菌力不同,市場上胡搭亂配、以次充好、甚至違規(guī)使用原料的現(xiàn)象仍然存在,要選

4、擇到真正質(zhì)量優(yōu)良的防霉劑產(chǎn)品,必須對防霉劑的質(zhì)量和抑菌效果進(jìn)行正確的評估。2評估飼料防霉劑效果的方法探討目前飼料防霉劑防霉效果的評估沒有國家或行收稿日期:2007-01-05作者簡介:陸沛瓊(1966-,女,工程師,主要從事飼料防霉劑、抗氧化劑和酸化劑等添加劑的研究和開發(fā)工作。飼料防霉劑防霉效果評估方法的探討陸沛瓊,陶常義,朱金琳(桂林市萬康生物化工有限公司,廣西桂林541213摘要:由于飼料復(fù)合防霉劑沒有國家和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),給飼料防霉劑的質(zhì)量評估和選購造成了一定的困難。為探討評估飼料防霉劑效果更準(zhǔn)確可行的方法,通過對不同類型的飼料防霉劑,用不同的防霉抑菌試驗方法,進(jìn)行的防霉試驗結(jié)果比較,提出采用

5、飼料破壞性防霉存放試驗結(jié)合飼料常規(guī)存放試驗法,能較準(zhǔn)確可靠地評估飼料防霉劑的使用效果。關(guān)鍵詞:飼料防霉劑;效果評估;試驗方法中圖分類號:S816.17;S816.3;S816.9文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:1001-0084(200705-0048-03!飼料博覽2007年第5期-48-添加劑世界業(yè)標(biāo)準(zhǔn),業(yè)內(nèi)常用的評估方法有多種,主要是一些科研單位和有實力的防霉劑生產(chǎn)企業(yè)提出來的,這些方法按試驗的基質(zhì)可分為兩大類:第一類,以高鹽察氏培養(yǎng)基為抑菌試驗基質(zhì)。此類試驗是以GB13092-91飼料中霉菌檢驗方法為基礎(chǔ)發(fā)展延伸而來的,包括:杯碟法(測定抑菌圈直徑、最低抑菌濃度法、平皿計數(shù)抑菌法。方法原理:在

6、玻璃培養(yǎng)皿中,將含適量霉菌數(shù)量的帶菌液和一定濃度的防霉劑溶液,共同混勻分布在高鹽察氏培養(yǎng)基中,置于霉菌培養(yǎng)箱內(nèi),于(281溫度下培養(yǎng)觀察一段時間,記錄并比較不同防霉劑對霉菌的抑制能力。第二類,以飼料為防霉抑菌試驗基質(zhì)。方法原理:將適量的防霉劑混勻到飼料中,在一定條件下存放,通過測定一定時間段的某些指標(biāo)(如霉菌菌落總數(shù)、二氧化碳產(chǎn)量、飼料溫度等,來判斷霉菌生長的情況,比較防霉劑的抑菌能力。這一類評估方法主要包括:飼料常規(guī)存放試驗法、溫度測定法、二氧化碳釋放法、破壞性存放試驗法等。這些評估方法中,有些由于試驗條件的限制或方法本身的局限性,在實踐運用時,往往無法得到準(zhǔn)確的防霉試驗結(jié)果。根據(jù)我們多年應(yīng)

7、用這些試驗方法的經(jīng)驗,認(rèn)為評估各種不同類型飼料防霉劑防霉效果時,第二類方法比第一類方法的結(jié)果更為準(zhǔn)確可靠。雖然第一類方法具有速度快,重復(fù)性高、能快速得出試驗結(jié)果的特點,但由于試驗采用瓊脂培養(yǎng)基作為霉菌生長的基質(zhì),沒有充分考慮飼料成分及飼料生產(chǎn)加工工藝對防霉劑成分的影響,在評估某些類型的防霉劑產(chǎn)品時,往往得到與在飼料中的防霉能力完全不同的結(jié)果。3不同方法防霉效果試驗對兩種不同類型飼料防霉劑,分別采用平皿計數(shù)抑菌法和飼料破壞性存放試驗法進(jìn)行霉菌抑制試驗的結(jié)果比較。3.1試驗的防霉劑樣品來源1#:市場上以香料和有機酸為主要成分的飼料防霉劑;2#:市場上以有機酸和有機酸鹽為主要成分的飼料防霉劑。3.2

8、試驗方法3.2.1平皿計數(shù)抑菌法試驗器材和培養(yǎng)基的準(zhǔn)備:先將所需的玻璃器皿和霉菌培養(yǎng)基按GB13092-91飼料中霉菌檢驗方法進(jìn)行滅菌消毒。試驗用霉菌帶菌液的制備:稱取一定質(zhì)量的已知大概霉菌數(shù)量的飼料或玉米樣品,按GB13092-91飼料中霉菌檢驗方法中的規(guī)定,將試樣逐級稀釋至每毫升含霉菌約100個,備用。操作步驟:往玻璃培養(yǎng)皿中加入1mL制作好的霉菌帶菌液和1mL0.1%0.2%濃度的防霉劑溶液,立即傾注1520mL培養(yǎng)基至培養(yǎng)皿內(nèi),充分混合均勻。培養(yǎng)基凝固后,將培養(yǎng)皿翻轉(zhuǎn),置于霉菌培養(yǎng)箱內(nèi),在(281下培養(yǎng)3d,從第3天開始觀察霉菌生長情況,同時記錄霉菌的菌落總數(shù),共培養(yǎng)7d,觀察、記錄結(jié)

9、果。將試驗組與未加防霉劑的對照組進(jìn)行比較,計算抑菌率,比較防霉劑的平皿抑菌能力。3.2.2破壞性存放試驗法方法原理:通過提高飼料水分含量,提高存放環(huán)境的相對濕度,以加快飼料霉變速度。通過觀察添加不同防霉劑的飼料霉變先后順序,或測定試驗飼料霉菌菌落總數(shù)來比較判斷防霉劑防霉效果優(yōu)劣。操作步驟:先制作好適當(dāng)水分的飼料(水分含量18%左右。稱取一定質(zhì)量已制作好的高水分飼料,按使用比例添加飼料防霉劑,充分混合均勻,然后移入三角瓶中,用濾紙包扎瓶口,置試驗箱中,于溫度2630、相對濕度85%左右的條件下培養(yǎng)。每天觀察霉菌的生長情況或定期檢測霉菌菌落總數(shù)(按GB13092-91進(jìn)行2。3.3試驗結(jié)果結(jié)果見表

10、1、表2、表3。表10.1%防霉劑溶液平皿計數(shù)抑菌法試驗結(jié)果樣品名稱第3d第4d第5d霉菌菌落總數(shù)(103個mL-1抑菌率(%霉菌菌落總數(shù)(103個mL-1抑菌率(%霉菌菌落總數(shù)(103個mL-1抑菌率(%1#297.71288.64656.22#2175.64359.06241.0對照組86-105-105-49-飼料博覽2007年第5期添加劑世界注:“-”表示尚未霉變,“+-”僅邊緣輕微霉變,“+”輕微霉變,“+”中度霉變,“+”嚴(yán)重霉變。表2飼料破壞性存放試驗(0.1%防霉劑添加量肉眼觀察防霉結(jié)果第4d 霉變程度第5d 霉變程度第6d 霉變程度1#+-+2#-+對照組+樣品名稱樣品名稱第

11、4d第5d第6d霉菌菌落總數(shù)(103個mL -1抑菌率(%霉菌菌落總數(shù)(104個mL -1抑菌率(%霉菌菌落總數(shù)(105個mL -1抑菌率(%1#4257.12044.44124.12#1683.71266.73731.5對照組98-36-54-表3飼料破壞性存放試驗(0.1%防霉劑添加量霉菌檢測結(jié)果從表1、表2和表3的結(jié)果來看,在平皿計數(shù)抑菌法中,1#樣品的抑菌效果明顯優(yōu)于2#樣品。而飼料破壞性存放試驗結(jié)果,卻是2#樣品優(yōu)于1#樣品,兩種試驗方法得出了矛盾的結(jié)果。采用這兩種不同的防霉抑菌試驗方法,對各種不同類型防霉劑抑菌試驗的結(jié)果表明,并不是所有類型防霉劑都出現(xiàn)矛盾的結(jié)果,比如,以有機酸為主

12、要成分的防霉劑在兩種試驗方法中能取得較一致的試驗結(jié)果。某些以香料和有機酸為主要成分的防霉劑之所以會產(chǎn)生不同的試驗結(jié)果,主要原因可能是:由于采用新的原料,這些原料未經(jīng)飼料大規(guī)模應(yīng)用驗證,與飼料成分的兼容性差,與飼料成分接觸后變質(zhì)失效或不能耐受飼料的加工工藝條件;用瓊脂培養(yǎng)基抑菌法評估防霉劑在飼料中的防霉效果,存在一定的局限性。綜上所述,用平皿計數(shù)抑菌試驗法不能準(zhǔn)確評判所有類型防霉劑的使用效果,杯碟法和最低抑菌濃度法也存在相同的問題。評判飼料防霉劑使用效果好壞的方法,從操作簡便、實用、準(zhǔn)確的角度考慮,建議采用飼料破壞性存放試驗法結(jié)合飼料常規(guī)存放試驗法較準(zhǔn)確。平皿計數(shù)抑菌試驗法、杯碟法和最低抑菌濃度法可作為一種參考方法,但不是最終的抑菌效果評估方法,最終應(yīng)以防霉劑在飼料中的防霉存放試驗結(jié)果為準(zhǔn)。參考文獻(xiàn)1羅方妮,蔣志偉.飼料衛(wèi)生學(xué)M .北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2003.2賈愛元,魯昊.飼料防霉劑殺菌效力的判定及其綜合評價J.飼料工業(yè),1999(7:29-30.書訊飼料博覽合訂本(各年分上、下冊,80元;飼料博覽2000年增刊動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)研究文集,30元